聚酰胺色谱结合高速逆流色谱分离制备萹蓄黄酮类化合物

采用聚酰胺色谱结合高速逆流色谱法分离纯化了萹蓄中3种黄酮类化合物,建立了快速分离制备萹蓄中3种黄酮类化合物的方法。通过聚酰胺柱色谱富集黄酮类成分,再经过高速逆流色谱分离,以乙酸乙酯-甲醇-水-甲酸(体积比为4∶1∶5∶0.1)组成的二相系统作为固定相与流动相,在主机转速为850 rpm,流速为2.0m L/min,检测波长为254 nm的条件下制备样品。从150 mg富集黄酮成分的馏分中,一次性分离制备得到纯度为94.86%的杨梅树皮苷(myricitrin)7.5 mg,94.28%的黄芪苷(astragalin)13.8 mg,91.86%的合欢草素1(desmanthin-1)20.6 mg。所得馏分经高效液相色谱法(HPLC)检测纯度,并经MS和NMR鉴定化合物的结构。该方法简便、快速,所得产物纯度高,适合于黄酮类化合物的制备分离。     

固相小柱对沙苑子总黄酮萃取方法的研究

目的:以沙苑子总黄酮为研究对象,考察固相萃取小柱的洗脱条件,确定固相萃取沙苑子总黄酮的实验方法。方法:以不同浓度的甲醇对不同填料的固相小柱进行洗脱,将洗脱液在岛津VP-ODS(150 mm×4.6 mm,5μm)柱上进行高效液相色谱分析。通过比较不同浓度及体积甲醇的萃取效率,确定沙苑子苷在固相萃取小柱上的洗脱条件。结果:用正相氨基小柱以50%甲醇洗脱效果好,回收率可达100%。结论:经试验,正相氨基小柱对沙苑子苷的萃取回收率约为100%,适用于沙苑子总黄酮中沙苑子苷的分析。     

高速逆流色谱法(HSCCC)分离制备香水莲花中的柚皮素

采用高速逆流色谱法对香水莲花中的黄酮类化合物进行了分离,溶剂系统为正己烷-醋酸乙酯-甲醇-水(体积比1∶1.2∶2∶1),上层为固定相,下层为流动相,流速2.0 mL/min,转速830 r/min,检测波长280 nm,进样量300 mg,分离出80 mg化合物C,经HPLC测定纯度98.6%,根据UV光谱、MS分析及1H-NMR、13C-NMR图谱分析结果,化合物C鉴定为柚皮素,该化合物为首次从该植物中分离得到,为香水莲花的开发应用提供了理论依据。     

陕西柑橘主产区13种推广品种维生素C含量分析

为了测定陕西柑橘主产地区13种推广种植的柑橘品种中维生素C含量,为陕西柑橘的生产、加工、育种研究提供实验数据,采用高效液相色谱法对13个柑橘品种的维生素C含量进行检测。检测条件为:色谱柱Diamonsil(钻石)C18柱(4.6mm×150mm,5μm);检测波长为245nm;流动相为甲醇∶0.1%磷酸=1∶99(V/V),等梯度洗脱;流速0.8mL·min-1;柱温:25℃,进样量10μL。实验结果表明,汉中13个主要推广种植的柑橘品(系)中,维生素C含量在234.07~392.92mg·kg-1之间,各品种之间维生素C的含量各不相同,差异显著。本研究的结果表明,汉中柑橘中维生素C含量较高,品质较好。     

高速逆流色谱分离雷公藤中的雷酚内酯异构体

利用高速逆流色谱法从雷公藤植物粗提物分离得到一个化合物.两相溶剂体系为正己烷/乙酸乙酯/甲醇/水(2∶3∶3∶2,V/V/V/V),水相作流动相,有机相作固定相.经单晶X-衍射分析确定该化合物为雷酚内酯异构体.晶体参数为:晶体为正交晶系,空间群为P2(1)2(1)2(1);晶胞参数为:a=0.71913(10) nm,...     

