双歧杆菌脂磷壁酸与5-氟尿嘧啶体内联用对肿瘤细胞凋亡的影响

目的研究双歧杆菌脂磷壁酸与5-氟尿嘧啶联用诱导H22荷瘤小鼠肿瘤细胞凋亡的作用机制。方法双歧杆菌脂磷壁酸联合5-FU处理H22荷瘤Balb/c小鼠,计算抑瘤率,观察小鼠生存期;采用Real time-PCR和Western blot方法分别检测荷瘤小鼠肿瘤组织Bcl-2、Bax和Caspase-3 mRNA及蛋白的表达变化。结果双歧杆菌脂磷壁酸联合5-FU应用,与单独5-FU处理组比较,不仅抑瘤率明显提高（P〈0.01）,且荷瘤小鼠存活时间明显延长（P〈0.01）,肿瘤组织Bcl-2表达下降,Bax和Caspase-3表达升高（P〈0.05）。结论双歧杆菌脂磷壁酸联合5-FU可通过上调Bax和Caspase-3,下调Bcl-2,促进肿瘤细胞凋亡,从而发挥协同抗肿瘤作用。     

桦木酸体内抗肿瘤作用的初步研究

目的研究桦木酸对H22、S180小鼠肿瘤细胞药效学作用及对肿瘤细胞膜Ca^2＋、Mg^2＋-ATP酶活性的影响。方法通过限量实验确定桦木酸的给药剂量。动物随机分为6组,分别为桦木酸500、250、125mg／kg剂量组,阳性对照组给予环磷酰胺（20mg／kg）,模型对照组分别给予相同体积的生理盐水和配药溶剂,灌胃给药。观察生命延长时间与瘤重抑制率;紫外分光光度法测定Ca^2＋、Mg^2＋-ATP酶活性,结果桦木酸使S180荷瘤小鼠肿瘤细胞膜Ca^2＋、Mg^2＋-ATP酶活性提高（P〈0．05）。结论桦木酸抗肿瘤作用机制与其上调肿瘤细胞膜p53蛋白的表达,改变肿瘤细胞膜Ca^2＋、Mg^2＋-ATP酶活性有关。     

香菇C91-3菌丝发酵蛋白对H22肿瘤细胞体内外抗肿瘤机制的初探

目的探讨香菇C91-3菌丝发酵蛋白(LFP91-3)对H22肿瘤细胞抑瘤作用及相关机制。方法应用不同剂量LFP91-3(50、100和150μg)对H22荷瘤小鼠腹水瘤模型和腋下实体瘤进行治疗,观察其生存期和体内抑瘤作用;并用MTT法(LFP91-3浓度5、10、15μg/mL)和流式细胞仪对经LFP作用的H22肿瘤细胞进行观察和检测。结果香菇C91-3菌丝发酵提取蛋白(LFP91-3)能延长H22荷瘤小鼠的生存期,对体外培养的H22有直接杀伤作用,抑瘤率出现对浓度和时间的依赖性。LFP91-3能将H22肿瘤细胞株细胞周期阻滞到S期并诱导出细胞凋亡。结论 LFP91-3在体内、外对H22肿瘤细胞有较好的抑瘤作用,主要是诱导其调亡。     

双歧杆菌及其发酵液的抗肿瘤机制的研究

目的 通过比较双歧杆菌及其发酵液的抗肿瘤作用,对其抑瘤作用和相关机制进行初步探讨。方法 取BALB／c小鼠,分别予H22细胞和S180细胞腹腔荷瘤,荷瘤后给予不同的治疗。分别观察2种肿瘤细胞荷瘤小鼠的生存期。右腋下荷瘤后,进行病理切片观察。MTT法计算给予不同方法后的抑瘤率。并计算淋巴细胞转化率。制备电镜标本。观察其超微结构。结果 双歧杆菌死菌液、活菌液能够延长荷瘤小鼠的生存期,而双歧杆菌发酵液不能延长其生存期,病理切片可见作用后的肿瘤组织内部和间质有大量炎性细胞浸润。双歧杆菌死菌液、活菌液对肿瘤细胞株有抑杀作用。电镜观察死菌液作用后的H22细胞可见典型的凋亡表现。结论 双歧杆菌死菌液、活菌液在体内外均有较好的抑瘤作用,其发酵液并未显示出抑瘤作用。说明双歧杆菌的抗肿瘤作用主要来源于菌体的作用。     

