“遗传学和进化”实验

实验4 单基因杂种杂交 (一)实验器材 1 培养管的真实遗传野生型雄果蝇;1培养管的残翅处女雌;2培养管的培养基(每管贴有一空白标签);孵化箱(调至25℃);其它器材见实验3。注释: 下列配料可为100个培养管提供足够的培养基:120克玉米粉;20克琼脂;20克黄糖;80克红糖;20克酵母;3克尼巴精(nipagin,一种霉菌抑制剂),1升凉水。配制时用约20毫升凉水,使玉米粉呈糊状。把琼脂放入剩余的凉水中加文火。逐渐加入糊状玉米、黄糖和红糖,充分搅拌混合液。沸     

分离和鉴别脑膜炎球菌的培养基

一般认为脑膜炎球菌必须在含有天然动物蛋白(血液、血清、腹水及鸡蛋)的培养基上才能生长。而我们用黄豆代替动物蛋白用于脑膜炎球菌培养和鉴别,结果满意。培养基制备方法分离用培养基(黄豆—玉米淀粉抗菌素培养基):(1)基础培养基(g):胰胨6、胨6、牛肉膏3、氯化钠3、葡萄糖1、琼脂25、蒸馏水800ml,加热溶化。(2)玉米淀粉液:玉米淀粉3g(或玉米粉5g),用10ml蒸馏水拌成糊状,再用90ml煮沸的蒸馏水边倒边搅拌,微     

实验室薄口螨的大量培养及休眠体的诱导

用玉米粉培养基、BY(牛肉膏+酵母膏)软琼脂培养基、BY培养液3种培养基对实验室薄口螨(Histiostoma laboratorium)进行了培养。其最适培养基是玉米粉培养基;该螨在BY软琼脂培养基上也能生长,但生长速度比较缓慢,经过BY软琼脂培养基的培养,能够收集到大量干净的个体,为DNA提取和分子生物学研究提供了方便;在BY培养液中,实验室薄口螨不能进行继代生长,但能够产生大量的卵,可收集卵做更进一步的深入研究。休眠体是该螨生活史中的重要阶段,是借助携播者进行传播的特殊形式。对孳生于培养有果蝇的玻璃指管中的实验室薄口螨产生的休眠体及其在果蝇体表的吸附状况进行了观察,利用较高温度(30～35℃)培养基逐步干燥、较低温度(10～15℃)、BY液体培养3种方法,可以诱导该螨休眠体集中大量地形成,方便收集休眠体,是对其进行生理生化、基因表达、疾病传播机理等方面研究的先决条件。     

中麻黄的组织培养

1植物名称中麻黄（Ephedraintermedia）。2材料类别幼茎。3培养条件愈伤组织诱导及其继代培养基：(1)MS＋KT0．05mg·L－1＋2．4D1．1mg·L－1（单位下同）;（2）芽分化培养基：MS＋BA3＋IAA0．2;（3）生根培养基：MS＋BA0．06＋2,4-D1.1。以上培养基均加30g·L-1蔗糖,9g·L-1琼脂,pH值5.8左右,高压灭菌。培养温度(25±）℃,光照12h·d－1,光照度2000lx.4生长与分化情况4.1愈伤组织诱导及继代培养无菌操作下,切取中麻黄幼苗节间幼茎5mm大小,置培养基（1）上。15d后,淡黄绿色愈伤组织开始生长,愈伤组织疏松易碎。再过1…     

绣球花的组织培养(简报)

1、植物名称绣球花（Hydrageamaerophylla）,又名八仙花,虎耳草科多年生草本植物。2、组培材料带侧芽茎段。3、培养条件（1）侧芽诱导及增殖培养基：MS＋6－BA2．0～3．0mg／L＋NAA01～0．5mg／L,蔗糖30g／L,琼脂7g／L,pH6．0;（2）诱导生根培养基：1／2MS＋NAA0.5mg／L,蔗糖15g／L,琼脂用量和pH值同（1）。培养基用121℃高温高压灭菌30min,培养温度为24～27℃,光照强度为1500Lux,照光10h。4、生长与分化（1）侧芽诱导及增殖取生长健壮的绣球花茎段清洗后,经常规方法灭菌,用无菌水冲洗3～4次。切取2～2．5cm的带侧芽…     

