缬沙坦胶囊联合肾炎康复片治疗糖尿病微量蛋白尿的研究

目的：研究缬沙坦联合肾炎康复片治疗糖尿病微量蛋白尿的疗效及安全性。方法：采用随机、对照原则将60例有微量蛋白尿期糖尿病患者分为缬沙坦对照组（A组）和缬沙坦联合肾炎康复片治疗组（B组）,每组各30例。A组给予缬沙坦160mg,每日1次口服;B组给予肾炎康复片（薄膜衣片）每次5粒,每日3次口服和缬沙坦160mg,每日1次口服。疗程均为12w。比较2组治疗前、治疗第4、8和12w尿白蛋白排泄率（UAER）及治疗前、后肾功能、24h尿蛋白定量等生化指标的变化及肌酐50％倍增率。结果：2组治疗后血压、Scr、CRP指标均低于治疗前（P〈0．05）,而血FBG、PBG、HbAlc、Alb、BUN、24h尿蛋白定量指标变化无差异（P〉0．05）;B组治疗后与对照组比较,B组有较低Scr、CRP值（P〈0．05）,而余生化指标及血压变化无差异（P〉0．05）,B组第8、12w时尿蛋白排泄率下降幅度低于A组（P〈0．05）,B组治疗中12w的肌酐50％倍增率低于A组（P〈0．05）。结论：缬沙坦胶囊联合肾炎康复片治疗糖尿病微量蛋白尿是有效安全的。     

Neuritin在大鼠脑外伤合并骨折过程中的作用研究

目的：研究脑外伤合并股骨骨折的骨痂中Neuritin的表达及血清中变化,探讨中枢神经系统损伤加速对骨折愈合的作用,为临床难治性骨创伤提供新的理论依据。方法：取96只雄性SD大鼠随机分成：A组正常组8只、B组单纯骨折组40只、C组单纯脑外伤组8只及D组骨折合并脑外伤组40只,做股骨骨折和采用脑损伤液压装置建脑损伤模型,术后3、7、14、21、28天取血离心,ELISA法测血清中的Neuritin值。分时间处死B组和D组,取骨痂做切片,行免疫组织化学染色,观测各时间点骨痂中Neuritin的变化和骨折愈合情况。结果：①免疫组织化学染色：骨折愈合过程中血管内皮细胞、软骨细胞及成骨细胞的胞浆中有阳性表达,并显色强。D组1w至3w时的Neuritin阳性细胞百分数均高于B组有显著性统计意义（P〈0．05）,但4周时（P〉0．05）。②血清浓度值：A组值（81．37±1．37）,B组、C组、D组3天（94．94±3．77107．28±3．46118．35±1．43）逐渐升高,2周达到高峰（110．18±1．48131．89±3．26161．48±1．46）,然后下降,3d至3w时各组有显著性统计意义（P〈0．05）,4周下降为略高于正常（P〉0．05）。结论：血清和骨痂中Neuritin的表达显著升高,提示Neuritin可能是大鼠股骨骨折合并脑损伤时促进骨折修复的重要因素一。     

肉足虫的培养方法

教学中,经常需要肉足虫,如变形虫（Amoeba）等,但肉足虫受季节影响取材较困难,即使采到,种类和数量均较少,远远不能满足实验课需要。经多次试验,终于摸索出一种十分有效的方法,现将培养过程及注意事项介绍如下：（1）A、B、C液配制：A液：CaCI。·ZH。O0．433s,KCIO．162s无菌水100mlB液：K。HPO。0．5129无菌水100mlC液：MsSO。·7H。O0．28s无菌水100ml（2）培养基配制将igg芭叶粉末加A、B、C液各lml,再加无菌水至1000ml,煮沸,过滤。再将所得滤液配成1．5％琼脂培养液,经高压灭菌后,分装到培养皿中（约1／3高度…     

SD大鼠胞质内单精注射技术方法的建立

目的建立SD大鼠胞质内单精注射操作程序。方法和结果实验1：用直径为7～10μm和2-4μm的注射针以及相应的注射方法进行大鼠ICSI,ICSI后卵母细胞存活率（30．5％vs．61．3％）和卵裂率（12．5％vs．51．1％）均差异显著（P〈0．05）;实验2：分别在hCG后14h、16h和18h取卵进行ICSI,三组存活率（77．4％、74．1％vs．69．6％）差异不显著（P〉0．05）;14h和16h组的卵裂率（60．8％、56．0％vs．31．3％）与18h组差异显著（P〈0．05）;实验3：用不同的显微操作液H-mR1CM和H-mKRB进行大鼠ICSI,结果卵存活率相近（79．2％vs．75．9％）,卵裂率（70．5％vs．74．7％）差异不显著（P〉0．05）,但8-细胞发育率（43．5％vs．61．9％）差异显著（P〈0．05）,囊胚发育率差异极显著（P〈0．01）。结论大鼠ICSI时在注射hCG后14～16h取卵最佳,采用2—4pan直径的注射针、H—mKRB作为操作液更有利于卵的发育。     

