小鼠小肠大剂量γ线照射的剂量-效应关系

三种不同种系的雄性、10周龄小白鼠于~(60)Coγ线照射10～100戈瑞(组距10戈瑞)72小时后活杀取出整个小肠,进行了小肠的长度、面积、重量的测量和全小肠纵切面切片中隐窝的计数。将上述指标的测量数据进行了统计学处理,并各配合了一条两项式的指数方程曲线。这些剂量-效应曲线都具有共同的双相性特点:即在饱和剂量(约为20戈瑞)以下时曲线较陡,而超过该剂量后曲线平直。在全小肠的纵切面切片中直接计数隐窝的方法,未见类似报道,文献中也无关于小肠面积在电离辐射作用后变化的观察。这两者都是对电离辐射的作用较为敏感的指标,操作简便,且均可进行较为精确的测量。     

核桃低聚肽对辐射小鼠小肠损伤的保护作用

目的：探讨核桃低聚肽（walnut oligopeptides，WOPs）对辐射小鼠小肠损伤的保护作用。方法：将96只SPF级雌性BALB/c小鼠随机分为6组：空白对照组、模型对照组、乳清蛋白组（0.44g/kg）、3个WOPs组（0.22、0.44、0.88g/kg），再将每组随机分为2个亚组。连续饮水干预不同溶液第14天，除空白对照组外所有小鼠全身照射3.5Gy剂量60Co-γ射线，分别在辐射后第3天和第14天采用ELISA法检测小鼠血清脂多糖（LPS）、二胺氧化酶（DAO）、D-乳酸水平，对小鼠十二指肠、空肠和回肠进行HE染色，观察其损伤情况，并用ImageJ软件测量绒毛长度和隐窝深度。结果：辐射改变了小肠形态结构，显著降低了绒毛长度，增加了隐窝深度及血清LPS、DAO、D-乳酸水平（P＜0.05）。与模型对照组相比，预先补充或后期继续干预乳清蛋白和WOPs不同程度地改善了辐照小鼠小肠形态结构。辐射后第3天，与模型对照组相比，WOPs各剂量组小鼠小肠各肠段绒毛长度显著增高（P＜0.05），隐窝深度、血清LPS水平、血清DAO水平及血清D-乳酸水平显著降低（P＜0.05）。辐射后继续干预乳清蛋白及WOPs至辐射后第14天，与模型对照组相比，WOPs中、高剂量组小鼠小肠各肠段绒毛长度显著增加（P＜0.05），隐窝深度、血清LPS水平及血清DAO水平均显著降低（P＜0.05），血清DAO水平则是WOPs低、中剂量组显著降低。辐射后第3天和第14天，乳清蛋白组的效果均不显著。结论：WOPs对辐射小鼠小肠损伤具有良好的保护作用。     

牦牛肠源Lactobacillus acidophilus L3对其小肠黏膜形态结构的影响

为了探讨牦牛肠源嗜酸乳杆菌Lactobacillus acidophilus L3对牦牛小肠肠道黏膜形态结构的影响,将10头健康牦牛(2~2.5岁)随机分为2组,分别为益生菌组和空白对照组,益生菌组在饲料中添加2×109CFU·kg-1L.acidophilus L3,饲喂28 d后取其小肠组织样品,采用组织学和显微测量学方法对益生菌组和空白对照组牦牛小肠绒毛高度、隐窝深度、绒毛高度/隐窝深度比值(V/C),以及回肠黏膜淋巴集结厚度进行测量和统计分析。研究结果显示,益生菌组牦牛十二指肠、空肠、回肠绒毛高度均较空白对照组显著增加,隐窝深度降低,V/C值增加,差异有统计学意义(P<0.05)。通过对回肠淋巴集结的测量发现,益生菌组牦牛回肠淋巴集结的平均厚度均较空白对照组显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。研究结果表明,牦牛肠源L.acidophilus L3可有效改善其肠道黏膜结构,增强肠道黏膜免疫效应部位的免疫功能。     

