通过酒精饲养小鼠建立小鼠酒精模型

研究通过酒精饲养小鼠建立小鼠酒精成瘾模型的方法。使用6周龄SPF级Balb/c雄性小鼠15只,随机分为3组(n=5),即灌胃和酒水喂养组(A)、灌胃组和水喂养组(B)、对照组(C)。3组固体饲料正常给予,A、B两组每日灌胃11%酒水200μL,A组酒水溶液自由摄取并作为唯一饮水来源,B组水自由摄取,C组不做处理。饲养8周后进行24 h酒精戒断,并进行矿场实验,强迫游泳实验。处死小鼠取肝脏、肾脏和结肠制作石蜡切片并观察。造模过程中3组小鼠进食、饮水、体重、内脏重量出现了不同程度的变化。行为学结果显示,矿场实验中A、B两组小鼠戒断酒精后相对对照组小鼠焦虑水平明显升高;强迫游泳实验中,A、B两组相对C组绝对不动时间显著加长,表现出精神抑郁。显微镜观察小鼠内脏石蜡切片,A组小鼠肝脏切片明显出现肝细胞排列紊乱,肾脏中肾小球上皮细胞轻度萎缩,空泡变性,肾小管无明显病变,结肠石蜡切片肠绒毛出现破损,肠绒毛顶端完整性降低。B组肝、肾、结肠石蜡切片与对照组相比无明显变化。     

小鼠萎缩性胃炎模型的构建及与血清胃泌素 17、白介素 8的关系

目的建立小鼠慢性萎缩性胃炎(CAG)模型;用此模型探讨胃泌素-17(gastrin-17,G-17)及白介素-8(IL-8)在CAG诊断和病程进展中的应用价值。方法选取SPF级、体质量22～24 g、5～7周龄雄性C57BL/6小鼠40只,随机分为阴性对照组(A组,超纯水)、高盐组(B组,1.8%NaCl溶液)、H.pylori组(C组,H.pylori悉尼菌株SS1)和高盐+H.pylori组(D组,1.8%NaCl溶液+SS1菌株)4组,每组10只,分别对各组小鼠进行灌胃处理。于第16周和第24周每组分别处死5只小鼠,通过免疫组化观察H.pylori情况、胃黏膜病理组织学变化,酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清G-17和IL-8的表达水平。结果灌胃处理16周可观察到B、D两组小鼠CAG造模成功,G-17表达水平差异无统计学意义(χ~2=6.591,P0.05);C、D两组小鼠IL-8表达水平较A、B两组明显升高(F=25.241,P0.05)。24周后可观察到B、C、D三个实验组均CAG造模成功:B、D组小鼠G-17表达水平较A组明显降低(χ~2=15.006,P0.05),C组G-17水平与A组差异无统计学意义(Z=-1.681,P0.05);H.pylori处理组(C、D)小鼠的IL-8水平明显升高(F=31.941,P0.05)。结论高盐饮食和胃黏膜H.pylori定植均可成功构建C57BL/6小鼠CAG模型,且高盐饮食可加快该模型的建立;血清G-17表达水平与CAG病情严重程度呈负相关,而IL-8的表达水平与是否H.pylori感染有关。     

大鼠荷子宫肌瘤组织移植瘤模型的建立

目的 通过对应用免疫抑制剂的大鼠进行组织移植的方法,建立大鼠荷子宫肌瘤组织移植瘤模型,为研究子宫肌瘤的研究提供新的动物模型。方法 术前两周开始,大鼠予免疫抑制剂吗替麦考酚酯(mycophenolate mofetil,MMF)灌胃,持续至整个实验结束。将20只Wistar大鼠随机分为4组,按照腹腔移植术后补充的不同激素分别为A组(芬吗通)、B组(雌二醇)、C组(达芙通)、D组(对照组),术后4周取材,观察肌瘤形态及组织形态学。结果 A组造模成功率90%,B组造模成功率40%,C组、D组造模成功率为0。结论 大鼠荷子宫肌瘤移植瘤模型成功率高,成本低,可作为新的研究子宫肌瘤移植瘤的动物模型。     

