玻璃化冻存延期回植技术在大面积皮肤撕脱伤中的应用研究

目的:探讨玻璃化冻存延期回植技术用于大面积撕脱皮肤伤的临床效果。方法:选择2015年6月至2018年6月收治的大面积皮肤撕脱伤的患者16例,根据处理方式分为撕脱皮肤玻璃化冻存二期回植组和撕脱皮肤一期回植组,每组8例患者。皮肤冻存后回植前,采用MTT法检测皮肤活力,比较两组皮片回植后的成活率、感染率、平均住院时间。结果:玻璃化冻存组皮肤冻存后平均活力为92.56%±7.20%,皮片成活率为81.74%±5.78%,感染率12.5%,平均住院时间33.13±3.91 d;一期皮肤回植组皮片成活率21.91%±5.28%,感染率100%,平均住院时间47.50±1.93 d。玻璃化皮肤保存组皮片成活率、感染率、平均住院时间均优于一期皮肤回植组(P0.05)。结论:皮肤玻璃化冻存延期回植技术用于无法一期回植皮肤撕脱伤的临床效果较好。     

VSD负压引流技术结合游离植皮治疗大面积皮肤缺损的 临床疗效研究

目的：研究VSD负压引流技术结合游离植皮治疗大面积皮肤缺损临床疗效。方法：选择2012年4月至2013年10月入我院接受治疗的大面积皮肤缺损患者65例,将其随机分为观察组（35例）与对照组（30例）。观察组患者术前先采用VSD治疗,游离植皮术后继续给予VSD治疗;对照组患者采取打压植皮或传统打包加压治疗。观察和比较两组患者的皮片成活时间、皮片成活率、术后住院治疗时间、换药次数、疼痛评分及家属满意度。结果：观察组患者的皮片成活时间短于对照组、皮片成活率高于对照组、住院时间短于对照组,换药次数少于对照组,两组之间的差异具有统计学意义（P〈0．05）。此外,观察组患者的疼痛视觉模拟评分明显低于对照组,患者家属的满意度评分明显高于对照组,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论：相对于传统的打压植皮或传统打包加压的技术而言,VSD负压引流技术结合游离植皮在治疗大面积皮肤缺损的临床疗效更好,值得在临床上推广使用。     

不同植皮方式修复大面积烧伤创面的临床效果分析

目的:比较邮票植皮、meek植皮以及自体微粒皮移植用于大面积烧伤患者创面修复的临床效果和可行性。方法:回顾性分析我院烧伤科收治的120例大面积烧伤患者的临床资料,根据不同的手术植皮方法分为微粒皮植皮组、Meek植皮组和邮票皮组,每组40例。三组患者入院后均给予常规基础治疗,再根据选择植皮方式的不同实施微粒皮植皮、Meek植皮和邮票皮植皮。对比三组患者的植皮成活率、创面一期愈合率、愈合时间、死亡率、1%烧伤面积(1%TBSA)治疗费用(元)以及康复效果(康复优良率)。结果:邮票皮组植皮成活率明显高于Meek植皮组(P0.05),Meek植皮组植皮成活率明显高于微粒皮植皮组(P0.05)。Meek植皮组和邮票皮组创面愈合时间均明显短于微粒皮植皮组(P0.05)。邮票皮组1%TBSA治疗费用明显低于Meek植皮组(P0.05),Meek植皮组1%TBSA治疗费用明显低于微粒皮植皮组(P0.05)。Meek植皮组和邮票皮组的创面一期愈合率均明显高于微粒皮植皮组(P0.05);Meek植皮组和邮票皮组的死亡率均明显低于微粒皮植皮组(P0.05);meek植皮组的瘢痕最轻,关节功能恢复最好;微粒皮植皮组瘢痕最重,关节功能恢复最差。结论:不同植皮方式用于大面积烧伤创面修复的临床效果各不相同。邮票皮成活率高、抗感染能力强,但扩张比例低,创面愈合效果差;meek皮扩张比例高、康复效果好,但抗感染能力差;微粒皮扩张比例最高,但成活率低,治疗成本高。临床上,应该根据患者的自身情况选择不同的植皮方式。     

