亚麻植株的再生及诱导因素的研究

亚麻根、下胚轴、茎和叶外植体在适宜培养基上可产生愈伤组织和不定芽。愈伤组织在分化培养基上产生幼芽。在生根培养基上小苗生根长大。组织细胞学观察表明,下胚轴表皮、皮层和韧皮部细胞都能产生小分生细胞团,后者形成不定芽和愈伤组织。愈伤组织边缘区域分化芽原基,内部产生大量的分生组织结节和维管组织结节。根原基起源于维管组织结节的形成层状细胞。不同器官外植体再生植株的潜力不同,对诱导条件的反应有差别,其中茎和下胚轴切段易兼生不定芽和愈伤组织,再生植株频率高。外源激素、基本培养基和损伤刺激明显影响植株再生。     

油茶未成熟子叶幼胚离体培养成苗的研究

MS培养基适用于油茶未成熟子叶与幼胚的离体培养。在附加2ppm NAA+4PPm BA的培养基上诱导愈伤组织,转入减少生长素或无生长素,提高细胞分裂素的培养基中,可产生大量丛生小苗,每管可达40株以上。也可以在再分化培养基上直接诱导丛生苗。丛生小苗分株培养后,用液体培养基在滤纸桥上诱根,并用透明薄膜室移栽成活。试验表明生长素NAA、IAA对愈伤组织的诱导与分化都有良好效果,BA、ZT与NAA的适当配比是诱导丛生小苗的重要因素。只有绿色或黄绿色的愈伤组织才能分化。培养基含2.4-D,蔗糖5%以上都不利于愈伤组织绿化,也不利于分化。子叶基部与幼胚的培养条件基本相同,而且其分化能力与发育阶段有密切关系,取六月以后,油茶胚乳已完全消失的子叶与幼胚作外植体,较易诱导成苗。除了丛生苗的诱导外,幼胚在怀特培养基附加低浓度的生长素与细胞分裂素上可获得根茎完整的胚苗。但移栽的成活率却低于上述诱根的丛生苗。     

罗布麻子叶和下胚轴再生植株的培养

本文报道了用罗布麻（Apocynum venetam)幼苗的子叶和下胚轴切段诱导出愈伤组织和再生植株。结果表明,愈伤组织的诱导在附加0.5mg/L6－BA和0.1-1mg/L NAA的MS培养基上为最好。在附加0.5mg/L NAA的MS培养基上培养愈伤组织能促进芽的分化,当NAA浓度增加到1mg/L时则能抑制芽的分化。随后在附加0.4mg/L IBA的MS培养基上诱导生根,获得完整再生植株。     

石刁柏胚乳愈伤组织的诱导及植株的再生

石刁柏已形成细胞的幼嫩胚乳,接种在附加有不同浓度的生长素(NAA)和细胞分裂素(BA)的 MS 培养基上,获得了愈伤组织。愈伤组织的诱导频率随生长素的浓度不同而异,可达65.9—83.1%。将胚乳愈伤组织转移到降低了生长素浓度或只含有低浓度生长素的分化培养基上,可陆续分化芽、根、芽丛和少量胚状体,个别的芽和胚状体能发育成小植株。切取1.5—5cm 长的芽,接种在诱导根的培养基上,或在 IBA50ppm 溶液中浸泡2小时,转移到 MS 基本培养基上,部分芽能生根形成完整植株。     

龙眼的组织培养

植物名称:龙眼(Dimocar pus longana)。材料类别:十天龄无菌实生苗的上、下胚轴,子叶、根、叶、顶芽和茎段以及自然环境条件下生长的植株的茎段、顶芽和侧芽。培养条件:基本培养基为MS。(1)愈伤组织的诱导和分化培养基附加6-BA1.0mg/1(单位下同)。(2)愈伤组织直接分化幼芽培养基附加6-BA2.5、IBA2.5。(3)芽增殖培养基附加6-BA5.0、IBA5.0、KT2.0。(4)促根培养基附加IBA0.1。诱导愈伤组织是在黑暗条件下进行,愈伤组织直接分化芽在弱光下进行较佳。培养温度25～28℃,     

