恶性横纹肌样瘤（MRT）的起源研究——高变异率HeLa细胞致裸鼠产生MRT的实验研究

HeLa细胞KB株、X株、NM20／X株、H株的染色体众数依次为60±3（超二倍体）、62±3（超二倍体）、68±3（超二倍体和亚四倍体）和78±2（亚四倍体）,所占比率分别为72%～76%,69%,52%和40%。在纯化3代的肿瘤阴性对照二倍体猫肾（染色体众数38所占比率80%）和犬肾原代细胞皮下接种裸鼠的致癌／致瘤率分别为0%（0／22）和0%（0／10）,X株HeLa细胞冻融裂解物皮下接种裸鼠产生进行性缩小肿瘤的比率为20%（1／5）的前提下,HeLa细胞KB株、X株、NM20／X株皮下接种裸鼠产生进行性生长恶性肿瘤的比率分别为100%（10／ 10）,100%（25／25）和100%（5／5）,H株细胞皮下接种裸鼠产生恶性肿瘤的比率为50%（5／10）。其中,只有HeLa细胞KB株10～11代（染色体结构畸变率高达20%,出现18%双着丝点和2%断片）以超高数量接种的1组4只裸鼠（0.17ml12.75×10     

横纹肌样瘤的起源研究——高变异率BHK-21细胞致裸鼠产生恶性横纹肌样瘤的实验研究(续)

３讨论和结论３．１．不同核型细胞的致瘤性不同,细胞染色体数目变异大小和致癌／致瘤性强弱相关与肿瘤细胞系高变异率株在裸鼠体内的快速选育犬（Ｃａｎｉｓｆａｍｉｌｉａｒｉｓ）、猫（ＦｉｌｉｓＣａｔｕｓ）和叙利亚地鼠（Ｍｅｓｏｃｒｉｃｅｔｕｓａｕｒａｔｕｓ）...     

成人肾恶性横纹肌样瘤的研究:1例报告及文献复习

应用组织化学、免疫组织化学及电镜技术对我国首例成人肾恶性横纹肌样瘤（ｍ ａｌｉｎｇａｎｔｒｈａｂｄｏｉｄｔｕｍ ｏｒ, ＭＲＴ） 进行了研究, 与婴幼儿ＭＲＴ相比本例有以下临床病理特点： （１） 以血尿为早期和唯一症状,肿块缺乏特征性ＣＴ 改变; （２） 光镜下大量ＰＡＳ阳性嗜酸性球形小体多位于细胞外, 电镜下细胞外小体由微丝构成并有界膜包绕; （３） 免疫组化显示肿瘤细胞向神经外胚层、横纹肌和组织细胞多向性分化; （４） 肿瘤侵袭力较低, 高度表达ｎｍ ２３－Ｈ１ 蛋白, 随访１８个月术后化疗效果佳, 提示其恶性度较婴幼儿ＭＲＴ 低。     

人成纤维细胞系HF—91的建立及生物学特性

人胚胎胰腺结缔组织经分离培养成人成纤维细胞系ＨＦ－９１,传４０代。该细胞贴壁生长,具有密度依赖性抑制性质。它的生长依赖于成纤维细胞生长因子的存在,在１０ｎｇ／１００ｎｇ／ｍｌ浓度范围内,细胞生长与ｂＦＧＦ的浓度成正相关。细胞群体倍增时间２３．８±５．３ｈ。有丝分裂指数４９．３％±４．１％染色体众数２ｎ＝４６,占８７．５％±４．１％。染色体众数２ｎ＝４６,占８７．５％－９１．０％,乳酸脱氢酮同工酶Ｌ     

