鼠抗人纤维蛋白抗体单链Fv片段的人源化分子设计

产生免疫原性的残基都是位于蛋白表面的暴露残基,为了消除鼠抗体对人的免疫原性,利用表面再塑方法对本室克隆的鼠抗人纤维蛋白抗体单链Fv片断进行了人源化分子设计。首先确定了鼠及人Fv表面残基,在此基础上分析了鼠与人Fv间表面残基的差异,将有差异的鼠表面残基换成人的。提出了残基最高频率人源化及最相似链人源化两种人源化方案。人源化后鼠抗人纤维蛋白抗体单链Fv的结构经Profile-3D验证是合理的,置换的表面残基溶液可及性未变,且未影响CDRs的结构,应不会影响与纤维蛋白的亲和力,为鼠抗体人源化实验研究奠定了基础。     

尼安德特人基因组学研究进展

尼安德特人是现代人最近的旁支,也是化石资料最丰富的古人类。在现代人起源问题的争论中,尼安德特人对现代人是否有遗传贡献是一个焦点问题。文章综述了近年来关于尼安德特人线粒体基因组和核基因组的研究进展,初步研究表明尼安德特人可能对现代人有遗传贡献,这引发了人们对现代人起源问题的重新思考。藉尼人基因组研究经验进行的古人类基因组学研究将有望揭开现代人起源的谜团,并丰富进化生物学相关领域的理论体系。     

智力水平还是文化表现?——尼安德特人与现代人文化精致程度差异研究述评

尼安德特人和解剖学意义上的现代人在文化精致程度上的区别已经争论了很长时间,考古学者希望能得出一个确定的答案,两个假设应运而生:智力水平(尼人不能发展出精致的文化)与文化表现(尼人不需要发展出精致程度较高的文化)。古人类与考古材料显示智力水平假设有缺陷:尼人的基因进入了现代人的基因库中,而且他们有能力学习现代人的技术,在"过渡工业"的材料中可以找到相关证据;与此同时,至今还未找到关系到智力水平的大脑结构证据证明尼人智力水平不如现代人。检验文化表现假设的前提是尼人与早期现代人在智力水平上没有差异,却呈现出不同的社会网络和社会组织。本文在讨论尼人与现代人人口与社会交流的基础上,认为现代人复杂的社会组织切割了尼人的生活环境,同时火山爆发引起了资源短缺,最终导致了尼人在欧洲灭绝。     

吉林省中医药管理局药用菌物资源及其开发利用研究室

<正>吉林省中医药管理局药用菌物资源及其开发利用研究室在李玉院士的指导下,由包海鹰教授带领菌物药方向研究团队,率先在国内开创了菌物生药学的研究,在菌物药的研究方面积累了丰富经验,并取得了丰硕的成果。.在菌物药的本草考证、化学成分和药理活性研究等方面做了大量的研究工作,从菌物药中发现了结构新颖的新化合物及抗肿瘤活性成分,均为新产品的研制提供了基础。本研究室面积4 800平方米,仪器设备价值达800万元。有教授4人,副教授6人,讲师4人,助教1人,实验员2人,具有博士学位15人。主持完成了"药用木腐真菌‘桑黄’资源及其抗肿瘤活     

抗人IgG Fc片段及Fab段单抗的鉴定及应用

本实验采用木瓜酶水解,SPA柱亲合层析等手段得到人IgGFc段及Fab段,以Sigma抗人IgGfFc段和抗人IgG Fab段单抗为标准品,鉴定了细胞库中抗人IgG系列的部分细胞株,得到特异性分泌抗人IgG Fc段和抗人IgG Fab段单抗的细胞各一株。 在上述实验基础上,用抗人IgG Fc及抗人IgG Fab单抗分别制备了Sepharose4B亲合层析柱,提纯了酶解人IgG Fc、Fab片段,经ELISA法鉴定,相互之间无交叉反应。同时用此方法制备了人抗HBe Fab片段,并将该片段进行了过氧化物酶标记,用来配制HBe ELISA诊断盒,证明其生物活性未受影响,而且消除了类风湿因子引起的HBe Ag假阳性现象。因抗HBe单抗来源困难,如采用HBe多抗制备ELISA试剂,本法将是提高质量的一个好方法。     

我的良师益友

<正>转眼之间,从四川大学研究生毕业已近20年了,真是人生一回首,如白驹过隙,实在令人感叹。不知不觉,走过了多少岁月,一些人收藏在了岁月的记忆里,一些人成了生命中的过客。在人一生中,学生时代的经历是最难忘     

