化学剂引起的豚鼠“踏步自动作用”的研究

传统的“踏步自动作用”(stepping automatism)用电刺激和踏车(treadmill)相结合的方法在中脑或脊髓猫上引起。本文发现4-R-2,2,5,5-四(三氟甲基)-氢化咪唑化合物能在整体豚鼠引起规律的“踏步自动作用”。用上述化合物引起的豚鼠踏步运动仅见“对角肢”(diago-hal limbs)和“同侧肢”(homolateral limb-)两种踏步模式,并且前肢较后肢规律,前肢的踏步幅度铰后肢高数倍。     

冷冻或切除小脑蚓部山顶(Culmen)对豚鼠“踏步自动作用”(Stepping automatism)的影响

本研究探讨部分冷冻或切除小脑蚓部(vermis)对整体豚鼠“踏步自动作用”(steppingautomatism)的影响。“踏步自动作用”由我们近年来发现的诱发踏步物质(SIS)(4-R-2,2,5,5-四(三氟甲基)-咪唑啉)所引起。结果表明部分冷冻或切除小脑蚓部的山顶(culmen,Ⅴ和Ⅳ叶)和中央叶(Centralis,Ⅲa,b)明显增强豚鼠的“踏步自动作用”。冷冻小脑不能触发,但仅能调控“踏步自动作用”。这种调控作用对自动化程度差的弱“踏步自动作用”特别显著。蚓部山顶(Ⅴ叶为主)同时调控左右前肢踏步,而一侧蚓部山顶及其半球则主要调控同侧前肢踏步。此外,本研究的结果表明当介面温度(冷冻头和小脑幕间)致冷至5℃—0℃左右,冷冻小脑便可基本模拟部分切除小脑效应。     

刺激豚鼠中脑对化学诱发的踏步的易化作用

用电刺激和踏车相结合的方法对“踏步自动作用”的研究,曾在去大脑猫上证明有一个位于下丘下面的楔状核的“中脑运动区域”的存在。但未见关于前后肢踏步运动控制差别的报道。豚鼠脑内是否存在中脑运动区域也未有过研究。本研究利用我们发现的“踏步诱发物质”(SIS)诱发的豚鼠踏步模型,在整体豚鼠上实验,观察电刺激 A_(9.0—3.0),R_(0.5—3.5),H_(8—0)(Tindal,1965)间对踏步的影响。结果表明,在豚鼠上丘下面的 A_(6.0—5.0),R_(1.0),H_(4.0)区域存在一个主要兴奋前肢踏步的“中脑踏步易化区域”。同时也观察到下丘下面的网状结构中有一个明显增强后肢踏步的区域。     

诱发踏步物质和中枢运动控制

1980年发现若干4-R-咪唑啉衍生物能在豚鼠等四足动物诱发规律的“踏步自动作用”(stepping automatism);1983年在上海将这些物质命名为“诱发踏步物质”(substances capable of inducing stepping,SIS)。X光电影的分析表明,SIS诱发的“踏步周期”相似于四足动物的正常踏步运动。SIS仅强抑制α-运动神经元的兴奋性突触后电位,对抑制性突触后电位无影响。SIS还能在麻雀等两足动物诱发拍翅飞行运动。     

多巴脱羧酶及其与神经类疾病的关联性研究进展

多巴脱羧酶(dopa decarboxylase,DDC)又称作芳香族L-氨基酸脱羧酶,是儿茶酚胺生物合成途径中重要的酶之一,具有多种生物学功能。多巴脱羧酶可分别催化L-3,4-二羟基苯丙氨酸(L-多巴)和L-5-羟色氨酸合成两种神经递质多巴胺和五羟色胺。多巴胺和五羟色胺在脊椎动物和无脊椎动物的生殖、发育、行为和免疫应答过程中均具有重要作用。此外,它还与多种神经类疾病和社会行为有关。多巴脱羧酶一般以二聚体的形式存在于哺乳类和昆虫的多种神经和非神经组织中。本文从多巴脱羧酶的结构、催化机制、与神经类疾病及其攻击性社会行为的关联性研究进展等方面进行了综述。     

咪达氟对兔脑5-羟色胺释放和多巴胺含量的影响

1.用~3H-5-羟色胺脑室灌流清醒动物的方法,测定了脑内5-羟色胺的释放。实验结果表明,给兔静注咪达氟(4mg/kg)后,因动物挣扎引起5-羟色胺释放加强,可能咪达氟不直接加强兔脑5-羟色胺的释放。因此,必须指出,在用清醒动物脑室灌流的方法研究药物对神经递质释放是否有影响时,必须考虑到清醒动物的活动状态。2.用荧光方法测定了多巴胺含量。实验结果表明,给兔静注眯达氟(4或8mg/kg)以后10分钟,颈部和前肢产生明显肌松时海马中多巴胺含量虽有增加的趋势,但无统计学意义,尾核中多巴胺含量基本不变。因此,可以认为咪达氟所引起的肌肉松弛可能与脑内多巴胺含量关系不大。     