当归愈伤组织诱导和植株再生

运用改良的 B_5、MS、KU、NT、1/2 MS 培养基,从当归[Angelica sinensis(Oliv.)Diels]的根、叶片、叶柄、子叶、下胚轴等器官诱导愈伤组织和植株再生。试验证明:1.根的愈伤组织产生最快,生长旺盛,分化率高;2.植物激素在愈伤组织诱导和分化中起主导作用,且细胞分裂素(6-BA)与生长素(2,4-D,NAA)的适当配合有增效作用;3.培养基的种类对愈伤组织诱导和继代培养的影响差别不大,而对分化率有明显的影响,其中以改良的 B_5和 MS 培养基较好;4.由胚状体和愈伤组织分化芽。     

植物体细胞胚状体与器官发生的激素调节

研究了外源激素对胡萝卜、矮牵牛、石刁柏以及烟草、曼陀罗、芹菜等植物体细胞胚状体与器官(主要是不定芽)发生的调节作用。1.胚状体的诱导在基本培养基中所需生长素都比不定芽分化所需生长素浓度高,或再需补加少量细胞分裂素。不定芽的分化在基本培养基中所需细胞分裂素都比胚状体的诱导所需细胞分裂素浓度高,或再补加适量生长素。少量细胞分裂素对石刁柏E_3无性系胚状体发生有强烈的促进作用。2.在一定的激素条件下,石刁柏E_3、B_2茎尖无性系可以在同一块愈伤组织上发生胚状体、不定芽,有时还有根。改变培养基中激素的量,可使愈伤组织只发生胚状体或芽。3.IAA、NAA和KT、BA、Z(玉米素)对诱导石刁柏E_3系体细胞胚状体与不定芽都有效,2,4-D和KT对诱导石刁柏B_2系体细胞胚状体与不定芽都有效。4.石刁柏个体之间胚状体与不定芽发生能力差异很大,有三种以上不同的类型。胡萝卜下胚轴只能发生胚状体,球形胚发生的愈伤组织既能产生胚状体又能发生不定芽。     

苦荞胚性愈伤组织诱导与植株再生研究

以苦荞子叶和下胚轴为外植体,进行了不同浓度激素组合的MS和SH固体培养基对胚性愈伤组织诱导及植株再生的研究。结果发现,MS培养基比SH培养基更有利于胚性愈伤组织诱导;2,4-D是诱导愈伤组织的有效激素,KT能有效促进胚状体的形成;下胚轴和子叶都能有效诱导出胚性愈伤组织和再生植株。下胚轴在MS 1.5mg·L-12,4-D 1.5mg·L-1BA培养基,子叶在MS 2mg·L-12,4-D 0.5~1.5mg·L-1BA上能高效诱导出愈伤组织;愈伤组织在MS 2mg·L-12,4-D 0.1mg·L-1KT培养基中继代,能有效诱导胚性愈伤组织;来自下胚轴的胚性愈伤组织在1/2MS 2.0mg·L-1BA 0.5mg·L-1KT 0.1mg·L-1NAA培养基上能够高频再生出芽,来自子叶的胚性愈伤组织在1/2MS 1.0mg·L-1BA 0.1mg·L-1KT 0.1mg·L-1NAA培养基上芽诱导率较高;MS 1mg·L-1NAA是适宜的再生苗生根培养基。     

