分枝杆菌制剂对小鼠的免疫调节作用的初步研究

探讨不同分枝杆菌制剂对小鼠的免疫调节作用。将C57BL/6小鼠,随机分成4组分别注射生理盐水、微黄分枝杆菌、草分枝杆菌和田鼠分枝杆菌制剂,每隔2周免疫一次。免疫2次后,小鼠取脾淋巴细胞体外培养,分别以PPD、PPDB刺激,用MTT法检测T淋巴细胞增殖情况;用酶联免疫斑点法(Enzyme-Linked ImmunoSpot assay,ELISpot)检测脾细胞分泌IFN-γ情况,分析各分枝杆菌制剂对小鼠免疫应答的影响。结果显示,与对照组相比,微黄分枝杆菌制剂和草分枝杆菌制剂免疫小鼠的T淋巴细胞增殖反应和脾细胞分泌IFN-γ均明显提高,其中微黄分枝杆菌组与对照组相比有显著性差异(p<0.01)。分枝杆菌制剂可促进小鼠免疫应答。     

直肠接种卡介苗可诱导出与注射接种相似的免疫应答和保护作用

本文通过直肠途径接种卡介苗(BCG),并与肠胃外途径接种进行比较对结核分枝杆菌(结核杆菌)的免疫应答及保护作用.实验选用动物为BALB/c小鼠、远交系Hartley豚鼠和恒河猴;BCG为Pasteur株1173P2;攻击用菌种为结核杆菌H37Rv.直肠免疫小鼠、豚鼠及恒河猴时分别接种2×109、2×1010和6×1010活菌单位的BCG;皮下注射免疫小鼠时接种100 μl BCG(含108活菌单位);皮内注射免疫豚鼠和恒河猴时分别接种5×106和1×109活菌单位的BCG.在两条途径免疫后不同时间,取豚鼠和恒河猴脾细胞在96孔微孔板培养,用3H TdR掺入法测定对PPD刺激的增殖反应.     

分枝杆菌制剂对小鼠细胞免疫功能影响的研究

以迟发性超敏反应与T淋巴细胞增殖反应分别作为体内,外细胞免疫功能的基本参数,探讨不同剂量的分枝杆菌,在不同时间对小鼠细胞免疫功能的影响。结果 显示免疫组的中和／或高剂量组的反应显著强于对照组（P＜0．05）,且随时间延长,剂量加大有增强的趋势。证实分枝杆菌制剂能增强机体细胞免疫功能。     

Ipr1/PPE68重组BCG诱导BALB/C小鼠免疫应答的探讨

目的构建Ipr1/PPE68重组卡介苗(Recombinant BCG,rBCG),探讨其诱导BALB/C小鼠免疫应答的效果。方法将Ipr1和PPE68基因及结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)复制子OriM分别插入pBudCE4.1的多克隆位点,构建共表达穿梭质粒pBIPO,将其电转入BCG,构建Ipr1/PPE68-rBCG并将rBCG免疫BALB/C小鼠,检测小鼠血清中IgG2a、IL-12、IFN-γ及IL-4的水平、特异性脾淋巴细胞增殖和CD4+和CD8+T细胞数量,同时观察脾、肺荷菌量及脾、肺组织病理学变化。结果酶切测序及菌落PCR鉴定Ipr1和PPE68以及OriM基因序列与理论值相符,Western-blotting结果显示Ipr1和PPE68蛋白成功表达。Ipr1/PPE68-rBCG免疫小鼠后,血清中的IgG2a和IL-12水平及脾淋巴细胞增殖情况明显高于对照组,但与BCG组相比没有显著意义;IFN-γ水平显著低于BCG组,与对照组相比无显著性差异;各组别IL-4的水平差异均不明显。脾、肺荷菌实验未见菌落生长,肺、脾组织未见病理学改变。结论成功构建Ipr1/PPE68-rBCG,该重组BCG能诱导BALB/C小鼠的细胞免疫应答。     

口服卡介菌治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎的研究

目的：观察口服卡介菌对实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）的治疗效果。方法：制备EAE大鼠模型,随机分为BCG高、中、低剂量组和PBS对照组,每组各15只,对大鼠治疗后的临床症状及病理组织学进行评估,提取脾脏淋巴细胞,流式细胞术检测T淋巴细胞亚群,3H—TdR掺入法检测淋巴细胞增殖能力。结果：BCG组EAE大鼠与对照组相比,临床症状减轻,发病时间延迟,炎性细胞浸润数减少;急性期,口服BCG各组CD4^＋、CD8^＋T细胞的数量随剂量增加而增加,缓解期CD4^＋、CD8^＋T细胞数量减少;口服BCG可促进EAE大鼠T淋巴细胞增殖能力;高、中剂量组上述变化均较其它分组明显。结论：口服BCG可很好的诱导免疫耐受,延迟EAE发病,减轻炎症反应,改善临床症状。     

口服卡介菌治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎的研究

目的:观察口服卡介菌对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)的治疗效果。方法:制备EAE大鼠模型,随机分为BCG高、中、低剂量组和PBS对照组,每组各15只,对大鼠治疗后的临床症状及病理组织学进行评估,提取脾脏淋巴细胞,流式细胞术检测T淋巴细胞亚群,3H-TdR掺入法检测淋巴细胞增殖能力。结果:BCG组EAE大鼠与对照组相比,临床症状减轻,发病时间延迟,炎性细胞浸润数减少;急性期,口服BCG各组CD4+、CD8+T细胞的数量随剂量增加而增加,缓解期CD4+、CD8+T细胞数量减少;口服BCG可促进EAE大鼠T淋巴细胞增殖能力;高、中剂量组上述变化均较其它分组明显。结论:口服BCG可很好的诱导免疫耐受,延迟EAE发病,减轻炎症反应,改善临床症状。     