哈茨木霉的培养及其对烟草疫霉生长的抑制研究*

哈茨木霉是一类重要的植病生防因子。哈茨木霉TH-1分别在PDA培养基、麦芽糖培养基、查氏培养基和琼脂培养基上培养均能产孢,其中PDA培养基为最适培养基。PDA培养基上,菌丝生长适宜温度27.5℃~35℃,最适温度32.5℃,产孢最适温度27.5℃。菌丝生长适宜pH值为3~7,产孢适宜pH值为5~9,生长与产孢最适pH值为5。光照对菌丝生长影响不大但明显影响菌株的产孢数量,光照时间越长产孢量越大。对峙培养试验表明TH-1明显抑制疫霉菌的生长速率,其无菌滤液明显抑制烟草疫霉菌游动孢子的萌发,并抑制游动孢子芽管     

异株藤的离体快繁

1植物名称异株藤(Calamus dioicus)。 2材料类别胚。 3培养条件(1)胚芽生长培养基：MS+6-BA 2．0 mg·L一(单位下同)+4％蔗糖;(2)丛芽诱导培养基：MS+6-BA 4．0+IBA 1．0+NAA 1．0+4％蔗糖;(3)生根培养基1／2MS(大量元素减半)+IBA 0．5+NAA 0．5+3％蔗糖。培养基(1)和(2)加0．7％卡拉胶,培养基(3)加0．73％卡拉胶,pH 5．8±0．2。培养温度(28±2)℃,每天光照10 h,光照度为2 000 k。 4生长与分化情况 4.1 萌发果实大量成熟前一个半月采集近成熟果实,去除果肉得干净种子,用75％酒精浸泡30 s,0．1％升汞表面消毒加～30 min,无菌水冲洗4～5次,在超净台上用刀片将发芽孔打开后转接至培养基(1)。种子在培养基(1)上30 d,与田间播种相同,胚根先长出发芽孔,但受6-BA的作用,胚根长至0．5～1．0 cm即不再进一步生长。接种∞d,胚芽长出发芽孔,∞d长至1．5～2．0 cm高,即可切下胚芽转入丛芽诱导培养基(2)。 4.2 丛芽诱导在培养基(2)中,胚芽高生长明显减缓,基部开始横向膨胀生长,约40d分化出丛芽,丛芽诱导率为30％～35％。     

毛果杨的组织培养与快速繁殖

1植物名称 毛果杨（Populus trichocarpa Torr．＆Gray）,又称测序杨。 2材料类别 茎段。 3培养条件（1）基本培养基：1／2WPM＋3％蔗糖;（2）增殖培养基：WPM＋TDZ0．5mg·L^-1（单位下同）＋IBA0．05＋3％蔗糖;（3）生根培养基：1／2WPM＋IBA0．15＋2％蔗糖。培养基加入5．5g·L^-1琼脂,培养温度为18-25℃,     

枯枝牡丹的组织培养

植物名称:枯枝牡丹(Paeonia suffruticosa)材料类别:(1)采用盐城卞仓的枯枝牡丹植株的腋芽,于消毒后剥取长约2—3mm的茎尖。(2)将枯枝牡丹种子无菌萌发后,切取上胚轴,长约3mm。培养条件:以MS为基本培养基。(1)腋芽茎尖的诱导培养基.附加BA2mg/L(单位下同),NAA0.2,LH500,蔗糖50g,琼脂粉5g;(2)胚轴的诱导培养基:附加BA2,NAA0.2,LH500,蔗糖80g,琼脂粉5g;(3)生根培养基为1/2MS,附加IAA1,IBA1,蔗糖20g,琼脂粉5g。     

