几种杀虫剂对嗜虫书虱的触杀作用

采用滤纸药膜法比较了常用8种杀虫剂对嗜虫书虱Liposcelis entomophila的触杀作用,在药剂的推荐浓度下有机磷类杀虫剂对嗜虫书虱的急性触杀作用强于其它药剂.同时测定了杀螟硫磷、敌敌畏和溴氰菊酯(含增效醚)3种药剂对嗜虫书虱的触杀毒力,其24h内触杀作用的LC50分别为9.3284、2.1440和7.5007 μg/cm2,但杀螟硫磷的LC95为459.4949 μg/cm2,远高于敌敌畏的8.2453μg/cm2和溴氰菊酯(含增效醚)的14.5274 μg/cm2.此外,48h内敌敌畏等有机磷杀虫剂对嗜虫书虱的毒杀速度较其它供试药剂快.     

抑制剂存在下不同种群烟粉虱乙酰胆碱酯酶残余活性频率分布及其与抗药性的关系

为了探讨烟粉虱Bemisia tabaci不同种群个体乙酰胆碱酯酶敏感性差异及其与抗药性的关系, 我们选用室内饲养的烟粉虱SUD S敏感品系和6个田间抗性种群, 采用酶标板酶动力学法测定了各品系 (种群）乙酰胆碱酯酶对抑制剂的敏感性反应以及抑制剂存在时各抗性种群个体乙酰胆碱酯酶残余活性频率分布。结果表明: 在抑制剂浓度为300 μmol/L时, 敏感品系乙酰胆碱酯酶的活性基本上被完全抑制, 可以明显地区分敏感品系与田间抗性种群。在抑制剂浓度为2 000 μmol/L时, 各抗性种群个体乙酰胆碱酯酶残余活性频率分布差异明显, 其中ZZ-R种群和FZ-R种群的乙酰胆碱酯酶残余活性频率分布相似, 大部分个体的乙酰胆碱酯酶残余活性分布在1.00~1.80 mOD/min之间; SM-R种群和ND-R种群的乙酰胆碱酯酶残余活性频率分布也相似, 大部分个体的乙酰胆碱酯酶残余活性分布在0.40~1.00 mOD/min之间; LY-R和NP-R种群大部分个体的乙酰胆碱酯酶残余活性分别分布在1.00~1.60 mOD/min和0.80~1.20 mOD/min之间。各抗性种群乙酰胆碱酯酶高残余活性 (大于1.00 mOD/min）个体频率与对敌敌畏的抗性水平之间具有明显相关性, 相关系数为0.86 (P<0.05）。考虑到乙酰胆碱酯酶对抑制剂作用不敏感是一些昆虫对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂抗性的重要机制之一, 建议可以将乙酰胆碱酯酶对敌敌畏的敏感性作为烟粉虱抗药性生化检测的一个参考指标。     

几种杀虫剂对朱砂叶螨酯酶的抑制作用

测定了 3种杀虫剂乐斯本、甲氰菊酯、敌敌畏及其两两组合对朱砂叶螨离体酯酶的抑制作用。这 3种杀虫剂的抑制中浓度依次为 2 .81 2 8× 1 0 - 6 、 3 .1 698× 1 0 - 6 、 4.1 5 86× 1 0 - 6 ( mol/ L) ,说明乐斯本对朱砂叶螨酯酶的抑制作用最强 ,甲氰菊酯次之 ,敌敌畏最弱。通过对杀虫剂作用于朱砂叶螨酯酶的米氏常数和最大反应速度测定 ,发现乐斯本和甲氰菊酯的作用方式为竞争性抑制 ,敌敌畏为非竞争性抑制。敌敌畏 +乐斯本和敌敌畏 +甲氰菊酯联合抑制作用均具有相加作用 ,乐斯本 +甲氰菊酯联合抑制有增效作用 ,且均为竞争性抑制     