HSV—TK／GCV系统杀伤肝癌细胞的在体研究

目的和方法：将可产生含有ＨＳＶＴＫ基因逆转录病毒的包装细胞与ＢＥＬ７４０２肝癌细胞混合后,接种于裸鼠皮下,复制肝癌模型。确定ＨＳＶＴＫ基因转移后,给予动物注射ＧＣＶ,观察ＨＳＶＴＫ／ＧＣＶ系统基因治疗实验性肝癌的在体疗效。结果：在体条件下,逆转录病毒可将ＨＳＶＴＫ基因部分转导至肝癌细胞;ＧＣＶ作用后,ＴＫ＋中瘤细胞的生长受到明显抑制;电镜观察发现,ＧＣＶ杀伤ＴＫ＋肿瘤细胞的作用主要体现在细胞核;虽然组化染色分析表明ＴＫ基因转移效率只有１０％～３０％,但测量肿瘤体积显示ＨＳＶＴＫ／ＧＣＶ系统杀伤肝癌细胞的效果依然明显,故其作用机制可与“旁观者效应”有关。结论：ＨＳＶＴＫ／ＧＣＶ“自杀”基因系统有可能成为基因治疗肝癌的有效方法     

亲骨转移乳腺癌细胞MDA-MB-231BO成瘤性的初步研究

目的通过比较亲骨转移乳腺癌细胞（MDA-MB-231BO）和亲代乳腺癌细胞（MDA-MB-231）的生长曲线和致瘤性,初步探讨MDA-MB-231BO细胞的生物学特性。方法MTT法测定两种细胞的生长曲线,并将两种乳腺癌细胞接种于裸鼠腋窝处皮下,建立乳腺癌细胞异种移植瘤动物模型,30 d后处死裸鼠,肿瘤组织及相关脏器官做病理检查。结果MTT法测得MDA-MB-231BO细胞生长速率高于MDA-MB-231细胞。接种两种乳腺癌细胞的裸鼠均长出肿瘤,成瘤率为100%。病理检查符合人乳腺癌细胞特征,MDA-MB-231BO组瘤体体积明显大于MDA-MB-231组（P〈0.05）。结论MDA-MB-231BO细胞生长速率高于MDA-MB-231细胞,而且MDA-MB-231BO在裸鼠体内的致瘤性强于MDA-MB-231。     

动物细胞系的染色体组型与遗传变异率分析

在建立国内首家犬,猫,猴,鼠传代细胞库,即7种动物肾细胞系（F－81,CRFK,MDCK,Vero,Vero-2,MA-104,BHK-21)的种子库和工作库的基础上,通过细胞染色体组型,G带核型,染色体数目变异率,结构畸变率分析,了解7种细胞系传代培养不同代次的染色体变异情况,以相应的细胞株皮下接种褐 形成肿瘤实验,软琼脂细胞克隆一苦恼经与植物凝集素作用下细胞凝集实验为对照,筛选出无致癌／致瘤性,符合细胞遗传学要求,无传染因子污染的细胞系（F－81,CRFK,Vero,Vero-2)或极低致癌性的MDCK细胞系用于制苗,发现肿瘤细胞系高变异率株可在裸鼠体内快速选育成功,细胞系染色体遗传特征决定致性质并具有种属特异性,得到一些100％成瘤和100％不成瘤的细胞株并了与染色体组型的关系,对于肿瘤的发病机理及实验治疗,都是非常好的模型,一些细胞系不仅成瘤而且还可转移（致恶性横纹肌样瘤的BHK－21和Vero 细胞株）,其他致瘤细胞株只成瘤不转移或不明显转移。     

黄芪多糖和白细胞介素2对LAK细胞毒活性的调节作用

采用扶正中药黄芪的有效成分黄芪多糖（ＡＰＳ）和不同来源的白细胞介素２的伍用,探讨其对ＬＡＫ细胞毒性的调节作用,乳酸脱氢酶释放法（ＬＤＨ）测定ＬＡＫ细胞毒性的实验结果表明：ＡＰＳ自身具有增强ＬＡＫ细胞毒性的作用,有效剂量范围为１μｇ／ｍｌ￣１００μｇ／ｍｌ;ＬＡＫ细胞发挥细胞毒活性伍用一定剂量的白细胞介素２;ＡＰＳ（１０μｇ／ｍｌ）和ＩＬ－２（５００μ／ｍｌ）对ＬＡＫ细胞毒性具有非常显著的协同增强作     