腹腔镜子宫次全切除术对患者机体应激的影响

为了评估腹腔镜次全子宫切除（LSH）和开腹次全子宫切除（TASH）对机体应激影响,选用以随机方式分为开腹次全子宫切除组（A组）、腹腔镜次全子宫切除组（B组）。取术前24h、术后24h和术后72h患者外周静脉血,分别检测血清中皮质醇（Cor）、甲状腺相关激素（FT3、FT4、TSH）水平的变化。开腹组内皮质醇水平于术后24h则高于术前（P=0．016）,而腹腔镜组升高不显著（P=0．057）,两者比较差异有统计学意义（P=0．038）。术后24h,两组病人FT3浓度下降,此时点两组间差异无统计学意义（P=0．256）。术后72h,两组间差异有统计学意义（P=0．042）。术后24h开腹手术组FT4浓度低于同时点腹腔镜手术组FT4浓度（P=0．040）。术后72h两组均能恢复至术前水平（pA=0．412,pB=0．578）,两组间差异无统计学意义（P=0．723）。TSH的比较：开腹组与腹腔镜组比较术后24h均下降,术后72h又有所上升,但各时点变化均不显著（P〉0．05）,且两组间差异也无统计学意义（P〉0．05）。腹腔镜次全子宫切除比开腹次全子宫切除对机体的应激影响小。     

大鼠脑损伤后非损伤区域缺氧诱导因子与乳酸的变化研究

目的：研究大鼠脑损伤后非损伤区域缺氧诱导因子（hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α）与乳酸的表达变化。方法：取雄性SD大鼠36只,体重200-300g,参照统计学随机数字表将大鼠随机平均分为正常对照组（6只）、假手术组（6只）、造模组（24只）,3组,造模组分四个时间点12h、72h、1w、2w处死动物（每时间点6只）。使用立体定位仪和液压打击装置,靶向打击大脑中动脉,造大鼠脑外伤模型。采用免疫组织化学法检测脑外伤后不同时间点损伤临近区域脑组织中HIF-1α蛋白表达及乳酸含量的变化。结果：正常组和假手术组脑组织神经细胞HIF-1α表达和乳酸含量无明显变化,而模型组损伤临近区域HIF-1α的表达及乳酸含量的变化规律基本一致,12 h时增多,72h时达到高峰,1w表达下降至2w时恢复正常。造模组12h、72h、1w3个亚组与正常对照组比较差异具有统计学意义p〈0.01,造模组2w亚组与正常对照组比较差异无统计学意义p〉0.01。结论：脑外伤后非损伤区域也有缺血、缺氧的改变,可能与脑外伤后的脑萎缩有相关性。     

肝素涂抹管道对肺损伤的保护作用

目的：观察肝互涂抹体外循环管道对体外循环肺损伤的保护作用。方法：16例双瓣膜替换术病人,随机分为对照组（CON组,n＝8）和肝素涂抹管道组（HCC组,n=8）。分别于CPB开始及主动脉阻断开放后10min取左右心房血进行血细胞计数,并测定肺循环血中补体C3、C4及MDA含量;于麻醉后CPB前,开放后30min,手术结束时,术后3h,6h及第一天取血标本测定血气及呼吸做功并计算RI和Qs/Qt。结果：开放后10min,对照组左房血中MDA含量明显高于右心房（P＜0．05）,而C3、C4水平,PMN和血小板数量明显低于右房血（P＜0．05）;HCC组上述指标则无明显变化（P＞0．05）,在对照组,CPB结束时呼吸做功较术前明显增加,术后6h时明显高于HCC组;手术结束3h以后,对照组病人RI和Qs/Qt明显增加,HCC组在正常范围内（P＜0．01）,结论：肝素涂抹管道能够减轻炎症反应,保护肺功能。     