小菜蛾及菜蛾绒茧蜂乙酰胆碱酯酶敏感性的相关变化

用生物测定和生化检测的方法,对福州地区小菜蛾Plutella xylostella和菜蛾绒茧蜂Apanteles plutellae的抗药性及两种昆虫乙酰胆碱酯酶对杀虫剂的敏感性进行了田间监测。结果显示,从1998年9月至1999年4月,小菜蛾乙酰胆碱酯酶对6种有机磷和氨基甲酸酯杀虫剂敏感性逐渐恢复,寄生于同一虫源的菜蛾绒茧蜂乙酰胆碱酯酶敏感性的变化也呈明显的相关性,但菜蛾绒茧蜂乙酰胆碱酯酶的敏感性高于其寄主小菜蛾。脱离选择压力后,两种昆虫对杀虫剂的敏感性迅速恢复,乙酰胆碱酯酶的K_i值显著增高。对乙酰胆碱酯酶的K_m、V_max和K_i值测定结果表明,两种昆虫对有机磷和氨基甲酸酯杀虫剂的抗性与乙酰胆碱酯酶对杀虫剂的不敏感性有关。此外还研究了不同发育期小菜蛾乙酰胆碱酯酶活性及其K_i值的变化。探讨了在杀虫剂选择压力下,两种昆虫乙酰胆碱酯酶敏感性的环境适应性变化机制。     

小峰熊蜂头部乙酰胆碱酯酶测定条件的优化及其对六种常用杀虫剂的敏感性

小峰熊蜂Bombus hypocrita是我国优势熊蜂种群之一, 因其易于饲养、 群势较强且授粉性能优良而成为我国设施农业常用优良授粉蜂种, 但常受到以乙酰胆碱酯酶(AChE)为靶标酶的有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的危害。 为合理规避这两类杀虫剂对熊蜂的危害, 同时也为完善熊蜂授粉配套技术和保护野生熊蜂资源提供理论基础, 本研究利用正交试验对小峰熊蜂头部乙酰胆碱酯酶活性的测定条件进行了优化, 并明确了6种常用有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂对乙酰胆碱酯酶活性的影响。结果表明： 各测定因素对小峰熊蜂乙酰胆碱酯酶活性测定影响的大小顺序依次为： 酶浓度＞pH＞温度＞底物浓度＞反应时间; 小峰熊蜂头部乙酰胆碱酯酶活性的最适反应条件为： 酶浓度0.25 g 蛋白质/L, 底物浓度0.8 mmol/L, pH值7.5, 温度40℃, 反应时间5 min。毒死蜱、 三唑磷、 丙溴磷、 异丙威、 仲丁威和残杀威6种杀虫剂对小峰熊蜂头部乙酰胆碱酯酶离体抑制作用均呈现明显的剂量-效应关系, 其抑制中浓度IC₅₀分别为0.39, 1.79, 0.42, 0.04, 0.43和0.63 mmol/L。这6种杀虫剂对小峰熊蜂AChE抑制作用的强弱依次为： 异丙威＞毒死蜱＞三唑磷＞仲丁威＞残杀威＞丙溴磷, 即小峰熊蜂对异丙威最敏感, 而对丙溴磷的敏感性最弱。     

羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶在褐飞虱对马拉硫磷抗性发展中的作用

对室内筛选褐飞虱Nilaparvata lugens Stal对马拉硫磷抗性及羧酸酯酶、乙酰胆碱酯酶的连续变化进行了研究。结果表明,抗性发展在不同世代之间存在一定的变化。LD₅₀的最大变化发生在第3代和第5代之间。在筛选的前5代,羧酸酯酶活性上升与马拉硫磷抗性变化存在很好的相关性,而乙酰胆碱酯酶敏感性在第6代和第8代间的变化与抗性发展存在很好的相关性。可见,羧酸酯酶活性的上升在抗性发展的早期阶段起重要作用,而乙酰胆碱酯酶不敏感在抗性发展的后期阶段起更重要作用。     