樟芝液体发酵粉对肝癌H22的体内生长抑制作用(英文)

本文采用肝癌H22荷瘤小鼠的肿瘤模型,对樟芝液体发酵粉的体内抗肿瘤活性进行评价。结果表明,樟芝液体发酵粉(500或1000 mg/kg b.w.)能够体内显著抑制H22肿瘤的生长,抑制率分别为42.0%和46.4%。同时,与模型组相比,樟芝发酵粉能够延长荷瘤小鼠的生存周期,延长率为29.4%。组织病理学研究结果表明,模型组小鼠的肿瘤细胞生长旺盛,而樟芝发酵粉处理组的小鼠肿瘤细胞具有明显的皱缩和坏死症状。樟芝发酵产物具有较好的体内抗肿瘤活性。     

桦木酮酸对肿瘤细胞SGC-7901、HepG-2及S180荷瘤小鼠肿瘤细胞的影响

为研究桦木酮酸体外对SGC-7901、HepG-2及体内对S180荷瘤小鼠的影响,采用MTT与肿瘤细胞集落形成能力实验观察桦木酮酸对HepG-2和SGC-7901作用。通过抑瘤率观察其对S180荷瘤小鼠的影响;HE染色观察其对S180肿瘤细胞形态学的影响。结果显示：桦木酮酸可抑HepG-2和SGC-7901细胞的生长,MTT与肿瘤集落形成能力实验测得其IC50分别为68．14和110．77μmol／L。连续给药8d后,150和75ms／kg／d剂量的桦木酮酸对S180的抑制率分别为68．3％和41．5％（P〈0．05）;HE染色发现肿瘤细胞表现较为明显的胀亡现象：细胞淡染、细胞体积增大,细胞核结构相对完整。提示桦木酮酸体内、外对肿瘤细胞均有一定的抑制作用,其作用可能与其引起肿瘤细胞胀亡有关。     

中药提取物FAC的抗肿瘤作用及其机制的初步研究

目的:探讨中药提取物FAC对H22肝癌实体瘤的作用及其机制.方法:制备人肝癌H22荷瘤小鼠模型,观察中药提取物FAC对H22肝癌实体瘤的抑制作用及其对荷瘤小鼠免疫器官、存活期、巨噬细胞吞噬功能、淋巴细胞转化功能的影响.结果:小鼠灌服中药提取物FAC10 d后,中、大剂量组抑瘤作用显著,荷瘤小鼠存活期明显延长,反映免疫功能的胸腺指数和脾指数显著增加,巨噬细胞吞噬功能和淋巴细胞转化功能明显增强.结论:中药提取物FAC可抑制人肝癌H22实体瘤的生长,并能提高荷瘤小鼠的免疫功能.提示中药提取物FAC可能通过增强机体免疫功能而发挥抗肿瘤作用.     

灵芝多糖抗肿瘤作用的初步探讨

目的 :初步探讨灵芝多糖对小鼠肿瘤的抑制作用。方法 :观察灵芝多糖对 S180 、U14腹水型荷瘤小鼠生存期的影响 ,了解灵芝多糖对 S180 、U14、H2 2 肿瘤细胞有无直接杀伤作用 ,以寻找治疗肿瘤的新方法。结果 :灵芝多糖能够显著延长荷瘤小鼠的生存期 (P<0 .0 5) ,治疗组小鼠的生存期比对照组小鼠的生存期明显延长 ,但是灵芝多糖对肿瘤细胞无直接杀伤作用 (P<0 .0 5)。结论 :灵芝多糖抗肿瘤作用是通过机体的免疫系统介导的。     

