长非编码RNA THOR在肿瘤中的作用

长非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）是一类长度超过200 nt并且缺乏蛋白质编码潜能的RNA分子。最初lncRNA被认为是由RNA聚合酶Ⅱ转录的副产物,且无生物学功能。随着转录组测序技术的发展,大规模的lncRNA被鉴定出来。越来越多的证据表明,lncRNA参与多种生物学过程,包括基因印记、基因组重排、染色质修饰、细胞周期调控、转录、剪接、mRNA降解和翻译。lncRNA异常表达与人类多种疾病相关,尤其是增生性疾病,包括胃癌、肝癌和直肠癌等。其中,睾丸相关的高度保守的致癌长非编码RNA（testis-associated highly-conserved oncogenic long non-coding RNA,THOR）是一种非常保守的非编码RNA,在睾丸中特异性表达,并广泛存在于人的多种肿瘤组织中,如肝癌、胃癌、鼻咽癌、肾细胞癌、骨肉瘤、视网膜母细胞瘤、黑色素瘤、非小细胞肺癌和舌鳞状细胞癌中,在其发生和发展过程中发挥重要作用。在鼻咽癌、肾细胞癌、骨肉瘤、黑色素瘤、非小细胞肺癌和舌鳞状细胞癌中,THOR主要通过与胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1（insulin-like growth factor 2 mRNA-binding protein 1,IGF2BP1）相互作用,促进肿瘤细胞的增殖。在肝癌中,THOR分别通过PTEN/AKT和β-联蛋白信号促进癌细胞的增殖和肝肿瘤干细胞的扩增。在胃癌和骨肉瘤中,THOR主要通过提高SOX9的表达增强癌细胞的干性。在视网膜母细胞瘤中,THOR主要通过提高c-myc的表达促进癌细胞增殖。在鼻咽癌中,THOR主要通过提高YAP的表达增强癌细胞的干性。     

长非编码RNA THOR在肿瘤中的作用

长非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）是一类长度超过200 nt并且缺乏蛋白质编码潜能的RNA分子。最初lncRNA被认为是由RNA聚合酶Ⅱ转录的副产物,且无生物学功能。随着转录组测序技术的发展,大规模的lncRNA被鉴定出来。越来越多的证据表明,lncRNA参与多种生物学过程,包括基因印记、基因组重排、染色质修饰、细胞周期调控、转录、剪接、mRNA降解和翻译。lncRNA异常表达与人类多种疾病相关,尤其是增生性疾病,包括胃癌、肝癌和直肠癌等。其中,睾丸相关的高度保守的致癌长非编码RNA（testis-associated highly-conserved oncogenic long non-coding RNA,THOR）是一种非常保守的非编码RNA,在睾丸中特异性表达,并广泛存在于人的多种肿瘤组织中,如肝癌、胃癌、鼻咽癌、肾细胞癌、骨肉瘤、视网膜母细胞瘤、黑色素瘤、非小细胞肺癌和舌鳞状细胞癌中,在其发生和发展过程中发挥重要作用。在鼻咽癌、肾细胞癌、骨肉瘤、黑色素瘤、非小细胞肺癌和舌鳞状细胞癌中,THOR主要通过与胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1（insulin-like growth factor 2 mRNA-binding protein 1,IGF2BP1）相互作用,促进肿瘤细胞的增殖。在肝癌中,THOR分别通过PTEN/AKT和β-联蛋白信号促进癌细胞的增殖和肝肿瘤干细胞的扩增。在胃癌和骨肉瘤中,THOR主要通过提高SOX9的表达增强癌细胞的干性。在视网膜母细胞瘤中,THOR主要通过提高c-myc的表达促进癌细胞增殖。在鼻咽癌中,THOR主要通过提高YAP的表达增强癌细胞的干性。     

长链非编码RNA在胃癌中的研究进展

长链非编码RNA(Long non-coding RNA,lncRNA)是一类长度大于200个核苷酸的转录本,其转录本没有或少有蛋白质编码功能,参与调控多种生物生理功能。lncRNA可在表观遗传学、转录及转录后等多层面调控基因表达,对个体生长发育及肿瘤发生、发展过程至关重要。近年来,有诸多的研究发现lncRNA参与胃癌的发生、发展及转移等多个过程,且与患者的预后相关。对lncRNA在胃癌增殖、凋亡、侵袭和转移中的调控作用进行了综述,以期为胃癌临床诊断与治疗提供新的思路。     