羊水干细胞治疗维甲酸诱导的大鼠骨质疏松的初步研究

目的:维甲酸(ratinoicacid)诱导雌性大鼠骨质疏松(Ostoporosis,OP)模型,观察并分析羊水干细胞(amniotic fluid-derivedstem cells,AFS)对OP的治疗作用。方法:选取40只S D雌性大鼠,随机分为4组,每组10只。除正常组(A组)外,模型组(B组),一次注入AFS组(C组)和两次注入AFS组(D组)均用维甲酸70 mg/(k g.d)连续灌胃1 4 d,A组用等量灭菌注射用水灌胃。于给药二,三周分别测量各组大鼠血清Ca、Pi、碱性磷酸酶ALP和抗酒石酸酸性磷酸酶TRACP含量,制造模型(简称造模)过程观察动物生活习性体重等变化,实验结束进行股骨骨形态计量学测量,骨薄片病理学观察。结果:造模过程中,大鼠出现少食,竖毛,及体重减轻。B.C组大鼠体重较正常组显著降低(P<0.05)。造模21d后,B组血清Ca2+水平显著升高。模型组骨密度较正常组显著下降(P<0.05),但D组骨密度变化无明显统计学意义。B,C,D组血清ALP,TRACP均明显高于正常组(P<0.05)。骨薄片染色显示模型组骨胶原排列杂乱无序,结构松散,D组有修复迹象。结论:羊水干细胞尾静脉注射可缓解维甲酸诱导的大鼠骨质疏松,且两次次给药的治疗效果好于单次给药。     

中药芪莪合剂联合西药治疗幽门螺杆菌诱导的慢性胃炎模型的实验研

目的观察芪莪合剂联合西药对幽门螺杆菌（Hpylori）诱导的慢性胃炎模型的治疗作用,从胃黏膜血流及Cx32、Cx43表达改变探讨其作用机制。方法70只BALB／C小鼠随机分为模型组54只,正常对照组16只。模型组采用东亚型CagA’Hpylori菌株造模,其中48只随机分为4组,分别用芪莪合剂1联合西药组（A组）、芪莪合剂2联合西药组（B组）、三联西药（c组）灌胃治疗14d,对照组用生理盐水（D组）。停用治疗后4周观察Hpylori根除率、胃黏膜炎症改变、胃黏膜血流及Cx32、Cx43表达情况。结果A、B、C组Hpylori根除率分别为83．3％、91．6％与75．0％,胃黏膜炎症评分A、B组与c组均低于D组（P〈0．05）,且A、B组均低于C组（P〈0．05）。A、B组胃黏膜血流量均增加,高于C组和D组,与正常对照组比较差异无统计学意义,A、B、C组Cx32、Cx43mRNA表达均明显高于D组（P〈0．05）,与正常对照组比较差异无统计学意义。结论芪莪合剂与西药合用在减小西药剂量的情况下仍能有效根除Hpylori,且提高胃黏膜血流量,改善胃黏膜炎症,上调Cx32、Cx43mRNA表达。     