利用RNAi抑制PARs防治脑缺血性损伤的实验研究

目的：利用RNA干扰技术,通过重组腺病毒导入,抑制脑组织中PARs基因的表达,观察神经功能缺陷评分、缺血脑组织梗死体积的变化,为缺血性脑血管疾病的基因治疗提供实验依据。方法：雄性Wistar大鼠随机分组。以重组腺病毒介导的无序PARs基因shRNA片段、生理盐水进行干预,干预3天后以线栓法建立Wistar大鼠大脑中动脉永久闭塞模型,各组分别于线栓后24h、72h进行神经功能缺陷评分并断头取脑,应用4％TTC染色测脑梗死体积。结果：1．缺血后24h、72h同一时间点：①实验组分别与对照组、生理盐水组对比,神经功能缺陷评分明显降低（P〈0．05）,脑梗死体积明显减小（P〈0．05）;②对照组与生理盐水组对比,神经功能缺陷评分、脑梗死体积无明显差异（P〉0．05）。2．各组组内缺血后24h、72h对比,神经功能缺陷评分、脑梗死体积各组均有明显差异（P〈0．05）。结论：重组腺病毒介导的RNAi能有效抑制脑组织中PARs基因的表达,缩小脑梗死体积,改善神经功能缺陷评分。     

寒冷刺激对部分睡眠剥夺小鼠血细胞参数的影响

目的：探讨寒冷刺激,部分睡眠剥夺,以及部分睡眠剥夺的基础上再给予寒冷刺激等处理对小鼠血细胞参数的影响。方法：昆明小鼠24只,随机均分为4组（n=6）：对照组、寒冷组、不完全睡眠剥夺组和不完全睡眠剥夺加寒冷组。寒冷组每天给予（10±2）℃的低温处理4h,不完全睡眠剥夺组每天18：00至次日9：00剥夺睡眠,不完全睡眠剥夺加寒冷组在每天睡眠剥夺的基础上再给予4h寒冷刺激。连续处理4d后采血检测血常规和血沉率。结果：与对照组相比,寒冷刺激可使小鼠血液中淋巴细胞含量（P〈0．05）以及百分比（P〈0．01）显著增加;部分睡眠剥夺可使小鼠血液白细胞和淋巴细胞含量（P〈0．05）及百分比（P〈0．01）明显降低。不完全睡眠剥夺加寒冷刺激处理后与其它三组相比小鼠血液白细胞和淋巴细胞含量显著降低（P〈0．01）,而血沉率则显著升高（P〈0．01）。结论：部分睡眠剥夺会抑制机体免疫能力,在部分剥夺睡眠的基础上再给予寒冷刺激则将进一步抑制机体免疫能力并使血沉率加快,降低机体对外界环境变化的适应能力。     

象牙球的组织培养

TissueCultureofEchtnocactusgrosoniiZENGSongjun（SoofhChaaBotanicalGarden,TheChineseAcademyofScineces,Guangzhou510520）1植物名称象牙球（Echinocactusgrosonii）。2材料类别子球。3培养条件（1）愈伤组织诱导培养基：MS＋6－BA5mg·L‘（单位下同）＋NAA0．l;（2）于球增殖培养基：MS＋6－BAI＋NAA005;（）生根培养基：及／2MS＋NAA05。上述培养基均加琼脂0．7％,蔗糖3％,PH5．8。培养温度为25f2C,光照10～12h·d－‘,光照度2加0IX。4生长与分化情况吗．1愈伤组织的诱导取盆栽象牙球上的子球用洗衣粉洗净…     

中麻黄的组织培养

1植物名称中麻黄（Ephedraintermedia）。2材料类别幼茎。3培养条件愈伤组织诱导及其继代培养基：(1)MS＋KT0．05mg·L－1＋2．4D1．1mg·L－1（单位下同）;（2）芽分化培养基：MS＋BA3＋IAA0．2;（3）生根培养基：MS＋BA0．06＋2,4-D1.1。以上培养基均加30g·L-1蔗糖,9g·L-1琼脂,pH值5.8左右,高压灭菌。培养温度(25±）℃,光照12h·d－1,光照度2000lx.4生长与分化情况4.1愈伤组织诱导及继代培养无菌操作下,切取中麻黄幼苗节间幼茎5mm大小,置培养基（1）上。15d后,淡黄绿色愈伤组织开始生长,愈伤组织疏松易碎。再过1…     

地被菊的组织培养

1植物名称地被菊[Dendranthemagrandiflorun（Ramatuelle）cvs.]，品种伏地玉龙、盏黄、橙黄片。2材料类别带腋芽的茎段。3培并条件（1）启动培养基：MS＋6－BA0．1mg·L－1（单位下同）＋NAAO．1。（2）诱导分化培养基两种：MS＋6－BA0.3＋NAA0．1；MS＋6－BA0．5＋NAA0．1。（3）生根培养基：1／2MS＋IBA0．3～0．5＋NAA0．1。上述培养基均加蔗糖20g·L－1，0．5％琼脂，PH值6．0。培养温度27C，光照12h·d-1（人工光和散射光）。4生长与分化情况4．l启动培养取带腋芽的茎段，先用浓度0．1％的洗衣粉液洗净，自来水冲15min…     