小酸浆(Physalis minima L.)茎尖的玻璃化法超低温保存

用玻璃化法超低温保存小酸浆茎尖的结果表明,1 cm的小酸浆茎段放在改良MS培养基上室温预培养3 d后.切取2mm长的茎尖放在0℃条件下用100%PVS2溶液中处理70min.快速投入液氮保存,1 d后取出.于40℃恒温水浴中化冻2～3min后用含1.2mol·L-1蔗糖的改良MS培养液洗涤30min,接种于再生培养基上暗培养7d再转接至正常光照35μmol·m-2·s-1条件下,成活率可达36.0%,再生植株生长正常.     

封闭式负压引流术联合自体游离皮片植皮治疗四肢皮肤软组织感染创面的疗效观察

探究封闭式负压引流术(VSD)联合自体游离皮片植皮治疗四肢皮肤软组织感染创面的疗效及其对疼痛的影响。方法:选择2018年12月-2020年10月北京积水潭医院收治的四肢皮肤软组织感染创面患者90例,按随机数字表法将其分为对照组和观察组,每组45例。对照组采用传统的治疗方法治疗,观察组采用VSD联合自体游离皮片植皮治疗。对比两组治疗结束后的临床疗效,并观察两组治疗前以及治疗后24 h、3 d的疼痛程度,对比两组一般治疗情况及治疗过程中的不良反应。结果:观察组治疗总有效率为93.33%,显著高于对照组的68.89%,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者在治疗后24 h和3 d的数字疼痛量表(NRS)评分低于治疗前,治疗后3 d NRS疼痛评分低于治疗后24 h(均P<0.05),且治疗后24 h和3 d观察组NRS疼痛评分均显著低于对照组(P均<0.05)。观察组患者并发症的发生率为31.11%,明显低于对照组的57.78%,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组换药频率显著低于对照组,且疼痛暂缓时间、创面愈合时间、住院时间更短,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:VSD联合自体游离皮片植皮有利于提高治疗四肢皮肤软组织感染创面的临床疗效,缓解患者疼痛症状,并降低并发症发生率。     

指端切割伤断离皮片改良缝合原位再植52指体会

目的:介绍指端切割伤断离皮片改良缝合原位再植术的治疗方法、效果和经验总结,分析影响手术疗效的因素.方法:对37例52指指端切割伤断离皮片行改良缝合原位再植.术后随访1～24个月.结果:术后各型指端切割伤断离皮片成活率分别为:Ⅰ型94.7%;Ⅱ型88.2%;Ⅲ68.8%.在指端切割伤断离皮片改良缝合原位再植术式中,其操作简便,疗效确切.虽存在一定的失败风险,但不失为一种积极的治疗方法.结论:只要切割伤离断的皮片仍较完整,而无手术禁忌证,均可予以改良缝合原位再植.彻底的清创、消毒及所植皮片均匀稳定受压、牢固固定,加上感染的预防是成功的关键.     

负压封闭引流技术在躯干部皮肤恶性肿瘤切除术中的应用

目的:探讨负压封闭引流技术应用于躯干部皮肤恶性肿瘤切除术的临床效果,并分析其临床应用价值。方法:回顾性分析2012年5月~2015年3月我院收治的11例躯干部皮肤恶性肿瘤患者的临床资料,均予行肿物切除术并同时行自体皮游离移植术,并外用持续负压封闭引流术于植皮术区。结果:所有患者均接受肿物切除+植皮+封闭负压引流技术治疗。9例患者于4~9天后拆除负压材料,皮片全部成活。1例患者治疗后24小时内吸引管堵塞,经术后于24小时内行管路冲洗疏通后再次行负压吸引,于术后5天首次拆除负压材料,见皮片部分成活,部分皮片仍有浮动,血运未明显建立,予以扩大皮片引流孔后再次行负压封闭引流术,术后9天再次拆除负压材料,见皮片成活较好。1例患者治疗4天后出现新鲜渗血经引流管引出,予拆除负压材料,所植皮片下有积血块,有新鲜渗血,予以清创后再次行负压封闭引流术,术后9天再次拆除负压材料,见皮片成活较好。随访半年到3年,所植皮片无破溃,肿瘤无复发。结论:躯干部皮肤恶性肿瘤切除术中,植皮联合封闭式负压引流技术可使所植皮片固定确实,充分引流渗液积血,利于皮片成活,对无法有效包扎固定肢体特殊部位(肩部、臀部、躯干部)等术区植皮提供了有效方法,具有一定的推广应用价值。     