B型烟粉虱田间种群对毒死蜱和敌敌畏抗性的生化机制

通过增效剂生物测定和生化分析,探讨了采自福建省的B型烟粉虱Bemisia tabaci 6个田间种群对毒死蜱和敌敌畏抗性的生化机制。结果表明：与敏感品系SUD-S相比,6个田间种群对毒死蜱和敌敌畏分别具有54.53～78.43倍和6.23～11.25倍的抗性。TPP、PBO和DEM对毒死蜱的增效比分别为3.61～24.94倍、1.14～1.76倍和1.04倍,对敌敌畏的增效比分别为1.67～2.64倍、1.33～1.65倍和1.09倍,表明羧酸酯酶的解毒代谢在烟粉虱对毒死蜱的抗性中起着重要作用。烟粉虱抗性种群乙酰胆碱酯酶的K_m值是敏感品系的1.83～4.0倍,V _max值是敏感品系的0.34～0.62倍; 敏感品系乙酰胆碱酯酶的活性在底物浓度大于1.0 mmol/L时受抑制,抗性种群乙酰胆碱酯酶的活性在底物浓度大于16 mmol/L时受抑制;抗性种群乙酰胆碱酯酶对敌敌畏和毒死蜱的敏感度分别比敏感品系低119.92～161.33倍和10.11～14.24倍,表明烟粉虱田间抗性种群乙酰胆碱酯酶可能已发生了变构,由变构引起的乙酰胆碱酯酶不敏感是烟粉虱田间种群对毒死蜱和敌敌畏产生抗性的重要原因。结果提示,乙酰胆碱酯酶不敏感性和羧酸酯酶的解毒代谢在烟粉虱对毒死蜱的抗性中均起着重要作用,而乙酰胆碱酯酶不敏感性在对敌敌畏的抗性中起重要的作用,多功能氧化酶和谷胱甘肽S转移酶在烟粉虱对毒死蜱和敌敌畏抗性中所起的作用不大。     

棉铃虫对拟除虫菊酯杀虫剂敏感性的修复及其乙酰胆碱酯酶的变化

利用生物测定和生物化学方法研究了抗药性棉铃虫Helicoverpa armigera(Hubner)对拟除虫菊酯敏感性修复及其体内乙酰胆碱酯酶的变化,结果表明：当去除药剂选择压后,棉铃虫对拟除虫菊酯的抗性为不稳定。随着停止用药的时间加长,敏感性增加。从田间收集的棉铃虫在室内饲养后第1代对拟除虫菊酯的抗性下降速度较迅速。特异性酶抑制剂对敏感和抗性棉铃虫种群的乙酰胆碱酯酶亲和力试验结果证实,乙酰胆碱酯酶在抗性棉铃虫对杀虫剂反应发生变化的过程中发生改变,这种酶的改变可能对棉铃虫抗药性的不稳定性有重要影响。     

有机磷对抗拟除虫菊酯家蝇的毒力

测定敏感、抗溴氰菊酯(Del-R)、抗氯菊酯(2Cl-R)的家蝇品系对有机磷杀虫剂敌敌畏、辛硫磷及马拉硫磷的LD₅₀,α-乙酸萘酯（α-NA）酯酶动力学,酯酶的活性和酯酶的抑制作用。Del-R和2Cl-R的家蝇品系对三种有机磷杀虫剂的抗性倍数为0.966～7.190倍,均为低抗水平。三个家蝇品系的羧酸酯酶活性水平与抑制中浓度存在正相关性,说明羧酸酯酶在抗拟除虫菊酯家蝇对有机磷杀虫剂的抗性中起一定的作用。     