N-(1-萘乙酰基)-,N’-(4-氨替吡啉基)硫脲对小麦幼苗的几种生理效应

小麦（Triticumaestivum）品种温－2540的种子用0．1％的HgCl2灭菌10min，每份取300粒，分别用N－（1－萘乙酸基）－，N’－（4－氨替吡啉基）硫脲（NAT，先用少量二甲亚砜溶解后，再溶于蒸馏水中）和NAA各50、10、1．0、0．1mg·L－1及蒸馏水浸种17h后，播于铺有3层滤纸的培养皿中，加等量蒸馏水，于25℃培养箱中萌发。胚芽鞘伸长至一定长度后转移到培养缸的尼龙网上，于人工光照箱中进行水培（Hoagland完全营养液，25℃，每天光照11h，光照度1400lx）。苗展开叶片时，喷施与浸种相对应浓度的药液。种子萌发72h时，随机取30粒，用精…     

当归对大鼠缺血性脑损伤后Flt-1、Flk-1 mRNA表达的影响

目的：研究大鼠缺血性脑损伤后不同时间点Flt-1、Flk-1 mRNA的表达及当归对其表达的影响。方法：雄性Wistax大鼠,随机分为缺血损伤组和当归治疗组。采用线栓法制作大鼠短暂性大脑中动脉阻断（MCAO）与再灌模型。治疗组腹腔注射当归注射液（剂量5g／kg）。36只大鼠（每组各18只）在脑缺血／再灌后1d、3d、7d神经行为学评分完成后被处死,取大脑行氯化三苯四唑（TTC）染色以测脑梗死比;另取72只大鼠（每组各36只）在脑缺血／再灌后3h、6h、12h、1d、3d、7d分别被处死,应用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测缺血侧Flt-1、Flk-1 mRNA的表达。结果：在同时间点神经功能缺损评分比较,缺血损伤组明显高于当归治疗组（P〈0．05）;在同时间点当归治疗组梗塞比明显小于缺血损伤组（P〈0．01）。RT-PCR检测表明,缺血损伤组Flt-1、Flk-1 mRNA在缺血／再灌后3h即开始表达增强,于3d达高峰,后逐渐降低;当归治疗组Flt-1、Flk-1 mRNA表达比缺血损伤组明显增加,于3d达到高峰后缓慢降低至第7d仍保持较高水平。缺血损伤组和当归治疗组中Flt-1 mRNA与Flk-1 mRNA的表达呈正相关性,相关系数为r=0．957（P〈0．01）。结论：当归可增强缺血性脑损伤后Flt-1、Flk-1 mRNA表达。Flt-1、Flk-1 mRNA的表达紧密相关。     

荸荠的组织培养和快速繁殖

l植物名称李养O柏秋w由tlju,aso广苏养”品种。2材料类别种养的饱满芽。3培养条件芽分化培养基：MSWBAo．2～1．0mg／L（单位下同）＋NAA0．1,3％蔗糖,液体培养基;增殖培养基：MS十玉米素0．4,3％蔗糖,液体培养基;PHS．8,培养温度25t士ZC,光照度2000IX,光照12h／d。也生长与分化情况4．五诱导芽的分化培养取种养的饱满芽,经流水冲洗,洗衣粉液浸泡10～15min后用70％酒精漂洗5min;再用：（）2．5％的次氨酸钠液浸洗25min,（2）005％的升汞溶液浸洗15min。经两种杀菌处理,然后利取3～5mm的芽尖,接种于芽分化培养基中,…     

生长调节剂对石刁柏悬浮培养细胞的生长和多糖含量的影响

选取在MS十2,4DI．0ms／L（单位下同）＋6－BA0．2培养基上,每30～40d继代1次的一年生长石刁柏（As～（nxv）zllaLLi）愈伤组织无性系,于26士IC下进行无菌悬浮培养,培养基为MS＋2,4D0·4＋6－BA0．4,每4d换液1次,8～12d继代1次,3个月后用于实验。测定生长（60C下供至恒重）和多糖（0．15g干培养物加3ml水,超声波处理回～2min后匀浆,于90C水浴中置lh,离心,上清液加2倍体积酒精沉淀过夜,取沉淀加入1．5ml水）。多糖测定按苯酚硫酸法（张惟杰．复合多糖生化研究技术．上海：上海科学技术出版社,1987．6）。结果表明：回…     