人源化小鼠人源细胞检测方法

目的人源化小鼠在人类疾病与再生医学研究中具有广泛应用,为获得一种理想的人源化小鼠检测方法,研究人特异性线粒体序列扩增作为人源化动物模型中人类DNA检测方法的可行性。方法设计人线粒体DNA特异性引物,并用该引物对人脐血造血干细胞嵌合体小鼠进行了检测。结果在人源化动物模型的人类DNA检测中,这种人线粒体DNA的PCR检测方法能够达到理想的特异性与灵敏性,是一种理想的嵌合体小鼠检测方法。结论获得了一种理想的人源化小鼠人源细胞检测方法。     

人凝血因子Ⅶ cDNA基因的克隆与鉴定

目的:克隆并鉴定人凝血因子ⅦcDNA基因。方法:采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法,从人胎肝总RNA中扩增人凝血因子ⅦcDNA基因,将其克隆入pGEM-T载体,对阳性克隆进行序列测定和分析。结果:经RT-PCR扩增和克隆,获得了人凝血因子ⅦcDNA基因,经序列分析表明,所克隆的基因序列正确。结论:本试验成功克隆了人凝血因子ⅦcDNA基因,为重组人凝血因子Ⅶ的研究奠定了基础。     

捍卫进化论的新保卫战

尽管美国是科技最发达的国家之一,但多数公众仍不接受达尔文的进化论。美国哥伦比亚广播公司2005年10月的民意测验显示,51%的美国人相信人是上帝制造的,30%的人认为上帝参与了人的进化。面对进化论反对者的不断挑战,捍卫进化论的科学家们做了些什么呢?     

鼠抗人纤维蛋白抗体单链Fv片段的人源化分子设计

产生免疫原性的残基主要是位于蛋白表面的暴露残基,为了消除鼠抗体对人的免疫原性,利用表面再塑的方法对本室克隆的鼠抗人纤维蛋白抗体单链Ｆｖ片段进行了人源化分子设计．首先确定了鼠及人Ｆｖ片段的表面残基,在此基础上分析了鼠与人抗体Ｆｖ片段表面残基的差异,将存在差异的鼠抗体的表面残基换成人的,从而实现鼠抗体的人源化．提出了残基最高频率人源化及最相似链人源化两种分子设计方案．人源化的鼠抗人纤维蛋白抗体单链Ｆｖ片段的结构经Ｐｒｏｆｉｌｅｓ－３Ｄ检测证明合理,替换的表面残基的溶剂可及性未变,而且未对ＣＤＲｓ的空间构象产生明显影响,应不会影响与纤维蛋白的亲和力,为鼠抗体人源化实验研究奠定了基础．     

人天然免疫基因TRIM5α的序列及进化分析

目的：克隆人TRIM5α基因,对其编码序列进行分析,并进行分子进化研究。方法：以HeLa细胞cDNA为模板,用RT-PCR方法克隆人TRIM5α基因,与人基因组序列对比分析其结构;用BioEdit、Genedoc和MEGA4.1软件进行蛋白序列联配和进化分析。结果：扩增了长1482bp的人TRIM5α基因片段,序列分析表明其覆盖了完整编码框,编码由493个氨基酸残基组成的人TRIM5α蛋白;人TRIM5α蛋白与黑猩猩、大猩猩、猩猩、猕猴TRIM5α蛋白的相似度分别为98.2%、96.8%、93.7%和87.6%。结论：克隆了人TRIM5α基因,为进一步研究该基因的功能奠定了基础。     

福建省农业科学院花卉研究中心 福建省特色花卉工程技术研究中心

<正>福建省农业科学院花卉研究中心成立于1982年,隶属于福建省农业科学院作物研究所。2008年经福建省科技厅批准组建了"福建省特色花卉工程技术研究中心",2012年12月通过验收、挂牌,成为福建省第一个花卉科技创新平台。2007年组建了福建省农业科学院"花卉育种科技创新团队",成员16人,其中高级职称9人,中级职称7人,硕、博士10人,福建省"百千万人才工程"1人。     

重组人TNF-α在大肠杆菌表达、纯化及生物学活性鉴定

[目的]获得人TNF-α蛋白,并鉴定其生物学活性。[方法]通过对人源TNF-α序列进行密码子优化构建了p Cold-TNFα原核表达载体,完成了TNF-α重组蛋白的表达,建立了两步分离纯化方案,并利用Western Blot和细胞刺激实验检测了重组人TNF-α蛋白抗原性和生物学活性。[结果]利用大肠杆菌成功表达重组人TNF-α蛋白,经酶切纯化后的人TNF-α蛋白不含标签序列,纯度达95%,收率约70%,并具有良好的生物学活性。[结论]获得具有生物学活性的人TNF-α蛋白,为进一步的中和抗体研究奠定了基础。     

阿伊努人的故事(上)