酪酸梭菌活菌胶囊对行早期肠内营养支持的感染性休克患者胃肠道症状改善作用观察

目的观察酪酸梭菌活菌胶囊对行早期肠内营养支持的感染性休克患者胃肠道症状改善作用。方法选取2017年1月-2019年1月我院收治的感染性休克患者100例,按照完全随机法将所有患者随机分为对照组和酪酸梭菌活菌组各50例。对照组患者行早期留置胃管鼻饲肠内营养支持,酪酸梭菌活菌组在对照组的基础上使用酪酸梭菌活菌胶囊干预治疗。评价患者免疫功能、机体营养状况、肠粘膜屏障功能、肠道菌群数量变化、胃肠道症状改善情况及药物不良反应情况。结果治疗后酪酸梭菌活菌组患者腹痛、反流、消化不良、便秘、腹泻、进食困难等胃肠道症状评分分别为1.12±0.10、1.01±0.10、1.02±0.09、0.98±0.08、1.12±0.10、1.05±0.09低于对照组2.46±0.30、2.10±0.08、1.96±0.10、1.16±0.10、2.35±0.09、2.45±0.12,差异具有统计学意义(P<0.05)。酪酸梭菌活菌组患者不良反应发生率为2.0%(1/50)低于对照组18.0%(9/50),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论运用酪酸梭菌活菌胶囊治疗行早期肠内营养支持的感染性休克,可显著提高患者免疫功能,改善机体营养状况,增强肠粘膜屏障功能,改善胃肠道症状,促进患者恢复。     

中国分支杆菌类免疫调节剂的评述与展望

近年来,中国分支杆菌类制剂有多种,如治疗用卡介苗,卡介苗多糖核酸（已有三个品牌：卡提素、斯奇康和卡舒宁）,冻干卡介苗细胞壁,草分支杆菌注射液（高品名：乌体林斯注射液）及母牛分枝杆菌冻干制剂（即Vaccae苗）,这些制剂均有免疫调节功能,治疗用卡介苗及卡介菌细胞壁主要用于治疗浅表性膀胱癌;卡介苗多糖核酸制剂主要用于预防和治疗慢性气管炎,感冒和哮喘;单分枝杆菌及母牛分枝杆菌制剂以及卡介苗多糖核酸液主要用作结核病的辅助治疗,临床观察,均有明显疗效。     

Toll样受体4在实验性自身免疫性葡萄膜炎发病中的作用

目的:研究常见感染菌菌壁成份脂多糖(LPS)在自身免疫性眼病-葡萄膜炎的致病作用.方法:用视网膜抗原IRBP和福氏完全佐剂免疫B10.RⅢ小鼠,诱发实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU),在免疫动物同时添加LPS.免疫19天后检查迟发型变态反应(DTH);21天处死小鼠,收集腹股沟淋巴结和髂动脉淋巴结细胞,检测抗原特异性T淋巴细胞增殖和炎症细胞因子的分泌.结果:LPS加重B10.RⅢ小鼠EAU的发病;增强DTH反应;增加抗原特异性T淋巴细胞增殖和IL-17、IFN-γ的分泌.结论:LPS能够促进EAU发病,从而证明病原微生物感染可能参与如葡萄膜炎等自身免疫性疾病的发生.     

急性低氧和腺苷对大鼠脾脏T淋巴细胞增殖的影响

目的:观察急性低氧和腺苷对大鼠脾脏T淋巴细胞增殖的影响,以探讨急进高原时机体免疫功能改变的规律和机制.方法:大鼠在5 000 m模拟高原减压低氧3 d后,用3H-TdR掺入法检测脾脏T淋巴细胞增殖功能,增加细胞培养液中腺苷浓度观察对T淋巴细胞增殖的影响.结果:在5.0 mg/L 和2.5 mg/L刀豆素A(concanavalin A,ConA)的刺激下,对照组大鼠脾脏T淋巴细胞的刺激指数分别为64.0±23.7和43.5±21.7;急性低氧组大鼠显著降低至29.4±11.3 和20.2±16.1;10 μmol/L和100 μmol/L腺苷能够显著抑制大鼠脾脏T淋巴细胞的增殖反应,且这种抑制作用具有明显的浓度依赖性.结论:急性低氧可在一定程度上抑制T淋巴细胞功能,这种抑制作用可能与低氧引起的腺苷含量增加有关.     

A REINTERPRETATION OF THE ONTOGENY OF THE ASCOCARP OF SPECIES OF THE ERYSIPHACEAE

A study of four species of Erysiphaceae (Uncinula salicis, Podosphaera leucotricha, Erysiphe cichoracearum, and Microsphaera diffusa) revealed that the binucleate stages of the ascocarp are initiated in a similar manner to those of Diporotheca rhizophila Gordon & Shaw. The “appendages” developing on immature ascocarps are considered to be receptive hyphae. Appendages characteristic of mature ascocarps are produced much later. Lysis of certain centrum cells occurs, and asci are initiated from some of the remaining binucleate centrum cells. Resorption of centrum cells by the asci is supported by this investigation, corroborating Björling's earlier studies on Erysiphe graminis.