交感神经对青年和老龄小鼠肠道上皮细胞增殖和抗氧化功能的影响

目的 探讨交感神经对青年和老龄小鼠小肠上皮细胞增殖的影响。方法 腹腔注射6-羟多巴胺(6-OHDA)阻断交感神经,用石蜡组织切片和HE染色检测绒毛长度、隐窝深度及两者比值,用免疫组织化学检测增殖细胞核抗原(PCNA)在肠腺中的表达,用试剂盒检测总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)等指标。结果 化学性阻断交感神经,在3月龄和18月龄鼠中小肠绒毛长度、V/C比值、小肠肠上皮细胞PCNA表达水平均下降显著,小肠SOD、T-AOC降低,MDA升高。结论 交感神经均能促进3月龄和18月龄鼠小肠上皮细胞的增殖,其中对3月龄小鼠的作用大于18月龄小鼠。     

电离辐射对大鼠小肠吸收酪氨酸的影响及其机制的初步探讨

用在体方法研究电离辐射后大鼠小肠吸收酪氨酸(Tyr)的变化并对其机制进行了初步探讨。结果说明,以较低剂量6Gyγ线照射后第3天,出现暂时Tyr吸收障碍,以后很快恢复,并持续在正常水平。随照射剂量的增加,吸收障碍加重,3Gy以下照射,则不出现Tyr吸收障碍。6Gy照射后早期及不同剂量照射后第3天,肠上皮细胞计数及空肠和血浆的二胺氧化酶(DAO)活性变化与肠吸收Tyr的变化有较好的一致关系,表明肠上皮的损伤是引起照射后吸收障碍的原因之一。提示DAO活性也是能反映肠道辐射损伤的一个较敏感指标。实验还测定了小肠粘膜Na~ ,K~ -ATP酶活性以及用加入葡萄糖后的小肠壁电位差和短路电流的增加幅度来判断Na~ 的跨膜转运情况,说明Na~ ,K~ -ATP酶活性下降及Na~ 转运障碍也是引起肠吸收Tyr障碍的原因。     

不同剂量炔雌醚对雄性小鼠繁殖生理的作用

为探究不同剂量炔雌醚作用于雄性昆明小鼠时,对小鼠的繁殖生理指标的影响,现将18只雄性昆明小鼠分为3组:对照组(C组)、10 mg/kg给药组(E10组)、20 mg/kg给药组(E20组)进行实验。在给药后第6天进行剖检,测量其繁殖器官重量及血清睾酮浓度,观察其睾丸组织形态切片。结果发现,两给药组繁殖器官重量与对照组相比无明显差异;(E10组)血清睾酮浓度有所上升,(E20组)无明显变化;(E20组)曲细精管受到一定程度的损伤,而(E10组)的损伤不明显。因此,高浓度的炔雌醚可能对雄性昆明小鼠有更好的抗生育作用。本研究为进一步明确炔雌醚对鼠类不育控制的最佳浓度提供了一定的理论依据。     

ToxoDB#17型弓形虫感染小鼠引起小肠潘氏细胞溶菌酶缺失

为探究Toxo DB#17型弓形虫对昆明小鼠小肠潘氏细胞(Paneth cells,PCs)溶菌酶的表达及小肠病理损伤特点,该研究以8周龄小鼠为研究对象,灌胃1×106个Toxo DB#17型弓形虫卵囊,分别在灌胃后6 HAI(hours after inoculation)、1 DAI(day after inoculation)、3 DAI、8 DAI取小肠各段,常规方法制作石蜡切片,HE和免疫组化染色,研究小肠病理损伤、虫体分布、潘氏细胞及溶菌酶表达特点。结果显示,小鼠弓形虫感染率为100%,弓形虫虫体抗原分布随时间延长呈增多趋势(P0.05),小肠的病理损伤随着弓形虫感染时间的延长,未见明显变化。小肠隐窝数、含潘氏细胞隐窝数、PCs总数和颗粒总数的变化总趋势呈现先减少后增加再减少的趋势,3 DAI数量较多(P0.05),潘氏细胞颗粒未观察到溶菌酶阳性染色反应。以上结果表明,Toxo DB#17型弓形虫抑制潘氏细胞溶菌酶的表达,对肠道损伤较轻,潘氏细胞及其分泌颗粒对弓形虫有应答反应,溶菌酶的缺失与Toxo DB#17型弓形虫成功入侵肠道有关。     

