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1.
硝酸银与脱落酸相配合影响菜心离体培养之植株再生方式的组织学研究 总被引:5,自引:0,他引:5
菜心带子叶的子叶柄在培养基中是否添加AgNO3与ABA可导致两种不同的植株再生方式:添加AgNO3与ABA时由外植体直接出芽,而不加AgNO3与ABA则植株再生经过愈伤组织阶段再分化成芽。培养1—3d,子叶柄切口端之皮层及维管束的薄壁细胞开始启动,细胞迅速分裂而形成分生细胞团和少量愈伤组织。第4天,在不含AgNO3与ABA的培养基上,分生细胞团则形成根原基进而发育成根;或者去分化形成愈伤组织。在这种条件下,只有少数芽原基可由培养15d后的愈伤组织再分化产生.在含AgNO3与ABA的培养基上,分生细胞旺盛增殖而形成大量分生细胞团,并由这种分生细胞团直接形成大量的芽原基.10d左右即可产生为数众多的丛生不定芽.AgNO3与ABA相配合抑制了不定根及愈伤组织的形成和生长,促进大量增生的分生细胞团直接分化为不定芽的芽原基. 相似文献
2.
提高菜心离体植株再生频率的研究 总被引:42,自引:0,他引:42
AgNO3与ABA 相配合,在离体培养条件下从3个菜心(Brassica parachinensisBail.)品种(“49-19”、“60D”和“70D”)获得了高频率的植株再生。结果表明:在试验的3种外植体中,子叶-子叶柄再生能力最强。实生苗龄及接种方式影响植株再生频率。MS附加不同浓度的BAP和NAA,BAP 2 m g/L与NAA 1 m g/L配合效果最好,植株再生频率可达26.8% 。培养基中单独添加AgNO3 或ABA 均能促进植株再生,且AgNO3 作用优于ABA。AgNO3(4 m g/L)和ABA(0.5 m g/L)相配合获得了更高的植株再生频率:“49-19”达89% ,“60D”达84.3% ,“70D”达86% 。组织学研究表明,在本实验条件下菜心离体培养植株再生方式为外植体直接出芽。不定芽起源于子叶柄切口端维管组织的薄壁细胞;由此种细胞分裂形成分生细胞团,继而分化成芽。试管苗移入盆中获得成熟植株 相似文献
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4.
本文发展的技术可以使金鱼草下胚轴外植体不定芽高频再生。添加有2mg/lBAP和0.5mg/lNAA的MS培养基上再生芽出得又快又多,淡黄色愈伤组织易于形成并存活。但主要依赖的是6-BAP。MS培养基中含有0.1mg/l或6mg/l浓度的6-BAP均能刺激芽的发育,最适浓度为2-3mg/l.仅加2,4-D,也能形成正常的黄色愈伤组织。但这样形成的愈伤组织在只含有0.1-6mg/l6-BAP或含有2mg/l6-BAP和0.5mg/lNAA的MS培养基上均不能分化生出再生芽来。仅加NAA,能够刺激下胚轴形成根。加入AgNO_3,则抑制不定芽的再生,并导致整个外植体变成棕色而死亡。组织化学分析结果表明:不定芽的再生源于下胚轴外植体表皮细胞。在不含有任何生长调节剂的MS培养基上,再生苗均能形成根。再生植株移栽至花盆可开花结实。 相似文献
5.
刺槐宽叶和四倍体无性系的组织培养 总被引:13,自引:0,他引:13
1植物名称刺槐(Robiniapseudoacacia)优良无性系:Tetraploidlocust、Glgastypelocust。2材料类别带腋芽的茎段。3培养条件(1)启动培养基:MS+6-BA0.25mg·L-1(单位下同)+NAA0.05。(2)分化培养基和继代培养基:MS+6-BA0.5+NAA0.1+AgNO310,MS+6BA0.5+NAA0.1。上述培养基均添加3%蔗糖、0.6%琼脂。(3)生根培养基:1/2MS+IBA0.2+NAA0.2,添加2%蔗糖0.6%琼脂。培养基pH… 相似文献
6.
AgNO3对大白菜子叶芽再生的促进作用 总被引:19,自引:0,他引:19
以大白菜“02号杂交早皇白”无菌苗的子叶为材料,用附加BA2.0mgL^-1、NAA0.1~1.0mgL%-1的MS培养基培养,能直接放导分化 出芽,最适激素比例为BA2.0mgL^-1、NA0.5mgL^-1,芽的分化率为31.6%,在上述培养基里活加2mgL^-1的AgNO3能使芽的再生频率提高至86.5%。 相似文献
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根癌农杆菌对甘蓝型油菜的转化及转基因植的再生 总被引:21,自引:0,他引:21
用根癌农杆菌共培养法把外源基因导入甘蓝型油菜主要栽培品种“云北2号”,获得转基因植株。所用外植体为带有1-2mm子叶柄的完整子叶,根癌农杆菌为A208SE(pTiT37-SE,pROA93)。Ti质粒pROA93带有NPTⅡ及GUS嵌合基因。共培养2天后转到附加25mg/L卡那霉素的分化培养基(MS+4.5mg/LBAP)上。AgNO3和羧苄青霉素促进芽的分化,头孢霉素则有抑制作用。最高转化频率为 相似文献
8.