淫羊藿黄酮对被动吸烟大鼠骨组织肿瘤坏死因子-α和白介素1-α表达的影响

目的:探讨淫羊藿黄酮对被动吸烟大鼠骨组织肿瘤坏死因子-α白介素1-α达的影响.方法:选用2月龄Sprague-Dawley(SD)大鼠60只,随机分为6组,每组10只,各组雌雄各半,雌雄分笼饲养.A组:空白对照组,常规方法饲养,不给予被动吸烟;B组:被动吸烟组,不给予灌服药物;C组:被动吸烟+钙组.灌服高效钙(75mg·kg-1·d-1)+维生素D3 21 IU·kg-1·d-1;D组:被动吸烟+低剂量,灌服淫羊藿黄酮(75mg·kg-1·d-1);E组:被动吸烟+中剂量,灌服淫羊藿黄酮(150mg·kg-1·d-1);F组:被动吸烟+高剂量,灌服淫羊藿黄酮(300mg·kg-1·d-1).按"密室熏烟法"给予实验组(B组、C组、D组、E组、F组)大鼠被动吸烟4个月.实验动物干预完毕后取出胫骨,制备标本,RT-PCR法检测TNF-αmRNA和IL-1mRNA表达,并应用曲线拟合分析其相关性.结果:应甩淫羊藿黄酮明显抑制TNF-αmRNA和IL-1-αmRNA在骨组织中的表达,其中TNF-αmRNA表达中A组、D组、E组、F组与B组比较,差异有统计学意义(P<0.05),C组与B组比较,差异无统计学意义(P0.05),D组、E组、F组与A组比较,差异无统计学意义(P0.05),D组、E组、F组随淫羊藿黄酮剂量的增加而降低,但组间差异无统计学意义(P0.05);其它各组比较无统计学意义(P0.05);而IL-1-αmRNA表达中A组、C组、D组、E组、F组与B组比较,差异有统计学意义(P<0.05),D组、E组、F组与A组比较,差异无统计学意义(P0.05),D组、E组、F组随淫羊藿黄酮剂量的增加而降低,但组间差异无统计学意义(P0.05);其它各组比较无统计学意义(P0.05).二者在淫羊藿黄酮干预下的相关性从二者的曲线拟合图中,TNF-αIL-1-α表达的相互作用关系经曲线拟合为Y=0.82115+0.09343X-0.01781X2.结论:淫羊藿黄酮可抑制被动吸烟大鼠骨组织TNF-αIL-1-α表达.     

中药芪莪合剂联合西药治疗幽门螺杆菌诱导的慢性胃炎模型的实验研究

目的观察芪莪合剂联合西药对幽门螺杆菌(H.pylori)诱导的慢性胃炎模型的治疗作用,从胃黏膜血流及Cx32、Cx43表达改变探讨其作用机制。方法 70只BALB/C小鼠随机分为模型组54只,正常对照组16只。模型组采用东亚型CagA+H.pylori菌株造模,其中48只随机分为4组,分别用芪莪合剂1联合西药组(A组)、芪莪合剂2联合西药组(B组)、三联西药(C组)灌胃治疗14 d,对照组用生理盐水(D组)。停用治疗后4周观察H.pylori根除率、胃黏膜炎症改变、胃黏膜血流及Cx32、Cx43表达情况。结果 A、B、C组H pylori根除率分别为83.3%、91.6%与75.0%,胃黏膜炎症评分A、B组与C组均低于D组(P0.05),且A、B组均低于C组(P0.05)。A、B组胃黏膜血流量均增加,高于C组和D组,与正常对照组比较差异无统计学意义,A、B、C组Cx32、Cx43 mRNA表达均明显高于D组(P0.05),与正常对照组比较差异无统计学意义。结论芪莪合剂与西药合用在减小西药剂量的情况下仍能有效根除H pylori,且提高胃黏膜血流量,改善胃黏膜炎症,上调Cx32、Cx43 mRNA表达。     