猕猴发育过程中肠肝组织生长抑素及其受体表达演变规律

探讨在猕猴发育过程中生长抑素(somatostatin,SST)及其受体在肠肝组织的演变规律。通过手术途径获得胚胎6月、新生2 d、新生45 d和成年猕猴的回肠、肝脏、门静脉和外周血等标本。应用放射免疫分析法测定各标本中的SST含量; 通过免疫组化方法观察SST在肠、肝组织内的分布;利用原位杂交检测SST受体2(somatostatin receptor 2,SSTR2)的表达。结果显示:(1)胚胎6月的猕猴,小肠内SST含量为(27．3±16．6)ng／mg蛋白;黏膜隐窝处SST呈弱阳性染色,肌层 SST染色阴性。在发育过程中,小肠内SST含量逐渐增加,成年期时达最高水平(120．1±35．3)ng／mg蛋白,较胚胎6月显著增加(P<0．01)。(2)成年小肠黏膜隐窝处及肌间神经丛SST呈强阳性染色。(3)胚胎6月,小肠粘膜上皮可见大量SSTR2 表达,成年时SSTR2表达下调,且主要定位于腺上皮隐窝处;胚胎及新生期肌层SSTR2染色阴性,成年时小肠肌间神经丛则可见阳性SSTR2染色。(4)肝脏在发育过程中SST及SSTR2含量逐渐降低;发育的各个时期,小肠组织的SST含量均明显高于肝脏组织含量,门静脉SST水平也始终高于外周血。总之,位于小肠黏膜隐窝处的SST和SSTR2随着发育逐渐增加,来自肠道的SST进入门静脉后迅速被降解。SST阳性的肠肌间神经丛仅在发育成熟后才出现。     

丙线照射后小鼠小肠ACh含量ChE活性变化及其原因的初步探讨

本文观察了电离辐射后小鼠小肠组织中ACh含量,ChE活性变化,并对其机制进行探讨,结果如下; 1.丙线照射后小鼠小肠ACh含量增加,ChE活性降低。其变化程度与照射剂量和照后时间有关。一定剂量范围内,照射剂量愈大,ChE活性愈低,ACh含量愈高。 2.照射后小肠粘膜脱落是ChE活性降低的主要原因,ACh含量增加除因ChE活性降低外,ChAT活性增高也许是ACh含量增高的主要原因。     

潘氏细胞在昆明小鼠弓形虫病发病过程中的变化

每只昆明小鼠灌胃1×104个弓形虫卵囊,分别在灌胃后1,3,5,6 DAI(days after inoculation),采用HE方法和免疫组织化学方法对小鼠回肠潘氏细胞的变化以及弓形虫在回肠的分布和数量进行研究,探讨潘氏细胞(paneth cells,PCs)在小鼠弓形虫病感染期间的变化。结果发现,回肠隐窝总数、含PCs的隐窝数、PCs总数及颗粒总数呈先增加后迅速减少至消失的趋势,回肠后段表现明显,6 DAI各参数与对照组比较差异显著(P0.05)。弓形虫在回肠中的分布面积呈增大趋势,6 DAI与1 DAI、3 DAI相比差异显著(P0.05)。该研究结果表明,弓形虫卵囊感染昆明小鼠可减少回肠潘氏细胞及其分泌颗粒的数量,为以小肠潘氏细胞为基础的弓形虫病的防治提供了实验依据。     

