抗血型物质杂交瘤细胞悬浮培养研究

诱导、选育了适于连续悬浮培养的抗人血型杂交瘤细胞株,并初步建立了一种血型定型试剂悬浮培养生产工艺,抗体效价和亲和力等所有指标均达到或超过国家标准。它是一种经济、简单、切实可行的大生产方法。此外,为用发酵罐大规模生产血型定型试剂提供了物质基础和初步的生产模式。     

抗A、抗B血型单克隆抗体试剂稳定剂的筛选研究

临床上使用的抗A、抗B血型定型试剂根据其原材料来源,可分为多克隆抗体(免疫马血清)和单克隆抗体两大类,与多克隆抗体血型试剂相比,单抗血型试剂具有生产成本低、亲合力高等优点,但单抗血型试剂的稳定性欠佳。通过向单抗血型试剂中加入不同配比的稳定剂,观察其对抗A、抗B血型单抗     

ABO血型正反定型及交叉配血实验在外科病人手术输血中应用

目的:探讨ABO血型正反定型及交叉配血实验在外科手术患者输血中的应用效果及影响因素。方法:选取我院自2017年2月-2019年2月收治的80例行ABO正反定型与交叉配血治疗的外科手术患者,记录ABO反定型与交叉配血不合的标本,使用2-Me处理被患者自身冷抗体凝集的红细胞,同时使用微柱凝胶法、凝聚胺法对血型不规则抗体以及特异性进行筛选和鉴定。分析ABO血型反定型不符合以及交叉配血不合的影响因素。结果:对正反定型完全无凝集反应的80例血清标本进行交叉配血实验,其中8例存在凝集反应,配血不合情况;导致外科手术患者输血中ABO血型反定型不符交叉配血不合的主要因素包括自身冷抗体、血型抗原性减弱、血型不规则抗体以及血型抗体效价减弱等。结论:ABO血型正反定型及交叉配血治疗中的患者中,大部分配血一致,少数的交叉配血不合,主要与自身冷抗体、血型抗原性减弱、血型不规则抗体以及血型抗体效价减弱等因素相关。     

单克隆抗体血型定型试剂转瓶培养生产工艺

研制成功单克隆抗体ABO血型定型试剂转瓶培养生产工艺,生产周期从静置培养生产的5～6天缩短到2～3天。产品所有质量指标均达到或超过国家标准,特别是抗体效价明显提高。实验及生产结果显示,该法简单易行,经济快速．投入低,产出高,生产时间短,产品质量高。     

ABO血型实验结果矛盾解析

通过观察近千例学生操作步骤、亲自操作以及查阅文献,解析学生实验“ABO血型测定”结果不一致的原因。发现ABO血型测定结果矛盾的原因是：正向定型玻片法灵敏度低;学生操作技术不规范或者抗原、抗体反应条件不当;低质量的血清试剂：献血车上测定结果可能错误以及其他小概率事件等。因此在教学实验过程中要求：规范学生操作．培养基本技能;尽量选用质量稳定、可靠的试剂,培养科学的态度;要重视学生实验中发现的意外结果,培养学生的创新思维。     

国产人ABO血型定型试剂稳定性观察

为了解国内人ＡＢＯ血型定型试剂的稳定性,随机对４个厂家生产的共２０批次的血型试剂置２－８℃条件下,定期进行稳定性观察,结果显示,所有试剂在其效期内,凝集效价均下降１－２个滴度,其中有二个批次的试剂在临近失效期时,效价已低于１：１２８,其余全部合格,合格率为９０％,说明目前国产人ＡＢＯ血型定型试剂的稳定性是良好的,同时提示该剂的稳定性还需进一步提高。     

