激光辐照蓖麻蚕的效应探讨

本文采用不同激光波长和不同形式的激光照射蓖麻蚕蚕卵,观察蚕卵的孵化率;蚕血液的酯酶同工酶、血清蛋白、染色体等在激光照射前后的变异情况。     

激光对家蚕诱变效应的探讨

激光应用于生物学的研究,国内外都取得 了一定进展。Zkzolot^[8]用红宝石激光器照射雄 性果蝇幼虫产生了突变。中山大学^[3]用CO₂激 光器处理植物花药,引起大量染色体畸变。安 徽农学院^[5]用钦玻璃激光器照射蚕卵,获得一 雌一雄的突变体,进而育成新原种。华南农学 院^[2]用显离子激光照射蓖麻蚕蛹,诱发蛾翅突 变,并育成优良新品种。但也有经照射后未发 现突变的>,对此有必要从实践和理论上作进 一步探讨。我们采用特定位点法,以家蚕形质 性状为标志,研究了激光对家蚕诱变的效应,并 进行了染色体观察,现将结果报告如下.     

不同能量激光照射后中华大蟾蜍早期胚胎发育及其蛋白质谱变化的研究

应用YAG倍频激光器选择不同能量密度激光微束对中华大蟾蜍4细胞期胚胎进行照射,观察胚胎的生长、发育状况,统计出膜率、畸胎率和死亡率。实验结果表明：低能量激光照射明显地提高了胚胎的孵化速度,且使畸变率降低;而高能量激光对胚胎发育有明显抑制作用,而且使畸变率增高。不同能量密度激光微束照射中华大蟾蜍早囊胚,0．5h后制备样品进行双向电泳,凝胶成像后用PDQuest软件进行分析。结果显示激光照射对蛋白质点数及其分布有影响,影响程度与照射激光密度有关。结论：激光照射可以影响胚胎发育和蛋白质的合成。     

不同激光照射方法对周围神经再生的影响

为研究不同半导体激光照射方法对周围神经损伤的影响,将96只家兔随机分为3周,6周,9周,12周4个观察期组,每个观察期组又随机分为不同照射方法的治疗组和对照组。建立动物模型后,各照射组在术后1d开始照射治疗,激光功率为10mw,每次照射10rain,每天一次,连续照射10d。照射治疗A组对准损伤神经吻合部位进行照射,照射治疗B组照射家兔L5、L6脊髓节段,照射治疗c组在对准吻合处进行照射同时还要照射L5、L6脊髓节段,对照组激光输出功率为零。实验结果表明低能量半导体激光照射能促进轴突再生,改善再生神经功能,以同时照射损伤周围神经部位和相应脊髓节段效果最为显著。     

低强度激光对人红细胞生物物理特性的影响

研究不同功率的低强度He-Ne激光对正常人体红细胞流变学特性影响。以正常人体红细胞为研究对象,测量了低强度He-Ne激光在不同照射时间、不同功率条件下红细胞的变形、取向、膜流动性、膜的微粘度和渗透脆性的变化情况。结果表明:照射后红细胞的变形性和膜流动性增强、渗透脆性下降。照射对红细胞流变学特性影响显著,其中激光能量为0.24 J、照射血样为2 mL时取得的照射效果最佳。     

He-Ne激光抗衰老效应的初步探讨

目的:探讨氦氖激光对人胚肺二倍体成纤维细胞(Human fetal lung diploid fibroblasts,2BS)对细胞衰老的影响。方法:采用低功率氦氖激光(λ=632.8nm,p=5mW)对年轻2BS细胞进行照射处理,用实时荧光定量PCR( Fluorescence Real time Quantitative PCR,q-PCR)方法检测细胞端粒DNA相对长度的变化来反映细胞的衰老情况。结果:经激光照射后生长到老年的细胞端粒长度较未经激光照射而生长到老年的细胞端粒长度长。结论:经适当的激光照射后,细胞端粒D N A因衰老而变短的趋势得到减缓。从而为从基因水平上探讨低功率激光延缓细胞衰老的激光生物学效应提供实验依据。     

