正交实验优选沟眶象甲壳素的超声波提取工艺

以沟眶象干粉为原材料,通过单因素实验和正交实验优化了沟眶象甲壳素的超声波辅助酸碱法提取工艺。在不同条件下,研究超声处理的时间、功率、温度以及柠檬酸、氢氧化钠的浓度和固液比对甲壳素提取的影响,确定了沟眶象甲壳素的最佳提取工艺条件:氢氧化钠质量分数9%、固液比1︰16、温度65℃、时间50 min、超声功率60%;柠檬酸质量浓度1.8 g/L、时间25 min、固液比1︰12、室温、超声功率100%。在此工艺条件下得到的甲壳素样品得率为16.50%,比传统酸碱法提取甲壳素的得率减少2.69%,但优化后的超声波辅助酸碱法所用时间仅占传统酸碱法的4.31%,因此超声波辅助酸碱法具有明显的优势。     

第四纪花粉的无酸碱分析法

第四纪花粉无酸碱分析方法,是从第四纪沉积物中提取花粉的一种行之有效的方法。该流程简单,易于操作,已被大量分析实验证实,与常规的酸碱分析法相比具有不使用酸碱、流程短、花粉破坏少、成本低、污染少等特点。是目前高精度、高分辨第四纪花粉分析的有力工具。     

花粉内细胞核的直接染色方法

由于植物花粉具有坚固的外壁,要直接观察花粉内营养核和生殖细胞核非常困难。传统方法是采用石蜡切片法,但制做比较复杂,一般初学者不易掌握。现介绍一种简单的染色处理方法,不但可使花粉内营养核和生殖细胞核自动从花粉壁内膨出,而且还可以给两核着上鲜艳的颜色。该方法所用试剂少,操作简便,适于一般初学者和在普通中学生物课实验中使用。具体操作方法如下:     

生化药物生产过程中控制热原的方法

热原是微生物的代谢产物 ,是微生物的一种内毒素 ,其主要成分是脂多糖 ,分子量一般为 10 6左右。去除热原的主要方法有 :1 高温法。多在 2 5 0℃加热 30分钟以上。2 酸碱法。用酸或碱进行处理 ,破坏热原。3 吸附法。常用 0 1%～ 0 5 %的活性炭吸附处理。4 层析法。利用离子交换树脂或分子筛凝胶层析处理。5 超滤法。使用超滤装置滤除热原物质。为了保证热原符合规定 ,往往要经过多次实验才能选择合适的方法 ,设计出适宜的...     

靶向shRNA表达载体构建方式的比较研究

目的:探讨两种构建shRNA表达载体方法的不同,寻找更加稳定方便的靶向shRNA表达载体的构建方式。方法:比较构建shRNA表达载体传统方法双链退火法和新方法双链PCR法的设计原则、构建方法和鉴定结果的不同。结果:两种方法均能得到重组质粒,但是双链PCR法构建效率高且不易引起碱基的缺失和突变。结论:双链PCR法构建shRNA表达载体比传统双链退火法更加稳定,构建成功率较双链退火法高。     

虫草多糖含量测定方法的研究

目的:选择一种适合于北虫草提取物中多糖含量的测定方法。方法:采用水杨酸法和苯酚-硫酸法测定虫草多糖的含量,比较两种方法的优缺点。结果:两种方法精密度上均符合要求,但在样品处理时间、稳定性、回收率等方面水杨酸法优于苯酚-硫酸法。结论:水杨酸法操作简便、稳定、回收率高、重现性好,更适用于虫草多糖的质量控制。     

膜过滤细胞直接计数新方法

介绍了两种膜过滤细胞直接计数新方法,即不透明滤膜的金相显微镜细胞直接计数法和透明滤膜的生物显微镜细胞直接计数法的基本原理、仪器设备、分析和计算方法,并且将此方法与荧光显微镜细菌计数、血球计数板等方法进行了比较。实际计数结果表明,两种膜过滤细胞直接计数法配合了独特的酸碱处理法以分散聚团细胞,用于非环境样品细胞浓度的测定具有快速准确简便的特点。此外,该方法基本不受细胞大小的影响,除了适用于体型较大的藻类、酵母菌的快速计数以外,还可以清晰地分辨诸如光合细菌这样体积较小的细菌。     

