阳离子脂质体介导RNA干扰的效果评价

考察自制的肽型阳离子脂质体CDO14作为RNA转染载体的细胞毒性及其运载si RNA进行RNA干扰的效果。通过MTT法检测脂质体对稳定表达荧光素酶的肺癌A549(Luc-A549)细胞的毒性。以脂质体为载体将荧光素酶si RNA(Luc-si RNA)转染至Luc-A549细胞内,用发光仪检测转染细胞内荧光素酶含量,BCA法检测细胞内总蛋白含量。在裸鼠腋下接种Luc-A549细胞,成瘤后尾静脉注射Luc-si RNA和脂质体的复合物,利用活体成像系统检测模型小鼠体内荧光素酶的表达量。细胞毒性实验表明,自制脂质体的毒性与商品脂质体DOTAP相近,低于商品脂质体Lipo2000;细胞转染实验表明自制脂质体作为基因转染载体的转染效率高于DOTAP;体内转染实验表明CDO14作为载体转染效果优于DOTAP。结果表明,肽型阳离子脂质体CDO14具有毒性小、转染效率高等优点,有望作为转染载体用于基因治疗。     

蛹虫草培养液成分研究

目的：研究蛹虫草培养液的化学成分。方法：采用硅胶柱色谱等技术分离纯化单体化合物,并根据理化性质及光谱数据鉴定结构。结果：分离并鉴定了8个化合物,分别是2-乙基-3-羟基4H吡喃酮（1）、1-甲酰基-苯并咪唑（2）、3-乙基-4-羟基-6-甲基．2H．吡喃-2-酮（3）、1-甲基-6-异丁基-2,5-哌嗪二酮（4）、1-异丙基-6-异丁基-2,5-哌嗪二酮（5）、3,6-二（对羟基苄基）-2,5-哌嗪二酮（6）、1-羟甲基-6-异丁基-2,5-哌嗪二酮（7）、麦角甾-7-22-二烯-3β,5α,6β-三醇（8）。结论：化合物1-5,7为首次从虫草属真菌中分离得到。     

蛹虫草培养液成分研究Ⅱ

目的：研究蛹虫草人工培养液的化学成分。方法：利用硅胶柱层析、制备薄层、SephadexLH-20、重结晶等方法分离、纯化单体化合物,并根据理化性质及光谱数据鉴定其化学结构。结果：分离并鉴定了8个化合物,分别为3,7,8-三甲基-异咯嗪（1）;琥珀酸（2）;胸腺嘧啶（3）;虫草素（4）;腺苷（5）;2吲哚乙丁二酰胺（6）;1（-5-羟甲基）-呋喃-3-羧基-β-咔啉（7）;5（-1-甲基丙基）-3,6-氧代-2-哌嗪乙酰胺（8）。结论：化合物1,6,7为首次从虫草属真菌中分离得到。     

特异性卵黄抗体(IgY)对小鼠大肠杆菌败血症的保护作用

目的:研究特异性IgY对小鼠大肠杆菌败血症的保护作用.方法:以灭活的E.coli O111免疫产蛋母鸡,抗体经水稀释及盐析分离纯化.ELISA法检测大肠杆菌特异性IgY对大肠杆菌及LPS的结合活性.腹腔注射E.coli O111(1011cfu/mL)建立小鼠败血症模型,攻毒剂量为0.1mL/10g体重.小鼠随机分为5组,分别给药保护:空白组(生理盐水)、阴性对照组(非特异性IgY,20mg/mL)、阳性对照组(头孢哌酮20mg/mL)、高剂量组(特异性IgY,40mg/mL),低剂量组(特异性IgY,20mg/mL).给药剂量为:攻毒前,0.15mL/10g体重,每天一次,共两天;攻毒后,0.25mL/10g体重,每天一次,共七天.观察小鼠临床表现、体重变化、白细胞(WBC)和血小板(PLT)数变化及各组小鼠的死亡率.结果:特异性IgY与E.coli O111和LPS均有体外结合活性.大肠杆菌攻毒后,小鼠体重下降,各组小鼠外周血中WBC和PLT数均有不同程度的下降.特异性IgY保护组各项指标较快恢复到正常水平,其他组恢复缓慢.各组小鼠七天内的死亡率分别为:空白组与阴性对照组都为100%;阳性对照组60%;低剂量IgY组30%;高剂量IgY组10%.结论:特异性IgY对小鼠大肠杆菌败血症有保护作用.     

联和用药治疗幽门螺杆菌相关性消化性溃疡的疗效比较

观察90例幽门螺杆菌（Hp)感染的消化性溃疡者随机分成A、B、C三组治疗,A组：丽珠胃三联－枸椽铋钾、克拉霉素、替硝唑;B组奥美拉唑、阿莫西林、甲硝唑、C组：奥美拉唑、克拉霉素、替硝唑;疗效均为一周。用药前及停药4周后作内镜。尿毒酶检测及病理学检测后二者Hp均阳性者定为Hp感染,均为阴性定为Hp根除,A、B、C三组Hp根除率分为别为87．5、85．2、87．0;溃疡治疗总有百分率分别为93．8、92．5、96．7。统计学上无显著差异。均有轻微副反应,停药后消失。结果表明丽珠胃三联－周治疗方案具有药物剂量小,疗效程、疗效高、价格低等特点,是较为理想的根除、治疗Hp相关消化性溃疡的药物。     