哈茨木霉的培养及其对烟草疫霉生长的抑制研究

哈茨木霉是一类重要的植病生防因子。哈茨木霉TH-1分别在PDA培养基、麦芽糖培养基、查氏培养基和琼脂培养基上培养均能产孢,其中PDA培养基为最适培养基。PDA培养基上,菌丝生长适宜温度27．5℃～35℃,最适温度32．5℃,产孢最适温度27．5℃。菌丝生长适宜pH值为3～7,产孢适宜pH值为5-9,生长与产孢最适pH值为5。光照对菌丝生长影响不大但明显影响菌株的产孢数量,光照时间越长产孢量越大。对峙培养试验表明TH-1明显抑制疫霉菌的生长速率,其无菌滤液明显抑制烟草疫霉菌游动孢子的萌发,并抑制游动孢子芽管的伸长,TH-1对游动孢子萌发的相对抑制率为12．7％,对芽管生长长度的相对抑制率为63．1％。水解酶平板活性测定显示,TH-1产生β-1,3葡聚糖酶与纤维素酶,从而使烟草疫霉菌细胞壁的消解,产生非挥发性抗生素抑制烟草疫霉菌孢子萌发,但对菌丝生长影响不大。     

产漆酶灰色葡萄孢霉培养条件的研究

通过对培养灰色葡萄孢霉（Botrytis cinerea）不同培养基产漆酶酶活力大小的比较,筛选出了产漆酶灰色葡萄孢霉的最佳培养方法。结果表明：灰色葡萄孢霉在蛋白胨5g/L,酵母提取物20 g/L,蔗糖20 g/L,MgSO4 1.5 g/L,CuSO4 0.006 g/L的培养基中生长最好。最佳的培养条件为：pH值4.9,温度25℃,转速100 r/min。     

地生弯颈霉的培养与生长条件

从长白山北坡森林土壤中分离纯化得到1株地生弯颈霉(Tolypocladium geodes),对其培养及生长条件(如培养基、光照、温度、碳源、氮源和pH等)进行了试验。结果表明,地生弯颈霉在麦芽浸膏琼脂培养基(MEA)上菌落生长直径最大,马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)上产孢量最高;5~30℃温度范围内均能生长,25℃时生长和产孢量最佳;最适碳源和氮源分别为葡萄糖和柠檬酸铵;光暗交替条件下,最利于其生长和产生孢子;pH4~9范围内均能生长和产孢,pH=8时菌落直径最大,pH=6时产孢量最高。     

制备酵母菌实验材料的简易方法

笔者在实验中发现了以下制备酵母菌实验材料的简易方法。1　实验器材1 .1　药品 :玉米粉、琼脂、蔗糖和酵母粉。1 .2　器材 :小三角烧瓶 (带棉塞 )、烧杯、漏斗和电炉。1 .3　仪器 :培养箱、高压灭菌锅。2　操作步骤1 )先将三角烧瓶 (带棉塞 )、漏斗用报纸包好 ,然后进行高压灭菌 (1 2 1℃维持 2 0～ 3 0min)。2 )配制玉米粉培养基 ,方法如下 :A .蔗糖 1 3g +琼脂 1 .5g+水 80mL ,倒入大烧杯中煮沸 ,使琼脂溶解。B .玉米粉 1 7g+水 80mL倒入另一烧杯中调匀。当A中的琼脂溶解后 ,将B倒入A中 ,煮沸后移去电炉。待稍冷却后往培养基中加入 1 …     

纯培养拟茎点霉属真菌的产孢条件

对8种拟茎点霉纯培养下的产孢条件进行了筛选和比较。结果表明,拟茎点霉产孢的最佳培养基为苜蓿煎汁+Czapek培养基,其次为燕麦片琼脂培养基和苜蓿杆+水琼脂培养基;最适温度范围为22~25℃;最佳光照时间为每天12h(日光灯40W,与培养物间的距离约为30cm);合适的pH值范围为5.6~6.8。     

濒危品种软籽石榴的组织培养和快速繁殖

1植物名称石榴(Punica granatum). 2材料类别新梢茎尖. 3培养条件(1)芽诱导培养基:MS 6-BA 1.5 mg·L-1(单位下同) IBA 0.2 NAA 0.1;(2)芽增殖培养基:MS 6-BA 2.0 IBA 0.5;(3)生根培养基:1/2MS NAA 0.1.培养基(1)、(2)加蔗糖30 g·L-1,培养基(3)加蔗糖15 g·L-1;(1)、(2)、(3)均加琼脂0.7 g·L-1:pH 5.8.培养温度为(28±1)℃,光照度为2 000～3 000 lx,光照时间12～14 h·d-1.     