白纹伊蚊溴氰菊酯抗性和敏感品系羧酸酯酶性质比较

本文对白纹伊蚊Aedes albopictus溴氰菊酯抗性品系和敏感品系羧酸酯酶的生物化学性质进行了比较。白纹伊蚊抗性品系和敏感品系羧酸酯酶随底物浓度(α-乙酸萘酯或β-乙酸萘酯)的变化比活力变化趋势一致,但抗性品系对这2种底物的比活力均高于敏感品系,抗性品系羧酸酯酶的米氏常数和最大反应速度与敏感品系有显著差异。胆碱酯酶抑制剂测定结果表明,抗性品系羧酸酯酶对敌敌畏和磷酸三苯酯的敏感性高于敏感品系,对残杀威的敏感性低于敏感品系。2个品系羧酸酯酶对脱叶磷的敏感性差异不大。说明羧酸酯酶可能与白纹伊蚊对溴氰菊酯抗性有关。     

杀虫剂胁迫下嗜卷书虱和嗜虫书虱能源物质的代谢比较

采用比色法测定嗜卷书虱（Liposcelis bostrychophila）和嗜虫书虱（L．entomophila）体内甘油三酯、多糖和可溶性蛋白的贮存量。结果表明,嗜虫书虱体内3种物质的贮存量均显著高于嗜卷书虱。在毒死蜱和丁硫克百威的胁迫下,嗜虫书虱体内3种物质的变化幅度均大于嗜卷书虱,其中甘油三酯的含量先增高后降低,整体呈现下口抛物线趋势;多糖和可溶性蛋白的消耗率增加。这些说明在毒死蜱和丁硫克百威的作用下,书虱更多地启动了多糖和可溶性蛋白的代谢,降低了对甘油三酯的利用,以应对杀虫剂的胁迫。     

菜蚜茧蜂对甲胺磷和灭多威的抗性机制

采用试管药膜法测定了菜蚜茧蜂 Diaeretiella rapae 对甲胺磷和灭多威的抗性及增效剂的增效作用,并测定了菜蚜茧蜂和菜缢管蚜 Lipaphis erysimi 乙酰胆碱酯酶动力学参数、解毒酶活性及增效剂对菜蚜茧蜂酶活性的体内抑制作用。福州地区菜蚜茧蜂已对甲胺磷和灭多威产生5.6和9.1倍的抗性,胡椒基丁醚、磷酸三苯酯和马来酸二乙酯对两种杀虫剂的抗性品系均有显著增效作用,胡椒基丁醚的作用最为显著。胡椒基丁醚对抗性菜蚜茧蜂杀虫剂敏感性的增效作用远高于对敏感菜蚜茧蜂的影响。3种增效剂对菜蚜茧蜂乙酰胆碱酯酶均无抑制作用;磷酸三苯酯和胡椒基丁醚对羧酸酯酶,马来酸二乙酯对谷胱甘肽S转移酶有显著抑制作用。抗性和敏感菜蚜茧蜂乙酰胆碱酯酶的米氏常数K_m）、最大反应速度（V_max）、羧酸酯酶及谷胱甘肽S转移酶活性值相近,但敏感菜蚜茧蜂乙酰胆碱酯酶的双分子速度常数（K_I）值远高于抗性的。此外,对菜蚜茧蜂和菜缢管蚜乙酰胆碱酯酶、羧酸酯酶和谷胱甘肽S转移酶进行了比较研究。结果表明菜蚜茧蜂对甲胺磷和灭多威的低水平抗性与乙酰胆碱酯酶的不敏感性及解毒酶的解毒代谢有关。     

取食不同寄主植物对棉蚜后代抗药性的影响

测定了5种药剂对棉蚜Aphis gossypii抗氰戊菊酯、吡虫啉品系和敏感品系取食棉花、黄瓜和石榴的后代的毒力,并对它们的后代体内乙酰胆碱酯酶和羧酸酯酶的比活力做了初步探索。结果表明,氰戊菊酯抗性品系取食棉花比取食黄瓜的后代对氰戊菊酯的抗性大76.4倍,对灭多威、氧乐果、硫丹和吡虫啉的抗性也大0.5～4.6倍;取食石榴的后代对5种药剂的抗性介于取食棉花和黄瓜的之间。吡虫啉抗性品系的测定结果与氰戊菊酯抗性品系基本一致。敏感品系取食黄瓜比取食棉花的后代对5种药剂的敏感性更高。3个品系取食不同植物的后代相比,其体内乙酰胆碱酯酶的比活力,取食棉花的为取食黄瓜的2.4～2.8倍;羧酸酯酶的比活力,取食棉花的为取食黄瓜的1.8～2.4倍。证明棉蚜的抗性和敏感品系取食的寄主植物不同,可引起对药剂敏感性的变化。乙酰胆碱酯酶和羧酸酯酶活力的变化均是引起这种变化的重要因素。     

