PTEN、HPV16/18-E6蛋白和雌激素受体在宫颈腺癌中的表达及其临床意义

目的：探讨宫颈腺癌组织中抑癌蛋白PTEN、人乳头瘤病毒（HPV）16/18-E6蛋白和雌激素受体（ER）的表达及其临床意义。方法：采用免疫组织化学S-P法对65例宫颈腺癌组织进行PTEN、HPV16/18-E6蛋白和ER检测,对30例慢性宫颈炎组织中HPV16/18-E6蛋白和ER的表达进行检测。结果：宫颈腺癌组织细胞核中PTEN的表达显著低于癌旁宫颈腺上皮组织（P〈0.01）,96%的宫颈腺癌细胞核呈低表达,而仅35%的癌旁宫颈腺上皮呈低表达（P〈0.01）;HPV16/18-E6蛋白和ER在宫颈腺癌中的阳性表达率分别为32.1%与49.4%,均显著高于慢性宫颈炎组织（P〈0.01）;HPV16/18-E6蛋白和ER的表达与宫颈腺癌的病理学分级、临床分期无关,在宫颈腺癌中的表达呈正相关。结论：PTEN在宫颈腺癌的发生中起一定的作用,其抑癌作用环节可能在细胞核水平;部分宫颈腺癌的发病可能与HPV16/18-E6蛋白过度表达有关;部分宫颈腺癌可能属于激素依赖性,雌激素可能有协同人乳头瘤病毒致癌的作用。     

PTEN、HPVl6/18-E6蛋白和雌激素受体在宫颈腺癌中的表达及其临床意义

目的:探讨宫颈腺癌组织中抑癌蛋白PTEN、人乳头瘤病毒(HPV)16/18-E6蛋白和雌激素受体(ER)的表达及其临床意义.方法:采用免疫组织化学S-P法对65例宫颈腺癌组织进行PTEN、HPV16/18-E6蛋白和ER检测,对30例慢性宫颈炎组织中HPV16/18-E6蛋白和ER的表达进行检测.结果:宫颈腺癌组织细胞核中PTEN的表达显著低于癌旁宫颈腺上皮组织(P＜0.01),96%的宫颈腺癌细胞核呈低表达,而仅35%的癌旁宫颈腺上皮呈低表达(P＜0.01);HPV16/18-E6蛋白和ER在宫颈腺癌中的阳性表达率分别为32.1%与49.4%,均显著高于慢性宫颈炎组织(P＜0.01);HPVl6/18-E6蛋白和ER的表达与宫颈腺癌的病理学分级、临床分期无关,在宫颈腺癌中的表达呈正相关.结论:PTEN在宫颈腺癌的发生中起一定的作用,其抑癌作用环节可能在细胞核水平;部分宫颈腺癌的发病可能与HPV16/18-E6蛋白过度表达有关;部分宫颈腺癌可能属于激素依赖性,雌激素可能有协同人乳头瘤病毒致癌的作用.     

Pten^＋/＋MEFs与Pten^-/-MEFs细胞系的差异表达蛋白质组分析

目的：研究PTEN缺失细胞的蛋白表达规律。方法：用双向电泳技术比较Pten^＋/＋MEFs与Pten^-/-EFs细胞的蛋白表达差异;用基质辅助激光解吸／电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）对差异蛋白进行质谱分析;用肽质量指纹图谱检索数据库对差异蛋白进行鉴定;用Northern印迹和Western印迹验证蛋白的差异表达。结果：与Pten^＋/＋MEFs细胞相比。Pten^-/-MEFs细胞有明显的差异性蛋白表达谱,Pten^-/-MEFs细胞中表达下降的蛋白有铜锌超氧化物歧化酶、过氧化物氧化还原酶5和6等,表达增加的蛋白有低分子量蛋白酪氨酸磷酸酶和丝切蛋白（cofflin）1。结论：PTEN的缺失引起细胞内多种蛋白表达改变,这些表达改变的蛋白可能与PTEN缺失后细胞癌变相关。     