灵芝孢子油脂肪酸组分的分析

采用气相色谱与质谱(GC-MS)联用分析,从超临界CO2萃取孢子油中鉴定出18种脂肪酸成分,包括6种不饱和脂肪酸、7种饱和脂肪酸、2种环链脂肪酸,以及己酸、辛酸、壬酸等短链脂肪酸。GC定量分析结果表明:灵芝孢子油中检出9种已知脂肪酸,不饱和脂肪酸总量为73.6%;其中,主体成分油酸(C18∶1)、亚油酸(C18∶2)和棕榈酸(C16∶0)等含量分别为57.5%、13.4%、19.6%;此外,不饱和脂肪酸十六碳烯酸(C16∶1)、亚麻酸(C18∶3)等不饱和脂肪酸含量为2.2%、0.5%。     

地钱、拳卷地钱和粗裂地钱的紫外谱线组法鉴别

本文建立了紫外谱线组法鉴别地钱、拳卷地钱和粗裂地钱的方法。通过这三种药材的石油醚、氯仿、乙醇和水提取液的紫外谱线比较,发现地钱、拳卷地钱和粗裂地钱的紫外谱线图、最大吸收峰数目及峰位值具有明显差异。该法简单、准确,可用来鉴别地钱、拳卷地钱和粗裂地钱的原药材。     

HPLC法测定18种菊科植物中总黄酮醇苷含量研究

目的:建立测定青海产18种菊科植物中总黄酮醇苷含量的方法。方法:Reprosil C18-AQ色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-0.2%甲酸溶液(48∶52),检测波长360 nm,流速1.0 mL/min,柱温40℃,进样量10μL。结果:槲皮素、山柰素和异鼠李素3种黄酮类化合物在1.06～212、1.06～212、0.93～186μg/mL浓度范围内均线性关系良好。本方法精密度、稳定性和重复性良好。结论:该方法准确稳定,重复性好,可用于菊科植物的质量控制。     

PEG(NH4)2SO4双水相体系在加杨叶总黄酮萃取分离中的应用

目的:寻找加杨叶粗提液中的总黄酮的有效方法.方法:利用双水相体系萃取分离、紫外分光光度法直接测定.结果:萃取分离加杨叶总黄酮的最佳双水相体系是25%PEG 400与12%(NH4):SO4,最佳萃取条件为:pH-9,NaCl的添加量为3%,粗提液3mL,温度25℃.结论:该方法的相对标准偏差(RSD)(≦) 0.28%(n=5),具有良好的精密度和选择性,为黄酮类化合物萃取分离的一种有效方法.     

离子液体-微波辅助提取黄芩饮片中四种黄酮类成分(英文)

采用HPLC法建立黄芩饮片中黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素四种黄酮类化合物同时测定的方法;并且优选离子液体-微波辅助提取(IL-MAE)黄芩饮片中四种黄酮类成分的最佳工艺。优选的色谱分离条件为:Aglient TC-C18(250×4.6 mm,5.0μm)色谱柱,流动相为0.4%磷酸水(A)和甲醇(B),梯度洗脱程序为0~10min,40%~50%B;10~20 min,50%B;20~30 min,50%~60%B;30~40 min,60%~80%B;50 min,80%B,检测波长280 nm。优选的最佳的黄芩饮片IL-MAE条件为:以溴化-1-丁基-3-甲基咪唑盐为溶剂,固-液比为1∶100,提取时间为3 min,微波功率为264 W;将该工艺所得四种成分的含量与采用中国药典(2010版)所收载的"回流提取法"所得含量进行对比,IL-MAE显著地提高了黄芩饮片中四种黄酮类成分的含量并且缩短了提取时间。研究结果表明,所建立的HPLC分析方法灵敏、准确,可用于黄芩饮片的质量控制;所优选的黄芩饮片的IL-MAE简单,高效,快速,无污染。     