溴隐亭和巴氯芬对吗啡诱导成瘾后戒断症状的协同抑制作用

皮下递增注射吗啡(25、50、75、100、125、150mg/kg)建立小鼠身体依赖动物模型,把6mg/kg纳络酮作用下的小鼠跳跃症状作为成瘾后戒断的行为学观测指标,检测DA受体激动剂溴隐亭和GABAB受体激动剂巴氯芬对戒断行为的影响;同时进一步研究激动二受体在戒断过程中的作用。结果表明:溴隐亭低剂量(10mg/kg)无抑制戒断症状的作用,中、高剂量(20、30mg/kg)能够明显抑制戒断症状;巴氯芬低、中剂量(0.5、1.0mg/kg)无抑制戒断症状的作用,高剂量(1.5mg/kg)则可以抑制戒断症状的作用。当无抑制作用剂量的溴隐亭(10mg/kg)和巴氯芬(1.0mg/kg)联合应用时能够明显抑制小鼠的戒断症状,说明此二受体在吗啡成瘾后戒断期间功能上具有协同作用,能够很好地抑制纳络酮诱导的成瘾小鼠跳跃症状。     

灌胃不同剂量钙对大肠肿瘤模型大鼠肿瘤及血氨基酸的影响的实验研究

目的:研究不同口服剂量钙对大肠肿瘤和血清中氨基酸代谢的影响。方法:50只雄性Wistar大鼠适应性喂养一周后随机分为5组每组10只,碳酸钙灌胃6个月。对照组(钙摄入量0.5 g/kg/d)、模型对照组(钙摄入量0.5 g/kg/d)、低剂量钙组(钙摄入量1.0 g/kg/d)、中剂量钙组(钙摄入量1.5 g/kg/d)和高剂量钙组(钙摄入量2.0 g/kg/d)。模型对照组及低中高钙剂量组在实验的第2周开始,颈部皮下连续注射二甲基肼20周进行大肠肿瘤造模。大鼠解剖后观察肿瘤数量和直径,亚甲蓝染色观察大肠内异常隐窝(ACF)数量,HE染色观察腺癌发生情况。液相色谱-质谱联用检测大鼠血液中相关氨基酸含量。结果:从第20周开始,与模型组相比,中剂量钙组的体重增加,有显著性差异(P0.05)。在肿瘤数、肿瘤发生率、肿瘤平均直径和肠重这些指标中,中剂量钙组和高剂量钙组均显著低于模型对照组(均P0.05)。病理组织学结果显示,正常对照组未见任何组织增生,模型对照组以腺瘤为主,出现小部分腺癌。而其余各组均以腺瘤为主,未出现腺癌。与模型对照组相比,中剂量钙组的谷氨酸、谷氨酰胺、鸟氨酸均显著升高。结论:钙灌胃对大鼠大肠肿瘤发生具有抑制作用,血清中谷氨酸、谷氨酰胺和鸟氨酸的代谢发生变化。     

胰高血糖素样肽-2对小鼠小肠缺血/再灌注损伤的保护作用

目的:观察胰高血糖素样肽-2(GLP-2)对缺血/再灌注损伤小鼠小肠的保护效应.方法:采用肠缺血/再灌注(I/R)模型,将32只小鼠随机分为4组(n=8)假手术(Sham)组、I/R组、I/R GLP-2保护组和I/R 谷氨酰胺(GLN)阳性对照组.光镜观察小肠黏膜形态学改变.检测小肠绒毛高度和隐窝深度;小肠组织二胺氧化酶(DAO)活性;肠系膜淋巴结(MLN)细菌易位率.结果:与假手术组相比,I/R组部分小肠绒毛坏死脱落,绒毛高度下降,隐窝变浅(P＜0 01);小肠组织DAO活性降低(P＜0.01);MLN细菌易位率增加(P＜0.05).与I/R组比,GLP-2组肠绒毛损害明显减轻,DAO活性回升(P＜0.01),细菌易位率回降(P＜0.05).结论:GLP-2对缺血/再灌注损伤小鼠小肠的形态结构及肠屏障功能具有保护作用.     