miR-940在调控胃癌细胞生长和迁移行为机制的研究

为探究micro RNA调控胃癌细胞生长和迁移等生物学行为的机制,本研究从基因表达综合数据库GEO下载7例胃癌micro RNA芯片数据,利用Qlucore Omics Explorer(QOE)3.2分析差异microRNA,筛选出miR-940做后续分析。本研究采用Real-time PCR方法检测miR-940在37例胃癌组织及胃癌细胞是否存在差异表达,并在胃癌细胞MKN-45中过表达miR-940,通过MTT、流式细胞术及划痕法检测胃癌细胞的细胞周期、细胞增殖及迁移能力。此外,我们利用双荧光素酶系统确定miR-940的靶基因,并用Western blotting法检测该靶基因在胃癌细胞中的表达水平。研究结果表明,miR-940在胃癌组织及胃癌细胞中的表达水平均显著上调,过表达miR-940可使胃癌细胞增殖能力加快,细胞周期缩短,增殖活性明显增高,迁移能力提升。ZNF191作为miR-940靶基因,在胃癌细胞中呈现低表达。根据以上研究结果可得出结论,miR-940在胃癌发生中高表达,可以促进胃癌细胞生长、提高胃癌细胞迁移能力,并且可能是通过调控ZNF191基因来发挥作用,这为理解胃癌的发生机制提供了理论依据。     

长非编码RNA SNHG18对人胃癌细胞BGC823增殖和凋亡的影响

目的:探究长非编码RNA SNHG18对胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用实时定量PCR(qRT-PCR)技术检测人胃癌组织及癌旁组织和胃癌细胞系中lncRNA SNHG18的表达;采用MTT和克隆形成试验观察转染SNHG18过表达质粒后胃癌细胞BGC823增殖活力的变化;通过流式细胞术检测lncRNA SNHG18对胃癌细胞BGC823凋亡的影响。结果:相较于癌旁组织和胃正常粘膜上皮细胞系GSE-1,胃癌组织及胃癌细胞系中SNHG18的表达水平显著降低(P0.05);胃癌细胞过表达SNHG18增殖活力以及克隆形成的能力均显著降低(P0.05),而细胞凋亡率明显升高(P0.05)。结论:胃癌组织中长非编码RNA SNHG18呈低表达,可促进胃癌细胞增殖并抑制其凋亡,可能在胃癌发生发展过程中发挥重要作用。     

迁移侵袭抑制蛋白抑制胃癌细胞增殖迁移及侵袭

目的检测迁移侵袭抑制蛋白(migration and invasion inhibi tory protein,MIIP)基因在胃癌中的表达情况及其在胃癌发生发展过程中起到的作用,为探究胃癌发生的分子机制和靶向治疗提供实验依据。方法 Western blot和免疫组织化学法检测MIIP在胃癌组织的表达。胃癌SGC7901细胞中转染MIIP过表达质粒及其空质粒,应用细胞功能学实验检测MIIP过表达对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果 MIIP在胃癌组织标本中的表达低于癌旁正常胃粘膜;细胞功能实验结果显示,MIIP过表达可抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结论过表达MIIP可以抑制胃癌SGC7901细胞增殖、迁移和侵袭的能力。     

长链非编码RNA CCAT2与癌症

长链非编码RNA (lncRNA)与癌症的发生发展密切相关。结肠癌相关转录因子(CCAT) 2是2013年鉴定的一种新的lncRNA,已发现其在结直肠癌、肝癌、乳腺癌以及胃癌等多种癌细胞中表达异常升高,通过Wnt、PI3K/AKT/m TOR和GSK3β/β-catenin等信号通路形成复杂的癌症调控网络,在癌症的增殖、侵袭/转移和细胞凋亡等过程中发挥着重要的作用,提示CCAT2有望成为癌症诊断与治疗的新的分子靶点。现综合近年来CCAT2在癌症中的研究进展作一综述。     

lncRNA在白血病中对细胞增殖和凋亡的调控作用

长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA)参与基因表达的调控,在白血病的发生和发展过程中可通过多种机制调控细胞增殖、凋亡等过程,发挥促癌或抑癌作用。本文对lncRNA ZEB1-AS1、lncRNA NALT、lncRNA H19、lncRNA PLIN2、lncRNA MEG3、lncRNA CASC15、lincRNA-p21等lncRNA分别在白血病中的生物学功能及其调控细胞增殖和凋亡的机制进行了简要概述,旨在为白血病的诊疗和预后提供新策略。     

