幽门螺杆菌感染与胃黏膜上皮细胞DNA甲基化的研究进展

在癌症发生表观遗传学研究中,DNA甲基化是研究最多也最深入的一种机制,异常甲基化可导致胃黏膜上皮细胞癌变.幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hpylori)是胃癌的第Ⅰ类致癌原,在“慢性浅表性胃炎-慢性萎缩性胃炎-肠上皮化生-不典型增生-胃癌”的癌变模式中可能起先导作用.胃癌相关基因的异常甲基化和H.pylori的致癌机制均是目前研究的热点,本研究综述H.pylori感染与胃黏膜上皮细胞DNA异常甲基化的关系,阐述H.pylori感染介导慢性炎症诱发胃黏膜上皮细胞DNA甲基化的机制.     

胃癌发生不同阶段临床和胃镜表现及与幽门螺杆菌感染的关系

目的观察慢性浅表性胃炎(CSG)→萎缩性胃炎(CAG)→肠上皮化生(IM)→非典型增生(DYS)→胃癌(GC)五个不同阶段临床和胃镜表现及其与幽门螺杆菌(H.pylori)感染的关系。方法对经胃镜及病理证实的上述GC发生五个不同阶段的患者各50例,详细询问其临床症状,记录胃镜下表现,并用快速尿素酶试验(RUT)、14C尿素呼气试验(14C-UBT)、组织学检查及H.pylori培养等方法检测H.pylori感染情况。结果 (1)CSG和GC的临床表现分别以上腹胀和早饱、体重减轻为主,其他阶段均以上腹痛为主;(2)CSG、CAG和GC的胃镜下表现依次以疣状隆起及糜烂、黏膜变薄及血管显露、巨大溃疡及出血为多见,而IM和DYS均以直径小于2 cm的溃疡为多见(P0.05);(3)H.pylori感染:从CSG→GC不同阶段,H.pylori感染率依次降低(分别为80%、78%、62%、56%和36%,P0.05);临床表现中上腹痛及纳差H.pylori感染率高,早饱H.pylori感染率低(P0.05);不同胃镜下表现中溃疡H.pylori感染率最高(P0.05)。结论体重减轻可作为胃癌警示信号,胃镜下巨大溃疡及出血以GC多见;H.pylori感染率与GC发生阶段呈负相关,临床表现为上腹痛、纳差,及胃镜下溃疡患者H.pylori感染率高。     

中药芪莪合剂联合西药补救治疗H.pylori感染消化道疾病的临床疗效

观察中药芪莪合剂联合西药补救治疗幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)感染上消化道疾病的临床疗效,探讨其临床应用价值。对182例常规抗H.pylori治疗清除失败的上消化道疾病患者,随机分为单用西药组(14 d四联疗法)和中西药联合组(14 d四联疗法+中药芪莪合剂10剂),疗程结束后消化性溃疡患者继服埃索美拉唑14 d,并胃镜观察溃疡及糜烂愈合情况,随访症状缓解及不良反应情况;治疗结束后4周复查~(14)CUBT或~(13)C-UBT,观察H.pylori清除率。结果显示,H.pylori清除率按意向性治疗(ITT)和试验方案(PP)分析在中西药联合组分别为86.8%和89.8%,单用西药组分别为73.6%和78.8%,PP分析两组差异有统计学意义(P0.05);中西药联合组溃疡和糜烂治愈率分别为90.0%和80.6%,单用西药组分别为64.3%和48.5%(P0.05);中西药联合组的症状缓解率为97.7%,高于单用西药组(85.7%,P0.05);两组不良反应发生率无统计学差异(10.2%vs 15.3%,P0.05)。结果表明,采用中药芪莪合剂联合西药补救治疗能获得较高的H.pylori清除率,并能有效治愈溃疡和糜烂,缓解临床症状,且副反应发生率低。     