微波辐射加热对潘氏细胞染色的影响

潘氏细胞(Paneth Cell)是小肠腺的特征细胞,该细胞有合成分泌蛋白质的特点,其分泌颗粒含有防御素(defensin,又称隐窝素Chyntdin)、溶菌酶,释放后对肠道微生物有杀灭作用[1];同时亦有吞噬功能.潘氏细胞含有的分泌颗粒通常可用酸性染料如焰红(Phloxine)、伊红或橘黄G染色[2],其中以焰红染色效果最佳.     

两性霉素B联合氟康唑治疗艾滋病合并新型隐球菌性脑膜脑炎的疗效预测因素分析

目的:探讨两性霉素B联合氟康唑治疗艾滋病合并新型隐球菌性脑膜脑炎(简称"艾滋病合并隐脑")的疗效预测因素。方法:回顾性收集2010年1月1日-2016年12月31日58例在首都医科大学附属北京佑安医院住院治疗且接受两性霉素B联合氟康唑治疗的艾滋病合并隐脑患者的临床资料,分析其疗效预测因素及预测价值。结果:根据预后将患者分为好转组(38例)和死亡组(20例),单因素分析结果显示两组之间CD4+T细胞计数、脑脊液细胞计数比较有统计学差异(P分别为0.032,0.001)。Logistic回归多因素分析结果显示脑脊液细胞计数是两性霉素B联合氟康唑治疗艾滋病合并隐脑的疗效预测因素(P=0.023),Exp(B)=1.01,95%置信区间为1.00-1.03。ROC曲线对脑脊液细胞计数的预测价值进行分析,结果显示曲线下面积为0.889,预测阈值为261个/mm3,对应的敏感性=0.684,特异性=1.0。结论:脑脊液细胞计数是两性霉素B联合氟康唑治疗艾滋病合并新型隐球菌性脑膜脑炎良好的疗效预测参考因素。     

小鼠小肠类器官体外培养体系的建立与应用

目的建立一种研究肠上皮细胞的体外模型—小肠类器官培养体系,探索其相关病理检测技术方法,为肠道相关疾病的体外研究提供便利平台。方法将小鼠肠上皮隐窝分离并培养成小肠类器官,体外模拟肠上皮的生长发育过程。通过制作石蜡切片,探索应用免疫组化技术以及基于基质胶中类器官三维水平免疫荧光技术对相应的增殖与分化信号进行检测。结果探索并建立了小肠类器官体外培养体系,应用石蜡切片免疫组化技术与三维水平免疫荧光技术能够准确检测小肠上皮结构的生长发育状态。结论小肠类器官体外培养体系的建立与免疫检测技术的应用,将逐渐使其成为人们研究肠道相关疾病最为有利的技术手段。     

人溃疡性结肠炎与大鼠模型的组织病理学变化比较及机制探讨

目的对葡聚糖硫酸钠(DSS)复制大鼠溃疡性结肠炎(UC)与人UC大肠黏膜组织病理学变化进行比较,并探讨其机制。方法 SPF级SD雄性大鼠20只,分为正常组和模型组(自由饮用5%DSS)各10只,观察大鼠一般情况、大肠外观及黏膜组织病理学变化;选取我院9例人UC做对照。结果 DSS模型与人UC共同病变为大肠黏膜隐窝炎、隐窝脓肿、结构紊乱及萎缩、糜烂及溃疡等;不同之处为:DSS模型早期病变始于固有膜下1/3隐窝萎缩消失,逐渐发展至全层隐窝消失,间质以巨噬细胞为主,未见浆细胞,然后表面上皮变性坏死脱落、糜烂溃疡形成,多个血管腔内可见血栓,偶见机化,腺体不典型增生发生率低;而人UC早期病变始于表面上皮及上1/3隐窝急性炎,隐窝破坏萎缩与隐窝脓肿明显相关,均伴慢性肠炎基础病变及腺体不典型增生,偶见血栓伴/不伴机化。结论二者的共同点为大肠黏膜隐窝干细胞损伤,不同点为DSS首先损伤隐窝干细胞,炎症是继发,而人UC则相反,如采用该模型研究药物疗效及其机制需辨证分析其结果。     