毛萼口红花愈伤组织的诱导和植株再生

1植物名称毛萼口红花(Aeschynanthus lobbianus). 2材料类别叶片. 3培养条件诱导培养基:(1)MS 6-BA1.0 mg·L-1(单位下同) GA 0.01 NA A 0.05;(2)MS 6-BA 1 GA 0.01 NAA 0.1.增殖培养基:(3)MS 6-BA 1 NAA 0.1;(4)MS 6-BA 1.5 NAA0.2.生根培养基:(5)1/2MS NAA 0.2.以上培养基均加30 g·L-1的蔗糖,7 g·L-1的琼脂,pH 5.8,高压灭菌.培养温度23～26℃,光照10 h·d-1,光照度2 000 lx左右.     

墨兰的组织培养和快速繁殖

1植物名称墨兰品种企黑（Cymbidiumsinensecv．Qihei）和白墨（C。sinensecv．Baimo）。2材料类别墨兰种子于培养基中萌发后产生的原球茎。3培养条件（1）种子萌发培养基：1／2MS十适量琼脂;（2）芽分化培养基：1／2MS＋6－BA5．0mg·L－1（单位下同）＋NAA0．5十椰汁50ml·L－1;（3）转瓶培养基：1／2MS＋6－BA2．0＋NAA1.0＋5％活性炭。培养基中加3％蔗糖,0．8％琼脂,PH5．5。培养温度25±2℃,光照强度2W·m－2,每天光照10h。4生长与分化情况4．1种子萌发形成原球茎墨兰葫果以70％酒精消毒15min,在无菌条件下取出种子置…     

用家蝇幼虫神经节作染色体压片

家蝇（Muscadomestica）在我国广泛存在,它是一种主要卫生昆虫,能传染霍乱、伤寒及痢疾等疾病,但它也是一种很好的遗传学实验材料。本文推荐一种用于实验室饲养家蝇的方法,展示普通光学显微镜下所见的家蝇幼虫神经节细胞的染色体中期分裂期。达到取材方便,容易剥离标本,成功率高的效果。1家蝇的饲养（1）培养基成分玉米粉15g、红糖2g、蛋白陈5g、牛肉膏2g、酵母膏0．5g、苯甲酸15g、琼脂0．4g、自来水100ml。（2）培养方法用少许苯甲酸加无水乙醇溶解后,再加入培养基中,培养基煮熟smin后,分装干50Oml或1000ml已灭菌的广D瓶内,培…     

万带兰的组织培养与快速繁殖

TissueCultureandRapidPropagationofaHybridVandaLANQin-Ying,LIUDao-Hua,PUHua-Qiong(XishuangbannaTropicalBotanicalGarden,TheChineseAcademyofSci-ences,Mengla666303)1植物名称万带兰（VandaXroth-schildiana）。2材料类别茎尖。3培养条件愈伤组织、不定芽诱导及增殖培养基：（1）MS＋6-BA0．5~2mg·L-1（单位下同）＋NAA0．1－0．2;（2）MS＋6－BA0.5＋NAA0．05十10％捣烂香蕉。生根培养基：（3）MS＋6－BA0~0．1＋NAA0．5~1．0.上述培养基均加0．8％琼脂和3％蔗糖,pH5．8±0．1。培养温度28±2℃,每天…     

玫瑰海棠的离体快速繁殖

InvitroRapidPropagationofBegoniamanniiLIJin－Jin,KELi－Wan,LULi-Rong,LIAOJun－Jie（PhargenBiotechnologicalCompany,ShatouSpecialEconomicZone,Shantou515041）1植物名称玫瑰海棠（Begoniamannii）。2材料类别叶片及茎段。3培养条件（1）诱导丛生芽培养基：MS＋NAA02mg·L－1（单位下同）＋6－BA2.0＋蔗糖3％;（2）丛芽增殖培养基：MS＋GA0．05＋蔗糖2％;（3）诱导生根培养基：1／2MS＋IBA0．2＋蔗糖2％。上述培养基均加琼脂粉058％,pH为5．7。培养基用121℃、高温高压灭菌20min。培养温度为25℃,光照度…