微胶囊技术使人单克隆抗体成为可能

Damon Biotech公司正利用微胶囊技术培育人杂交瘤,使之有可能用常规方法生产出浓度为30-100倍的单克隆抗体。此项技术解决了阻碍人单克隆抗体广泛使用的一大难题。今天,大多数单克隆抗体来自小鼠,它们较易生产,但对人体不总是有效的,有时会引起变态反应。在Damon公司的工艺过程中,杂交瘤细胞在液体培养基中的多孔的醣类微胶囊里生长。其养料和代谢产物可通过微胶囊的膜。细胞和高分子量的产物(如单克隆抗体)则保留在胶囊内。生长一段时间后,微胶囊可从培养基中分离出来,经洗涤、破裂,就得到高浓度的单克隆抗体液。     

一种高效和经济的单克隆抗体制备新方法

杂交瘤技术使得单克隆抗体大量制备成为可能,采用该技术制备单抗的关键步骤是杂交瘤细胞的培养,常规方法是用细胞培养瓶水平方式培养,这需要经常细心照料细胞使之处于健康状况,此外,如要获得大量的单抗,还需要通过进一步重新接种来扩大细胞数量。本文报道了一种高效而又简便易行的在标准细胞培养瓶中制备单克隆抗体的方法。该方法的关键在于将杂交瘤细胞和其适合的培养液放在水平的细胞培养瓶中培养,直到９０％的细胞达到融合,然后补加培养液至培养瓶的颈部,将瓶子竖直地放置在培养箱中培养３～４周,直到９０％～９５％的细胞死亡…     

《酶学方法第121卷(免疫化学技术)第1部分(杂交瘤技术与单克隆抗体)》

该卷介绍杂交瘤技术与单克抗体。全书共收入81篇论文,分四部分:(一)杂交瘤的产生;①免疫接种和细胞融合(211篇);②杂交瘤的生长与克隆(17篇)。(二)单克隆抗体:③单克隆的筛选测走(17篇);④单克隆抗体的纯化和抗体染色体片段(10     

呼吸道合胞病毒融合抑制活性单克隆抗体的鉴定及应用

用杂交瘤技术制备了抗呼吸道合胞病毒(RSV-Long株)的单克隆抗体F     

用异质培养生产单克隆抗体

单克隆抗体(mABs)的生产不仅费用昂贵,而且需要特殊的组织培养设备和技能。在体外,培养杂交瘤细胞需要添加胎牛血清(FCS)以确保生长,然而胎牛血清中含有的转铁蛋白和白蛋白会污染收获的单克隆抗体上清。因此下游纯化技术要确保将污染蛋白去除,这样不仅费时、收率低,而且需要特殊设备。粗糙的纯化过程会使单克隆抗体受损或变性。     

研制确定特异性兔单克隆抗体的稳定的兔-鼠杂交瘤

<正> 杂交瘤技术现已达到可制备抗大多数抗原的单克隆抗体的程度。可是,某些免疫原在小鼠体内免疫应答较差,并且通常很难得到具有确定表位特异性的高亲和力鼠单克隆抗体。这些问题通过曾报道的为数不多的分泌抗A群链霉菌(GAS)特异单克隆抗体的鼠杂交瘤而有所反映。     

Celltech公司开发单克隆抗体治疗剂近况

人们普遍认为,以单克隆抗体为基础的药物对诸如癌症、休克、心血管病和自身免疫病等疾病的治疗将取得重大进展。在这些领域中从事研究工作的Celltech公司最近通报了自己目前的情况。公司通过采用一项结合了杂交瘤技术和遗传工程的创新性技术,正在开发一系列有可能作治疗剂的单克隆抗体。 Celltech公司的科学家把工作重点放在单克隆抗体的“人化”上,以减轻免疫系统拒绝     

分泌抗北京鸭免疫球蛋白单克隆抗体的淋巴细胞杂交瘤CBH-2(简报)