直肠癌腹腔镜Dixon 术与传统Dixon 术的临床效果对比分析

目的:对比腹腔镜直肠癌Dixon术与传统Dixon术两种手术方式的优缺点。方法:对我院2005年9月至2010年8月期间326例行腹腔镜下直肠癌Dixon术与传统Dixon术的患者临床资料作回顾性对比分析。结果:腹腔镜直肠癌Dixon术手术时间、胃肠功能恢复和住院时间较传统开腹Dixon术时间短,术中出血量较传统Dixon术少,术后镇痛方面较传统手术有优越性,术后粘连性肠梗阻发生率较传统手术少、术后吻合口瘘发生率及肿瘤复发率两者无显著性差异。结论:腹腔镜直肠癌Dixon与传统Dixon手术相比,术中出血少,创伤小,术后恢复好,具有明确的微创优势,是安全可行的。     

原阿片碱提取工艺的改进

采用酸碱法处理从夏天无中提取原阿片碱,所得产品理化性质与标准品一致。     

煮沸裂解法和试剂盒法提取浸矿菌基因组DNA的比较

目的:在生物浸出中,微生物群落结构分析有着重要意义,而群落分析的基础是提取纯度高、损失少的基因组DNA。为了解决这一问题,本实验通过比较两种较常用的DNA提取方法,煮沸裂解法和试剂盒法,寻找一种灵敏、快速、经济实用的制备浸矿细菌基因组DNA的方法。方法:分别用煮沸裂解法和试剂盒法提取6种浸矿菌的基因组DNA,从所提取的基因组DNA浓度、纯度、回收率和对PCR扩增反应的影响方面比较了两种方法的提取效果;用两种方法来处理不同浓度梯度的一种菌,通过实时定量PCR来比较两种方法的灵敏性。结果:相同处理量(108个)的革兰氏阳性菌(1株)、革兰氏阴性菌(4株)、古菌(1株)经两种方法提取的基因组DNA差异较大,煮沸裂解法所得的6组基因组DNA更纯,其OD260/OD280的值更接近1.8-2.0(纯DNA的OD260/OD280在1.8-2.0之间),前者所提DNA回收率最大可达后者的16.7倍;煮沸裂解法只需较少菌(102个)便能让实时定量PCR检测到所提DNA模板浓度,比试剂盒法灵敏。结论:两种方法提取的基因组DNA均可用于后续的PCR扩增,此外,前者提取的DNA浓度随细菌浓度增加而呈线性增大,而后者随菌浓度增大,所提DNA量增加有限,因此,在生物浸出中微生物基因组DNA的提取可直接采用简单快速的煮沸提取法,为实验节约成本和时间。     

几种全长cDNA文库构建方法比较

全长cDNA文库是高效、大规模获得基因全序列信息的一条有效途径,尤其是对基因组庞大,近期内尚不能进行全基因组测序的生物来说,是一条开展功能基因组研究的重要途径。本文对几种全长cDNA文库的构建方法进行了概述,针对各种方法的原理及优缺点做了分析、比较,并结合本实验室的结果,重点介绍了Cap-trapper法在小麦全长cDNA文库中的应用及文库中全长基因比例判定方法。     

A new method for measuring tree height in tropical rain forest

Abstract. A new method is described for measuring tree height in tropical forest with a dense undergrowth, the so-called angles-measure method, which is related to the height-matching method formerly used by British foresters.     

四种提取芸芥基因组DNA方法的比较

以芸芥为材料 ,分别用CTAB法、SDS法、尿素法、NaOH法四种方法对芸芥基因组DNA进行了提取 ;并用紫外光分光光度计法、琼脂糖电泳法和RAPD分析法对所提取的DNA进行检测 ,将它们在DNA的产量、质量和耗时、耗费等方面的优缺点进行比较 ,以便在实际工作中根据不同的试验条件选取最合适的提取方法。通过四种方法的比较 ,研究认为尿素法是芸芥基因组DNA的最佳提取方法。     

小麦网腥黑粉菌冬孢子总DNA提取方法比较

目的：研究提取不同时期小麦网腥黑粉菌冬孢子总DNA的最佳方法。方法：应用改良过的四种方法（CTAB法、SDS-CTAB法、SDS法和尿素法）对小麦网腥黑粉菌冬孢子总DNA进行提取。结果：提取当年小麦网腥黑粉菌冬孢子DNA,纯度（OD260/OD280）：CTAB法〉SDS-CTAB法〉SDS法〉尿素法=1.876〉1.7815〉1.7789〉1.6095;产率（μg/g）：SDS-CTAB法〉SDS法〉尿素法〉CTAB法=796.25〉664〉306〉291.5。提取15年的小麦网腥黑粉菌冬孢子DNA,纯度（OD260/OD280）：CTAB法〉SDS-CTAB法〉SDS法〉尿素法=1.91795〉1.8876〉1.65985〉1.55925;产率（μg/g）：尿素法〉CTAB法〉SDS法〉SDS-CTAB法=1529.25〉799〉687.25〉372.5。结论：SDS-CTAB法是提取当年小麦网腥黑粉菌冬孢子DNA的最佳方法。CTAB法是提取15年的小麦网腥黑粉菌冬孢子DNA的最佳方法。     