低强度氦氖激光对缺血性疾病患者红细胞变形性影响的临床研究

目的：探讨低强度氦氖激光对临床中风等缺血性疾病患者红细胞变形能力影响情况。方法：临床采集不同缺血性疾病患者新鲜血样,检测各组红细胞变形能力情况。对中风患者血样进一步分组,给予不同剂量的氦氖激光处理,讨论临床低强度氦氖激光量效关系,探讨具有临床疗效的有效剂量情况。结果：各疾病病组红细胞变形能力较正常对照组红细胞变形能力为低;缺血疾病组样品经低强度氦氖激光照射后,其红细胞变形能力较未经激光照射组有显著不同。结论：显示体外人红细胞变形能力因患者疾病情况、红细胞状态、低强度氦氖激光临床治疗输出功率等因素有不同。     

850 nm波长微激光对肥大细胞脱颗粒及释放组胺的影响

目的:研究850 nm波长微激光对肥大细胞(RBL-2H3 (Rat basophilic leukemia))照射后组胺释放的影响.方法:肥大细胞铺于96板上,密度为5×104/孔,12 h后细胞经D-Hank's缓冲液清洗3次用于实验.肥大细胞经微激光照射15 min后,轻轻吸取细胞上清液,加入等量0.1 mmol/L的邻苯二甲醛,充分混匀,室温下反应20 min后,于荧光酶标仪上测量混合物的荧光光谱.结果:微激光照射之后的肥大细胞上清液,能发出440 nm左右的荧光,说明850 nm微激光能使肥大细胞脱颗粒,从而判断850 nm微激光能作为仿灸仪器的光源.     

658 nm低能量激光照射对人牙周膜细胞生物学效应的影响

目的:探讨658 nm低能量激光照射对人牙周膜细胞增殖、碱性磷酸酶活性及纤维连接蛋白合成的影响.方法:改良组织块法体外培养人牙周膜细胞.通过658 nm激光照射人牙周膜细胞,观察能量密度为1.86 J/cm2和3.72 J/cm2激光照射后不同时间点细胞增殖效应、碱性磷酸酶活性和纤维连接蛋白的变化.结果:1.86 J/cm2和3.72 J/cm2能量密度的激光照射人牙周膜细胞,可显著促进细胞增殖效应.3.72 J/cm2能量密度的激光照射可提高人牙周膜细胞碱性磷酸酶活性;能量密度为1.86 J/cm2的激光照射人牙周膜细胞72 h后,细胞中纤维连接蛋白分泌量增加.结论:658 nm低剂量激光照射可促进人牙周膜细胞增殖;适量的低剂量激光照射人牙周膜细胞可促进其碱性磷酸酶活性及纤维连接蛋白的分泌.     

810nm弱激光照射对大鼠急性脊髓损伤后巨噬细胞极化的作用研究

本研究构建急性大鼠脊髓夹伤模型,并将大鼠随机分为单纯脊髓损伤对照组及脊髓损伤联合弱激光照射组。照射组应用810 nm波长,150 m W照射功率,照射光斑0.3 cm^2的弱激光对脊髓损伤区进行经皮照射,连续照射3天,7天或14天。应用免疫荧光、免疫印迹实验方法,测定脊髓损伤区巨噬细胞及小胶质细胞的极化表达。应用酶联免疫吸附法测定脊髓损伤区白细胞介素4的表达情况。应用坚牢蓝髓鞘染色测定两组损伤脊髓中髓鞘保留的差异。采用BBB评分对两组大鼠后肢运动功能的恢复进行评估。结果表明,810 nm弱激光对脊髓损伤区连续照射3天,7天后,可显著减少M1型巨噬细胞及其标志物诱导型一氧化氮合酶的表达,在7天时间增加M2型巨噬细胞及其标志物精氨酸酶1的表达。弱激光照射组白细胞介素4的表达明显增加。损伤后14天,弱激光照射组脊髓损伤区髓鞘保留面积比值明显提高。损伤后7天及14天时,弱激光照射组大鼠的BBB评分明显升高。该实验结果表明,810 nm弱激光经皮照射,可增加大鼠急性脊髓损伤区M2型巨噬细胞及小胶质细胞的表达,并减少脊髓损伤后的髓鞘脱失,促进脊髓损伤大鼠运动功能的恢复。     