游离植皮联合负压封闭引流治疗骨科创面的临床研究

目的:观察游离植皮联合负压封闭引流(vacuumsealingdrainage,后文简称VSD)对骨科创面的疗效,并与植皮后传统加压包扎相比较,为临床实践提供更好的治疗方法。方法:对广州中医药大学第一附属医院创伤骨科2008年3月至2010年2月收治的65例感染创面病例采取手术清创后予VSD引流,合理应用抗生素,创面感染得到控制后,创面干净,肉芽生成良好,外露的肌腱、骨膜表面有新鲜的肉芽组织覆盖,达到植皮的要求后,随机分成两组,其中30例(实验组)采用游离植皮联合VSD法闭合创面,35例(对照组)采用游离植皮加压包扎植皮区,对两组术后的平均换药次数、创面平均愈合时间、植皮成活率情况、平均住院时间(植皮后)、平均抗生素应用次数(植皮后)进行统计学分析,采用t检验和卡方检验,对此两种方法进行评价。结果:植皮联合VSD组与植皮加压包扎组,在平均换药次数、创面平均愈合时间、植皮成活率、平均住院时间(植皮后)、平均抗生素应用次数(植皮后)的对比,有显著性差异(P<0.05)。结论:创面达到游离植皮条件后,游离植皮联合VSD负压引流可以促使皮片黏附,保持创面洁净,避免皮下渗液积聚,有利于皮片的存活,与植皮加压包扎组相比,减少了平均换药次数,缩短创面平均愈合时间及平均住院时间(植皮后),减少抗生素平均应用次数,提高了植皮成活率,说明游离植皮联合VSD组优于游离植皮加压包扎组,游离植皮联合VSD法治疗骨科创面有显著疗效。该手术方法操作简单,术后护理方便,是一种较理想的植皮后的固定方法,有利于创面的愈合,值得临床推广应用。     

4℃保存的绵羊皮肤成纤维细胞的培养及冷冻

为了探讨利用死亡珍稀动物皮肤建立成纤维细胞库的方法,本研究采集幼龄绵羊耳廓皮肤,在4℃条件下保存0 h(对照组)、24 h、48 h和72 h后进行原代培养,达到85%汇合后再进行了继代培养或者经冷冻-复苏后继代培养。结果:(1)与对照组相比,各保存组皮肤成纤维细胞经原代培养后达到85%汇合时间滞后(分别为4 d和8d~15 d);(2)各保存组成纤维细胞经4代培养后,与对照组继代培养达到85%汇合时间相同(对照组继代培养第1~4代均为4 d);(3)原代培养成纤维细胞通过冷冻-复苏后经第2代培养,即可在4 d内均达到85%汇合。表明动物死亡后立即采取其耳廓皮肤并在4℃下保存一段时间后,经原代培养和继代培养,或经原代培养、冷冻-复苏和继代培养,可获得具有正常继代能力的成纤维细胞。     