淋巴细胞杂交瘤技术作为一种新的生物工程技术,已在生物学和医学领域内得到广泛的应用。我们继建立产生抗北京鸭红细胞单克隆抗体的杂交瘤细胞系CBH-1后,又建立了一株产生抗北京鸭免疫球蛋白(I_g)单克隆抗体的杂交瘤细胞系,命名为CBH-2。这种杂交瘤细胞经体外培养,能稳定地分泌抗北京鸭I_g的单克隆抗体。此单克隆抗体在以北京鸭抗体进行放射免疫和酶标等测定时,可用作第二抗体。现将主要结果简报于下。北京鸭I_g抗原的制备及免疫:从北京鸭颈动脉采血,分离血清,用50%和33%硫酸铵沉淀法提取二次。每只Balb/cJ小鼠腹腔免疫剂量为0.3毫克,共免疫三     

结核分枝杆菌ESAT-6抗原鼠单克隆抗体的制备及初步鉴定

目的:制备重组结核分枝杆菌ESAT-6抗原鼠单克隆抗体.方法:采用杂交瘤技术,获得了12株针对结核分枝杆菌ESAT-6抗原的鼠单克隆抗体杂交瘤细胞株,对其中的5株进行了小鼠腹水的制备及相关鉴定.结果:5株单克隆抗体的腹水效价达到1:512 000～1:1 024 000,纯化后纯度高于90%,抗体亚类(型)均为IgGl...     

抗伏马菌素B_1单克隆重组抗体的筛选

为了克服无功能抗体编码基因及基因重组等因素导致PCR直接从杂交瘤细胞中扩增组装的重组抗体不一定具有活性,分离伏马菌素B1(fumonisin B1,FB1)的特异重组抗体,首先通过杂交瘤技术制备分泌抗FB1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,然后构建单克隆重组抗体基因文库,利用噬菌体展示技术筛选抗FB1的重组抗体,并分析比较其亲和力。结果筛选得到的4个杂交瘤细胞株均能够稳定分泌抗FB1单克隆抗体,从抗体基因文库中获得抗FB1的重组抗体FBMH7,分析结果显示其结合能力相对其亲本单克隆抗体降低3.7倍,但仍对FB1抗原具有较高的亲和力(KD=2.00×10-7),为发展伏马菌素的免疫检测技术体系奠定了基础。     

杂交瘤细胞体外大规模培养研究进展

单克隆抗体在生物学和医学研究领域中显示了极大的应用价值,是免疫检验中的新型试剂,是生物治疗的导向武器。作为医学检验试剂,单克隆抗体可以充分发挥其优势,如特异性好,灵敏度高,更便于质量控制,利于标准化和规范化。传统的方法是利用小鼠腹水制备单克隆抗体,但是近几十年杂交瘤细胞体外大规模培养制备单克隆抗体技术也在不断发展。特别是单克隆抗体在疾病诊断和治疗方面的需求,更进一步促进了杂交瘤细胞体外培养生产技术的发展,体外培养杂交瘤细胞生产的单克隆抗体已应用到许多方面。由于杂交瘤细胞的半贴壁性质,无论是悬浮培养还是贴壁培养,均可进行杂交瘤细胞的体外大规模培养。针对应用于体外诊断试剂的杂交瘤细胞体外培养制备单克隆抗体进行综述,主要包括中空纤维细胞培养和生物反应器细胞培养方法,以及不同培养方法优化的进展。     

《单克隆抗体实用指南》

《单克隆抗体实用指南》(A practical guide to monoclonal antibodies)由J.Eryl Liddell和A.Cryer著,1991年威利父子出版公司出版,188页。作者向有经验的科学家提供生产单克隆抗体的全面信息,从基础组织培养技术、免疫策略和筛选试验设计,去生产杂交瘤细胞株以及基本抗体的鉴别、纯化及标记。该书中的程序     

单克隆抗体在乙肝病毒研究中的应用

一、已建株的抗乙肝病毒杂交瘤细胞株1975年G.Kohler等用细胞融合方法建立分泌特异抗体的杂交瘤细胞株。随后该项技术广泛用于生物科学的各个领域。八十年代初,Wands J R建立了分泌抗乙肝病毒表面抗原(HB_(?)Ag)单克隆抗体(McA的细胞株。     