在体分离小鼠小肠隐窝、绒毛上皮细胞的生化完整性研究

目的:检测低温条件下用螯合剂沉淀法分离的小鼠小肠上皮隐窝和绒毛细胞是否具有生化完整性.方法:使用螯合剂在低温(冰浴)条件下分离和富集小肠上皮绒毛和隐窝细胞;抽提DNA、RNA和总蛋白,用电泳的方法检测完整性;用Real-time PCR检测溶菌酶Lysozyme的表达以判断隐窝、绒毛细胞富集程度.结果:低温条件下分离的肠上皮隐窝、绒毛细胞形态完整;基因组DNA完整,未出现明显的DNA ladder现象;富集细胞的RNA完整;富集隐窝、绒毛细胞的蛋白未降解,两组总蛋白具有表达谱差异性;隐窝细胞富集物溶菌酶mRNA表达水平较绒毛细胞富集物高30倍以上.结论:小肠隐窝绒毛的生物学性状可在低温螯合剂沉底法分离过程中得到保存,提示此方法可以用来分析生理和创伤痛理条件下小肠上皮基因和蛋白表达改变.     

溴隐亭对小鼠生育的影响及其作用机理

为研究溴隐亭对小鼠妊娠及免疫系统的影响,于孕5-7d皮下注射不同剂量溴隐亭,孕10d剖杀,统计流产率和平均胚胎数,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清及子宫匀浆中催乳素、孕酮、干扰素γ(IFNγ)、白介素10(IL10)的含量。结果显示:小鼠流产率随溴隐亭剂量的增加而升高,0.075mg溴隐亭组的流产率为75%,平均胚胎数为2.167±4.064只;0.1mg和0.2mg组均为100%流产,与对照组比较差异显著;随着溴隐亭剂量的增加,血清及子宫组织中IFNγ含量上升,催乳素、孕酮及IL10含量下降。提示溴隐亭具有致小鼠流产的作用,此流产模型与习惯性流产(RSA)都具有偏向Th1型细胞免疫反应的特点,为研究母胎界面的免疫关系提供了实用的动物模型.     

两种手术方式治疗Krouse分级T2、T3上颌窦内翻性乳头状瘤的疗效及对炎性应激指标的影响

目的:对比鼻内镜下经泪前隐窝入路、鼻内镜下中下鼻窦道开窗术两种手术方式治疗Krouse分级T2、T3的上颌窦内翻性乳头状瘤的疗效及对炎性应激指标的影响。方法:回顾性分析50例上颌窦内翻性乳头状瘤患者的临床资料。根据手术方式分成A组(n=26,鼻内镜下中下鼻窦道开窗术)和B组(n=24,鼻内镜下经泪前隐窝入路)。考察两组围术期指标、炎性应激指标[白介素-8(IL-8)、白介素-10(IL-10)、降钙素原(PCT)]、并发症、复发率。结果:与A组相比,B组的术中出血量更少,手术时间、术后鼻腔内创面愈合时间、住院时间更短,术后疼痛程度更轻,组间对比差异有统计学意义(P<0.05)。两组术前、术后1 d、术后10 d的IL-8、PCT水平呈先升高后降低趋势,IL-10呈先降低后升高趋势(P<0.025),B组术后1 d的IL-8、PCT水平低于A组,IL-10水平高于A组(P<0.05)。两组并发症发生率、术后复发率组间对比均无统计学意义(P>0.05)。结论:以鼻内镜下经泪前隐窝入路治疗Krouse分级为T2、T3的上颌窦内翻性乳头状瘤患者,创伤小,术后恢复快,可减轻患者炎性应激,术后并发症少,是治疗上颌窦内翻性乳头状瘤疗效较好的手术方式之一。