负压创面治疗技术对皮肤移植成活的临床观察及实验研究

目的:采用负压固定移植皮片方法,观察负压创面治疗技术(negative-pressure wound therapy,NPWT)对游离皮片成活的影响,初步探讨微血管形成与皮肤成活之间的关系。方法:采用回顾性研究的方法,对65例皮肤缺损的患者,根据皮肤移植术后皮片固定方法的不同,分为两组,其中I组为NPWT治疗组,有35例患者,刃厚游离皮片移植术后行创面负压吸引治疗;II组为常规治疗组,有30例患者,刃厚游离皮片移植术后用打包或加压包扎的方式固定。Balb/c小鼠20只,按皮片移植后不同固定加压方式,分为实验组:负压创面治疗技术使用组(10只),对照组:打包加压组(10只),于皮片移植术后第5天,大体观察移植皮片颜色、有无水疱、有无皮下积液及质地,计算并比较皮片成活率,以免疫组化染色标记毛细血管内皮,检测皮片中微血管情况。结果:临床观察表明:I组术后皮片成活时间平均较II组缩短,有统计学差异(P<0.01),I组术后住院治疗时间平均较II组缩短5天,有统计学差异(P<0.01),I组术后抗生素费用、换药次数及换药费用较II组减少,有统计学差异(P<0.01)。动物实验结果表明:术后第5天,实验组小鼠移植皮片中微血管增生较对照组明显增多(P<0.05)。结论:与常规打包或加压包扎固定皮片的方式相比,负压创面治疗技术的应用可以缩短皮片成活时间,缩短患者住院治疗时间,减少抗生素的使用及换药次数,促进移植皮片中毛细血管增生,提高皮片成活率。     

不同手术方法对小鼠同种异基因移植皮片存活的比较

目的采用不同手术缝合方式观察小鼠移植皮片存活及生长情况,以建立一种简单易行、快速经济的小鼠同种异基因皮肤移植方法.方法 受体BALB/c小鼠随机分为3组(Z组、J组和T组),每组20只,通过背-背法进行供体C57BL/6的皮片移植,Z组、J组和T组分别采用四周缝合、对角缝合和粘贴固定的皮片缝合方法.每天监测小鼠体重变化及生长状态,观察26天,实验第3、7、15和26天观察各组受体移植皮片存活情况,其中皮片变硬、结痂脱落或坏死判定为移植排斥.第26天取小鼠皮肤移植组织以及肝脾组织进行病理检测.结果 各组小鼠移植物平均体重变化趋势类似,第6天达到最低水平,移植皮片病理检测结果显示,各组均见移植皮片真皮内淋巴细胞浸润,3组病理结果类似,肝脾病理检测发现淋巴细胞大量浸润,说明造模成功.实验26天后,Z组、J组和T组小鼠皮片分别有7、5和3只受体小鼠皮片仅观察到炎症反应.结论 3种手术方式建模均成功,但采用粘贴固定方式进行小鼠背部皮肤移植具有手术方式简单有效、对皮肤损伤小的优点,是一种较好的小鼠同种异基因皮肤移植手术方法.     

组织工程复合皮肤应用于皮肤缺损创面的临床疗效观察

目的:临床观察组织工程复合皮肤对烧伤整形后需植皮患者的供皮区缺损创面的有效性及安全性。方法:试验选取不同临床中心烧伤整形后需植皮患者,在供皮区部分创面作为试验区应用组织工程复合皮肤覆盖,邻近创面采用盐水纱布替代作为对照区,应用后按常规方法包扎固定。临床试验时间为6个月,治疗期间观察统计患者的创面反应,愈合时间及愈合情况;对组织工程复合皮肤改善创面愈合质量及安全性进行临床评估。根据创面试验组和对照组的创面愈合时间,应用SPSS统计软件对数据进行方差齐性检验,根据检验结果分别进行独立样本t或t’检验。结果:试验共收集有效病例19例。临床观察显示应用后试验区创面无明显免疫排斥及炎性反应,患者自述疼痛明显减轻,试验区创面愈合时间与对照区相比缩短8d,统计学分析有显著性差异。愈后随访部分患者试验区愈合质量好于对照区,应用后患者疼痛、瘢痕形成等不良反应明显减少。结论:结果表明组织工程复合皮肤作为活型皮肤替代物用于医源性皮肤缺损的修复,这为促进供皮区的创面愈合提供了切实可行的方法。     