TRB3基因敲除减轻糖尿病小鼠中骨骼肌萎缩和纤维化的研究

摘要 目的：探讨TRB3基因敲除对糖尿病小鼠中骨骼肌萎缩和纤维化的影响。方法：选择30只TRB3敲除（TRB3-/-）小鼠和30只C57/BL6J小鼠，随机分为4组，包括TRB3基因敲除糖尿病模型组（A组）、TRB3基因敲除正常对照组（B组）、普通对照组（C组）和糖尿病模型组（D组）。正常对照组小鼠喂养标准大鼠饲料，糖尿病模型小鼠使用腹腔注射小剂量链脲佐菌素的方法建立糖尿病小鼠模型。进行前肢握力测试、悬栅试验、肌肉功能试验，同时测定骨微结构各指标水平、抗I型胶原蛋白和抗III型胶原蛋白水平、萎缩基因MuRF1和Atrogin-1水平。结果：A组、B组、D组小鼠前肢握力显著低于C组，其中D组小鼠前肢握力最低（P<0.05）；A组、B组、D组小鼠悬栅试验倒挂时间显著低于C组，其中D组小鼠悬栅试验倒挂时间最短（P<0.05）；A组、B组、D组小鼠肌肉功能CSA值显著低于C组，其中D组小鼠肌肉功能CSA值最低（P<0.05）；A组、B组、D组小鼠骨微结构指标BMD、BV/TV、Tb.N、Tb.Th值显著小于C组，其中D组数值最低（P<0.05）；而Tb.Sp和SMI值显著大于C组，其中D组数值最高（P<0.05）；A组、B组、D组小鼠抗I型胶原蛋白和抗III型胶原蛋白水平显著高于C组，其中D组抗I型胶原蛋白和抗III型胶原蛋白水平最高（P<0.05）；A组、B组、D组小鼠萎缩基因MuRF1和Atrogin-1水平显著高于C组，其中D组萎缩基因MuRF1和Atrogin-1水平最高（P<0.05）。结论：TRB3基因敲除可显著减轻糖尿病小鼠中骨骼肌萎缩和纤维化，增加骨强度。     

达格列净对2型糖尿病大鼠肾脏葡萄糖转运蛋白2及葡萄糖转运蛋白4基因表达的影响*

目的:探讨达格列净对2型糖尿病大鼠肾脏葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)和葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)基因表达的影响。方法:使用高脂饲料和一次性注射40 mg/kg链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病大鼠模型,造模大鼠以空腹血糖(FBG)含量≥16.7 mmol/L时视为造模成功。造模成功后随机分为模型组(B组,生理盐水)、达格列净低剂量组(C组,0.75 mg/kg)、达格列净中剂量组(D组,1.5 mg/kg)、达格列净高剂量组(E组,3.0 mg/kg),每组6只;另选取6只健康的SD大鼠作为正常对照组(A组,生理盐水)。各组均为灌胃给药,每天1次,连续7周。灌胃给药7周后测定大鼠的体重以及血清FBG、糖化血红蛋白(HbA1c)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)的变化;采用酶联免疫吸附测定血清及肾组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px);采用HE观察肾脏病理学变化;采用Western blot检测肾脏组织中GLUT2、GLUT4蛋白表达;RT-qPCR检测肾脏组织中GLUT2、GLUT4 mRNA相对表达量。结果: 与A组比较,各组大鼠的体重及SOD、GSH-PX水平明显降低(P＜ 0.05),FBG、HbA1c、BUN、Scr、MDA水平明显升高(P＜0.05),肾脏病理损伤严重,肾组织GLUT2、GLUT4 mRNA相对表达量和蛋白表达均明显降低(P均＜0.05)。与B组比较,C组、D组和E组大鼠的体重、SOD、GSH-PX水平和肾组织GLUT2、GLUT4 mRNA相对表达量明显升高(P＜0.05),FBG、HbA1c、BUN、Scr、MDA水平明显降低(P＜ 0.05);D组和E组肾脏病理损伤明显减轻,肾组织GLUT2、GLUT4蛋白表达均明显升高(P均＜0.05)。结论:达格列净可缓解2型糖尿病模型大鼠的病情,并上调肾脏GLUT2及GLUT4基因的表达。     