离子束注入对细胞有丝分裂微管骨架影响的研究

经能量为２０～３０Ｋｅｖ注入剂量为６×１０１５Ｎ＋／ｃｍ２和１０×１０１５Ｎ＋／ｃｍ２的Ｎ＋离子注入及免疫荧光抗体标记显微观察和统计,结果表明,在绿豆根尖细胞有丝分裂中,分裂细胞的形体、中后期细胞数目、细胞微管骨架以及纺缍体的排布方式均发生了异常变化。１２－１３％的分裂细胞个体增大,８－１０％有丝分裂中后期细胞数目高于对照组,间期细胞微管骨架荧光强度明显弱于对照组,且有２－４％的较强荧光小体和无荧光小体（微孔洞,ｍｉｃｒｏｏｐｅｎｉｎｇ）。３－１２％的中后期细胞中出现不对称和极向不同步移动排布的纺缍体。研究结果表明：２０～３０Ｋｅｖ的能量和剂量为６～１０×１０１５Ｎ＋／ｃｍ２的Ｎ＋离子束注入,对绿豆根尖细胞有丝分裂微管骨架可诱发产生异常变化,同时也可以初步认为这种变化结果与Ｎ＋离子束注入产生的染色体异常分配和运动功能活动有密切的相关性。     

Beagle狗肾细胞及用于制备乙脑活疫苗的研究

Ｂｅａｇｌｅ乳狗（５－１０日龄）肾块用热消化法制成细胞批放液氮保存,检定合格后做下列试验：（１）复苏培养长满单层后更换维持液,其细胞能维持４天以上,克服了常规消化培养细胞维持时间短（３６小时）的缺陷。（２）传代１４－２株病毒时,１代病毒的滴度即达６．０４－６．２４ＬｏｇＰＦＵ／ｍｌ,１代后的各代（至１１代）病毒滴度无明显提高。（３）该细胞接种１４－２株病毒时不产生明显的破坏性病变（ＣＰＥ）,在收毒前采取冻溶１次比冻溶前的病毒滴度提高０．２７－０．５ＬｏｇＰＦＵ／ｍｌ。以ＢＤＫ细胞传１代的１４－２株病毒作生产毒种,收毒前冻溶１次等工艺法制备五批疫苗,全面检定结果均符合《乙脑活疫苗规程》的质量标准。其中病毒滴度为６．０９－６．２４ＬｏｇＰＦＵ／ｍｌ;免疫效价（ＩＤ５０＝ｍｌ）为１．９－４．０×１０－５,与相同滴度的原毒株１４－２ＰＨＫ苗对照无明显差异（ｔ＝０．９６８Ｐ＞０．０５）,表明其免疫原性与原毒株相似。     

戊型肝炎病毒(HEV)合成肽及基因重组抗原免疫反应性研究

用ＯＲＦ２、ＯＲＦ３合成肽抗原（１～１０号）及基因工程重组的ＯＲＦ２抗原（１和２号）分别建立了酶联免疫方法（ＥＩＡ）,检测６０份戊型肝炎病人血清中ＨＥＶＩｇＧ及ＩｇＭ１０个合成肽抗原（Ｓｐ１－Ｓｐ１０）及２个重组抗原（Ｒｅ１、Ｒｅ２）,均和ＨＥＶ阳性血清发生特异反应,但阳性率和反应强度差别很大。以Ｒｅ１（ＯＲＦ２,４０２～６６０）检测的抗体阳性率最高,为９６．７％（５８／６０）;Ｓｐ６（ＯＲＦ３,８８～１２３）次之,为９３．３％（５６／６０）;以上两种抗原混合使用阳性率为１００％（６０／６０）。Ｓｐ６、Ｒｅ１及这两种抗原混合使用检测抗ＨＥＶＩｇＭ,阳性率分别为１８．３％（１１／６０）、６６．７％（４０／６０）和６６．７％（４０／６０）。研究结果表明：合成肽６号（Ｓｐ６）及重组抗原１号（Ｒｅ１）是制备戊肝抗体诊断试剂的理想抗原。     

牛微量白细胞样品的处理及其Y染色体特异DNA的扩增

本文建立了牛微量白细胞样品的处理及其Ｙ染色体特异ＤＮＡ的扩增的方法。采集成年公牛全血,用ＥＤＴＡ抗凝血。分离白细胞,用０．１４５ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ洗净,用０．１４５ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ稀释,计数。分别将０．５、５０、５００细胞在含１０ｍｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣｌ、５０ｍｍｏｌ／ＬＫＣｌ、２ｍｍｏｌ／ＬＭｇＣｌ２、０．４５％ＮＰ－４０、０．４５％Ｔｗｅｅｎ－２０、０．１ｍｇ／ｍＬ蛋白酶Ｋ、总体积２０μ     