子宫内膜癌中PTEN与PI3K-Akt通路的表达及意义

目的：研究PTEN与P1K3-Akt通路在子宫内膜癌中的表达及临床意义。方法：采用免疫组化技术检测正常子宫内膜组织（24例）、子宫内膜样腺癌组织（55例）及子宫内膜浆液性癌组织（26例）中PTEN、P13Kp110α及P—AKTSer473的表达情况,分析其表达与组织病理参数的关系。结果：免疫组化结果显示：子宫内膜癌的PTEN表达缺失率,P13Kp110α及p-AKTser473表达阳性率均高于正常子宫内膜组织,且正常子宫内膜组织与子宫内膜样腺癌组织比较有统计学意义（P〈0．05）;随着肌层浸润深度增加,PTEN表达缺失率增加（P〈0．05）。结论：PTEN的表达缺失及P13Kp110α与P-AKTSer473的表达可能与子宫内膜癌的发生发展有关,尤其是在子宫内膜样腺癌的发生发展机制中占重要地位。     

Galectin7和MMP9在宫颈腺癌中表达的临床病理研究

目的:探讨Galectin7和MMP9在宫颈腺癌中表达的临床病理学意义.方法:收集档案性宫颈腺癌病例及相关临床资料,应用免疫组织化学技术检测宫颈组织切片中Galectin7和MMP9的表达,分析这些指标的表达与临床病理指标的关系.结果:Galectin7在正常宫颈腺体,宫颈腺癌中的阳性表达率分别为30％,68.6％,差异有统计学意义.MMP9在正常宫颈腺体,腺癌组织中的阳性表达率分别为16.7％,71.4％,差异有统计学意义.宫颈腺癌组织中Galectin7与MMP9表达的相关性无统计学意义.Galectin7与MMP9表达与宫颈腺癌分期、淋巴结转移、分化程度有关,两种因子在中晚期患者的阳性表达率均显著早期宫颈腺癌患者,在有淋巴结转移的患者均高于无淋巴结转移患者,在低分化腺癌中的阳性表达率高于高中分化腺癌,均有显著性差异.Galectin7和MMP9表达阳性组5年生存率均显著高于Galectin7和MMP9表达阴性组.结论:Galectin7和MMP9表达与宫颈腺癌早期诊断,预后和复发预测密切相关.     

PTEN与P-糖蛋白在肺鳞癌与肺腺癌组织中的表达及其意义

目的通过检测突变型PTEN、P-糖蛋白在肺鳞癌和肺腺癌组织中的表达差异,探讨肺鳞癌和肺腺癌在肿瘤发生及预后方面出现差异的有关机制,并探讨这两种蛋白表达在肺癌病理临床方面的意义。方法利用免疫组织化学方法对65例肺癌患者手术切除的肺癌组织进行染色,镜下观察PTEN、P-糖蛋白的表达并分析其阳性表达率在肺鳞癌和肺腺癌组织中的差异及与这两种类型肺癌有关生物学行为之间的相关性。结果PTEN在肺腺癌组织中的表达明显高于肺鳞癌组织,差异具有统计学意义（P〈0.05）。PTEN的表达随肿瘤分化程度降低而逐渐降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。P-糖蛋白在肺腺癌组织的表达率明显高于肺鳞癌,差异具有统计学意义（P〈0.05）。P-糖蛋白的表达在高分化肺癌组织中的表达明显高于低分化肺癌,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论PTEN在肺鳞癌和腺癌的演进过程中,可能起到一定作用,与肿瘤细胞,尤其与肺腺癌的的分化调节有关;P-糖蛋白表达可能与肺鳞癌、肺腺癌的耐药性有关,并可能是肺腺癌及高分化肺癌对化疗药物不敏感的原因之一。     