日舒安洗液联合克霉唑治疗小鼠外阴阴道念珠菌病的疗效观察

目的观察日舒安洗液联合克霉唑治疗小鼠外阴阴道念珠菌病的疗效。方法将95只BALB/c雌鼠(8周龄)随机分为A组(5只,空白对照组),B组(30只,模型对照组),C组(30只,克霉唑组)和D组(30只,日舒安洗液联合克霉唑组)。对B组、C组和D组小鼠阴道接种白念珠菌。对A组和B组予等量的生理盐水冲洗阴道,C组单用克霉唑治疗,对D组进行日舒安洗液联合克霉唑治疗。在接种前及治疗过程中观察各组小鼠体重变化。B组、C组和D组在治疗后的第1、2、3、6、8、10、14和16天取阴道灌洗液进行菌落培养,采用涂布法检测小鼠的阴道真菌载荷量,并通过ELISA检测IL-2和IL-8的水平;qRT-PCR法检测小鼠阴道组织中NLRP3、ASC、caspase-1的mRNA表达。结果在前8 d,4组小鼠的体重均保持稳定,接种后B、C和D组小鼠体重下降,随后体重逐渐上升,接近接种前水平。与空白对照组A相比较,B、C和D组阴道灌洗液中阴道真菌载荷量增加,但B、C和D组之间存在统计学差异,D组阴道真菌载荷量少于B组和C组,C组阴道真菌载荷量少于B组;与空白对照组相比较,B、C和D组阴道灌洗液中IL-2和IL-8增加,但治疗后B、C和D组之间IL-2和IL-8水平存在统计学差异,D组IL-2和IL-8水平显著小于C组, C组IL-2和IL-8水平显著小于B组(P0.01)。与空白对照组相比较,B、C和D组阴道组织中NLRP3、ASC、caspase-1 mRNA表达上调,但B、C和D组之间存在统计学差异,B组mRNA上调水平大于C组和D组,C组mRNA上调水平大于D组(P0.01)。结论日舒安洗液联合克霉唑对小鼠外阴阴道念珠菌病治疗作用显著。     

毛蕊花苷对递增负荷运动小鼠骨骼肌损伤的保护作用

本研究采用小鼠跑台训练模型,应用免疫共沉淀等方法,研究毛蕊花苷对递增负荷运动小鼠骨骼肌损伤的保护作用及对谷胱甘肽的影响。90只小鼠随机分为:正常对照组(A)、正常+毛蕊花苷组(B)、单纯运动组(C)、运动+毛蕊花苷低剂量组(D)、运动+毛蕊花苷中剂量组(E)、运动+毛蕊花苷高剂量组(F).结果表明:与C组比较,D、E、F组小鼠骨骼肌损伤程度依次减轻,F组小鼠骨骼肌形态基本正常。F组小鼠血浆CK水平、骨骼肌组织GSSG含量分别低于C、D、E组;但CK水平高于A、B组,均P0.01;GSSG含量与A、B组比较,差异无显著性,P0.05。F组小鼠骨骼肌组织GSH含量、GSH/GSSG比值、GCL和GR酶活性、RyR1复合物中GSH表达水平分别高于C、D、E组,但低于A、B组,均P0.01。研究结果提示毛蕊花苷能降低递增负荷运动小鼠血浆CK的活性,保护运动鼠骨骼肌的形态;其机理与其提高运动鼠骨骼肌组织GSH含量和GCL、GR酶的活性,降低GSSG/GSH比值;提高RyR1复合物中GSH表达水平有关。     

小青龙汤对小鼠支气管哮喘模型气道炎症及细胞因子的影响

目的:探讨中药方剂小青龙汤对小鼠哮喘模型气道炎症及细胞因子的影响。方法:40只BALB/c小鼠随机分为正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、小青龙汤低剂量组(C组)和小青龙汤高剂量组(D组)。B、C、D组采用卵蛋白(OVA)腹腔注射致敏与雾化吸入激发制作哮喘模型。于OVA激发结束后24h收集支气管肺泡灌洗液(BALF)计数炎性细胞总数及嗜酸性粒细胞(EOS)数目,并测定BALF上清液中白细胞介素-4(IL-4)和干扰素-γ(IFN-γ)水平变化。结果:小青龙汤的干预治疗能显著降低小鼠BALF中炎性细胞总数及EOS数量;BALF上清液中IFN-γ水平明显升高,IL-4水平显著下降。D、C组与A组、B组有显著性差异(P<0.05),C组与D组结果亦存在显著性差异(P<0.05)。结论:小青龙汤能明显降低哮喘小鼠BALF中炎性细胞数量,影响细胞因子水平变化,从而改善哮喘气道炎症。     