A numerical study of oxygen diffusion in a spherical cell with the Michaelis-Menten oxygen uptake kinetics

A numerical method is presented for the solution of reaction diffusion systems in biology. The method is used to re-examine the oxygen diffusion in a spherical cell with the Michaelis-Menten oxygen uptake kinetics.     

A comparison of four methods for measuring roots of field crops in three contrasting soils

Rooting measurements have been made at different growth stages for sugar beets (1987) and for cereals (1988) on three different sites using four different root measurement techniques: (a) the core method where roots were extracted and root length is directly measured, (b) the core-break method where the visible roots were counted on the faces of a broken soil column, (c) the trench profile wall method where the number of visible roots were counted and the root length density was estimated on a profile wall, and (d) the monolith method where the roots were extracted from monoliths dug out from a profile wall. The calibration curves between the field methods and the extraction methods were not linear, and regression coefficients differed significantly between different sites, crops and between fields with different agronomic management, e.g. irrigation and liquid manure application. Differences between growth stages were comparably low compared with those found between locations. Root length densities obtained with the trench profile method were on average 10-fold lower in the sand brown earth, 6-fold lower in the vertisol and 4 times lower in the cambisol compared to data obtained with the core method. It is therefore concluded that the core-break method and the trench profile wall method deliver no reliable data for comparing rooting intensities between different soils and between different crops if they are not calibrated with an extraction method for each site and crop.     

三种提取苹果绵蚜基因组DNA方法的比较

参考国内外昆虫基因组DNA提取的常用方法,选取KAc法、氯仿-异戊醇法和盐析法3种方法对苹果绵蚜(Eriosoma lanigerum)基因组DNA进行提取.通过基因组DNA直接琼脂糖凝胶电泳、SSR引物扩增产物的琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,对3种方法所提基因组DNA的质量进行了比较,并综合分析了提取所需时间及所用试剂的毒性大小等.结果表明,盐析法操作程序较简便快捷,节时省工,可得较好质量的DNA样本,且对试验操作人员无伤害,是一种值得推广应用的基因组DNA提取方法.     

康氏木霉基因组DNA提取方法的比较研究

采用3种常规DNA提取方法提取瑞氏木霉基因组DNA。结果表明:冷冻研磨CTAB法更适合此真菌DNA的提取,试剂盒提取的总DNA纯度和浓度也较高,但是价格昂贵,饱和酚抽提法提取的DNA浓度不高,且易有降解现象,不适合分子生物学操作的要求。     

微生物气溶胶检测技术的研究进展

生物气溶胶中微生物的种类复杂多样,其采集和鉴定是全面掌握微生物气溶胶生物特性的关键,对防控气溶胶病原体传播十分重要.本文简要综述了微生物气溶胶的生物特性和潜在危害性,介绍了微生物气溶胶的一般采集方法,采集器采集生物气溶胶的基本原理、特点和优缺点.将有助于研究人员根据实验目的在采集低浓度生物气溶胶时选择合适的采样器.本文...     

Determination of chemical biodegradation by direct and indirect methods

Summary Degradation of 10 organic chemicals by pre-acclimated microorganisms in BOD dilution water was determined directly by UV spectrophotometry and indirectly by a modified BOD method. Residual chemical concentrations were periodically measured and pseudo-first-order biodegradation rate constants (k ₁) were calculated. Thek ₁ spectrophotometry values ranged from 0.006/h to 0.077/h andk ₁-BOD values from 0.002/h to 0.043/h for 1-methylnaphthalene and indole, respectively. The ratios ofk spectrophotometry to k₁-BOD were between 1.5 for salicylic acid and 3.0 for 1-methylnaphthalene with a mean of 2.7. A significant (=0.001) linear correlation (r ²=0.854,F=46.630) existed between the two sets of rate constants. Results from this study suggest that the modified BOD method may be used to estimate chemical biodegradation rates in synthetic media.