本文应用LSAB免疫组织化学方法及AgNOR技术对73例甲状腺良、恶性病变PC-NA、P53蛋白及AgNOR进行了检测并对其相关性进行了研究。结果显示①PCNA表达在良、恶性病变中有显著差异(P<0.01);②AgNOR颗粒均数及其形态在良、恶性病变中有较显著差异;③PCNA表达与AgNOR计数呈显著正相关性(P<0.01);④P53蛋白在良、恶性病变中的表达均呈阴性,只是在淋巴结转移灶内呈阳性表达。根据研究我们认为检测甲状腺良、恶性病变中PCNA及AgNOR颗粒对甲状腺良、恶性病变的鉴别、预后及对临床治疗均有意义 相似文献
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金线莲原球茎的诱导与植株再生 总被引:11,自引:0,他引:11
金线莲原球茎的诱导与植株再生王建勤林兰英陈钢(福建省药材公司研究所,福州350003)PROTOCORMINITIATIONANDPLANTLETREGENE┐RATIONOFANOECTOCHILUSROXBURGHIIWangJian-qinL... 相似文献
10.
黄瓜离体子叶切块培养直接分化花芽 总被引:3,自引:0,他引:3
48小时龄黄瓜幼苗的子叶切块接种于附加2.0mg/LBA及1.0mg/LAgNO3的修改MS培养基上,培养约60天后在子叶切块的近轴端可直接形成雄花芽,其频率达7.7%。 相似文献
11.
应用核仁组成区嗜银蛋白(AgNOR)技术及癌胚抗原(CEA)免疫组化染色对98例乳腺良、恶性病变进行对比研究。结果表明:AgNOR计数与肿瘤增殖活跃程度及生物学行为是一致的。乳腺癌中AgNOR计数显著高于良性病变(P<0.01)。浸润癌AgNOR计数比其他类型乳腺癌高。CEA染色在乳腺良性病变中基本阴性,恶性病变中阳性率80.8%。乳腺癌中AgNOR计数与CEA分布之间呈线性相关(r=0.82,P<0.05)。CEA阳性乳腺癌组与CEA阴性组AgNOR计数差异显著(P<0.05)。提示:AgNOR定量研究和CEA分布在乳腺良、恶性病变的鉴别及肿瘤恶性程度的研究中具有相似的参考价值。 相似文献
12.
Bt叶绿体转基因植株的抗虫性及后代表型分析 总被引:9,自引:0,他引:9
将Bt CryIA(c) 基因与水稻( Oryza sativa L.) 叶绿体psbA 基因的启动子和终止子构建成表达盒,连同烟草( Nicotianatabacum L.) 叶绿体基因组同源片段rpl2_trnH_psbA和trnK_ORF509A 以及选择标记基因aadA一起构建成烟草叶绿体转化载体pTRS8。基因枪法转化烟草叶片,经壮观霉素筛选获得转化再生植株。有些转基因植株对3龄棉铃虫( Helicoverpa zea) 具有较强的毒杀作用,并能显著抑制昆虫蜕皮和生长发育。对高抗虫性植株的子一代(T1) 和子二代(T2) 进行的遗传学和分子生物学分析表明,Bt 基因已稳定地遗传给子代叶绿体,且抗生素抗性遗传遵循非孟德尔的母系遗传规律 相似文献
13.
本文采用包括自动图象分析技术在内的AgNOR形态定量学方法,以大肠肿瘤为模型,进行了AgNOR定量形态学研究的误差分析,以探讨肿瘤AgNOR定量诊断规范化的可能。结果表明,染色条件、视场目标选择和细胞计数量是引起AgNOR定量诊断的主要误差;恒定染色环境,正确选择欲测细胞及测定足够量的细胞是使AgNOR形态定量诊断规范化的途径。 相似文献
14.
毛花猕猴桃原生质体再生植株 总被引:12,自引:0,他引:12
从毛花猕猴桃(Actinidia eriantha Benth.)试管培养的实生苗新展开叶片分离的原生质体,培养在液体MS(除去NH4NO3)附加2,4-D 1.0 m g/L和葡萄糖0.4 m ol/L的培养基上。培养3周后植板率达到19.4% 。在未添加新鲜培养基的情况下,原生质体再生的细胞可持续分裂,并于3个月时长成2 m m 大小的愈伤组织。将该愈伤组织转移到附加玉米素0.5 m g/L和IAA 0.1 m g/L的固体MS培养基上,分化出苗。试管苗经诱导生根,长成完整小植株 相似文献
15.