云芝糖肽对氧化偶氮甲烷-葡聚糖硫酸钠诱导小鼠结直肠癌模型中相关肠道菌的影响及潜在意义

旨在探究云芝糖肽(polysaccharopeptide, PSP)对炎症相关结直肠癌(colorectal cancer, CRC)模型小鼠中肠道潜在致病菌和益生菌的影响。将雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组和PSP组,每组10只。模型组和PSP组以氧化偶氮甲烷(azoxymethane,AOM)/葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)造模。PSP组在造模基础上每日灌胃PSP 650 mg/kg,持续13周。小鼠炎症状态以疾病活动指数(disease activity index, DAI)进行评估。采用实时荧光定量聚合酶链反应技术测定各组小鼠新鲜粪便中厌氧消化链球菌(Peptostreptococcus anaerobius,P. anaerobius)、嗜黏蛋白阿克曼菌(Akkermansia muciniphila,A. muciniphila)、脆弱拟杆菌(Bacteroides fragilis, B．fragilis)、共生梭菌(Clostridium symbiosum, C．symbiosum)及乳酸杆菌(Lactobacillus spp.)的相对丰度。结果显示,PSP可降低造模所导致的小鼠DAI值升高,且在前两轮DSS处理时与模型组比较有显著性差异(P<0.05、 P<0.01)。PSP下调潜在致病菌P. anaerobius、A.muciniphila、B.fragilis以及C.symbiosum的相对丰度,且中期时P.anaerobius、A.muciniphila、 B．fragilis的丰度均显著低于初始水平(P<0.05、 P<0.01、 P<0.05)。表明PSP可缓解致炎剂诱导的小鼠结肠炎症,并降低部分肠道致病菌的相对丰度,提示PSP对炎症相关CRC可能具有潜在的预防作用。     

STZ诱导的糖尿病模型小鼠肾脏的上皮-间质转分化研究

目的:探讨STZ诱导的糖尿病小鼠肾脏发生上皮-间质转分化(EMT)的情况。方法:将80只C57BL小鼠随机分为正常对照组(NC组)和糖尿病组(DM组),每组40只。DM组小鼠用1%STZ(streptozotocin,链脲佐菌素)溶液按60mg/kg体质量的剂量进行腹腔注射,每天1次,连续6天。NC组小鼠平行腹腔注射同等体积0.1mol/L的柠檬酸钠缓冲液。再将成模小鼠随机分为A、B批次,A批次用于动态观察生存率、小鼠体质量及随机血糖的监测;B批次用于在造模后第4、8、12周末观察肾组织的病理变化,并用Western blot、免疫荧光染色的方法观察肾组织中EMT标志蛋白α-SMA和E-cadherin的表达。结果:STZ诱导的糖尿病模型小鼠出现糖尿病典型症状如多饮、多尿等,血糖持续在高水平状态,体质量增长缓慢。在造模后12周末,DM组小鼠较NC组小鼠累积生存率显著降低,两组比较差异具有统计学意义(P0.001)。在造模后的第8周末,DM组小鼠肾脏出现明显的病理改变,到第12周末时,绝大部分肾小管上皮细胞被梭形的肌成纤维细胞取代,肾小球空泡,基底膜增厚。造模后的第4、8、12周末时,DM组小鼠E-cadherin表达量均显著低于NC组小鼠(P=0.004,0.026,0.004);而在第8和12周末时,DM组α-SMA表达量显著升高(P=0.009,0.015)。在第12周末,肾组织冰冻切片E-cadherin和α-SMA、免疫荧光染色结果与上述结果一致。结论:STZ诱导的糖尿病模型小鼠有较典型的糖尿病临床改变,且肾组织发生了EMT。     