新生溶血病患儿红细胞上致敏抗体对Rh 血型检测的影响

目的:探讨新生溶血病患儿红细胞致敏抗体对其Rh血型鉴定的影响。方法:采用抗球蛋白法、盐水法、微柱凝胶法(Rh血型测定型)、凝聚胺法和抗血清微柱凝胶法(Ig G型)五种方法对近三年来我院收集的163例新生溶血病患儿红细胞进行Rh血型检测,对五种检测结果不一致的患儿红细胞进行0.2 M 2-巯基乙醇抗体放散,比较放散后五种方法检测结果并验证其准确性。结果:29例直接抗体试验阳性患儿的五种Rh血型检测结果不一致,经0.2 M 2-巯基乙醇抗体放散后检测结果均一致。Rh血型准确性验证表明,红细胞放散测定的Rh血型完全符合临床现象。结论:患儿红细胞的致敏抗体达一定数量后,会影响抗球蛋白法、盐水法、微柱凝胶法(Rh血型测定型)、凝聚胺法和抗血清微柱凝胶法(Ig G型)对Rh血型鉴定,0.2M 2-巯基乙醇抗体放散法是一种正确鉴定新生儿Rh血型的简单可行的方法。     

血型检测用反向定型试剂的研制

将正常的红细胞在特定条件下用甲醛处理,使红细胞膜固定但不影响膜表面糖蛋白血型抗原的活性。采用与正向定型相同的平板凝集试验方法,４０６０份血样正向和反向定型结果完全一致。经稳定性观察９０天,处理后的红细胞与相应抗体的凝集性能未见明显改变。实验结果表明本文介绍的红细胞试剂可用于ＡＢＯ血型鉴定的反向定型试验。     

自身抗体引起的ABO血型正反定型结果不一致

目的:对因自身抗体引起ABO血型正反定型结果不一致的疑难血标本进行血型鉴定和分析,探讨其原因和解决办法。方法:先用直接抗人球蛋白试验(DAT)和间接抗人球蛋白试验(IAT)确定ABO血型正反定型结果不一致的原因是由于自身抗体的存在,然后做吸收放散试验、抗体筛选试验等排除自身抗体的干扰以便血型的正确判定。结果:ABO血型正反定型结果不一致因自身抗体引起的有10例,其中温抗体7例,冷抗体3例,温抗体同时同种抗体阳性2例,冷抗体同时同种抗体阳性2例。结论:自身抗体会影响ABO血型的正确判定,选用合适的试验进行分析判断以提高血型鉴定的准确性。     

卡式微柱凝胶法在猴血型鉴定中的应用

灵长类动物的ABO血型抗原都表达在组织器官内,而不是在红细胞上,这给灵长类动物血型的鉴定带来很大的困难。为找到更加简捷、准确鉴定灵长类动物类人ABO血型的方法,采用近年来临床上广泛应用的卡式微柱凝胶正、反定型法对34只猕猴和16只食蟹猴的血型进行了鉴定,并与肾组织免疫组化法的检测结果进行比较。结果显示:卡式微柱凝胶正定型法的检测结果中无一例为阳性结果;血浆中的纤维蛋白原和人-猴种属间非特异性抗体都会对卡式微柱凝胶反定型法的部分检测结果产生干扰;采用经正常人O型红细胞吸附处理后的清亮血清,卡式微柱凝胶反定型法的检测结果明确,与免疫组化法判定结果一致。由此得出:卡式微柱凝胶反定型法可以用于灵长类动物血型的鉴定,其主要干扰因素为血浆内的纤维蛋白原和人-猴种属间非特异性抗体,在采用清亮血清及经正常人O型红细胞吸附处理后能消除其干扰。     

两例IgM抗体激活补体引起ABO血型不合的探讨

为保障输血的安全可靠性,研究两例因补体激活引起的ABO正反定型不合,探讨抗体、补体与红细胞(ABO)血型的关系,运用免疫血型血清学方法,排除补体对ABO正反定型的影响,定出该两例血型为“O”型。     

中国科学家破解“血型检测技术”百年难题

“人ABO血型纳米磁珠检测技术与试剂开发”课题采用现代纳米磁珠技术与免疫学完美结合,将红细胞膜包被于免疫磁珠表面,应用于临床常规检测,如反定型、抗体检测、稀有抗原保存等,特别是“细胞膜抗原免疫磁珠”使红细胞膜抗原成为永生,可以长期保存,解决了红细胞不能长期保存的国际性难题,并将结束我国血型检测长期以来只能测定一半血型的局面。     