特异性卵黄抗体(IgY)对小鼠内毒素血症的保护作用

目的:研究特异性卵黄抗体(Egg yolk immunoglobulin,IgY)对小鼠内毒素血症的保护作用.方法:以灭活的E.coli O111免疫产蛋母鸡制备特异性IgY抗体.ELISA法检测对E-coli O111及内毒素(Lipopolysaecharide,LPS)的结合活性.腹腔注射LPS(2mg/m1),0.1 ml/10g体重,建立小鼠内毒素血症模型.小鼠随机分为5组,分别给药保护:空白组(生理盐水)、阴性对照组(非特异性IgY,20mg/ml)、阳性对照组(头孢哌酮钠,20mg/ml)、高剂量组(特异性IgY,40mg/m1),低剂量组(特异性IgY,20mg/ml).给药剂量为:攻毒前,0.15 ml/l0 g体重,24 h一次,共两次;攻毒后,0.25 ml/10 g体重,24 h一次,共7次.观察小鼠一般情况,体重变化,外周血中白细胞(WBC)和血小板(PLT)数的变化及各组小鼠的死亡率.结果:特异性IgY与E.coli O111及LPS均有体外结合活性.LPS感染后,各组小鼠外周血中WBC和PLl均有不同程度的下降,体重下降.特异性抗体保护组各指标较快恢复到正常水平,其他组恢复缓慢.各组小鼠七天内死亡率分别为:空白组,100%;阴性对照组,85%;阳性对照组,30%;低济量组,30%;高剂量组,0%.结论:特异性IgY对内毒素血症小鼠有保护作用.     

5-氯水杨醛缩2,4-二羟基苯酰肼的抗菌抗氧化活性研究

目的考察5-氯水杨醛缩2,4-二羟基苯酰肼对金黄色葡萄球菌的抗菌活性及体外抗氧化活性。方法采用试管法和平板法测定其对金黄色葡萄球菌最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC),绘制杀菌曲线,并通过扫描电镜研究其作用机制,采用DPPH法测定抗氧化活性。结果该化合物对金黄色葡萄球菌的MIC为2.5 mg/m L,MBC为5 mg/m L。杀菌曲线结果表明该化合物对金黄色葡萄球菌的杀菌作用表现出明显的浓度依赖性。扫描电镜结果表明该化合物的作用机制可能与破坏菌体细胞壁、改变其通透性有关。同时该化合物具有较强的清除自由基的能力。结论 5-氯水杨醛缩2,4-二羟基苯酰肼具有显著的抗金黄色葡萄球菌作用,同时具有较好的体外抗氧化活性。     

抗金黄色葡萄球菌IgY的酶解稳定性及活性研究

目的:考察抗金黄色葡萄球菌特异性IgY的酶解稳定性和酶解产物的活性。方法:以灭活的金黄色葡萄球菌免疫产蛋母鸡,抗体经水稀释及盐析分离纯化。抗体在不同条件下经胃蛋白酶或胰蛋白酶消化。抗体及酶解产物的特异性和活性分别用ELISA法和凝集法检测,酶解产物用SDS-PAGE和Western-blotting鉴定。结果:免疫产生的抗体具有特异性,能与金黄色葡萄球菌凝集而抑制其生长。分离纯化后抗体纯度与标准IgY相近。IgY在pH<4时完全酶解;pH等于4时部分酶解生成Fab片断,具有特异性和凝集活性;pH>4时,抗体稳定,不发生酶解。结论:抗金黄色葡萄球菌特异性IgY及其酶解生成的Fab片断,具有特异性和抑菌活性,有望代替抗生素用于细菌感染性疾病的治疗。     

金黄色葡萄球菌特异性卵黄抗体的制备及其影响因素

目的:考察金黄色葡萄球菌特异性卵黄抗体制备过程中的影响因素.方法:以灭活的金黄色葡萄球菌为抗原,采用不同的浓度(108cfu/mL,109cfu/mL,1010cfu/mL)、在不同免疫佐剂(商品弗氏佐剂和自制弗氏佐剂)作用下,对不同日龄(120天和300天)的蛋鸡进行免疫.免疫后收集鸡蛋,蛋黄用6倍体积水稀释,采用ELISA法测定抗体效价.结果:抗原浓度为109cfu/mL所得抗体效价最高;免疫120日龄蛋鸡获得抗体效价高于免疫300日龄蛋鸡所得抗体效价;在抗原浓度和蛋鸡日龄相同的情况下,商品弗氏佐剂比自制具有更好的免疫增强作用.结论:特异性卵黄抗体制备受多种因素的影响,抗原浓度、蛋鸡日龄、佐剂质量均对卵黄中特异性抗体水平有影响.     

焦山楂醇提物对大鼠离体胃、肠平滑肌条收缩性的影响

目的:观察焦山楂醇提取液对大鼠离体胃、肠平滑肌的影响.方法:本研究以大鼠的离体胃、肠平滑肌条为模型,观察在正常克氏液条件下加入焦山楂醇提取液后大鼠胃、肠平滑肌条收缩状况.同时观察乙酰胆碱、阿托品作用下加入焦山楂提取液对大鼠胃、肠平滑肌运动的影响.结果:焦山楂醇提取液在4-8 mg生药/ml浓度范围内可显著抑制大鼠胃、肠平滑肌条的运动,且具有明显剂量依赖性.焦山楂醇提取液(8mg生药/ml)可拮抗乙酰胆碱引起的胃肠平滑肌的强烈收缩和阿托品引起的肠平滑肌的舒张作用.结论:焦山楂醇提取液对大鼠胃、肠平滑肌条的收缩具有明显的抑制作用.