黑曲霉生产β—葡萄糖苷酶发酵条件的研究

经多项式回归分析,研究了不同浓度Ｎ源、Ｃ源、无机盐等对酶产量的影响,确定出最佳培养基配方为：麸皮４．９％,（ＮＨ４）２ＳＯ４０．４％,ＫＨ２ＰＯ４０．２９％,ＣａＣｌ２０．０５％,ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ０．０４％,ＦｅＳＯ４·７５ｍｇ·Ｌ＾－ＺｎＣｌ２１．４ｍｇ·Ｌ＾－,０．２％油酸钠。并对培养温度１时间、培养基初妈ｐＨ、通气量、接种量、接种方式等培养条件进行优化,使黑曲霉生产β－葡萄糖苷酶的产量由     

过氧化氢对蚕豆气孔运动和质膜K^＋通道的影响

不同浓度Ｈ２Ｏ２可使蚕豆（Ｖｉｃｉａ ｆａｂａ Ｌ．）叶片气孔关闭,抑制气孔张开,１０ｍｍｏｌ／Ｌ的Ｈ２Ｏ２最有效,１０μｍｏｌ／Ｌ的Ｈ２Ｏ２仍明显使气孔关闭。且１０μｍｏｌ／Ｌ的Ｈ２Ｏ２抑制气孔张开作用能被ＥＧＴＡ所消除,表明Ｃａ＾２＋参与低浓度Ｈ２Ｏ２使气孔关闭的过程。２ｍｍｏｌ／Ｌ的Ｈ２Ｏ２可使质膜内向Ｋ＾＋通道电流明显减小而外向Ｋ＾＋通道电流显著增加。因此,Ｈ２Ｏ２促进蚕豆气孔关闭主要是通     

泡桐叶片蛋白质提取方法的研究

２４个提取泡桐叶片蛋白质组合的试验结果表明,用ＵＫＣ（９．５ｍｏｌ／Ｌ尿素,５ｍｍｏｌ／ＬＫ２ＣＯ３,１．２５％ＣＴＡＢ,０．５％二硫苏糖醇,２％两性载体电解质ｐＨ３．５～１０,５％ＴｒｉｔｏｎＸ－１００）提取由１０％冷（－４０℃）三氯醋酸（丙酮配制,内含０．０７％的巯基乙醇）处理的泡桐叶片干粉提取出的蛋白质总量和种类最多。这表明该方法可用于泡桐叶片蛋白质的提取。     

亚砷酸对裸鼠宫颈癌移植瘤模型的干预研究

目的建立宫颈癌移植瘤模型,研究亚砷酸的体内干预效果及机制。方法将Hela细胞注射于裸鼠皮下接种,成瘤后腹腔分别连续注射亚砷酸、卡铂及生理盐水14d,观察肿瘤大小和裸鼠精神状态,用流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡和细胞周期。结果亚砷酸组小鼠精神状态良好。与对照组比较,亚砷酸组治疗7d后肿瘤生长速度减慢;治疗14d肿瘤重量显著性降低（P〈0．05）,抑瘤率达到35．8％,高于卡铂组的27．9％;治疗14d肿瘤细胞的凋亡率显著升高（P〈0．01）,增殖指数（PI）显著降低（P〈0．01）,处于G0／G1周期的细胞明显增多（P〈O．01）,处于G2/M周期的细胞明显减少（P〈0．05）。结论亚砷酸具有抑制宫颈癌移植瘤生长的作用,且未见明显毒副作用,其抑瘤的机理可能与诱导肿瘤细胞凋亡、干扰肿瘤细胞生长周期和抑制肿瘤细胞增殖有关。     