98例输血前检查疑难标本的原因分析及解决对策

输血前需要进行常规的血型血清学检查,而在常规检查中经常会发现各种影响正常定型的因素。本站2013年10月—2015年10月接收了98例医院血库在ABO定型和不规则抗体筛选中出现疑难问题的患者标本,本站血型室通过血型血清学试验查找出产生疑难问题的原因并采取了相应的解决方法,保证了患者正确定型和安全输血。     

血型单克隆抗体试剂规模化生产工艺的建立

为了满足规模化生产的需要 ,对血型杂交瘤细胞的接种量、培养时间、培养条件等重要步骤进行了优化比较。结果表明 ,最佳血型细胞的接种量为 2 4× 10 8个 ,过长上清的凝集效价达到 1∶12 8,重复性好。建立了切实可行的血型试剂大规模生产工艺 ,成品试剂的质量稳定可靠     

人ABO血型定型试剂(单克隆抗体)临床试验

通过与１１家单位协作,对中国药品生物制品检定所分发的ＡＢＯ血型单克隆抗体定型试剂进行临床考核,检测１～１２个月婴儿、５９岁以上老人、１～５９岁成人、健康献血员、癌症患者及其它疾病患者共计７０９６８例,单抗试剂检测结果与反定型结果完全相符,特别是对红细胞表面抗原位点少、亚型抗原性弱的新生儿和红细胞表面抗原成份可能发生变化的癌症患者,均呈现较好的凝集模式。     

狂犬疫苗糖蛋白ELISA定量分析方法的建立及验证

为狂犬疫苗生产质量控制建立简便、高效、精准的糖蛋白体外效力分析方法,研制适用于狂犬疫苗生产质量控制的狂犬病毒糖蛋白酶联免疫吸附(ELISA)定量分析试剂。采用双抗体夹心法建立狂犬病毒糖蛋白ELISA定量分析体系,优化反应各项参数后考核试剂性能。线性范围为1~180 mIU/mL,灵敏度为0.4497 mIU/mL,分析内变异系数为5.8%~8.2%,分析间变异系数为7.2%~14.4%。用自制试剂与National Institutes of Health(NIH)动物法平行检测10份疫苗相关样品,两种方法测定结果的相对系数r²为0.8943,相关性良好。自制ELISA试剂各项性能指标良好,且与NIH动物法检测结果相关性良好,有望推广用于狂犬疫苗生产质量控制。     

快速血型定型及交叉配血对创伤出血性休克患者抢救重要性的探讨

摘要 目的：通过对创伤出血性休克患者快速血型定型及交叉配血结果的分析,探讨其对创伤出血性休克患者抢救的重要性。方法：选择2018年2月至2020年2月于我院接受治疗的156例腹部创伤出血性休克患者为研究对象,对入组患者均实施快速血型鉴定及交叉配血,记录血型定型结果与交叉配血结果,对血型定型正反不一致,交叉配血结果不相合的数据进行分析。结果：156例入组患者实施快速血型定型显示有40例存在正反定型不一致,占比为25.64 %（40/156）,其中男性21例,占比52.50 %（21/40）,女性19例,占比47.50 %（19/40）,年龄分布10岁以下占比15.00 %,10~30岁占比37.50 %,31~60岁占比35.00 %,61岁及以上占比12.50 %,不同性别和年龄患者分布不具有统计学意义（P>0.05）;不规则抗体筛查阳性8例,检出率为5.13 %,其中男性2例占比25.00 %,女性6例占比75.00 %,有输血史7例占比87.50 %,无输血史1例占比12.50 %,比较显示女性明显高于男性,有输血史高于无输血史（P<0.05）;进行卡式交叉配血87例,其中有主侧相合而次侧不合2例,主侧不合次侧相合2例,在抢救用血过程中均采用配合性输血原则。156例患者经过快速血型定型及交叉配血,救治成功的有137例,成功率为87.82 %。结论：及时准确的血型定型及交叉配血对创伤出血性休克患者的救治具有重要意义,为创伤患者的输血救治提供有力保障,在临床上值得推广。     