Residual efficacy of four organophosphate insecticides on concrete and galvanized steel surfaces against three liposcelid psocid species (Psocoptera: Liposcelidae) infesting stored products

Four organophosphate insecticides, azamethiphos, fenitrothion, chlorpyrifos-methyl, and pirimiphos-methyl, were tested as surface treatments on concrete (porous surface) and galvanized steel (nonporous surface) panels (0.3 by 0.3 m) against adults of three Liposcelid psocid spp.--Liposcelis bostrychophila Badonnel, Liposcelis entomophila (Enderlein), and Liposcelis paeta Pearman. Residual efficacy of these chemicals was assessed at 30 +/- 1 degrees C, 70 +/- 2% RH, and a photoperiod of 12:12 (L:D) h from 1 d after treatment (0 wk) and thereafter at weeks 1, 2, 4, 6, and 8, and then every 4 wk up to week 40. Mortality was recorded at exposure periods of 6 h and then every 24 h until end-point was achieved. L. bostrychophila was the most susceptible species to the organophosphates tested, followed by L. paeta and L. entomophila. We conclude that for long-term protection, azamethiphos is the preferred organophosphate against L. bostrychophila (up to 36 wk on steel and 24 wk on concrete storage surfaces) and L. paeta infestations only on steel surface (up to 28 wk). None of the four organophosphates tested, however, would provide long-term protection against L. paeta on concrete surface and against L. entomophila infestations on either concrete or steel storage surfaces.     

菜蛾绒茧蜂和小菜蛾对杀虫剂的敏感性及酶学特性的比较研究

分别采用药膜法和浸叶法测定了菜蛾绒茧蜂Apanteles plutellae和小菜蛾Plutella xylostella对杀虫剂的敏感度。结果显示： 有机磷、氨基甲酸酯、拟除虫菊酯类杀虫剂、阿维菌素和锐劲特对菜蛾绒茧蜂高毒,而抑太保和Bt为低毒,然而,短时间(1 h)接触常规防治剂量的锐劲特、氰戊菊酯、氯氰菊酯和乙酰甲胺磷对菜蛾绒茧蜂低毒。增效剂胡椒基丁醚（PB）、磷酸三苯酯（TPP）和马来酸二乙酯（DEM）对菜蛾绒茧蜂的甲胺磷、克百威、氰戊菊酯、氯氰菊酯、阿维菌素和锐劲特敏感性增效显著,但对抑太保无增效作用。PB的增效作用显著高于TPP 和DEM。PB和TPP对菜蛾绒茧蜂羧酸酯酶(CarE),以及DEM对谷胱甘肽S转移酶(GST)具显著的活体抑制作用,但PB,TPP和 DEM对菜蛾绒茧蜂乙酰胆碱酯酶（AChE）无抑制作用。菜蛾绒茧蜂AChE的米氏常数(K_m)、最大反应速度(V_max)、CarE和GST活性分别为小菜蛾的0.22、2.08、4.60和0.45倍,甲胺磷、敌敌畏和克百威对菜蛾绒茧蜂AChE的双分子速度常数(Ki)分别为对小菜蛾的14.7、10.5 和26.0倍。酶与抑制剂反应温度增高将导致酶抑制率增高,尤其对菜蛾绒茧蜂AChE的抑制作用更为显著。上述结果表明,菜蛾绒茧蜂对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的高敏感性与其显著高的AChE敏感性有关,氧化代谢的解毒作用对菜蛾绒茧蜂耐药性的影响大于水解作用。此外,对小菜蛾和菜蛾绒茧蜂杀虫剂敏感性差异的毒理学原因进行了讨论。     