应用蛋白质组学技术筛选宫颈癌临床分期相关蛋白

目的：通过比较早期宫颈癌和中一晚期宫颈癌的差异表达蛋白,以发现与宫颈癌临床分期相关蛋白,为临床预后和复发的预测提供新指标。方法：收集早期宫颈癌和中一晚期宫颈癌组织标本,提取组织总蛋白进行二维凝胶电泳,选择部分差异表达蛋白进行MALDI—TOF质谱分析和生物信息学分析进行蛋白质鉴定,进一步应用WestemBlot和免疫组织化学技术检测部分差异表达蛋白的表达情况。结果：建立了早期宫颈癌组和中一晚期宫颈癌组的二维凝胶电泳图谱,其中两组的平均蛋白质点数分别为1098±23、1142±21,通过进行质谱分析和生物信息学查询,与早期宫颈癌组比较,鉴定了在中一晚期组下调的蛋白4个。包括HemoglobinsubunitbetaHB、caspase-14、galectin-7、CK19;中-晚期组上调的蛋白8个,包括NMP238、HSP70、Calmodulin-like5、S100A9。WesternBlot和免疫组化检测结果均显示S100A9在中-晚期组中的表达高于早期组,CK19在早期组中的表达高于中-晚期组。结论：早期宫颈癌和中-晚期宫颈癌中存在着差异表达蛋白,这些蛋白可能成为宫颈癌预后和复发预测的生物标志物。     

应用二维电泳和质谱技术筛选喉癌及癌旁组织中的差异表达蛋白质

目的分离并鉴定喉癌和癌旁正常粘膜组织的差异表达蛋白质,为喉癌早期临床诊断、治疗提供新的有关的肿瘤生物学标记和靶标。方法收集5对人喉癌组织和对应的癌旁正常粘膜组织,提取组织总蛋白质,采用二维凝胶电泳技术分离蛋白并进行比较。选择在喉癌中明显差异表达的蛋白质点,进行质谱分析。结果获得了分辨率和重复性均较好的凝胶蛋白图谱。筛选出的在喉癌及癌旁正常粘膜组织中明显差异表达的10个蛋白质点,并成功鉴定。其中在喉癌组织中高表达的7个,低表达的3个。结论喉癌组织与癌旁正常粘膜组织蛋白存在明显的差异,筛选并鉴定出的这些蛋白质可能成为喉癌早期临床诊断、治疗的标志物和靶标。     

双水相纯化的人肺腺癌和癌旁正常肺组织质膜蛋白质组差异分析

肿瘤标志物对于肺腺癌病人的临床诊断和预后具有重要意义. 本研究根据临床诊断选取人肺腺癌组织和癌旁正常肺组织为研究对象,采用差速离心联合双水相法纯化组织细胞质膜,运用同位素标记相对和绝对定量技术结合高效液相色谱 串联质谱技术,鉴定出肺腺癌组织和癌旁正常肺组织的差异蛋白质41种. 同癌旁正常肺组织相比,18个蛋白质在肺腺癌组织中表达上调,23个蛋白质在肺腺癌组织中表达下调. 生物信息学分析发现,差异质膜蛋白质FLOT1、CAV1和ITGB1均处于蛋白质相互作用网络的重要位置,可能参与了肺腺癌相关信号转导.利用蛋白质印迹和免疫组织化学染色验证,差异蛋白质FLOT1、CAV1和ITGB1在肺腺癌织和癌旁正常肺组织的表达情况,其验证结果与蛋白质组学研究结果一致. 研究结果对肺腺癌诊断标志物和肺腺癌癌变分子机理研究具有重要意义.     

miR-9靶向调控PTEN在HPV16+及HPV18+宫颈癌细胞凋亡中的作用

研究微小RNA-9(microRNA-9,miR-9)靶向调控人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源蛋白（Recombinantphosphataseandtensinhomolog,PTEN）在人乳头瘤病毒（Humanpapillomavirus,HPV）16+及HPV18+宫颈癌细胞凋亡中的作用。收集宫颈癌组织及正常宫颈组织，培养HPV16+SiHa细胞、HPV18+HeLa细胞、HPV阴性C33A细胞及正常宫颈上皮H8细胞，检测miR-9、PTEN的表达水平。SiHa细胞和HeLa细胞进行分组转染后检测增殖抑制率、凋亡率、PTEN及miR-9表达水平。结果显示高危型HPV阳性及阴性的宫颈癌组织中miR-9的表达水平高于正常宫颈组织、PTEN的表达水平低于正常宫颈组织（P<0.05）且高危型HPV阳性宫颈癌组织中miR-9、PTEN表达的变化更显著；SiHa细胞、HeLa细胞中miR-9的表达水平高于C33A细胞和H8细胞、PTEN的表达水平低于C33A细胞和H8细胞（P<0.05）；敲低miR-9表达后，SiHa细胞、HeLa细胞的PTEN表达水平、增殖抑制率、凋...     