中药芪莪合剂联合西药治疗幽门螺杆菌诱导的慢性胃炎模型的实验研

目的观察芪莪合剂联合西药对幽门螺杆菌（Hpylori）诱导的慢性胃炎模型的治疗作用,从胃黏膜血流及Cx32、Cx43表达改变探讨其作用机制。方法70只BALB／C小鼠随机分为模型组54只,正常对照组16只。模型组采用东亚型CagA’Hpylori菌株造模,其中48只随机分为4组,分别用芪莪合剂1联合西药组（A组）、芪莪合剂2联合西药组（B组）、三联西药（c组）灌胃治疗14d,对照组用生理盐水（D组）。停用治疗后4周观察Hpylori根除率、胃黏膜炎症改变、胃黏膜血流及Cx32、Cx43表达情况。结果A、B、C组Hpylori根除率分别为83．3％、91．6％与75．0％,胃黏膜炎症评分A、B组与c组均低于D组（P〈0．05）,且A、B组均低于C组（P〈0．05）。A、B组胃黏膜血流量均增加,高于C组和D组,与正常对照组比较差异无统计学意义,A、B、C组Cx32、Cx43mRNA表达均明显高于D组（P〈0．05）,与正常对照组比较差异无统计学意义。结论芪莪合剂与西药合用在减小西药剂量的情况下仍能有效根除Hpylori,且提高胃黏膜血流量,改善胃黏膜炎症,上调Cx32、Cx43mRNA表达。     

幽门螺杆菌对胃上皮细胞间隙连接超微结构的影响

通过实验和临床观察幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)对胃上皮细胞间隙连接超微结构的影响,从细胞间隙连接角度探讨H. pylori致癌机制．将不同H. pylori菌株与BGC-823细胞共培养24 h或 48 h,用原位固定与原位包埋法透射电镜观察细胞间隙连接超微结构变化．对70例胃癌患者,用快速尿素酶试验、碱性品红染色和¹⁴C尿素呼气实验检测H. pylori,PCR法检测H. pylori CagA基因,及透射电镜观察胃上皮细胞间隙连接超微结构变化．结果显示,未加H. pylori组BGC-823细胞可见较多细胞连接及连接复合体,加H. pylori各组细胞的连接数、单位周长连接数与单位周长连接长度均小于未加H. pylori组,而细胞间隙最小宽度大于未加H. pylori组(P < 0.001或P < 0.005),且CagA⁺ 的NCTC J99组、临床株GC 01组和NCTC 11639组细胞连接数、单位周长连接数均小于CagA^- 的NCTC 12908组(P < 0.001或P < 0.05),NCTC J99组与临床株GC 01组细胞单位周长连接长度短于NCTC 12908组(P < 0.001)．胃癌患者H. pylori感染组细胞连接数、单位周长连接数与单位周长连接长度均小于无H. pylori感染组,细胞间隙最小宽度大于无H. pylori感染组(P < 0.001),且CagA⁺ H. pylori感染者细胞连接数、单位周长连接数与单位周长连接长度均小于CagA^- H. pylori感染者,细胞间隙最小宽度大于CagA^- H. pylori感染者．上述结果表明,胃上皮细胞间隙连接改变与H. pylori感染,特别是CagA⁺ H. pylori感染有关．     

幽门螺杆菌对胃上皮细胞间隙连接超微结构的影响(英文)

通过实验和临床观察幽门螺杆菌（Helicobacter pylori）对胃上皮细胞间隙连接超微结构的影响,从细胞间隙连接角度探讨H.pylori致癌机制.将不同H.pylori菌株与BGC-823细胞共培养24h或48h,用原位固定与原位包埋法透射电镜观察细胞间隙连接超微结构变化.对70例胃癌患者,用快速尿素酶试验、碱性品红染色和14C尿素呼气实验检测H.pylori,PCR法检测H.pyloriCagA基因,及透射电镜观察胃上皮细胞间隙连接超微结构变化.结果显示,未加H.pylori组BGC-823细胞可见较多细胞连接及连接复合体,加H.pylori各组细胞的连接数、单位周长连接数与单位周长连接长度均小于未加H.pylori组,而细胞间隙最小宽度大于未加H.pylori组（P〈0.001或P〈0.005）,且CagA＋的NCTCJ99组、临床株GC01组和NCTC11639组细胞连接数、单位周长连接数均小于CagA-的NCTC12908组（P〈0.001或P〈0.05）,NCTCJ99组与临床株GC01组细胞单位周长连接长度短于NCTC12908组（P〈0.001）.胃癌患者H.pylori感染组细胞连接数、单位周长连接数与单位周长连接长度均小于无H.pylori感染组,细胞间隙最小宽度大于无H.pylori感染组（P〈0.001）,且CagA＋H.pylori感染者细胞连接数、单位周长连接数与单位周长连接长度均小于CagA-H.pylori感染者,细胞间隙最小宽度大于CagA-H.pylori感染者.上述结果表明,胃上皮细胞间隙连接改变与H.pylori感染,特别是CagA＋H.pylori感染有关.     