平喘固本合剂对昆系小鼠急性哮喘模型气道炎症作用影响

目的:探讨平喘固本合剂对昆系小鼠急性哮喘模型气道炎症作用影响及相关机制。方法:昆明系小鼠40只,随机分为对照组(A),哮喘模型组(B),喘固本合剂治疗组(C),布地奈德雾化治疗组(D)及平喘固本合剂联合布地奈德雾化治疗组(E)。用鸡卵蛋白(OVA)致敏建立昆系小鼠哮喘急性气道炎症模型,并给与药物治疗10天。对各组支气管肺泡灌洗液(BALF)中各种细胞进行分类并计数,观察肺组织的病理变化,同时应用ELISA法测定灌洗液中炎症相关因子的水平变化。结果:与B组比较,C组、D组、E组BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞数、巨噬细胞数及IL-4、IL-4/IFN-γ明显降低(P<0.05),IFN-γ明显升高(P<0.05)。对于IL-4、IL-4/IFN-γ水平的比较C组与D组无明显统计学差异,E组与两者具有明显统计学意义(P<0.05)。HE染色显示C组、D组、E组较单纯模型组炎症细胞浸润,平滑肌肥厚及黏膜肺组织水肿等炎症表现明显减轻。结论:平喘固本合剂对哮喘昆系小鼠气道炎症有明显的抑制作用,其作用机制可能与抑制IL-4的表达、炎性细胞聚积及促进IFN-γ的表达有关,并且可能与糖皮质激素有一定协同作用。     

大鼠心肌缺血再灌注模型构建的改良

目的改良大鼠心肌缺血再灌注模型的构建方法,增强实用性。方法32只SD雄性大鼠随机分为四组（A组：伪手术组;B组：缺血组;C组：缺血30 min再灌注组;D组：缺血60 min再灌注组）。缺血过程在人工机械通气条件下完成,术前术中监测心电图变化,模型成功72 h后抽血进行心肌酶谱分析,并观察左室压变化。结果造模成功率为91%。B、C、D组各心肌酶含量明显高于A组（P〈0.05）,C、D组低于B组（P〈0.05）。B、C、D组左室压值低于A组（P〈0.05）,C、D组高于B组（P〈0.05）。结论改进后的模型制备方法简便易行,成功率高,评价指标符合临床应用。     

清燥救肺汤及其分解剂对肺炎支原体感染小鼠肺部炎症相关因子的影响

目的 探讨清燥救肺汤(QJD)及其分解剂对肺炎支原体(MP)感染小鼠血清中TNF-α、INF-γ含量及肺组织中MPN372、P1、AQP5表达的影响,明确其抗MP感染的分子机制。方法 将144只SPF级BABL/c小鼠随机分成正常组(A组)、模型组(B组)、QJD组(C组)、QJD分解剂I组(D组)、QJD分解剂II组(E组)及阿奇霉素组(F组),每组24只。除A组外,对其余5组小鼠进行MP感染模型处理,造模后分别予对应分组药物灌胃治疗,于造模后第3、7、10、14天进行取材。镜下观察小鼠肺组织病理切片,对小鼠肺组织病理炎症程度进行评分;并计算小鼠肺指数及干湿比;采用q PCR法对MPN372、P1基因含量进行测定;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定各组小鼠血清TNF-α、INF-γ水平变化;Western blot法检测AQP5蛋白的表达。结果 MP感染后,镜下可见肺泡间隔增厚,细支气管壁增厚,大量炎症细胞浸润;其肺指数升高,干湿比降低;TNF-α、INF-γ的含量呈升高趋势,并于第7天达到峰值;AQP5的蛋白表达呈回落趋势,于第14天开始逐渐升高;与B组比较,从第7天开始,C组能够下调MPN372、P1及TNF-α的表达水平,上调INF-γ、AQP5的表达水平;其中D组的作用主要表现在下调MPN372、P1、TNF-α的表达,E组的作用主要表现在上调INF-γ、AQP5的表达。结论 QJD可以控制MP感染后肺部炎症,减少MP毒素MPN372的产生和P1黏附蛋白的表达;上调INF-γ、AQP5蛋白表达,下调TNF-α的表达,是其作用机制之一。     