高效液相色谱法同时测定楠竹叶提取物中的4种黄酮

采用高效液相色谱法同时测定楠竹叶提取物中的4种主要黄酮成分：荭草苷、牡荆苷、牡荆苷-4′-O-葡萄糖苷、牡荆苷-2′-O-鼠李糖苷。通过实验,得到了同时测定4种主要黄酮成分的最佳条件。采用Kromasil-C18(5 μm,4.6 mm×250 mm,Akzol Nobel,Sweden)进行测定,最佳检测条件为：以四氢呋喃∶乙腈∶甲醇∶0.5%醋酸水溶液=10.3∶1∶0.7∶88为色谱流动相等度洗脱;检测波长360 nm;柱温25℃,流速：1.0 mL·min^-1。荭草苷、牡荆苷、牡荆苷-4′-O-葡萄糖苷和牡荆苷-2′-O-鼠李糖苷的平均回收率分别为98.5%、98.1%、99.1%和98.7%,相对标准偏差分别为0.8%、0.7%、0.8%和0.6%(n=5)。该方法分离效率高、分析速度快、检测灵敏度高、重复性好,可用于楠竹叶成分的检测分析。     

固相萃取-高效液相色谱法测定沙苑子苷含量

目的：建立沙苑子总黄酮中沙苑子苷的含量测定方法。方法：用以氨基为固定相的固相萃取柱对沙苑子总黄酮进行纯化,洗去杂质后的洗脱液进高效液相色谱仪测定。色谱柱为VP—ODS（150mm×4．6mm,5um）,流动相为甲醇：1％HAC溶液（41：59）;流速1．2mL／min;检测波长266nm。结果：沙苑子苷在5—25μg／mL范围内呈良好的线性关系,加样回收率为102．5％,RSD2．3％。结论：本法灵敏、快速、准确,可用于测定沙苑子总黄酮中沙苑子苷的含量。     

高效液相色谱法测定17AA氨基酸注射液中N-乙酰-L-半胱氨酸和N-乙酰-L-酪氨酸

建立了一种用高效液相色谱测定 17AA氨基酸注射液中N 乙酰 L 半胱氨酸和N 乙酰 L 酪氨酸含量的方法。样品经稀释后 ,直接上机测定 ,其色谱条件为 :WatersSymmetryC18色谱柱 ,流动相为 8.5mmol/LNaAc - 5 %CH3 OH (pH =4.0 ) ,柱温36℃ ,流速 1.0ml/min ,检测波长 195nm ,N 乙酰 L 半胱氨酸在 5 .4mg/L到 5 40mg/L、N 乙酰 L 酪氨酸在 4.9mg/L到 490mg/L之间 ,标准曲线呈良好的线性关系 (r2 >0 .9999)。该方法具有良好的重现性 ,日内相对标准偏差小于 3% ,日间相对平均误差小于 7% ,样品回收率在 90 %～ 110 %之间。该方法与测定氨基酸注射液的其它高效液相色谱法相结合 ,能够对 17AA氨基酸注射液中所有氨基酸成分进行全面检测。     

Increasing proteome coverage with offline RP HPLC coupled to online RP nanoLC-MS

Fractionation prior to mass spectrometry is an indispensable step in proteomics. In this paper we report the success of performing offline reversed phase high pressure liquid chromatography (HPLC) fractionation on a C18 2.0 mm×150 mm column at the peptide level with microliter per minute flow rates prior to online nano-flow reversed phase liquid chromatography mass spectrometry (nanoLC-MS) using the well-studied fungus Saccharomyces cerevisiae. A C18 75 μm×150 mm column was used online and the online elution gradients for each fraction were adjusted in order to obtain well resolved separation. Comparing this method directly to only performing nanoLC-MS we observed a 61.6% increase in the number of identified proteins. At a 1% false discovery rate 1028 proteins were identified using two dimensions of RPLC versus 636 proteins identified in a single nano-flow separation. The majority of proteins identified by one dimension of nano-LC were present in the proteins identified in our two dimensional strategy. Although increasing analysis time, this non-orthogonal and facile pre-fractionation method affords a more comprehensive examination of the proteome.     

