玉米MuDR转座子DNA甲基化的MSP检测

DNA甲基化作为一种重要的表观遗传修饰,广泛存在于高等动植物中,并在维持基因组稳定性、调节基因表达等方面起着重要作用,因此建立快速有效地DNA甲基化检测技术至关重要.本文以两种不同MuDR活性的玉米转座子材料为研究对象, 探讨了甲基化特异性PCR(MSP)在检测DNA甲基化的有效性.结果表明: MSP技术可快速有效地检测MuDR转座子的末端反向重复(TIRs)序列内的CpG岛DNA甲基化的变化,灵敏度高,特异性强,可作为植物已知基因DNA甲基化检测的一种新方法.同时利用MSP研究发现,玉米MuDR转座子的活性随其TIRs序列内的CpG岛DNA甲基化的变化而改变, DNA甲基化是调控玉米MuDR转座活性的重要分子机制之一.     

对生玉米籽粒品质性状的杂种优势和配合力分析

本文利用对生基因转育获得的对生与互生自交系及其杂交组合,研究了对生性状对玉米主要品质性状的杂种优势和配合力的遗传效应的影响。结果表明:对生自交系籽粒品质性状的配合力效应一般高于互生玉米,在蛋白质含量上,对生F1杂种优势与普通互生F1无明显差异,而在油份和淀粉含量上对生F1较互生表现出明显的优势。不同组配方式对F1对生群体籽粒品质性状的杂种优势存在差异,在对生组合利用中通过互×互组配较对×对组配能使F1获得更高的蛋白质含量;选育含油量较高的对生系,利用对×对组合有助于选育高油杂交种;选育淀粉含量较高的含有不同对生基因的互生自交系作亲本,利用互×互组配有助于选育高淀粉对生杂交组合。     

HeNe激光辐照对离体质粒DNA损伤及诱发lacZ基因突变的研究

利用低功率ＨｅＮｅ激光辐照离体质粒ＤＮＡ,分析了质粒ＤＮＡ的损伤效应和ｌａｃＺ基因的突变。结果表明ＨｅＮｅ激光低剂量辐照可提高质粒转化活性,随着剂量增加可引起ＤＮＡ结构显著损伤,导致质粒失活,同时可诱发ｌａｃＺ基因突变,其最高突变率可达１０．５８×１０－４,且突变率的剂量效应曲线可用Ｙ＝ａ＋ｂｘ＋ｃｘ２来描述。与紫外线辐照相比,ＨｅＮｅ激光对ｌａｃＺ基因的诱变效率低于紫外线。     

脉冲电泳不同参数对介导GFP基因转化玉米种胚效果的研究

利用脉冲电泳介导绿色荧光蛋白(GFP)基因导入玉米种胚;以GFP基因在种胚中瞬时表达作为外源基因导人种胚细胞的标记,分析了外源．DNA浓度、电泳时间、电压、电流转换时间等脉冲电泳转化参数对种胚发芽率和外源基因导入率的影响。结果表明：脉冲电泳时间对种胚发芽率和外源GFP基因导入率影响最大;通过脉冲电泳可将外源基因导入胚芽细胞,其GFP基因导人种子的频率与各电泳参数均呈二次曲线关系,300μg／ml外源DNA浓度、120min电泳时间、5V电压、2s电流转换时间可作为脉冲电泳介导玉米种胚转化较适宜的参数。     

N+离子注入长豇豆对硝酸还原酶及氮代谢的影响

不同剂量的Ｎ＾＋离子注入长豇豆种子。豇豆开花结荚后，低剂量Ｎ＾＋离子处理能增加叶片的ＮＲ活性，促进ＮＯ＾－３－Ｎ向氨基酸和蛋白质的转化；减少ＮＯ＾－３－Ｎ的积累，提高叶片蛋白质和氨基酸含量。高剂量Ｎ＾＋离子处理抑制官种转化，豇豆结荚后期，叶片ＮＯ＾－３－Ｎ积累增多。     