吲哚美辛对COPD 大鼠TNF-α 与Bcl-2 和Bax 表达的影响

目的:探讨吲哚美辛对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠趾长伸肌TNF-α及Bcl-2和Bax表达的影响。方法:100只健康Wistar大鼠随机分为模型组和对照组(A组)。模型组采用熏香烟和气管内滴注猪胰蛋白酶(PEE)法建立COPD模型大鼠,以低于A组大鼠平均体重的90%判断发生营养不良的标准,将模型组大鼠分为COPD营养正常组(B组)和COPD营养不良组,COPD营养不良组随机化原则分为COPD营养不良生理盐水组(C组)、吲哚美辛1组(D组)、吲哚美辛2组(E组)、吲哚美辛3组(F组)。A、B、C三组灌注等量生理盐水,D、E、F组给予不同剂量吲哚美辛(IND)灌胃干预。TUNEL法测定趾长伸肌细胞凋亡率,免疫组织化学法测定Bcl-2、Bax蛋白表达,双抗体夹心法测定血清及趾长伸肌肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度。结果:吲哚美辛干预后,E组趾长伸肌细胞凋亡率、Bcl-2、Bax的蛋白表达、趾长伸肌匀浆和吲哚美辛干预后血清TNF-α浓度低于C、D、F组,但高于A、B组,P<0.05;E组趾长伸肌Bcl-2蛋白表达高于C、D、F组,低于A、B组,P<0.05。结论:Bcl-2、Bax及TNF-α参与COPD模型大鼠趾长伸肌细胞凋亡,适当剂量的吲哚美辛可改善COPD营养不良模型骨大鼠趾长伸肌的凋亡。     

AOM/DSS结肠癌模型优化及其肠道菌群变化探究

目的 优化氧化偶氮甲烷(azoxymethane, AOM)联合葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate, DSS)造模结肠炎相关性结肠癌(colitis-associated colorectal cancer, CAC)方法并探究肠道菌群在CAC中的发病机制。方法通过AOM不同注射次数联合自由饮用DSS的方法建立A(AOM 1次注射)和B(AOM 2次注射)模型组,正常组采用腹腔注射生理盐水联合饮用纯净水,每组10只。造模结束后通过DAI评分、结肠长度、成瘤率及死亡率等指标综合评估,选择最佳的造模方案。然后对B模型组小鼠进行实验,取血清以ELISA法检测白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及肿瘤标志物CA199、CEA、CA724含量;同时进行HE染色观察结肠病变;并对小鼠粪便进行16S rDNA高通量基因测序法分析,以探究CAC小鼠肠道菌群的变化。结果 单次和加强AOM注射联合DSS均能诱导CAC小鼠模型。但与A模型组相比,B模型组小鼠结肠内增生物较大,排列紧密且形态大小较一致,成瘤率达到100%。与正常组相比,B模型组IL-6显著升高(P...     

sICAM-1、sCD40L与糖尿病大血管病变的关系及干预研究

目的:观察sICAM-1、sCD40L与糖尿病大血管病变的关系,辛伐他汀干预后对sICAM-1、sCD40L水平变化和糖尿病大血管病变发生、发展的影响.方法:复制糖尿病合并大血管病变大鼠模型,随机分为正常对照组(A组)、正常干预组(B组)、糖尿病对照组(C组)、糖尿病干预组(D组),B组和D组给予辛伐他汀灌胃,A组和C组灌予相应量的生理盐水,8周末测四组血生化指标、血清sICAM-1和sCD40L,留取主动脉观察病理变化.结果:血糖C组和D组相近,均显著高于A组和B组(P<0.01);总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)及低密度脂蛋白(LDL-C)A组高于B组,C组高于D组;C组sICAM-1、sCD40L显著高于A组、B组和D组(P<0.01),D组明显低于C组(P<0.01);光镜下观察胸主动脉病变D组较C组减轻,A组与B组相比无明显变化.结论:sICAM-1、sCD40L与糖尿病大血管病变的发生有关;辛伐他汀干预治疗能够降低sICAM-1、sCD40L的水平,同时有明显延缓糖尿病大血管病变的作用.