马铃薯器官发生和植株再生研究

虎头、克４和Ｆａｖｏｒｉｔａ３个马铃薯品种的根、茎、叶外植体在附加ＮＡＡ和ＢＡ各１ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上诱导出愈伤组织。在附加０．２ｍｇ／ＬＮＡＡ和１ｍｇ／ＬＢＡ的ＭＳ培养荐,愈伤组织上分化产生不定芽。１．５－２．５ｃｍ高的不定芽在ＭＳ＋０．０５ｍｇ／ＬＮＡＡ培养基上生根形成再生完整植株。３个马铃薯品种中,虎头茎的愈伤组织诱导频率最高,达９８％。Ｆａｖｏｒｉｔａ叶愈伤组织的不定芽分化频率和不定芽生     

外源激素对金钱松胚外植体愈伤组织的诱导及其器官发生的调节作用

金钱松胚外植体在培养过程中由于外源激素的种类和配比的不同而存在着几种发育途径：直接从胚外植体表面分化不定芽;先诱导愈伤组织,再从愈伤组织分化不定芽;还可由愈伤组织分化出胚状体。激素ＢＡ对外植体不定芽的诱导起着关键作用。激素２,４－Ｄ则诱导愈伤组织,ＢＡ与２,４－Ｄ配比恰当诱导的愈伤组织分化出体细胞胚状体。　ＬＰ’附加低浓度的ＢＡ或ＫＴ（＜０．５ｍｇ／Ｌ）促进不定芽茎的伸长;　ＬＰ’附加浓度的ＩＢＡ（＜０．５ｍｇ／Ｌ）诱导不定根的发生。愈伤组织在基本培养基浓度为　×ＬＰ’或１×ＬＰ’的分化培养基上不定芽诱导率相似。     

资源植物罗布麻的愈伤组织诱导和植株再生研究

以罗布麻（Apocynum venetum L.）无菌苗的叶、茎和根作为外植体,在不同激素与浓度组合的MS培养基上进行愈伤组织诱导和植株再生研究。结果表明,在多个激素浓度配比的培养基中,罗布麻叶和茎的愈伤组织诱导率均可达到100%;但进一步将愈伤组织转接到含有不同激素组合的培养基进行不定芽分化时,叶和茎来源的愈伤组织的不定芽分化率有很大不同,茎来源的愈伤组织虽可在多个培养基中有不定芽分化,但最高诱导率仅达20%;而叶片来源的愈伤组织虽仅有4个激素组合培养基中有不定芽的分化,但最高分化率可达到35%。因此,构建罗布麻再生体系的最佳外植体应选择叶片。愈伤组织诱导与不定芽分化的最佳培养基均为：MS＋NAA0.1 mg/L＋6-BA 1.0 mg/L;不定芽在1/2MS＋NAA 0.2 mg/L生根培养基的生根效果最佳,不仅根群质量好,且生根率也高达100%;此再生苗的移栽成活率也最高,在适宜条件下可达75%。     

金鱼草（Antitthinum majus L.）下胚轴外植体不定芽的高频再生

本文发展的技术可以使金鱼草下胚轴外植体不定芽高频再生。添加有2mg/l BAP和0．5mg/l NAA的MS培养基上再生芽出得又快又多,淡黄色愈伤组织易于形成并存活,但主要依赖的是6－BAP。MS培养基中含有0．1mg/l和6mg/l浓度的6－BP均能刺激芽的发育,最适浓度为2－3mg/l。仅加2．4－D,也能形成正常的黄色愈伤组织,但这样形成的愈伤组织在只含有0．1－6mg/l6－BAP或含有2mg/l6－BAP和0．5mg/lNAA的MS培养基上均不能分化生出再生芽来。仅加NAA,能够刺激下胚轴形成根。加入AgNO3,则抑制不定芽的再生,并导致整个外体变成棕色而死亡。组织化学分析结果表明：不定芽的再生源于下胚轴外植体表皮细胞。在不含有任何生长调节的MS培养基上,再生苗均能形成根。再生植株移栽至花盆可开花结实。     