^60Co-γ射线辐照降解的壳聚糖对玉米萌发及生长的影响

采用不同剂量60Co-γ射线辐照降解壳聚糖,研究了其降解产物对玉米生长的调节作用.研究发现,壳聚糖辐照产物可提高玉米种子发芽率,促进玉米幼苗生长,提高玉米抗逆相关生理生化指标.辐照剂量为200 kGy,壳聚糖辐照产物溶液浓度为3.0 mg/mL时,可显著提高玉米种子萌发率和促进芽长;浓度为4.0 mg/mL时,显著促进主根长度;浓度为2.0 mg/mL～3.0 mg/mL,苯丙氨酸解氨酶 (PAL)活性显著高于对照.当辐照剂量为200 kGy～400 kGy,产物溶液浓度为2.0 mg/mL～4.0 mg/mL时,能显著提高胚乳中α-淀粉酶活性和幼苗中叶绿素含量;浓度为2.0 mg/mL～3.0 mg/mL时,显著提高幼苗过氧化物酶 (POD) 的活性.综合多种影响因素得出:利用壳聚糖辐照产物开发玉米促生抗逆剂的适宜60Co-γ射线辐照剂量为200 kGy～300 kGy,浓度为2.0 mg/mL～3.0 mg/mL.     

石斛干品基因组DNA的提取与RAPD分析

市场中药干品的药性差异一直是影响中药标准化的瓶颈,而检测技术相对落后是导致这一现象的主要原因。DNA分子水平检测的困难是药材干品的基因组DNA难以提取。本文以铁皮石斛(Dendrobium candidum)干茎为材料,采用了四种方法从干品石斛中提取基因组DNA。结果表明,采用改良的CTAB法可从石斛干品尤其是干茎皮中提取质量较高的基因组DNA,其分子量大于23kb,以此DNA为模板进行不同引物的PCR扩增可获得清晰的RAPD条带。该研究初步建立了石斛干品合适的RAPD技术体系。     

喜树内生真菌的分离、鉴定以及抗植物病原菌活性的初步研究

对喜树植株中的内生真菌进行分离纯化,共得到126株内生菌株。对126株内生菌株进行液体培养,并对其发酵产物进行抗菌活性测定。发现在供试质量浓度为5mg／mL时,126株菌株中有24株喜树内生真菌的发酵液对水稻纹枯病菌、稻瘟病菌以及辣椒疫霉具有不同程度的抑制菌丝生长的活性作用;其中,菌株XSY09的发酵液对此三种植物病原菌有明显的抑制作用,抑制率分别为74．97％、39．63％和58．49％。在0．1mg／mL的测试浓度下,菌株XSY09发酵液的乙酸乙酯相对三种植物病原菌均有较好的抑制作用。对该菌株的ITS序列进行测序分析,初步鉴定XSY09为炭疽菌属（Colletotrichum gloeosporioides）真菌。     

复合调控Wx与SBE3基因对水稻籽粒直链淀粉含量的影响

颗粒淀粉合成酶（GBSS）和淀粉分支酶3（SBE3）是淀粉合成过程中的两个关键酶,这两个酶主要由耽和SBE3两个基因分别控制,它们的表达量直接影响直链淀粉和支链淀粉的含量比例。为了探讨水稻淀粉关键酶基因耽过量与SBE3干涉复合表达对直链淀粉含量的影响,构建了Wx过量表达与SBE3干涉结合的多基因表达载体,并通过农杆菌介导的方法将其导入日本晴水稻中。经过PCR检测分析获得了65株转基因阳性植株,半定量RT—PCR检测表明转基因株系中Wx基因表达量明显增加,而SBE3基因表达量显著减少。转基因株系籽粒透明度明显降低,直链淀粉含量比野生型的平均高45％,但是千粒重变化不大,与野生型相当。遗传分析表明这些转基因株系多数可稳定遗传。     

玉米Dof转录因子家族基因的全基因组分析

Dof转录因子家族在植物生长发育和基因表达调控过程中具有重要的作用,本文利用公布的玉米基因组草图数据,利用生物信息学方法对玉米全基因组Dof基因的结构、系统进化关系和保守motif进行了分析。结果表明:玉米中共有18个Dof类型基因,命名为ZmDof1-ZmDof18,其蛋白质长度在211aa至618aa之间,通过系统进化树分析后,18个Dof基因可以明显的分为三类,此外玉米Dof基因的数目远远小于水稻和拟南芥,基因复制现象较少是玉米Dof基因数量较少的原因之一,MEME分析证实了Dof基因含有三个保守的motif。对玉米Dof类型基因的系统分析,将有助于玉米Dof类型基因的克隆和功能的进一步研究。