阿伊努人是日本唯一的少数民族,也是日本列岛上最古老的民族。间伊努是“人类”或“人”的意思。阿伊努人旧称虾夷人,“虾夷”是“男子”的意思。阿伊努人最初居住在日本国土的绝大部分地区。大约在2500年前,大洋彼岸来的人登上了日本列岛,阿伊努人被打败了,他们失去了土地,家园,一部分被消灭了,一部分被溶合了,另一部分则跑到遥远的北方。他们主要住在库页岛、千岛群岛,北海道,东北地方的北部,如青森、秋田、磐田等县。阿伊努人大约两万多人,他们所讲的语言与一切已知的语言均无     

中国人线粒体DNA的八种限制酶图及其电镜结构

尽管Anderson等人(1981)已测定了人mtDNA的全部序列,但还不能全面地反映整个人类mtDNA核苷酸序列的情况。因此,在具有代表特征的中国人mtDNA序列被测定之前,为了开展对中国人mtDNA的遗传学研究,笔者构建了中国人mtDNA的8种限制酶图。并通过电镜技术对mtDNA进行了研究,发现了一种周长为2μm的小环状DNA,推测它可能在核DNA和mtDNA之间的信息传递或衰老发生中起到某些作用。     

中国八甲人与空格人的体质特征

八甲人与空格人属于我国未识别族群。我们去云南省西双版纳调查了八甲人158例(男为61例,女为97例)与空格人71例(男为46例,女为25例)的86项体质指标,初步分析了八甲人与空格人的体质特征。结果如下:1)八甲人的上眼睑皱褶率男为95.08%,女为98.97%;空格人的上眼睑皱褶率男为80.43%,女为100%。八甲人蒙古褶率男为18.03%,女为29.90%;空格人的蒙古褶率男为32.61%,女为64.00%。八甲人与空格人眼裂高度多为中等,眼外角高于眼内角。八甲人男女鼻根高度多为中等。空格人男性鼻根较高,女性鼻根中等。八甲人与空格人男女均为直型鼻梁,鼻基部多为水平方向。八甲人男女颧骨体不突出。八甲人鼻翼高度约为鼻高的1/4。八甲人与空格人男女鼻翼宽与两眼内角间宽几乎等长,多为圆形耳垂,上红唇多为薄唇,唇皮类型多为中等。八甲人眼色多为褐色,空格人眼色多为黑色。2)根据头面部、体部指数分型,八甲人与空格人男女均以高头型率、阔头型率、中鼻型率、中腿型率、宽肩型率、身材矮型率最高。八甲人男女还以圆头型率、长躯干型率、宽胸型率最高。空格人男女还以中胸型率、窄骨盆型率最高。八甲人与空格人男性还以阔面型率最高,而女性则以中面型率最高。3)聚类分析显示八甲人与空格人体质特征属于南方族群类型。     

大荔人化石地点第二次发掘简报

对大荔人化石地点进行再次的发掘,不仅发现了新的文化层,而且在含大荔人化石层中找到了384件石器和一些哺乳动物化石,为探讨“大荔人”文化的性质及其时代提供了有意义的资料。     

人生长素基因的合成及克隆

根据人生长素基因的氨基酸序列,选择大肠杆菌所偏好的密码子,人工设计并合成了20个寡核苷酸片断。通过重叠区扩增法,利用PCR成功地合成了人生长激素基因的全序列。经克隆测序,证明已成功地实现了人生长素基因的合成及克隆。     

人B细胞永生化研究进展

人源单克隆抗体具有免疫原性低、半衰期长等优势,成为了体内应用中不可或缺的生物制剂。人类抗体库为人源单克隆抗体的制备提供了丰富的来源,人B细胞永生化是获得人类抗体库的潜在有效方法,可应用于人源单克隆抗体的制备。由于各平台均有亟待解决的问题,基于人B细胞永生化的抗体制备尚局限在实验室研究阶段,且目前尚缺乏一篇系统综述以明确现有的人B细胞永生化抗体制备平台的优劣及其可行性分析。因此文中就基于人B细胞永生化方法制备人源单克隆抗体的研究展开综述,以期为人源单克隆抗体制备技术的进一步发展提供参考。     

节日祭祀中的竹

布依族插龙猫竹布依族每年的农历六月六都要到田边插龙猫竹,这一习俗来源于一个古老的神话。相传古时布依寨子遭受蚂蚱和飞蛾危害,庄稼颗粒无收。人们求助于太阳神。太阳神授予人们一只龙猫竹,布依族人将竹栽下,一夜之间长成竹林。布依族人人手拿龙猫竹,扑打飞蛾和蚂蚱,终于把害虫都消灭了。从此布依族人又过上了丰衣足食的生活。此后,每年六月六,布依人都要到田边插龙猫竹,世代相传。