香石竹叶片离体再生体系的建立

以香石竹(Dianthus caryophyllus Linn.)无菌苗叶片为外植体,从不同细胞分裂素及其他激素配合使用等方面进行筛选,建立香石竹叶片离体再生体系.结果表明,不同的细胞分裂素影响叶片不定芽分化频率,其中较低浓度的6-BA(0.5 mg·L-1)和TDZ(0.001 mg·L-1)配合使用能有效诱导香石竹叶片不定芽分化;添加一定浓度的PP333(4 mg·L-1)可提高叶片不定芽分化频率和平均芽数.香石竹叶片不定芽分化的适宜培养基为:MS 0.002mg·L-1TDZ 0.5 mg·L-16-BA 0.2 mg·L-1IAA 4 mg·L-1PP333;壮苗培养基为:MS 0.2 mg·L-1 6-BA 0.2 mg·L-1IAA;生根培养基为:1/2 MS.不定芽诱导频率达到42.61%,平均芽数为4.53个.     

新多巴胺受体阻滞剂——四氢小檗碱对大鼠纹状体内乙酰胆碱含量的影响

作者证实四氢小檗碱(THB)很可能是一种新的多巴胺受体阻滞剂。大鼠腹腔注射100mg/kgTHB,纹状体内 ACh 含量与对照相比(47.9Pmol/mg组织,P<0.01)下降27.8%,相同剂量左旋四氢巴马汀(l-THP)可下降54.5%。腹腔注射典型的多巴胺受体阻滞剂氟哌啶醇5mg/kg下降45.1%。但在海马中上述三种药物均未见 ACh 含量的改变。结果再次提示:THB 和/l-THP 与氟哌啶醇相似,都具有多巴胺受体阻滞剂的作用特性。     

多巴胺对大鼠背角WDR神经元的抑制不被酚妥拉明和纳洛酮所拮抗

本实验用微电极细胞外记录方法研究了脊髓局部应用多巴胺对大鼠背角WDR神经元的抑制作用。实验在43只SD大鼠上共记录到54个WDR神经元。多巴胺的剂量从0.26×10~(-6)mol/kg-1.58×10~(-6)mol/kg逐步增加,其对伤害性经皮电刺激诱发的背角神经元后串放电的抑制作用也随之加强;0.52×10~(-6)mol/kg多巴胺的作用在给药后5min即出现,15min达高峰并在此后的25min基本维持在同一水平,这个作用可被静注多巴胺能受体拮抗剂氟哌啶(0.66×10~(-6)mol/kg)完全翻转,而不受静注酚妥拉明(2.65×10~(-6)mol/kg)和纳洛酮(1.37×10~(-6)mol/kg)影响。上述结果表明,多巴胺可能是参与脊髓水平伤害性信息传递调控的另一单胺类神经递质。     

侧脑室注射胰高血糖素对兔血浆自由脂肪酸、血糖及胰岛素浓度的影响

胰高血糖素是一种脑-肠肽,但它在脑中的生理作用尚不清楚。本工作在家兔侧脑室埋藏慢性套管,并通过注射20μl含0.5—5μg的胰高血糖素溶液,在注射后的15、45、75、105分钟各取血样测定血糖、血浆自由脂肪酸(FFA)和胰岛素的浓度。结果发现:(1)对血糖及血浆胰岛素浓度无明显影响;(2)能引起血浆 FFA 浓度降低,且与剂量有依赖关系,在注射后的45分钟,FFA 降低最明显,以后逐渐恢复;(3)皮下注射阿托品(0.2mg/kg)或静脉注射酚妥拉明(5mg/kg)均不能消除侧脑室注射胰高血糖素降低 FFA 的作用;(4)静脉注射心得安(5mg/kg)能阻断侧脑室注射胰高血糖素的降低 FFA 的作用。这似表明脑中的胰高血糖素可能参与脂代谢的调节,并可能是通过肾上腺素β-受体起作用的。     