快速诊断试验法

<正> Hazleton公司的一个子公司,即Hazleton生物技术公司(维也纳,弗吉尼亚)和Cell-ular产品股份有限公司(布法罗,纽约)决定制定一项生产用于诊断仪器的单克隆抗体的联合计划。Cellular公司能提供来自人体血液成分的一些高纯化抗原,这可能是与Hazleton公司一位组织培养和杂交瘤生产方面的专家的配合分不开的。生产出的第一批单克隆抗体可能对人体Platelet-Derived生长因子(PDGF)和人体免疫干扰素具有特异性。据Richard     

小鼠杂交瘤单克隆抗体快速制备技术研究进展

小鼠杂交瘤单克隆抗体来源稳定、后期易制备、产量高,是免疫学中使用最为普遍的抗体。传统的耗时费力的杂交瘤制备技术无法满足日益增长的市场需求。文中从抗原设计筛选、B细胞富集与筛选、骨髓瘤细胞的改造、融合技术的改进、阳性杂交瘤细胞筛选及单克隆抗体性能快速测定中所涉及的快速制备技术方面进行阐述,以期为系统化的小鼠杂交瘤单克隆抗体的快速制备方法提供参考。     

青霉素结合蛋白2a单克隆抗体的研制和初步应用

目的研制青霉素结合蛋白2a(PBP2a)单克隆抗体(Mc Ab),为建立耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)免疫层析检测方法提供检测用抗体。方法以基因工程抗原r PBP2a免疫BALb/c小鼠,通过常规小鼠B淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体,采用免疫印迹技术(Western blotting)分析单克隆抗体特异性。选取敏感、特异的单克隆抗体进行金标记和硝酸纤维膜包被,建立胶体金免疫层析检测方法。结果共获得11株分泌抗r PBP2a的杂交瘤细胞,其中6株分泌的单克隆抗体能够与天然PBP2a呈阳性反应。用其中2株单克隆抗体建立的PBP2a胶体金免疫层析方法,可在5~20 min内完成检测。结论获得了特异性针对PBP2a蛋白的单克隆抗体,并初步建立了检测PBP2a蛋白的胶体金免疫层析检测方法,为临床快速、简便检测产生PBP2a的细菌提供了检测方法。     

大鼠杂交瘤技术及抗HIV、HBsAg大鼠单克隆抗体的制备

在目前制备单克隆抗体的三个主要体系：小鼠、大鼠和人杂交瘤体系中,大鼠系统具有某些特有的优点。本文以制备抗艾滋病毒和抗乙型肝炎表面抗原的大鼠单克隆抗体为例,较详细的介绍了大鼠杂交瘤的特点及大鼠单克隆抗体制备技术。     

抗HBs/y亚型决定簇杂交瘤细胞株建立成功

由中国预防医学中心病毒所、河南省医科所和天津市卫生防疫站组成的肝炎单克隆抗体研制协作组。应用杂交瘤技术建立了两株分泌抗HBs/a及抗HBs/y亚型决定簇的杂交瘤细胞株SH1D 9(抗HBs/a)及SG3B10(抗HBs/y),经4～6次再克隆并传代3～6个月均能稳定地分泌高滴度单克隆抗体,其特异性     

细胞工程

生产一了分泌针对一种抗配位免疫球蛋白的抗个体基因型抗体的杂交瘤。(丘惠深)870505产生抗神经传递素降解酶单克隆抗体的杂交瘤细胞株仁专,英〕     

抗豚鼠IgG1单克隆抗体的制备

本研究应用B淋巴细胞杂交瘤技术,建立了能持续稳地分泌豚鼠IgG1 McAb的杂交瘤细胞株NB_(11)B_6和NB_(11)N_3。两株细胞分泌的单克隆抗体(MeAb)经间接血凝检测效价均达到1:12400以上,本McAb经检测属小鼠IgG_1亚类。该杂交瘤细胞株染色体的数目为93.12±12.3和103.25±11.2对,经半年的冻存与复苏分泌McAb性能稳定。