香菇C91-3菌LP1蛋白在小鼠体内的 抗肿瘤免疫作用

目的通过观察注射C91-3菌LP1蛋白对H22荷瘤小鼠的影响,探讨LP1蛋白在小鼠体内的抗肿瘤免疫作用。方法使用鼠肝癌H22细胞接种于BALB/C小鼠右腋下,建立小鼠H22实体瘤模型。取上述建立成功的H22实体瘤模型小鼠64只,体重20~25g;分为A、B两组,每组32只。A组再分为LP1实验Ⅰ组(300μg/只)、LP1实验Ⅱ组(100μg/只)、PBS对照组和顺铂对照组(4 mg/kg),每组8只,各组隔日给药1次,共给药5次。A组用于检测LP1蛋白作用后在小鼠体内对H22肿瘤的抑瘤作用、血清中IL-2含量以及脾中NK细胞活性等生理指标。B组按同样的方法分组,隔日给药1次,直至荷瘤小鼠死亡,记录各组小鼠的生存期,计算生命延长率。结果 LP1蛋白可以延长H22荷瘤小鼠的生存期,LP1实验组生存期达16.6d,较PBS对照组13.2d有明显提高。LP1蛋白在体内对H22实体瘤具有一定的抑制作用,对H22实体瘤进行病理切片、HE染色观察后发现,LP1实验组中H22肿瘤组织较PBS对照组肿瘤组织内出现炎性细胞浸润,局部可见坏死现象。使用ELISA法和LDH法分别检测H22荷瘤小鼠血清中IL-2含量以及NK细胞活性,发现LP1实验组IL-2水平和NK细胞活性较PBS对照组和顺铂对照组显著提高。结论 LP1蛋白可延长H22荷瘤小鼠的生存期限,提高小鼠的生存质量,具有一定的肿瘤抑制作用。其抑制作用主要是由增强H22荷瘤小鼠自身免疫力,提高NK细胞活性,发挥机体自身肿瘤免疫功能造成的。     

膜型Tim-3分子促进荷瘤小鼠抗肿瘤免疫应答的研究

目的 研究膜型Tim-3分子对H22肝癌细胞生长的抑制效应,探讨膜型Tim-3分子对荷瘤小鼠免疫系统的影响.方法 以H22肝癌细胞接种于BALB/c小鼠大腿肌肉建立小鼠实体瘤模型,采用原位注射裸DNA的方法在小鼠体内表达膜型Tim-3进行基因治疗,观察Tim-3对肿瘤生长的抑制作用;采用RTPCR技术在肿瘤生长不同时期检测Tim-3对4-1BB、IFN-γ、galectin-9等免疫相关基因表达的影响;流式细胞术检测膜型Tim-3对脾细胞增殖活性及细胞毒活性的影响;观察Tim-3 ＋4-1 BBL协同抗肿瘤作用.结果 体内转染表达Tim-3对肿瘤的生长有明显的抑制作用.流式细胞术结果显示,在小鼠荷瘤早期,Tim-3可提高脾细胞在特异性抗原刺激下的增殖反应和对H22肿瘤细胞的细胞毒作用;Tim-3与4-1BBL协同作用时抗肿瘤作用更加明显.结论 膜型Tim-3可在免疫启动阶段作为正向免疫调节因子增强抗肿瘤免疫应答,并可与4-1 BBL协同产生更强的抑瘤效应.     

肿瘤抑素抗肿瘤相关肽对肝癌细胞增殖和凋亡的影响

肿瘤抑素抗肿瘤相关肽-19肽是由肿瘤抑素185~203位氨基酸组成, 具有直接抑制黑色素瘤细胞生长作用, 但其对肝癌细胞增殖和凋亡是否有影响, 对肝癌是否具有治疗作用还需进一步研究。本研究中采用基因工程技术将合成19肽基因与载体pTYB2重组后进行蛋白表达、纯化获得19肽。通过MTT法、生长曲线观察19肽对人肝癌细胞生长抑制作用; TUNEL标记法、流式细胞仪细胞周期检测法、透射电镜观察19肽对肝癌细胞凋亡的影响; 小鼠H22腹水型转移型肝癌实体瘤抑瘤实验证明其体内的抑瘤作用。MTT实验和生长曲线实验表明随着19肽浓度的增加肝癌细胞的存活率下降。在相同19肽浓度下, 随着作用时间延长存活细胞逐渐减少。电镜观察治疗组细胞出现明显凋亡, 流式细胞仪可检测到前G1峰, TUNEL标记法也证实治疗组可见明显的凋亡细胞, 体内19肽作用的小鼠H22腹水型转移型肝癌的抑瘤率达48.46%。可见, 肿瘤抑素19肽可抑制肝癌细胞生长, 促进肝癌细胞凋亡, 对肝癌具有一定的治疗作用。     