He—Ne激光对家蚕诱变效应的研究

采用一定剂量的ＨｅＮｅ激光辐照家蚕蛹,在子代与对照相比较,出现熟性、茧形、斑纹等多种变异,利用ＰＡＧＥ,进行血液蛋白质电泳分析结果,也产生谱带数目及活性的变化,首次证明ＨｅＮｅ激光对家蚕具有一定的诱变效应。     

不同饲料饲养家蚕其肠道微生态优势菌群类型的组成及差异性

为探讨鳞翅目昆虫的生长发育及抗病性与肠道微生态状况的关系,以不同的桑科植物柘叶与桑叶分别饲养家蚕,采用纯培养分离检测技术、16S rDNA序列测定和系统发育分析方法,对4、5龄家蚕肠道优势菌群的类型进行了鉴定和差异性分析。结果表明:柘叶与桑叶饲养家蚕共有的优势菌群有短波单胞杆菌属(Brevundimonas)、寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)、肠杆菌属(Enterobacter)和葡萄球菌属(Staphylococcus)4个类群。从桑叶饲养家蚕肠道中检索到的优势菌群还有气单胞菌属(Aeromonas)、短杆菌属(Brevibacterium)、柠檬酸杆菌属(Citrobacter)、埃希氏菌属(Escherichia)和克雷伯氏菌属(Klebsiella)5个类群,而从柘叶饲养家蚕肠道中检索到的优势菌群仅有假单胞菌属(Pseudomonas)和土壤杆菌属(Agrobacterium)2个类群。饲料的改变导致家蚕肠道微生态细菌种群组成的变化,从柘叶饲养家蚕肠道中分离出的优势菌群与桑叶饲养的家蚕相比,出现较大差异且不如桑叶饲养家蚕的菌群丰富。推测这种改变可能与柘叶饲养家蚕生长发育不良、容易患病具有相关性。     

Knockdown of ecdysis-triggering hormone gene with a binary UAS/GAL4 RNA interference system leads to lethal ecdysis deficiency in silkworm

Ecdysis-triggering hormone (ETH) is an integration factor in the ecdysis process of most insects, including Bombyx mori (silkworm). To understand the function of the ETH gene in silkworm, we developed an effective approach to knockdown the expression of ETH in vivo based on RNA interference (RNAi) and a binary UAS/GAL4 expression system that has been successfully used in other insect species. Two kinds of transgenic silkworm were established with this method: the effector strain with the ETH RNAi sequence under the control of UAS and the activator strain with the GAL4 coding sequence under the control of Bombyx mori cytoplasmic actin3. By crossing the two strains, double-positive transgenic silkworm was obtained, and their ETH expression was found to be dramatically lower than that of each single positive transgenic parent. Severe ecdysis deficiency proved lethal to the double-positive transgenic silkworm at the stage of pharate second instar larvae, while the single positive transgenic or wild-type silkworm had normal ecdysis. This UAS/GAL4 RNAi approach provides a way to study the function of endogenous silkworm genes at different development stages.     

Proteomic analysis of the immune response of the silkworm infected by Escherichia coli and Bacillus bombyseptieus