低温保存脐带和胎盘组织的效果研究

目的:建立脐带和胎盘组织的低温保存方法,为自体化基因治疗和细胞治疗提供丰富的细胞储备。方法:取离体的脐带和胎盘,冲洗干净,以体积比20kg/m~3、15kg/m~3、10kg/m~3、5kg/m~3共4组浓度的DMSO作为抗冻剂,采用程序降温,至-80℃后转入液氮中保存,采用细胞培养与电镜扫描进行效果评估。结果:10kg/m3组组织低温保存效果最好,15kg/m~3组次之,5kg/m~3组效果最差,培养所得的胎盘组织来源的基质样细胞具有间充质干细胞的某些生物学特性。结论:低温保存脐带和胎盘组织切实可行,为自体基因治疗和细胞治疗提供了细胞储备。     

负压创面治疗技术对皮肤移植成活的临床观察及实验研究

目的：采用负压固定移植皮片方法,观察负压创面治疗技术（negative-pressure wound therapy,NPWT）对游离皮片成活的影响,初步探讨微血管形成与皮肤成活之间的关系。方法：采用回顾性研究的方法,对65例皮肤缺损的患者,根据皮肤移植术后皮片固定方法的不同,分为两组,其中Ⅰ组为NPWT治疗组,有35例患者,刃厚游离皮片移植术后行创面负压吸引治疗;Ⅱ组为常规治疗组。有30例患者,刃厚游离皮片移植术后用打包或加压包扎的方式固定。Balb／c小鼠20只,按皮片移植后不同固定加压方式,分为实验组：负压创面治疗技术使用组（10只）,对照组：打包加压组（10只）,于皮片移植术后第5天,大体观察移植皮片颜色、有无水疱、有无皮下积液及质地,计算并比较皮片成活率,以免疫组化染色标记毛细血管内皮,检测皮片中微血管情况。结果：临床观察表明：Ⅰ组术后皮片成活时间平均较Ⅱ组缩短,有统计学差异（P〈0．01）,Ⅰ组术后住院治疗时间平均较Ⅱ组缩短5天,有统计学差异（P〈0．01）,Ⅰ组术后抗生素费用、换药次数及换药费用较Ⅱ组减少,有统计学差异（P〈0．01）。动物实验结果表明：术后第5天,实验组小鼠移植皮片中微血管增生较对照组明显增多（P〈0．05）。结论：与常规打包或加压包扎固定皮片的方式相比,负压创面治疗技术的应用可以缩短皮片成活时间,缩短患者住院治疗时间,减少抗生素的使用及换药次数,促进移植皮片中毛细血管增生,提高皮片成活率。     

卵叶泥炭藓茎尖包埋玻璃化法超低温保存研究

该研究通过对脱水时间和化冻温度的探索,检验了包埋玻璃化法在超低温保存湿润生境中苔藓的可能性。结果表明:卵叶泥炭藓无菌苗在4℃条件下预培养3d后,在0℃用60% PVS_2装载30min,PVS_2脱水60min后迅速投入液氮保存,24h后用40℃水浴快速化冻2min再培养,成活率可达42.41%,且再生植株与常温状态下的植株形态指标没有显著性差异。研究认为,包埋玻璃化法超低温保存湿润环境中生长的苔藓植物是可行的。     

黑豆乳清多肽抗皮肤光老化作用的研究

以昆明小鼠为对象,研究了黑豆乳清多肽对皮肤光老化的保护作用.试验设空白组(动物不照射紫外线),阳性对照组(脱毛区皮肤涂抹10％ Vc溶液),给药大、小剂量组(分别涂乳清多肽含量为15％和5％的乳液),模型组(涂抹蒸馏水)和基质组(涂抹基质乳液).除空白组外,其余各组小鼠均用长波紫外线照射12周.试验结束后处死动物,取受试部位皮肤进行切片观察和生化指标检测.结果表明,与模型组相比,给药大剂量组动物皮肤中CAT活力水平和HYP含量均显著升高(P＜0.01)、单位面积的皮肤质量和MDA含量显著降低(P＜0.01),皮肤红斑量和受损程度明显减轻.表明黑豆乳清多肽有抗皮肤光老化的作用.     