Effects of chlorpyrifos on enzymatic systems of Cydia pomonella (Lepidoptera: Tortricidae) adults

The control program of codling moth (Cydia pomonella L.) in the Río Negro and Neuquén Valley is intended to neonate larvae. However, adults may be subjected to sublethal pesticide concentrations generating stress which might enhance both mutation rates and activity of the detoxification system. This study assessed the exposure effects of chlorpyrifos on target enzyme and, both detoxifying and antioxidant systems of surviving adults from both a laboratory susceptible strain (LSS) and a field population (FP). The results showed that the FP was as susceptible to chlorpyrifos as the LSS and, both exhibited a similar chlorpyrifos‐inhibitory concentration 50 (IC₅₀) of acetylcholinesterase (AChE). The FP displayed higher carboxylesterase (CarE) and 7‐ethoxycoumarine O‐deethylase (ECOD) activities than LSS. Both LSS and FP showed an increase on CarE activity after the exposure to low‐chlorpyrifos concentrations, followed by enzyme inhibition at higher concentrations. There were no significant differences neither in the activities of glutathione S‐transferases (GST), catalase (CAT) and superoxide dismutase (SOD) nor in the reduced glutathione (GSH) content between LSS and FP. Moreover, these enzymes were unaffected by chlorpyrifos. In conclusion, control adults from the FP exhibited higher CarE and ECOD activities than control adults from the LSS. AChE and CarE activities were the most affected by chlorpyrifos. Control strategies used for C. pomonella, such as rotations of insecticides with different modes of action, will probably delay the evolution of insecticide resistance in FPs from the study area.     

两种书虱微卫星富集文库的构建及比较

利用链霉亲和素与生物素之间的强亲和性原理,将链霉亲和素偶联的磁珠与微卫星探针(AC)12、(TC)12、(ATC)8、(ATG)8、(AAC)8、(ATAC)6及(GATA)6退火结合后,再亲和捕捉含接头和微卫星序列的单链书虱基因组DNA限制性酶切目的片段,经PCR扩增形成双链后进行克隆、建库。结果表明本研究成功构建了嗜卷书虱和嗜虫书虱共13个微卫星富集文库,包括6个嗜卷书虱文库,7个嗜虫书虱文库,其平均阳性克隆率为71.17%。经检测发现共得到两种书虱260个微卫星位点。这两种书虱微卫星富集文库的建立和高多态性微卫星位点的筛选将为嗜卷书虱和嗜虫书虱的种群遗传与进化、基因连锁图谱构建、分子系统发育研究等提供大量分子遗传标记,对其在实仓中的持续控制提供遗传学信息。     

Inhibition kinetics on carboxylesterase and acetylcholinesterase of Liposcelis bostrychophila and Liposcelis entomophila (Psocop., Liposcelididae) of two insecticides

Abstract: The inhibition kinetics on carboxylesterase (CarE) and acetylcholinesterase (AChE) of Liposcelis bostrychophila and Liposcelis entomophila of paraoxon and carbosulfan were compared. The results showed that L. entomophila exhibited significantly greater specific activity of CarE than L. bostrychophila [0.045 vs. 0.012 μmol of α‐naphthyl acetate (α‐NA) hydrolysed/mg protein/min]. Moreover, L. entomophila showed higher affinity (i.e. lower K_m value) to the substrate α‐NA than L. bostrychophila (0.29 vs. 0.67 mm ). For AChE‐specific activity and affinity, no significant differences between the two species were observed. Based on the I₅₀ values, AChE of L. bostrychophila was more sensitive to paraoxon and carbosulfan than that of L. entomophila. According to inhibition kinetics, the results revealed that AChE of L. bostrychophila was 3.8‐fold more sensitive to inhibition by paraoxon than that of L. entomophila, but L. entomophila was 1.5‐fold more susceptible to carbosulfan.