免疫渗滤法检测血液及尿液HIV抗体的应用评价

评价免疫渗滤法人类免疫缺陷病毒1+2型抗体诊断试剂盒检测人血浆和尿液样本的临床性能。采用对照试验研究,选取背景清晰的研究对象200例,采集同一研究对象的血浆和尿液样本,应用万泰生物药业公司生产的人类免疫缺陷病毒1+2型抗体诊断试剂盒作为考核试剂,法国生物梅里埃公司生产的人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒(ELISA法)作为参考试剂进行检测,考核试剂检测结果与参考试剂及研究对象背景进行比较分析。考核试剂检测血浆HIV抗体与参考试剂相比较,阳性符合率100.00%,阴性符合率100.00%,总符合率100.00%,Kappa值1.00,一致性强度为最强;考核试剂检测尿液HIV抗体与参考试剂检测结果相比较,阳性符合率68.29%,阴性符合率100.00%,总符合率87.00%,Kappa值0.72,一致性强度为高度。免疫渗滤法人类免疫缺陷病毒1+2型抗体诊断试剂盒对血浆、尿液样本检测性能优越,适合临床快速诊断。     

四种丙型肝炎病毒抗体试剂检测方法的性能评估

对血液筛查的四种丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)抗体试剂检测方法的性能进行评估。方法采用协作标定方式,应用四种检测方法(间接ELISA法、双抗原夹心ELISA法、间接CLIA法、双抗原夹心CLIA法)16种HCV抗体试剂,对经确证筛选出的70份(HCV抗体阳性35份、阴性35份)血浆样本进行检测,通过分析阳性、阴性符合率,评估四种方法 HCV抗体试剂的性能。结果间接ELISA法试剂检测阳性符合率为88.6%(31/35)~94.3%(33/35),双抗原夹心ELISA法、间接CLIA法、双抗原夹心CLIA法试剂检测阳性符合率为91.4%(32/35)~94.3%(33/35),四种检测方法 HCV抗体试剂阳性符合率之间的差异无统计学意义(P0.05);间接ELISA法和间接CLIA法试剂弱阳性样本检出率为11.4%(4/35)~31.4%(11/35),双抗原夹心ELISA法和双抗原夹心CLIA法试剂弱阳性样本检出率为5.7%(2/35)~11.4%(4/35),四种检测方法 HCV抗体试剂对弱阳性样本的检出率之间的差异有统计学意义(P0.05);间接ELISA法试剂检测阴性符合率分别为94.3%(33/35)~100%(35/35),间接CLIA法试剂阴性符合率分别为94.3%(33/35)~97.1%(34/35),双抗原夹心ELISA法和双抗原夹心CLIA法试剂阴性符合率均为97.1%(34/35),四种检测方法 HCV抗体试剂阴性符合率之间的差异无统计学意义(P0.05)。结论四种检测方法 HCV抗体试剂的性能基本一致,不同方法各有优缺点,建议应用多种检测方法对弱阳性样本进行确认检测。     

应用改良流式法检测猕猴和食蟹猴体内血型抗体水平的分布情况

绝大部分灵长类动物存在与人类相似的ABO血型系统,该研究采用改良流式法(flow cytometry method,FCM)检测猕猴及食蟹猴血清中血型抗体水平的分布情况。以流式细胞术为基础,使用商品化人源红细胞为靶细胞,并通过加入特异性荧光标记的抗人IgM或IgG二抗,对收集的实验用猕猴及食蟹猴的血清样本进行检测,以人类健康受试者的血清样本为对照,比较两者血型抗体水平的差异。结果显示:预先用人O型浓缩红细胞吸附猴血清中所含种属间非特异性抗体后,FCM法能够准确检测其血型抗体水平及分型,并且发现猴血清中天然血型抗体的水平明显低于健康人(P<0.05)。由此得出:通过预处理清除非特异性抗体的干扰后,FCM法同样适用于灵长类动物血清中血型抗体的检测,也为构建灵长类动物模拟人ABO血型不合器官移植模型提供了技术保障和实验数据。