色钉菇粗多糖对小鼠DA能神经元MPTP损伤的保护作用

以C57BL/6J小鼠为实验材料,研究色钉菇粗多糖对多巴胺能神经元损伤的保护作用,并用体外实验方法测定其抗氧化活性。用MPTP（1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶）方法复制了帕金森病小鼠模型,模型复制前,预先给予小鼠100mg/kg、200mg/kg、400mg/kg不同剂量的色钉菇粗多糖,通过行为学检测方法和免疫组化技术观察小鼠的行为变化以及黑质中多巴胺能神经元的数量变化;用抑制小鼠肝脂质过氧化能力的方法测定色钉菇粗多糖的抗氧化活性。结果显示,预先给予200mg/kg和400mg/kg剂量的色钉菇粗多糖能显著地改善帕金森病模型小鼠的行为症状,并能显著地降低MPTP所致的小鼠多巴胺能神经元的凋亡,这可能与该多糖的抗氧化活性有关。提示色钉菇多糖有开发成防治帕金森病药物的应用前景。     

常咯啉与奎尼丁治疗实验性心律失常的比较

本文在三种室性和一种房性心律失常的动物模型中,比较了常咯啉与奎尼丁的防治作用。又在大鼠坐骨神经上,比较了二药的局麻强度。静脉注射奎尼丁2.4—9.6mg/kg 对大鼠静脉注射乌头碱20μg/kg 引起室性心律失常的时间没有推迟作用,而常咯啉5mg/kg 能明显推迟。在大鼠静脉注射 BaCl_2 4mg/kg 引起的室性心律失常中,静注常咯啉10mg/kg 维持正常窦性律的时间是1.8±1.6分,而静注奎尼丁4.8mg/kg 维持窦性律时间是0.2±0.6分。常咯啉抗BaCl_2心律失常的效果明显优于奎尼丁(P<0.01)。静注奎尼丁4.8mg/kg 不能提高豚鼠哇巴因中毒引起的室速和室颤阈值,仅提高室早阈值,而常略啉10mg/kg 能提高所有三个室性律阈值。在 Ach 诱发狗的房颤实验中,静注奎尼丁和常咯啉各6mg/kg 都能对抗 Ach 房颤,而且常咯啉比奎尼丁作用更强。在等毒性剂量比较下,奎尼丁是一个强的局麻药,而常咯啉则否。     

洋桔梗的组织培养(摘编)

洋桔梗(Eustomasp.)日本品种“asukanosora”叶片愈伤组织诱导培养基:(1)MS 6-BA1.0mg.L-1(单位下同) NAA0.2,(2)MS 6-BA0.5 NAA0.2,(3)MS KT2.0 IBA0.5,(4)MS KT1.0 IBA0.5;分化培养基:(5)MS 6-BA1.0 NAA0.08,(6)MS 6-BA0.1,(7)MS KT1.0 IBA0.5;生根培养基:(8)1/2MS NAA0.2,(9)1/2MS IBA0.5。各种培养基均附加3%糖、0.8%琼脂粉,pH5.8～6.0。培养温度为(25±2)℃,光照16h.d-1,光照度2000lx。收稿2002-11-25修定　2003-07-15*通讯作者(E-mail:lwang2001@elong.com,Tel:028-84515754)。新长出的幼嫩叶片经水冲洗干净…     

冬枣的离体繁殖(摘编)

培养基:(1)MS+6-BA 3 mg·L-1(单位下同)+NAA 0.5;(2)MS+6-BA 2+NAA 0.5;(3)1/2MS+0.2 ABT(生根粉);(4)1/2MS+0.5 ABT.     

白玉兰的组织培养和快速繁殖

1植物名称白玉兰(Magnolia denudata). 2材料类别休眠顶芽. 3培养条件芽诱导增殖培养基:(1)MS 6-BA 0.2mg·L-1(单位下同) NAA 0.05,(2)MS 6-BA0.5 NAA 0.05,(3)MS 6-BA 1.0 NAA 0.05,(4)MS 6-BA 0.2 NAA 0.1,(5)MS 6-BA 0.5 NAA0.1,(6)MS 6-BA 1.0 NAA 0.1,(7)MS 6-BA2.0 NAA 0.05;诱导生根培养基:(8)1/2MS IBA0.2,(9)1/4MS IBA 0.5.以上培养基加0.7%琼脂、100mg·L-1肌醇,蔗糖除生根培养基为20 g·L-1外其余均为30 g·L-1,pH 5.8.培养温度20～28℃,光照度1 500～2500 lx,光照时间9～11 h·d-1.     

芨芨草愈伤组织器官发生及植株再生

芨芨草(Achnatherum splendens(Trin.)Nevski)种子消毒并在MS培养基上萌发获得无菌苗,以幼苗的叶鞘和胚轴为外植体诱导愈伤组织,经继代后进一步诱导不定芽及生根.研究结果表明,诱导愈伤组织最适合的培养基为B5 1.5 mg·L-12,4-D 0.5 mg·L-1NAA;诱导芽分化较适合的培养基为B5 0.5 mg·L-1 6-BA 0.2 mg·L-1 NAA;1/4B5 1.0 mg·L-1NAA 0.2 mg·L-1 IBA 1.0 g·L-1活性炭培养基则有利于芨芨草试管苗的生根.本实验建立了完整的芨芨草植株再生体系,移栽成活率高.     