发酵法生产紫杉醇的检测分析

目的:采用高效液相色谱法对发酵液中的紫杉醇进行测定。方法:将紫杉醇产生菌发酵产物经乙酸乙酯萃取得测定样品,高效液相色谱分析方法为苯基柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相乙腈-甲醇-水(36∶4∶60),流速1mL/min,检测波长227nm,进样体积20μL,柱温室温。结果:紫杉醇与干扰物可达到基线分离,在2.2～110μg/mL范围内,紫杉醇的峰面积与浓度线性关系良好,相关系数0.9996,平均回收率为99.55%,RSD为0.60%。结论:与使用C18柱色谱条件相比,该分析方法灵敏度高,不需要复杂的样品前处理过程,仪器配置不复杂、操作方便、准确性高,可有效地检测发酵液中紫杉醇的含量。     

黄花蒿中青蒿素含量的RP-HPLC法测定

建立黄花蒿中青蒿素的高效液相色谱测定方法,采用柱前衍生RP-HPLC法测定黄花蒿中青蒿素的含量,采用ZORBAXXDB-C18(4.6mm×150mm,5μm)色谱柱,甲醇-0.01mol/L醋酸钠-醋酸缓冲液(pH5.8,体积比62∶38)为流动相;检测波长:260nm;流速:0.8mL/min;柱温:30℃。对广西、沈阳、北京、郑州、苏州和杭州等不同产地的野生黄花蒿样品、以及同一产地不同采集时间黄花蒿样品进行检测,结果表明不同地区青蒿素含量差异很大,同一地区不同采集时间黄花蒿样品的青蒿素含量也有差异。该法准确可靠、重现性好,能准确地反映青蒿素含量的检测。     

长春花(Catharanthus roseus)中吲哚类生物碱含量的比较

建立了反相高效液相法测定长春花中吲哚类生物碱文多灵、长春质碱和阿玛碱含量的方法,色谱柱为HiQ sil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相为1%二乙胺水溶液(磷酸调pH=7.2)—甲醇—乙腈/2:1:1(V/V);流速为1 mL·min^-1;检测波长为215 nm;柱温为40℃。并采用此方法对长春花根、茎、叶、花和种子以及不同产地的长春花中的这3种生物碱进行了检测,结果表明文多灵和长春质碱主要存在于在根、茎、叶、花中,阿玛碱主要存在于种子中;并且随着地理位置的北移,长春花中的文多灵和长春质碱的含量逐渐降低,温室中人为控制长春花中的栽培条件能提高二者的含量。     

绿肉山楂叶中五种黄酮类成分含量动态变化

为充分利用山楂叶用资源,采用反相高效液相色谱法,以ZORBAX Extend-C18色谱柱（250×4.6 mm,5 μm）,乙腈-0.5%磷酸水溶液梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长345 nm,柱温25℃,对不同生长时期的绿肉山楂叶中牡荆苷、牡荆素2″-O-鼠李糖苷、金丝桃苷、芦丁和槲皮素含量进行测定。结果表明,在此分析检测条件下牡荆苷、牡荆素 2″-O-鼠李糖苷、金丝桃苷、芦丁和槲皮素的精密度、重复性、稳定性及平均加样回收率试验的RSD值均小于3%,方法准确可靠。绿肉山楂叶中含有的黄酮类成分主要以牡荆苷和金丝桃苷为主,且二者含量变化规律与其总黄酮含量变化相似,均在10月初含量达到最高;此时采摘,其质量完全符合《中国药典》的有关规定,故绿肉山楂可作为一种新的药用资源来进一步开发利用。     

HPLC法测定头孢克肟的含量

采用高效液相色谱法测定头孢克肟的含量 ,HPL C法 C1 8为填充柱 (6 .0× 15 0 mm ) ,以氢氧化四丁铵 -乙腈 (34 0 :16 0 )为流动相 ;检测波长为 2 5 4nm。结果 :线性范围为 0 .144 mg/ ml～ 0 .2 80 mg/ ml(r=0 .9999) ,平均回收率为 99.80 %,RSD=0 .2 0 %(n=3)。本法具有柱效高、经济等优点 ,优于 USP法。