应用改良滴冻法超低温保存两种柿属植物的研究

以君迁子（Diospyros lotus L．）和柿（D．kaki Thunb．）组培苗茎尖为试材,对影响超低温保存效果的主要因素,如低温锻炼方式、预培养条件、PVS：（30％甘油＋15％乙二醇＋15％二甲基亚砜＋0．4mol／L蔗糖）处理时间等进行了研究。建立了2种柿属植物的超低温保存程序：（1）切取1cm左右试管苗梢段继代到1／2MS（KNO3和NH4NO3减半）培养基中,交替低温[昼（25±1）℃、夜（4±1）℃]锻炼6周;在含0．5mol／L蔗糖的1／2MS培养基上预培养5d,20℃下装载液（2．0mol／L甘油＋0．4mol／L蔗糖）过渡10min,0℃下PVS2处理1．5h;（2）投入液氮保存;（3）40℃水浴化冻,洗涤5～6次后接种于含1．0mg／LTDZ、0．6g／L可溶性PVP、30g／L蔗糖和7．0g／L琼脂的培养基（作者在优化柿属植物离体培养体系试验中获得）上暗培养1周,转入25℃,1500lx培养室。按照上述程序培养,‘鄂柿1号’、‘湘西甜柿’和君迁子的成活率分别为79．6％、67．4％和60．9％。     

唐菖蒲花粉低温保存过程中的生理生化特征

以唐菖蒲切花栽培品种嫦娥粉花粉为实验材料,比较其花粉各项生理生化指标在-80℃和4℃贮藏过程中(360 d)的变化,以探讨2种保存条件下花粉保存效果出现显著性差异的生理生化原因.结果表明:唐菖蒲花粉在2种保存温度条件下,随保存时间的延长,各项生理生化指标表现出显著差异.与4℃保存处理相比,-80℃保存处理抑制了花粉中MDA的积累,增强了超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)的活性,减轻了花粉膜质过氧化和膜系统受伤害程度,同时提高了花粉可溶性蛋白质和可溶性糖的含量,增强了花粉的抗冻能力,从而使低温保存花粉活力维持在相对较高水平,这或许是-80℃条件下花粉保存效果较好的部分生理生化原因.     

香蕉离体茎尖超低温保存研究

以香蕉(Musaspp.)试管苗为试材,对其离体茎尖小滴玻璃化法超低温保存的影响因素进行了研究。小滴玻璃化法和玻璃化法超低温保存后再生率的差异表明,香蕉更适合用小滴玻璃化法进行超低温保存。香蕉小滴玻璃化法超低温保存的方案如下:试管苗在60g/L蔗糖的MS培养基上培养1~2个月,剥离带有1~2片叶原基的茎尖,室温下装载30m in(可延长至4h),0℃下PVS2处理40~50m in。6个基因型的14个品种的再生率平均为46.9%。通过SSR分子标记检测,再生植株的遗传稳定性没有发生改变。该结果为香蕉种质资源的长期保存提供了理论依据和技术支撑。     

15例腓肠肌岛状穿支肌皮瓣修复胫骨近端骨髓炎伴骨外露的临床观察

目的:观察腓肠肌岛状穿支肌皮瓣治疗胫骨近端骨髓炎伴骨外露的临床效果。方法:回顾性分析2013年1月至2015年6月在我科收治的15例胫骨近端骨髓炎伴骨外露患者,采用彻底清创、腓肠肌岛状穿支肌皮瓣进行修复治疗,皮肤缺损面积为5cm×4 cm~8 cm×6 cm,切取皮瓣面积为6 cm×5cm~9 cm×7 cm。术后对皮瓣成活率、并发症、膝踝关节功能、皮瓣外观满意度进行随访观察。结果:本组15例中14例肌皮瓣一期愈合,1例二期愈合,术后随访6~18个月无感染复发病例,膝踝关节功能良好。根据改良ASAMI评分系统评价疗效:优10例,良4例,中1例,差0例。结论:腓肠肌岛状穿支肌皮瓣修复胫骨近端骨髓炎伴骨外露具有良好疗效。