白花蛇舌草豆甾醇对肝癌细胞的体内外抑制作用及对其增殖周期、凋亡的影响

目的:研究白花蛇舌草豆甾醇(stigmasterol from Hedyotis diffusa willd.,SHD)对人肝癌细胞SMMC-7721、BEL-7402的体外抑制作用,对肝癌H22的体内抑制作用及对其增殖周期、凋亡的影响。方法:MTT法评价SHD对人肝癌细胞SMMC-7721、BEL-7402的抑制率变化规律。昆明雄性小鼠60只,随机取10只为正常对照组,余接种H22瘤株,随机分为模型对照组、5-FU阳性对照组(30mg/kg)和高中低剂量SHD给药组(剂量分别为15、30、60mg/kg),腹腔给药10 d后,比较各组瘤重抑制率、H22细胞周期分布、凋亡率。结果:SHD对SMMC-7721、BEL-7402细胞具有体外抑制作用;SHD显著抑制H22肿瘤,增加G0-G1期细胞比例,降低G2/M期细胞比例,促进肿瘤细胞凋亡。结论:SHD在体外、体内均具有抑制肝癌细胞的作用,此作用与阻滞肿瘤细胞增殖周期,促进肿瘤细胞凋亡有关。     

中药夏枯草对人甲状腺癌细胞系SW579增殖周期及凋亡的影响

目的：探讨夏枯草对人甲状腺癌细胞系SW579细胞生长的抑制作用及其对细胞增殖周期和凋亡的影响。方法：采用甲基噻唑（MTT）比色法和生长曲线测定不同浓度夏枯草在不同作用时间内对在体外培养SW579细胞增殖的影响,同时应用流式细胞术检测细胞增殖周期及凋亡率的变化。结果：夏枯草可在G0／G1期阻滞人甲状腺癌细胞系SW579的增殖,使s期细胞比率降低;在一定范围内,夏枯草的浓度越高、作用时间越长,对肿瘤细胞生长的抑制作用越强,凋亡率也越高。结论：夏枯草能抑制人甲状腺癌细胞系SW579细胞生长,并诱导细胞凋亡而阻止细胞周期。     

BIX-01294对肝癌细胞周期、凋亡及移植瘤的影响

目的:探究组蛋白甲基转移酶G9a抑制剂(BIX-01294)对肝癌细胞周期、凋亡及移植瘤的影响。方法:将SMMC-7721、BEL-7402、HL-7702原始细胞株传代培养后,分为空白对照组和不同浓度(1μM、5μM、10μM、20μM)BIX-01294处理组。应用Western-blot法检测G9a及肝癌细胞内凋亡蛋白CC3、C-PARP、Bax、Bcl-2表达水平;应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测不同浓度BIX-01294处理SMMC-7721、BEL-7402细胞24、48、72、96 h后的细胞增殖情况;应用流式细胞术检测不同浓度的BIX-01294处理肝癌细胞96h后细胞周期分布情况;移植瘤试验21 d后测量裸鼠体内肿瘤体积及重量,并检测瘤体内H3K9me2的蛋白水平。结果:G9a在肝癌细胞SMMC-7721、BEL-7402中表达水平高于HL-7702细胞(P<0.05)。不同浓度的BIX-01294对SMMC-7721细胞和BEL-7402细胞增殖具有抑制作用,且具有时间依赖性和剂量依赖性(均P<0.05)。不同浓度BIX-01294处理细胞96h后,SMMC-7721细胞和BEL-7402细胞G0/G1期细胞比例增加,S和G₂/M期的细胞比例降低(P<0.05)。5μM BIX-01294处理细胞96h后能明显增加CC3、Bax、C-PARP表达水平,并降低Bcl-2的表达水平(P<0.05),与空白对照组相比,BIX-01294处理组裸鼠肿瘤体积减小,重量较低,且肿瘤组织内H3K9me2的表达水平下降(P<0.05)。结论:BIX-01294导致SMMC-7721、BEL-7402细胞发生周期阻滞和凋亡,且对肿瘤的生长具有明显的抑制作用,其可能是通过抑制G9a的表达从而降低H3K9me2的表达来抑制肿瘤的生长。     

Effect of nitrogen-containing derivatives of the plant triterpenes betulin and glycyrrhetic acid on the growth of MT-4, MOLT-4, CEM,and Hep G2 tumor cells