双向凝胶电泳在先天性肛门直肠畸形中的初步应用

目的：寻找先天性肛门直肠畸形患儿直肠末端组织中异常表达的蛋白质。方法：通过二维凝胶电泳分离先天性肛门直肠畸形患儿直肠末端组织及正常新生儿直肠末端组织,用Image Master2D Platium6．0软件比较电泳图谱中的异常蛋白质点。结果：筛选出19个表达差异的蛋白质点,其中有12个蛋白质点表达上调,7个蛋白质点表达下调,差异具有统计学意义。结论：先天性肛门直肠畸形可以导致血清中多种蛋白的异常表达。这些差异表达的蛋白可以为先天性肛门直肠畸形的进一步研究提供了依据。     

腮腺腺样囊性癌中PTEN、MDM2表达

目的:研究腮腺腺样囊性癌组织中抑癌基因PTEN、癌基因MDM2蛋白表达,探讨PTEN、MDM2在腮腺腺样囊性癌中两者之间的相关性,为将来临床应用提供参考。方法:选取腮腺腺样囊性癌手术存档石蜡标本30例,另取10例腮腺腺样囊性癌癌旁正常组织石蜡标本作为对照组,采用免疫组化SP法检验PTEN、MDM2表达情况。结果:腮腺腺样囊性癌和癌旁正常组织中PTEN蛋白的阳性率分别为20%(6/30)和70%(7/10),二者存在显著性差异(P0.05)。MDM2蛋白在两种组织中阳性率分别为66%(20/30)和20%(2/10)(P0.05),二者存在显著性差异(P0.05)(r=-0.657),在腮腺腺样囊性癌中PTEN、MDM2的表达负相关。结论:PTEN、MDM2蛋白异常表达在腮腺腺样囊性癌的发生发展中起重要作用。     

大鼠心肌梗死后差异蛋白质组学分析

目的：建立大鼠心肌梗死后蛋白表达变化谱,以进一步了解心肌梗死后心肌细胞重塑产生机制。方法：通过结扎大鼠冠状动脉左前降支建立急性心肌梗死模型,利用蛋白质双向凝胶电泳技术（two-dimensionalgelelectrophoresis,2-DE）分离心肌总蛋白,采用PDQuest7.3.1软件比较分析,获得差异表达蛋白总体变化趋势。进一步通过蛋白免疫印记技术（Western-blotting）检测碱性成纤维生长因子（Basefibroblastgrowthfactor,bFGF）在心肌梗死后的表达变化。结果：成功建立了大鼠急性心肌梗死模型;2-DE结果表明：以假结扎组为对照,梗死3天组有27个蛋白显著上调,18个蛋白显著下调,7个蛋白表达明显差异（ratio〉5）。进一步研究发现梗死区心肌组织bFGF表达明显升高。结论：心肌梗死后蛋白表达变化趋势的探讨为心室重塑机制研究提供线索。     