小叶地不容离体培养与植株再生

1 植物名称小叶地不容(Stephania succifera H.S.Lo et Y.Tsoong). 2 材料类别茎段. 3 培养条件基本培养基含大量元素减半的MS(1/2MS).茎段培养基:(1)1/2MS,(2)1/2MS 6-BA 0.5mg·L-1(单位下同),(3)1/2MS 6-BA 2.0,(4)1/2MS 6-BA 5.0,(5)1/2MS 6-BA 0.5 NAA 0.2,(6)1/2MS 6-BA 2.0 NAA 0.2,(7)1/2MS 6-BA 5.0 NAA 0.2;侧芽增殖培养基:(8)1/2MS 6.BA 2.0 NAA 0.2 0.5g·L-1活性炭;生根培养基:(9)1/2MS IBA 1.0 0.5g·L-1活性炭.     

杏黄兜兰胚培养与快速繁殖

1植物名称杏黄兜兰(Paphiopedilum armeniacum). 2材料类别蒴果内的胚. 3培养条件(1)播种培养基(液体浅层静置培养):1/4MS 1 g·L-1胰蛋白胨 15%(V/V)椰乳 KT 0.5mg·L-1(单位下同) 15 g·L-1蔗糖 1 g·L-1活性碳;(2)增殖培养基:1/3MS 2 g·L-1胰蛋白胨 10%(V/V)椰乳 6-BA 1 Ad 5 NAA 0.5 20 g·L-1蔗糖;(3)原球茎分化培养基:MS 2 g·L-1胰蛋白胨 6-BA 0.5 NAA 0.2 20 g·L-1蔗糖;(4)壮苗及生根培养基:1/2MS 3 g·L-1胰蛋白胨 NAA 1 6-BA 0.2 10%(W/V)香蕉泥 20 g·L-1蔗糖 1 g·L-1活性碳.以上培养基pH均为5.2～5.4,培养温度为(25±2)℃.     

芨芨草愈伤组织器官发生及植株再生

芨芨草(Achnatherum splendens (Trin.) Nevski)种子消毒并在MS培养基上萌发获得无菌苗, 以幼苗的叶鞘和胚轴为外植体诱导愈伤组织, 经继代后进一步诱导不定芽及生根。研究结果表明, 诱导愈伤组织最适合的培养基为B5+1.5 mg.L-12,4-D+0.5 mg.L-1 NAA; 诱导芽分化较适合的培养基为B5+0.5 mg.L-1 6-BA +0.2 mg.L-1 NAA; 1/4 B5+1.0 mg.L-1 NAA+0.2 mg.L-1 IBA +1.0 g.L-1活性炭培养基则有利于芨芨草试管苗的生根。本实验建立了完整的芨芨草植株再生体系, 移栽成活率高。     

氟胺氰菊酯对西方蜜蜂育王质量的影响

【目的】本实验旨在研究3个低浓度氟胺氰菊酯对西方蜜蜂Apis mellifera育王质量的影响。【方法】控制蜂王产卵8 h,孵化后进行人工育王,从移虫第2天起每天用微量进样器分别给王台中小幼虫饲喂2μL含有0.05,0.5和5 mg/kg氟胺氰菊酯的糖水,以饲喂纯糖水作为对照组并进行标记。连续饲喂3 d后,记录王台的封盖数,待蜂王出房时,统计出房数,测其初生重、胸宽;利用实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测蜂王卵巢中卵黄蛋白原基因(Vg)、储存蛋白基因(hex110和hex70b)的相对表达量。【结果】5 mg/kg氟胺氰菊酯处理组王台封盖率显著低于0.05和0.5 mg/kg剂量组及对照组,但后3组之间差异不显著;5 mg/kg和0.5 mg/kg剂量组蜂王出房率显著低于0.05 mg/kg剂量组及对照组;4个试验组之间蜂王初生重及胸宽差异不显著。qPCR结果显示,5mg/kg剂量组蜂王卵巢中Vg和hex110基因的相对表达量均显著低于0.05和0.5 mg/kg剂量组及对照组,但后3组之间差异不显著;0.5 mg/kg剂量组和5 mg/kg剂量组蜂王卵巢hex70b基因相对表达量显著低于对照组,但0.05 mg/kg剂量组蜂王卵巢hex70b基因相对表达量与0.5和5 mg/kg剂量组及对照组均差异不显著。【结论】本研究结果说明,食物中氟胺氰菊酯含量超过0.5 mg/kg时,会影响西方蜜蜂育王培育质量。