Abstract The silkworm, Bombyx mori, is an economically important insect with a 5 000‐year history of domestication. During evolution, the silkworm has developed highly effective defenses against invasion and parasitization by microorganisms. In this study, two microorganisms Escherichia coli and Bacillus bombyseptieus were orally infected to silkworm larvae. After infection with E. coli and B. bombyseptieus for 24 h, we investigated the polypeptide changes in the hemolymph, midgut and integument using two‐dimensional gel electrophoresis and matrix‐assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry. Forty‐seven differentially expressed proteins were identified in these tissues. They belonged to a variety of functional classes, including immune proteins, metabolic proteins and structural proteins. Compared with controls, E. coli‐infected silkworms showed 21 up‐regulated proteins, 25 down‐regulated proteins and lost one protein. After infection with B. bombyseptieus, silkworms showed 15 up‐regulated proteins, 27 down‐regulated proteins, lost three proteins and retained two proteins unchanged. We speculate that all these proteins may play a role in the silkworm immune response, although it is unclear why and how the two kinds of bacteria can so markedly alter expression of these proteins. These results offer valuable insights for measuring the proteomic responses of the silkworm innate immune mechanism.     

家蚕中肠组织抗核型多角体病毒病的相关蛋白分析

家蚕中肠上皮是病毒经口侵入遇到的第一个组织。昆虫幼虫抵御杆状病毒的感染,可通过选择性的使感染的中肠上皮细胞发生调亡并在释放病毒粒子进入血淋巴之前使感染的细胞从中肠脱落。为研究家蚕抗核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus, BmNPV)病的机制,通过对BmNPV高度抗性和高度敏感性的家蚕品系杂交和回交构建了近等基因系。本文对家蚕高抗,敏感及近等基因系5龄起蚕中肠组织的蛋白质表达谱进行了二维电泳 (two-dimensional gel electrophoresis,2-DE) 分析,并利用基质辅助激光解吸电离飞行时间 (matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight, MALDI-TOF) 质谱对差异蛋白进行鉴定。结果发现了5个差异表达的蛋白。推测这些蛋白可能与家蚕中肠对BmNPV的抗性或感性有关。     

A new method of pebrine inspection of silkworm egg using multiprimer PCR

Using a mixture of several PCR primers, we evaluated whether multiprimer PCR is practically useful for the early and simultaneous detection of several kinds of microsporidia that cause silkworm pebrine. When genomic DNA extracted from silkworm eggs infected with Nosema bombycis was used as the DNA template, the specific DNA sequences were amplified by multiprimer PCR. In addition, similar results were obtained even when genomic DNA extracted from silkworms infected with N. bombycis was used as the DNA template. These findings suggest that multiprimer PCR using several primers designed for this study is practically useful for pebrine inspection of silkworm eggs.     

He—Ne激光辐照野桑蚕生物学效应研究

采用一定量He-Ne激光辐照野桑蚕催青卵及蚕肾,并与家蚕杂交,对其子代的蛋白质和酯酶同工酶进行电泳分析,结果发现谱带数目及活性有变化。另外,茧质调查和丝质调查与对照相比也有差异,并发现丝长和纤度特好的变异个体,显示He-Ne激光辐照对野桑蚕生理生化性状有一定影响。     

In vitro diapause substance in the silkworm, Bombyx mori

By means of in vitro studies, in which isolated suboesophageal ganglions of the Bombyx silkworm were cultured, it was shown that at least two kinds of substances are biosynthesized and exert independent effects on determination of diapause or non-diapause in silkworm eggs. They are referred to as the diapause and non-diapause substance, respectively. Whether diapause or non-diapause eggs are laid may depend upon the different quality of these substances.     

我国优势油脂类生物柴油植物蓖麻的种质资源发掘和生物柴油利用

发展可再生生物质能源是解决人类能源危机和环境污染的重要途径。利用边际土地发展油脂类生物质能是生物质能的重要组成部分。蓖麻因为适应性强和油脂成份独特被誉为"理想的生物柴油植物"。蓖麻是我国优势油脂类能源植物,利用边际土地,发展蓖麻产业为我国生物柴油产业化提供原料,是我国现阶段生物柴油产业化发展的相对理想而又现实的选择,而且具有重要的发展前景和巨大的发掘潜力。立足我国现阶段生物柴油产业化的瓶颈问题,着重阐述了蓖麻种质资源发掘的现状、优良品种培育的途径和发展前景,以及利用蓖麻种子油生产商业化生物柴油的现状,以期推动我国利用边际土地发展蓖麻产业以及生物柴油商业化生产。