福尔马林致痛对大鼠脊髓背角神经元神经肽CCK表达的影响

目的：本实验观察胆囊收缩素（CCK）在福尔马林致痛大鼠感觉信息传递中的作用。方法：用免疫组织化学技术,分别观察阴性对照、生理盐水、福尔马林致痛后1h和福尔马林致痛后3h大鼠脊髓背角的感觉神经元神经肽CCK表达的变化。结果：大鼠足底注射福尔马林1h后,脊髓背角Ⅰ、Ⅱ层神经元CCK表达阳性细胞数明显增加（P〈0．01）,且注射侧阳性细胞数明显高于非注射侧。注射福尔马林1h后,注射侧和非注射侧CCK表达阳性细胞的半定量光密度均值分别是0．397±0．014和0．295±0．007,差异有显著性（P〈0．01）;注射福尔马林3h后,注射侧和非注射侧脊髓背角CCK表达阳性细胞的半定量光密度均值分别是0．366±0．009和0．303±0．005,差异仍有显著性（P〈0．01）。结论：福尔马林致痛大鼠脊髓CCK表达阳性细胞的半定量光密度均值增加,进一步证实CCK在炎性痛信息传递通路的多个环节中参与了痛觉调制。     

乌司他丁对肠缺血-再灌注大鼠血清TNF—α，IL-6的影响

目的：通过检测血清TNF-α,IL-6的变化,评价乌司他丁对小肠缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法i健康Wistar大鼠84只,通过夹闭肠系膜上动脉（SMA）60min制作肠缺血模型,随机分成假手术组（C）,肠缺血再灌注组（I）,UTI治疗组（u）。根据缺血后再灌注时间不同又将I组和U组分成0min、2h和6h组。I组、U组于手术前经尾静脉分别注入生理盐水2mL、乌司他丁5×10^4U／kg,假手术组仅分离SMA,不夹闭血管。于各时点取腹主动脉血测定血清TNF-α、IL-6含量。结果：肠缺血再灌注各时相点均引起血清TNF-α、IL-6的变化,与假手术组相比,各时点TNF-α值显著升高（P〈0．01）,IL-6显著升高（P〈0．01）。u组0min、2h血清TNF-α值低于相应时点的I组（P〈0．01）;U组0min、2h、6h血清IL-6值低于相应时点的I组（P〈0．05）。结论：乌司他丁可减轻小肠缺血再灌注后的炎症反应。     

大花补血草优株无性系的建立

1植物名称大花补血草（Limoniumsinuatum）。2材料类别花茎。3培养条件（1）诱导芽萌发及增殖培养基：MS＋6－BA0．6mg／L（单位下同）＋3％蔗糖。（2）生根培养基：1／2MS＋NAA0·5＋1．5％蔗糖。以上培养基均加0．8％琼脂,PH5．8。培养温度25士2『C,光照度为2000IX,每天光照12h。4生长与分化情况4．1脑芽的增殖培养取大花补血草基部抽出的长5～10cm花茎,去除具有花芽的顶部,用带有l～2个、最多3个腋芽的中部茎作为外植体,在清水中用脱胎棉洗净,70％酒精浸lmin,10％安替福民溶液浸13～15min表面灭菌后,用无菌水冲洗4次,切…     

羟基喜树碱抑制人眼Tenon囊成纤维细胞增殖的实验研究

目的：研究羟基喜树碱（HCPT）对体外培养的人眼Tenon囊成纤维细胞（Human Tenon＇s capsule fibroblasts,HTFs）增殖、移行的影响。方法：取正常供体新鲜的Tenon囊组织,采用组织块培养法,进行成纤维细胞的体外培养,并用光镜、免疫荧光法观察鉴定;MTT法、划痕法检测不同浓度的HCPT（0、0．031、0．062、0．125、0．25、0．5、1、2、4mg／1）对HTFs增殖、移行的影响,并与MMC对比。结果：HTFs体外生长良好,经光镜和免疫荧光法观察鉴定为成纤维细胞;与空白对照组比较,HCPT（0．031-4mg／1）、MMC（0．0031-0．4mg／1）均能有效抑制HTFs的增殖,且呈一定的剂量、时间依赖性,HCPT作用24h、48h、72h的IC50分别为2．24mg／1、O．76mg／1、0．39mg／1,MMC作用24h、48h、72h的IC50分别为0．34mg／1、0．24mg／1、0．07mg／1;与空白对照组比较,HCPT（0．031-4mg／1）、MMC（O．0031-0．4mg／1）均能抑制HTFs迁移,呈剂量依赖性,而与时间无显著相关。结论：HCPT、MMC均能有效抑制HTFs的增殖和移行,其效应MMC约为HCPT的10倍。