基于TCGA和GEO数据库的胃癌lncRNA筛选与ceRNA网络构建

胃癌（gastric cancer,GC）是我国最常见的恶性肿瘤之一,严重危害人类健康。胃癌发病机制复杂,缺乏特异性预后生物标志物。长链非编码RNA（long non?coding RNA,lncRNA）可作为竞争性内源RNA（competing endogenous RNA,ceRNA）,影响microRNA（miRNA）与mRNA的结合,从而影响胃癌的发生、发展。基于TCGA和GEO数据库的转录组数据,筛选GC中差异表达的lncRNAs,并构建基于6条lncRNAs（HAGLROS、TMEM92?AS1、LINC01745、HOXC?AS3、SEMA3B?AS1、FEZF1?AS1）的lncRNA?miRNA?mRNA网络。网络核心基因的KEGG/GO富集和蛋白质互作分析结果显示,lncRNA可能通过miRNA海绵吸附作用,调控胃癌的发生、发展与转移。AC011352.1、AC087636.1、AC093627.1、GAS1RR与胃癌患者的预后相关性具有统计学意义（P<0.05）,并可能成为胃癌患者潜在的预后生物标志物。     

长链非编码RNA表征及其在结直肠癌发生发展中的作用和临床意义

长非编码RNA（long non-coding RNAs, lncRNAs）是一类转录本长度大于200个核苷酸,不具有蛋白质编码功能的非编码RNA（non-coding RNA, ncRNA）。人类基因组中,ncRNA基因占比超过90%,数量远大于蛋白质编码基因。作为生物大分子,lncRNA具有特定的初级和高级结构,在基因表达调控等生物学进程中发挥着特有的功能。lncRNA数量多,结构各异,因此鉴定和表征新的lncRNA,探索其结构和功能,是当前基因研究领域的热点之一。在临床疾病机制研究中,大量结果表明,lncRNA与临床疾病发生发展,特别是肿瘤的发生发展具有密切的相关性。伴随着后基因组学时代基因鉴定和功能探索方法的不断进步,探索lncRNA在疾病发生中的功能及表达变化,深入解锁lncRNA在疾病发生中涉及的分子机制,将为疾病早期预防、诊断和预后提供有效参考。基于以上的研究大背景,本文对lncRNA的定义、基因鉴定的策略和方法,高级结构检测及其对应的生物学功能,以及lncRNA的分类进行了阐述;另一方面,基于lncRNA与肿瘤发生发展的密切关系,本文以经典抑癌基因p53为切入点,对多种p53相关的lncRNA在结直肠癌（colorectal cancer, CRC）发生发展中的作用进行了归纳小结,阐述了lncRNA在结直肠癌中的表达变化、涉及的分子互作机制和信号通路,对其作为分子标志物在临床中的应用潜力进行了评估。我们乐观地认为,作为生物分子标志物,lncRNA将为包括癌症在内的疾病治疗提供全新、精准和个性化的分子靶点。     

LncRNA AC006449.2抑制卵巢癌细胞增殖

长链非编码RNAs(long non-coding RNAs, lncRNAs)是一类无蛋白质编码功能的RNAs。多项研究表明,lncRNAs在肿瘤的发生发展中发挥重要的作用。GEPIA数据库结合qRT-PCR结果提示,lncRNA AC006449.2在卵巢癌组织中的表达量显著低于正常组织,且其在卵巢癌细胞中的水平也低于正常卵巢上皮细胞。进一步分析发现,lncRNA AC006449.2的表达量与卵巢癌患者较差的预后负相关,与瘤体大小和远端转移密切相关,而与卵巢癌患者年龄、淋巴结转移及TNM分期无关。细胞功能研究发现,上调AC006449.2,卵巢癌细胞的增殖和平板克隆能力降低;而下调AC006449.2之后,该细胞的增殖和平板克隆能力显著增加。深入的机制研究发现,AC006449.2可上调细胞周期相关蛋白p21和p27的表达量,上调促凋亡蛋白Bax的表达,而下调抗凋亡蛋白Bcl2的表达量,最终抑制卵巢癌细胞的增殖。上述研究结果推测,lncRNA AC006449.2在卵巢癌细胞中可能发挥抑癌因子的作用。     

lncRNA选择性剪接调控的研究进展

长链非编码RNA (lncRNA)选择性剪接是指剪除未成熟lncRNA中的内含子,并将外显子连接起来生成成熟lncRNA的过程.在各类疾病发生和发展过程中,异常的选择性剪接起着重要作用. lncRNA选择性剪接直接参与膀胱癌、结直肠癌、肝癌、神经母细胞瘤等多种肿瘤的发病机制,且与胚胎发育、软骨毛发发育、多系统萎缩症等紧密相关.在此,我们对lncRNA选择性剪接的起因、调控机制以及对疾病影响的研究进展进行综述.此外,本文还介绍了两个与lncRNA选择性剪接相关的数据库(SpliceMap和LNCediting).     