番茄离体培养过程中器官发生的细胞组织学观察

对番茄下胚轴、子叶、茎段、叶片、叶柄不同类型外植体离体培养中有关细胞启动、分裂、分化以及器官发生作了细胞组织学观察。研究结果表明番茄不同类型外植体在同样的培养条件下,愈伤组织生长表现出明显差异,其中下胚轴、子叶诱导产生愈伤组织时,细胞启动最早,生长最快,其分裂方式基本为无丝分裂,未见有丝分裂,因此我们认为以不定芽方式获得转基因植株时,植株的所有性状变化,是否纯属目的基因所为,应该反复考察,不能忽视不定芽产生过程中的种种变化;下胚轴诱导愈伤组织形成时,细胞不规则的无丝分裂少于子叶,故下胚轴离体培养得到的正常芽的比例高于子叶的;番茄离体培养中不定芽通常发生在愈伤组织的周边区,也可起源于维管组织结节周围的形成层状细胞。不定根则由茎中柱鞘处发生。     

植物激素对驳骨丹茎愈伤组织生长和器官再生的作用

在驳骨丹离体茎切段培养中,用MS基本培养基,分别附加2毫克/升BA和0.2毫克/升NAA诱导愈伤组织,附加1毫克/升BA诱导芽分化;以2/1MS基本培养基分别附加0.5毫克/升NAA、IBA、IAA和2,4-D进行诱导发根试验,除2,4-D无效外,均能生根形成再生植株。根据上述试验结果,设计不同浓度的BA和NAA组合,进行愈伤组织继代培养,讨论这两种激素对愈伤组织生长和器官再生的调节作用。主要结果为:1.低浓度的BA和NAA组合比较有利促进愈伤组织的生长,且以中等浓度的BA和低浓度NAA的效果最佳;2.单独附加BA,其浓度在0.25—4.0毫克/升范围内,都能促进芽分化,而完全抑制了根的发生。当单加NAA,在0.5—6.0毫克/升的浓度范围内,能促进根的形成,而随其浓度的升高抑制芽的分化;3.细胞分裂素与生长素的比值>0.5时,有利芽分化而抑制根的发生,当比值<0.6时,有利根形成而抑制或减弱细胞分裂素促进芽分化的作用。在这里讨论了生长素和细胞分裂素之间对报、芽形成的拮抗作用。     

禿杉组织培养研究

本文详细报道了从秃杉(Taiwania flousiana Gaussen)离体胚诱导不定芽、不定根及从无菌苗茎端培养再生植株的过程。诱导不定芽要求较低的蔗糖浓度(以3％最好);同时BA是必须的,在附加0.1—3 mg/1 BA的White培养基上,从离体胚的子叶或胚轴上诱导了不定芽的发生(以1 mg/1最好);NAA与BA结合使用,对不定芽诱导无促进作用;适当提高光照有利于不定芽的诱导。在诱导不定芽的同时,在子叶表面还观察到有许多无结构的“不定突起”。不定芽起源于子叶表皮下1—2层细胞。IBA对诱导离体胚上产生不定根效果较好。在有或无生长素的培养基上,从生长1月龄的无菌苗茎端培养获得了不定根的产生,在加有细胞分裂索的培养基上,从无菌苗上产生了腋芽。     

番茄下胚轴离体培养植株再生及其组织学观察

研究了上海地区的主要栽培品种之一“鲜丰”番茄下胚轴离体培养过程中的激素调控 ,结果表明 :“鲜丰”番茄下胚轴进行离体培养过程中 ,MS培养基上附加不同浓度的生长素( IAA)和细胞分裂素 ( BA) ,对愈伤组织的形成影响不大 ,但对不定芽的分化有较大的影响 ,得出最佳培养基为 MS+ BA1 .0～ 2 .0 mg· L- 1+ IAA0 .2 mg· L- 1。用不同浓度的 ZT、BA、KT进行单因子芽器官的诱导实验 ,发现 ZT的作用力强于 BA和 KT,KT最弱 ;用不同浓度NAA、IAA、IBA、2 ,4- D进行发根培养实验 ,发现番茄的内源生长素浓度较高 ,用外植体直接发根外加生长素有一定的作用 ,若用不定芽扦插发根 ,不附加生长素也极易发根 ,故番茄的生根培养基为 1 /2 MS或 MS附加 IAA 0 .0 5～ 0 .1 mg· L- 1。另外 ,对有关细胞启动、分裂、分化以及器官发生的组织学观察表明 :番茄离体培养中不定芽通常发生在愈伤组织的周边区 ,也可起源于维管组织结节周围的形成层状细胞。不定根则由茎中柱鞘处发生。     