细胞松弛素B促微丝解聚对DNA合成的作用

利用微丝（ＭＦ）解聚药物细胞松弛素Ｂ（ＣＢ）处理Ｇ０期小鼠Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２成纤维细胞,对Ｇ０至Ｓ期ＤＮＡ合成,胸腺嘧啶核苷激酶（ＴＫ）活性、ＴＫ基因表达、钙调素（ＣａＭ）水平和一些细胞周期早期基因的表达进行了观察。Ｇ０期细胞经３ｍｇ／ＬＣＢ处理２ｈ,促ＭＦ解聚增强了血清对Ｓ期细胞ＴＫ活性、ＴＫ基因表达和ＤＮＡ合成的刺激作用,并促进细胞提前进入Ｓ期。血清刺激Ｇ０期细胞进入晚Ｇ１期和Ｓ期时,ＣａＭ     

PIC-BE诱导K562/ADM细胞凋亡及逆转其MDR的研究

β榄香烯吗素（ＰＩＣ－ＢＥ）是抗癌新药β榄香烯的水溶性衍生物．采用人红白血病的多药耐药性（ＭＤＲ）细胞株Ｋ５６２／ＡＤＭ作为实验模型,观察ＰＩＣ－ＢＥ对Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞的生长抑制和凋亡诱导作用,并进而研究其对该细胞ＭＤＲ的可能影响．结果显示：（１）Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞对ＡＤＭ具有明显的抗性,与Ｋ５６２细胞相比,抗性倍数约为４０倍,而两者对ＰＩＣ－ＢＥ的ＩＣ５０接近,无显著差异;（２）ＰＩＣ－ＢＥ（１０．０～３０．０μｇ／ｍｌ）对Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞具有明显的生长抑制和凋亡诱导作用,两种作用的强度在一定的范围内均具药物浓度和作用时间依赖性;（３）低毒剂量ＰＩＣ－ＢＥ（１０．０μｇ／ｍｌ）与ＡＤＭ（４．０μｇ／ｍｌ）联合应用,可显著增强ＡＤＭ对该细胞的生长抑制和凋亡诱导作用,升高细胞内ＡＤＭ的浓度,降低该细胞对ＡＤＭ的ＩＣ５０,使该细胞对ＡＤＭ的抗性有数倍逆转．上述结果提示,ＰＩＣ－ＢＥ不仅是一种有效的广谱抗肿瘤剂,而且也是一种有效的ＭＤＲ逆转剂     

灵芝多糖对人脐血LAK细胞活性的影响

本文研究了灵芝多糖（ＧＬＰ）对人脐血ＬＡＫ（ＣＢ—ＬＡＫ）细胞活性的影响,结果发现,单独ＧＬＰ能刺激人脐血单个核细胞（ＣＢＭＣ）增殖,但不能诱导ＬＡＫ活性,当与５０ｕ／ｍｌｒＩＬ—２伍用时,可增殖ＣＢ—ＬＡＫ细胞诱导活性,不同剂量ＧＬＰ（０．５—１００μｇ／ｍｌ）影响作用不同,以１０μｇ／ｍｌ浓度最好．在不同浓度ｒＩＬ—２（１０—１００ｕ／ｍｌ）诱导ＣＢ—ＬＡＫ细胞过程中加入ＧＬＰ（１０μｇ／ｍｌ）,可明显提高细胞增殖能力,减少ｒＩＬ—２用量。ＧＬＰ亦能促进效应阶段ＣＢ—ＬＡＫ细胞对Ｒａｊｉ肿瘤靶细胞的杀伤作用（Ｐ＜０．００１）。由此看出,ＧＬＰ具有增强ＣＢ—ＬＡＫ细胞活性的作用,是一很好的生物反应调节剂（ＢＲＭ）,有必要进行深入的研究。     

浓缩地鼠肾细胞狂犬病疫苗与纯化Vero细胞狂犬病疫苗接种 …

为了解国产浓缩地鼠肾细胞狂犬疫苗与法国纯化Ｖｅｒｏ细胞狂犬疫苗接种人体后中和抗体产生情况。分别用两种疫苗接种１０人,用小鼠中和试验方法检测中和抗体滴度。国产疫苗五针全程免疫后３０天（第一针按种后６０天）可１００％达到保护水平,法国疫苗在第一针接种后３０天１００％达到保护水平。第一针接种后１４、３０、６０天时,前者抗体平均滴度分别是０．０６ＩＵ／ｍｌ、１０２ＩＵ／ｍｌ、２．０７ＩＵ／ｍｌ;后者抗体平