长链非编码RNA在肺动脉高压中的作用

长链非编码RNA(long-chain non-coding RNA,lncRNA)是一类转录本长度 200 nt的RNA分子,可在表观遗传、染色质修饰、转录激活、转录抑制、转录后调节、核内运输等多种途径调控病理、生理过程。近年来,随着与心血管疾病相关的新型lncRNA不断被发现,使lncRNA成为当前心血管疾病研究的新热点。lncRNA与多种心血管疾病密切相关,最新的报道发现lncRNA在肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)的发生和发展中发挥重要作用。本文主要结合lncRNA在PAH领域的研究现状,综述其在PAH发生发展中的作用和机制。     

长链非编码RNA与细胞周期调控

长链非编码RNA (long non-coding RNA, lncRNA)种类繁多且生物学功能复杂,能与不同的分子相互作用,参与细胞核染色质结构的调控、mRNA的转录及转录后的加工运输、蛋白质的翻译等过程。细胞周期是保证细胞正常生命活动的过程,哺乳动物细胞通过细胞周期的调控实现自我的更新及个体的发育,而肿瘤细胞通过细胞周期的调控参与癌细胞的增殖及凋亡等过程。lncRNA在肿瘤细胞中可发挥抑癌基因或癌基因的作用调控细胞周期进程,了解其调控细胞周期的机制可揭示肿瘤发生发展的本质,阐释癌症的发生机制,为肿瘤的早期诊断及治疗提供分子标志物。本研究就近年来报道的lncRNA在肿瘤细胞中调控细胞周期的机制作一综述。     

IGFBP3基因启动子高甲基化所致表达下降促进胃癌化疗耐药

目的:研究胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)在胃癌化疗敏感及化疗耐药细胞和组织中的表达情况,初步探讨其在胃癌化疗耐药中的作用及表达异常机制。方法:采用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)及蛋白质免疫印迹实验(WB)的方法检测IGFBP3在化疗药物敏感的胃癌细胞AZ521、SC-M1,对应顺铂耐药细胞AZ521/cisplatin、SC-M1/cisplatin和胃癌组织中的表达水平;在降低和增加IGFBP3表达量后,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)试剂及流式细胞术(FCM)检测胃癌细胞对化疗药物的敏感性的变化;甲基化特异性PCR(MSP)检测IGFBP3基因启动子区甲基化水平。结果:IGFBP3在化疗耐受的胃癌细胞及组织中表达低于化疗敏感的胃癌细胞及组织(P0.05);在敏感细胞中干扰IGFBP3表达可促进胃癌细胞的耐药性,而在耐药细胞中恢复IGFBP3表达可显著逆转耐药性;MSP结果显示,IGFBP3的表达受DNA甲基化调控,耐药细胞中IGFBP3启动子高甲基化导致其表达下降(P0.05);甲基转移酶抑制剂地西他滨(DAC)处理耐药的胃癌细胞,可恢复IGFBP3表达,并提高其对化疗药物的敏感性(P0.05)。结论:IGFBP3启动子区发生DNA高甲基化导致其表达下降,使得化疗药物诱导胃癌细胞发生凋亡的能力下降,最终导致胃癌细胞的化疗耐药。     

Linc00651对胃癌细胞增殖与迁移侵袭能力影响的研究

胃癌是世上最常见的恶性肿瘤之一。人们对于胃癌的病因,尤其是对胃癌转移的分子机制并尚未完全阐明。表观遗传调控在肿瘤中的作用和机制已经引起研究者的高度关注。为了研究LincRNA是否在胃癌的侵袭迁移中发挥作用,本研究选择具有增强子样活性的长链非编码RNA Linc00651作为研究对象,通过CCK、流式细胞技术、Wound healing assay、Transwell迁移侵袭实验等,分析了Linc00651对胃癌细胞增殖及其迁移侵袭能力的影响。结果显示,Linc00651的转染,促进了胃癌细胞的侵袭和迁移能力,对胃癌细胞的增殖和细胞周期未见明显改变。本研究揭示了Linc00651参与了胃癌细胞侵袭迁移行为,为LncRNA应用于胃癌侵袭转移的临床评估提供了新的思路和视角。     