GRP94和CD8在宫颈病变组织中的表达及意义

目的：探讨葡萄糖调节蛋白94（glucose—regulated protein94,GRP94）和CD8在宫颈病变组织中的表达及与HPV感染的关系。方法：采用免疫组化S—P法检测32例原发宫颈癌、27例宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia, CIN）及40例慢性宫颈炎组织中GRP94和CD8的表达及定位;采用western blot技术检测6例宫颈癌及6例正常宫颈组织中GRP94和CD8的表达。结果：①在宫颈癌、CIN2／3、CIN1及慢性宫颈炎组织中,GRP94的阳性表达率分别为87．5％、82．4％、40％和22．5％;CD8的阳性表达率分别为28．1％、64．7％、90％和97．5％;GRP94在宫颈癌和CIN2／3中的表达均显著高于慢性宫颈炎和CIN1组织（P均〈0．05）;CD8在宫颈癌组的表达显著低于慢性宫颈炎组、CIN1组及CIN2／3组（P均〈0．05）。②Western blot结果示GRP94在宫颈癌组织中的表达显著高于正常宫颈组织（P〈0．01）;CD8在宫颈癌组织中的表达显著低于正常宫颈组织（P〈0．01）。③GRP94的表达与宫颈癌分化程度、有无脉管侵袭有关（P〈0．05）,而与年龄、病理类型、临床分期及有无淋巴结转移无关（P〉0．05）;CD8的表达与有无脉管侵袭有关（P〈0．05）,而与年龄、病理类型、临床分期、分化程度及有无淋巴结转移无关（P〉0．05）。④宫颈病变组织中,GRP94的表达与HPV感染呈正相关（rs=0．377,P=0．000）;cD8的表达与HPV感染呈负相关（rs=-0．395,P=0．000）;GRP94与CD8的表达呈负相关（rs=-0．608,P=0．000）。结论：GRP94表达可能是宫颈CIN进展及宫颈癌预后判断的重要预测指标。     

PDGF—D和VEGF在宫颈鳞癌中的表达及其意义

目的：检测宫颈鳞癌组织中血小板源性生长因子D（PDGF—D）和血管内皮生长因子（VEGF）的表达,探讨二者在宫颈癌变过程中的作用及意义,为探讨宫颈鳞癌的发病机制和宫颈鳞癌的早期治疗提供理论依据。方法：采用免疫组织化学（sP法）检测40例宫颈鳞癌和10例正常宫颈组织中PDGF—D和VEGF蛋白的表达,分析两者之间的相关性及其与临床病理特征之间的关系。结果：宫颈鳞癌组织中PDGF—D和VEGF蛋白的表达显著高于正常宫颈组织（P〈0．05）;PDGF—D和VEGF的表达与宫颈鳞癌的分化程度及淋巴结转移有关（P〈0．05）;与年龄及临床分期无关（P〉0．05）。Spearman相关分析发现PDGF—D与VEGF表达程度呈正相关（r=0．346,P〈0．05）。结论：1．PDGF—D和VEGF在宫颈鳞癌组织中特异性高表达,可能在宫颈鳞癌的发生、发展与转移中起着重要作用。2．PDGF-D和VEGF表达与宫颈鳞癌的分化程度及淋巴结转移有关,与年龄及临床分期无关,提示它们可能在宫颈鳞癌的浸润和转移及预后方面有重要的监测意义。3．PDGF-D和VEGF在宫颈鳞癌组织中的表达呈正相关,提示两者起着相互促进的作用,对PDGF—D和VEGF的联合检查,为临床实际应用提供了参考。     

PTEN和MDM2在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的：研究PTEN和MDM2在非小细胞肺癌（NSCLC）发生发展中的临床意义。方法：采用免疫组化SP法检测56例非小细胞肺癌组织及20例正常肺组织中PTEN和MDM2蛋白的表达。结果：56例肺癌组织中PTEN表达率为48.21%（27/56）,20例正常肺组织中PTEN表达率为95%（19/20）,二者有统计学意义（p〈0.05）。PTEN表达率与肿瘤的分化程度、临床分期、淋巴结转移有关（p〈0.05）。56例肺癌组织中MDM2表达率为53.57%（30/56）,20例正常肺组织MDM2表达率为10%（2/20）,二者有统计学意义（p〈0.05）,MDM2表达率与肿瘤的分化程度、临床分期、淋巴结转移有关（p〈0.05）。在NSCLC中,PTEN和MDM2的表达呈负相关（p〈0.05）。结论：PTEN和MDM2的异常表达在非小细胞肺癌的发生发展过程中起着重要的作用。