牛生长激素基因在马铃薯中的表达 总被引:5,自引:0,他引:5
将牛生长激素基因cDNA 与Patatin ClassI启动子及NOS3终止子连接,构建了表达载体pPBGT. 用直接法将表达载体转入农杆菌(Agrobacterium tum efaciens) LBA4404(pRAL4404)菌株, 用此菌株转化马铃薯(Solanum tuberosum )得到再生植株. 经NPTⅡ活性检测,总DNA PCR和Southern blot证明目的基因已整合到马铃薯基因组中.RNA 点杂交和Western blot表明牛生长激素基因已在转基因马铃薯块茎中转录和表达 相似文献
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根癌农杆菌对甘蓝型油菜的转化及转基因植株的再生 总被引:37,自引:0,他引:37
用根癌农杆菌(Agrobacterium tum efaciens)共培养法把外源基因导入甘蓝型油菜(Brassi-ca napusL.)主要栽培品种“云北2 号”,获得转基因植株。所用外植体为带有1—2 m m 子叶柄的完整子叶,根癌农杆菌为A208SE(pTiT37-SE, pROA93)。Ti质粒pROA93 带有NPTⅡ及GUS嵌合基因。共培养2 天后转到附加25 m g/L卡那霉素的分化培养基(MS+ 4.5 m g/LBAP)上。AgNO3 和羧苄青霉素促进芽的分化,头孢霉素则有抑制作用。最高转化频率为27% 。把分化出的茎芽切下,插入含有25 m g/L卡那霉素的生根培养基中。羧苄青霉素不利于根的形成。把完整抗性植株移入盛土壤的盆中,生长状况良好。测定β-葡糖苷酸酶活性,84% 明显高于对照。以NPTⅡ基因作探针进行Southern blot分析,证实外源基因已插入到植物细胞基因组中 相似文献
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杨和苹果离体茎尖培养和愈伤组织分化与内源IAA、ABA的关系 总被引:1,自引:0,他引:1
用杨和苹果的茎尖进行离体培养,在MS培养基中添加不同浓度的BA 、NAA 或2 ,4D,诱导(1) 茎的增殖或根的分化,(2) 愈伤组织形成以及愈伤组织分化根、芽或体胚,再生完整植株。测定了不同发育状态器官和组织的内源IAA 和ABA,并计算了IAA/ABA 的比值。培养物中其比值较高者,易于诱导不定根分化或形成胚性的愈伤组织,也是木本植物离体培养幼化程度较高的例证。在试管内培养时,杨比苹果培养物易于幼化,因而器官分化、愈伤组织形成和分化、再生完整植株较容易,在MS 培养基中添加的外源BA、NAA 和2 ,4D 的浓度也较低。 相似文献
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抗虫转基因欧洲黑杨的培育 总被引:77,自引:0,他引:77
用带有35S-Ω-Bt-NOS嵌合基历的双元载体的农杆菌LBA4404转化欧洲黑杨的叶片外植体,共独行54株转化再生植株,用这些再生植物对杨尺蠖进行毒力测定,昆虫校正死亡率在80-96%的再生植株占总测定植株的15%。部分再生植株对舞毒娥进行测定,表明在5-9天内校正死亡率高达100%,存活昆虫的生长和发育也明显地受到抑制。根据苗木在苗圃中高生长的昆虫校正死亡率采用重心聚类法进行分析。初步选出高生 相似文献
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导入蜘蛛杀虫肽基因的烟草具有抗虫性 总被引:18,自引:0,他引:18
用带有杀虫肽基因的农杆菌(Agrobacterium tum efaciens)LBA4404 转化烟草(Nicotiana tabacum )叶片,共获得30 株抗卡那霉素的再生植株. 用这些再生植株对棉铃虫(Heliothisarm igera)进行毒力测定,有3 株转杀虫肽基因植株对棉铃虫有较强抗性. 与对照相比,这3 株转基因烟草的杀虫率可达30%~45% ,并能显著抑制昆虫蜕皮和生长发育,表现出明显的抗虫作用. 以这3 株为主进行了PCR 扩增及Northern blot实验,结果表明杀虫肽基因已插入到这3 株植株的基因组中并表达出有活性的杀虫肽 相似文献
20.
肝素对成纤维细胞促增殖作用的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
应用核仁组成区相关嗜银蛋白(AgNORs)染色和抗Ⅲ型胶原以及抗5-溴脱氧尿苷单抗免疫组化技术,观察了肝素对体外培养的NIH/3T3成纤维细胞增殖的影响,发现:(1)肝素能促使成纤维细胞数量增加,如0.1mg/L浓度的肝素在培养第3天成纤维细胞数量相当于对照值的1.3倍;(2)对成纤维细胞AgNORs的合成显示出明显的促进作用,如0.2mg/L浓度的肝素培养第3天,其AgNORs数量为对照值的2.7倍;(3)进一步分析肝素对成纤维细胞DNA和Ⅲ型胶原合成的影响,结果表明,加入0.2mg/L肝素培养第3天,S期成纤维细胞和Ⅲ型胶原阳性细胞数分别为对照值的2.7倍和1.8倍。上述实验结果为探讨肥大细胞分秘的活性介质参与器官纤维化作用的机理进而采取相应的对抗措施提供了依据 相似文献