不同类型幽门螺杆菌对GES-1细胞Cx32、Cx43表达的影响

目的观察不同类型幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,H.pylori）对人胃黏膜上皮细胞系GES-1细胞间隙连接蛋白（Connexin,Cx）32和43表达的影响,探讨与Cx32、Cx43表达异常有关的H.pylori菌株类型。方法将临床培养分离的不同H.pylori菌株类型包括东亚型CagA＋H.pylori、西方型CagA＋H.pylori及CagA-H.pylori与GES-1细胞共培养24 h及48 h,对照组不加H.pylori培养24 h及48 h。采用间接免疫荧光方法（IIF）及计算机图像分析技术检测GES-1细胞Cx32、Cx43表达。结果对照组24 h和48 h及加H.pylori各组24 h GES-1细胞Cx32、Cx43表达阳性率均为100%,东亚型CagA＋H.pylori组48 h Cx32、Cx43表达阳性率均低于对照组、CagA-H.pylori组和西方型CagA＋H.pylori组（P〈0.05）;对照组24 h和48 h Cx32、Cx43绿色荧光位于细胞膜,西方型CagA＋H.pylori组和东亚型CagA＋H.pylori组24 h和48 h Cx32绿色荧光大部分位于细胞膜,少部分位于细胞浆,Cx43绿色荧光大部分位于细胞浆,少部分位于细胞膜;东亚型CagA＋H.pylori组和西方型CagA＋H.pylori组24 h及48 hCx32、Cx43表达强度低于对照组和CagA-H.pylori组（P〈0.05）,且东亚型CagA＋H.pylori组较西方型CagA＋H.py-lori组减弱更明显（P〈0.05）。结论 H.pylori下调GES-1细胞Cx32、Cx43表达,以CagA＋H.pylori菌株特别是东亚型CagA＋H.pylori菌株作用更明显。     

H.pylori对MGs胃黏膜Cx32、Cx43及相关转录因子表达的影响

目的观察幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)对蒙古沙土鼠(Mongolian gerbils,MGs)胃黏膜Cx32、Cx43和转录因子GATA-3、AP-4、PBX-1、C/EBPβ表达的影响及其相关性,探讨H.pylori致癌的机制。方法实验组采用经胃镜及病理确诊的胃癌患者胃黏膜分离的H.pylori对36只MGs灌胃,对照组5只用灭菌PBS灌胃;分批处死,观察H.pylori灌胃后第4、24、48、72周MGs H.pylori定植和胃黏膜病变情况,及Cx32、Cx43和转录因子表达变化。结果实验组H.pylori定植率为80.0%,灌胃后第4、24周MGs胃黏膜肉眼见充血水肿或糜烂、出血,HE染色呈不同程度慢性非萎缩性胃炎(NAG),48周后6例肉眼见胃黏膜变薄、颜色灰暗,HE染色4例慢性萎缩性胃炎(CAG)、2例肠化(IM),对照组无H.pylori定植,胃黏膜肉眼及HE染色无明显异常;实验组较对照组MGs胃组织Cx32、Cx43表达显著下降,转录因子GATA-3、AP-4、PBX-1、C/EBPβ表达显著升高(P0.05),其中有胃癌前病变(CAG和IM)者较NAG者改变明显(P0.05);Cx32、Cx43与转录因子表达呈负相关(-1r0,P0.05)。结论 H.pylori感染上调MGs胃黏膜转录因子GATA-3、AP-4、PBX-1和C/EBPβ表达,下调Cx32、Cx43表达,可能与胃癌发生有关。