菊花离体快速繁殖的研究

用MS基本培养基附加植物生长调节剂,进行了菊花离体快速繁殖试验。以幼叶为外植体在附加不同生长素的培寿基上诱导愈伤组织后进行分化培养。结果表明,2.OppmNAA上的愈伤组织诱导率最高,0.5ppmBA上的不定芽分化率最高。用不同浓度NAA与BA的组合进行分化试验,其方差分析结果说明0.1ppmNAA+0.5ppmBA是分化培养的最佳激素组合。无根苗在MS无激素培寿基上诱导生根,28天后移栽成活率达到85％。     

‘光叶蔷薇’器官间接再生体系的建立及GUS基因转化的初步研究

以‘光叶蔷薇’(Rosa wichuriana‘Basye's thornless’)无菌苗的顶生幼嫩小叶为外植体,探讨了其愈伤组织诱导及植株再生的方法。结果表明,高浓度的生长素NAA能诱导外植体产生愈伤组织;由NAA诱导的愈伤组织在附加TDZ的MS培养基上,先暗培养再进行光照培养可直接分化出不定芽。诱导愈伤组织的最佳NAA浓度是7.0 mg/L、暗培养时间为10 d,而最佳分化培养基是MS+5.0 mg/L TDZ+30 g/L葡萄糖+2.5 g/L GEL,分化率达18.34%。以诱导产生的愈伤组织为侵染受体,初步建立了‘光叶蔷薇’GUS基因转化体系。农杆菌菌液浓度OD600值为0.5、侵染30 min、共培养2 d、乙酰丁香酮的浓度为50μmol/L是‘光叶蔷薇’愈伤组织转基因的最优条件。     

深山含笑的组织培养和快速繁殖

组织培养深山含笑的实验结果表明：利用休眠芽和种子萌发时实生苗的上胚轴及下胚轴为外植体均能诱导出愈伤组织和不定芽,其中无菌实生苗的上胚轴最易诱导出不定芽,无菌实生苗的下胚轴最易诱导出愈伤组织。外体植体在ＭＳ＋１．０－２．０ｍｇ Ｌ＾－１ ２,４－Ｄ培养基上只产生愈伤组织;在ＭＳ＋３．０ｍｇ Ｌ＾－１ ＢＡ＋０．２ｍｇ Ｌ＾－１ ＮＡＡ培养基上产生较多的不定芽和较多的愈伤组织;在ＭＳ＋２．０ｍｇ Ｌ＾     

火炬松(Pinus taeda L.)合子胚愈伤组织的器官发生和植株再生

以火炬松(Pinus taeda L.)的成熟合子胚为外植体在附加NAA和BA的TE培养基上诱导产生了淡黄色、疏松、有光泽的颗粒状愈伤组织。经过愈伤组织的保持和增殖培养及不定芽原基的诱导培养后,进行了不同激素、低温处理和蔗糖浓度对不定芽分化的影响实验。结果表明,在附加0.5 mg·L~(-1)IBA和2 mg·L~(-1)BA的TE培养基上,愈伤组织上的不定芽分化频率最高达62.15%。不定芽分化的最佳低温处理时间是5—6周,最佳蔗糖浓度是25—30 g·L~(-1)。不定芽经伸长培养后取高于1cm的小苗用于生根。在附加IBA、BA和GA_3的TE培养基上不定芽的生很频率最高达46%。