Derivatives of the available plant triterpenes glycyrrhetic acid and betulin (betulin succinates and amides of betulonic and 18β-glycyrrhetic acids containing fragments of long-chain amino acids and a peptide) were synthesized. The inhibitory action of these compounds on the growth of MT-4, MOLT-4, CEM, and Hep G2 tumor cells and their effect on the apoptosis of these cells were studied. It was shown that betulonic acid amides are more effective inhibitors of the tumor cell growth than the corresponding amides of glycyrrhetic acid. It was also found that betulonic acid amides containing fragments of caprylic, pelargonic, and undecanoic acids are more effective inhibitors of tumor cell growth than betulinic acid. The 17-dipeptide derivative of betulonic acid N-{N-[3-oxo-20(29)-lupen-28-oyl]-9-aminononanoyl}-3-amino-3-phenylpropionic acid exhibited the maximum inhibitory activity toward the tumor cells studied. Data on the induction of apoptosis in tumor cells by betulin derivatives at a concentration of 10 μg/ml were obtained by flow cytometry. The amides of betulonic acid proved to be the most effective inducers of apoptosis.     

桦木酸对人胃癌MGC-803细胞增殖的影响

目的: 探究不同浓度桦木酸对人胃癌MGC-803细胞增殖的影响。方法: 将人胃癌 MGC-803 细胞分成 4 组,每组设置 3 个复孔,对照组细胞为加入浓度为0 μg /ml的桦木酸实验组细胞分别加入终浓度为10、20、30 μg /ml 的桦木酸,各组细胞在含5%的 CO₂ 培养箱中孵育 48 h 后,使用吉姆萨染色法和台盼蓝拒染法检测桦木酸对细胞克隆形成率和生长抑制率的影响;EdU法和流式细胞术分别检测细胞增殖和细胞周期变化;qRT-PCR和Western blot检测细胞周期调控因子CCNB1、CCND1的表达。结果: 与对照组相比,人胃癌MGC-803的克隆形成率显著降低(P＜0.01),生长抑制率明显升高,细胞增殖能力显著下降(P＜0.01);各实验组细胞随着桦木酸浓度的增加G1 期细胞所占比例逐渐降低, 而S 期细胞数量显著增多(P＜0.01);细胞周期调控因子CCNB1、CCND1 的mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P＜0.01),30 μg /ml 的桦木酸处理组的表现最佳。结论: 在终浓度为 10～30 μg /ml 的范围内,桦木酸能够降低人胃癌MGC-803细胞增殖,抑制细胞生长,下调CCNB1和CCND1的表达将人胃癌 MGC-803细胞阻滞于G0/G1 期。     

Effect of nitrogen-containing derivatives of the plant triterpenes betulin and glycyrrhetic acid on the growth of MT-4, MOLT-4, CEM, and Hep G2 tumor cells

Derivatives of the available plant triterpenes glycyrrhetic acid and betulin (betulin succinates and amides of betulonic and 18beta-glycyrrhetic acids containing fragments of long-chain amino acids and a peptide) were synthesized. The inhibitory action of these compounds on the growth of MT-4, MOLT-4, CEM. and Hep G2 tumor cells and their effect on the apoptosis of these cells were studied. It was shown that betulonic acid amides are more effective inhibitors of the tumor cell growth than the corresponding amides of glycyrrhetic acid. It was also found that betulonic acid amides containing fragments of caprylic, pelargonic, and undecanoic acids are more effective inhibitors of tumor cell growth than betulinic acid. The 17-dipeptide derivative of betulonic acid N-{N-[3-oxo-20(29)-lupen-28-oyl]-9-aminononanoyl}-3-amino-3-phenylpropionic acid exhibited the maximum inhibitory activity toward the tumor cells studied. Data on the induction of apoptosis in tumor cells by betulin derivatives at a concentration of 10 microg/ml were obtained by flow cytometry. The amides of betulonic acid proved to be the most effective inducers of apoptosis.     

酯苷胶囊对小鼠移植瘤的抑制作用

目的：探讨酯苷胶囊对小鼠移植性肿瘤的抑制作用。方法：采用小鼠移植性肿瘤模型,以5-FU为阳性对照组,观测2、4、8mg·kg^-1酯苷胶囊对小鼠H22、S180肉瘤和HCA肝癌模型动物的抗肿瘤作用。结果：酯苷胶囊对H22、S180和HCA移植瘤的抑制率分别为36．8％～65．3％,19．0％～41．4％,46．8％～52．3％。结论：酯苷胶囊具有较强的抗肿瘤作用,显著延长荷瘤小鼠的生命。