长链非编码RNA Hotair通过调控巨噬细胞表型转换促进胃癌细胞增殖与侵袭

目的探讨胃癌细胞是否通过长链非编码RNA Hotair作用于巨噬细胞,将其转化为癌症支持细胞,进而促进胃癌的增殖与侵袭。 方法实验分为对照组与AGS细胞共培养组,转染实验分为对照组、Hotair过表达组和RNA干扰组胃癌细胞与巨噬细胞共培养实验检测巨噬细胞表型转换。进行原位杂交实验对M2型巨噬细胞与lncRNA Hotair共定位。通过RT-?PCR实验检测并筛选出促进巨噬细胞表型转换的关键lncRNA。通过RNA干扰技术敲低胃癌细胞lncRNA水平并进行共培养实验。随后通过CCK-8实验与Transwell实验检测转型后的癌症相关巨噬细胞对胃癌细胞增殖与侵袭能力的影响。两组间均数比较采用t检验,多组均数间比较采用单因素方差分析,组间多重比较采用SNK-q检验。 结果共培养实验结果表明,相比于对照组（5.63±1.97）个,AGS细胞组中含有更多的CD206阳性M2型癌症相关巨噬细胞（32.51±5.44）个,两者比较差异有统计学意义（t =25.742,P = 0.001）;ELISA实验也证明AGS细胞组的巨噬细胞分泌更多的抑炎因子[TGF-β：（163.45±54.91）pg/ml,对照组：（87.32±19.24）?pg/ml;IL-4：（156.83±69.25）pg/ml,对照组：（49.94±17.55）pg/ml;IL-10：（385.65±24.75）pg/ml,对照组：（98.82±46.26）pg/ml],两组间比较差异有统计学意义（t?= 7.167,8.203,29.991,P均< 0.05）。GEO数据库鉴定并使用RT-PCR筛选出Hotair为关键lncRNA,随后的RNA干扰实验表明,Hotair敲低会抑制巨噬细胞的转变（CD206阳性细胞数量由41.12±6.91变为21.45±2.19）,进而降低胃癌细胞的增殖与侵袭能力。 结论胃癌细胞的lncRNA Hotair会被巨噬细胞摄取,将其转化为癌症相关巨噬细胞,进而促进胃癌细胞的增殖与侵袭能力,这为胃癌的治疗提供了新的可能的靶点。     

胃癌组织长链非编码RNA HIT000218960的表达及其与患者临床病理特征及预后的关系研究

摘要 目的：探讨胃癌组织长链非编码核糖核酸（lncRNA）HIT000218960的表达及其与患者临床病理特征及预后的关系。方法：选择2018年1月至2019年6月于中国人民解放军联勤保障部队第九七Ο医院进行手术切除治疗的103例胃癌患者及进行胃粘膜活检的健康体检志愿者62例,取其对应组织,应用逆转录-定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）检测组织中lncRNA HIT000218960及高迁移率族蛋白A2（HMGA2）信使RNA（mRNA）表达,应用免疫组织化学法检测组织中HMGA2阳性表达。分析lncRNA HIT000218960表达与胃癌患者临床病理特征的关系。随访3年,应用Kaplan-Meier生存曲线分析不同lncRNA HIT000218960分组患者预后情况,并应用Cox回归分析胃癌患者预后的影响因素。结果：胃癌组织中lncRNA HIT000218960、HMGA2 mRNA表达水平显著高于正常胃粘膜组织（P<0.05）,HMGA2蛋白阳性表达率显著高于正常胃粘膜组织（P<0.05）。胃癌组织中lncRNA HIT000218960表达与肿瘤直径、组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移显著相关（P<0.05）。lncRNA HIT000218960水平与HMGA2 mRNA表达呈正相关（r=0.462,P<0.05）。lncRNA HIT000218960低表达组3年生存率显著高于lncRNA HIT000218960高表达组（P<0.05）。Cox回归显示,肿瘤组织中低分化、TNM分期Ⅲ期、淋巴结转移、lncRNA HIT000218960高表达、HMGA2 mRNA高表达是胃癌患者预后不良的危险因素（P＜0.05）。结论：胃癌组织中存在lncRNA HIT000218960异常高表达,其与胃癌恶性进展及患者预后不良有关。     

长链非编码RNA在神经系统疾病中的作用

转录本长度超过200个核苷酸(nt)的非编码RNA被称为长链非编码RNA(lncRNA)。lncRNA可在转录和转录后水平调控基因的表达,并作为信号分子、蛋白质复合物支架、分子诱饵实现其生物功能;lncRNA的表达与多种疾病的发生密切相关。现将综述lncRNA的功能及其在神经系统疾病中的研究进展,以期了解这些疾病的发病机制,并为治疗提供新的思路。