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共有20条相似文献,以下是第1-20项 搜索用时 718 毫秒

1.  姬菇原生质体制备与再生条件初探  被引次数:1
   杨凤苓  贾乐  任轩《生物技术》,2007年第17卷第6期
   目的探索姬菇(Pleurotus cornucopiae)菌丝原生质体制备和再生条件.方法以培养5d的幼嫩菌丝体为材料,在1.5%溶壁酶 0.5%纤维素酶混合酶作用下,以0.6mol/L甘露醇作渗透压稳定剂于pH5.5,30℃酶解2.5h,然后用血球计数板计数,计算原生质体产量.结果在上述条件下,原生质体产量达到3.12×107个/mL.原生质体适宜的再生培养基为马铃薯200g,蔗糖20g,酵母膏2g,KH2PO4 3.0g,MgSO4 ·7H2O 1.5g,维生素B1 0.1g,0.6mol/L甘露醇.采用上述培养基,原生质体再生率达到O.78%.为姬菇原生质体诱变及融合育种奠定了基础.    

2.  黄曲霉菌原生质体的制备和再生技术优化  
   储韬  黄国玉  赵志伟  陶芳《激光生物学报》,2014年第4期
   黄曲霉菌的遗传转化是研究黄曲霉菌致病相关功能基因的前提和基础,而原生质体是研究和建立真菌遗传转化系统的重要工具。本文分别以黄曲霉孢子和菌丝为材料,研究不同条件下黄曲霉原生质体的形成和再生,结果表明,黄曲霉孢子在酶液浓度为纤维素酶∶蜗牛酶∶溶壁酶=1.5%∶1.5%∶1.5%,30℃酶解3 h,原生质体制备率高达97.3%,再生率达89.2%;黄曲霉菌丝在菌龄为42 h,酶液浓度为纤维素酶∶蜗牛酶∶溶壁酶=1.5%∶1.5%∶1.5%,30℃酶解1 h,可获得最高原生质体产量为2.0×10^6个/m L,再生培养基中以1 mol/L蔗糖作为渗透压稳定剂时,原生质体再生率达5.5%。故本实验条件下,黄曲霉孢子原生质体的形成和再生优于菌丝。    

3.  不同因素对金针菇原生质体制备和再生的影响  被引次数:1
   陈力力  马美湖  周传云  高必达《生物技术》,2005年第15卷第5期
   比较了不同浓度裂解酶及组合、渗透压稳定剂、酶解时间等因素对金针菇原生质体得率的影响以及不同渗透压稳定剂、培养基、接种方法等因素对金针菇原生质体再生的影响。试验结果表明:固体培养10d的金针菇菌丝,以0.5mol/L KCl作渗透压稳定剂,加入1%纤维素酶和1%溶菌酶在25℃下酶解1.5h,分离原生质体效果最佳,原生质体产量可达27.8×105个/ml以上;以0.5mol/L KCl作渗透压稳定剂,在25℃条件下,金针菇原生质体采用直接涂布法接种在RCM培养基上培养,再生率最高为0.5%。    

4.  蓝色犁头霉原生质体的制备与再生  被引次数:4
   王敏  王春霞  路福平  杜连祥《工业微生物》,2001年第31卷第2期
   研究了氢化可的松生产菌蓝色犁头霉原生质体的形成与再生。通过对溶解酶系统的选择,影响原生质体形成的因素如渗透压稳定剂、酶浓度、菌龄、菌丝培养基和培养方式等因素进行考察,发现以0.4mol/L NH4Cl做为稳定剂、2.5mg/mL溶壁酶和5mg/mL纤维素酶组成的混合酶液溶解菌丝,4h后原生质体量可达10^6cell/mL。通过显微镜观察原生质体的形成过程以及在高渗培养基上的再生情况,再生率为15.6%。    

5.  斜卧青霉原生质体制备和再生的研究  被引次数:2
   赵晨  易宗春  荣龙  孙艳《微生物学杂志》,2009年第29卷第1期
   研究了斜卧青霉原生质体制备和再生的条件,确定了培养方式、菌龄、渗透压稳定剂、酶的配比、酶解时间等因素对原生质体制备和再生的影响。最佳条件:菌丝体培养12h,用1%溶壁酶+1%纤维素酶+1%蜗牛酶的混合酶液酶解,将NaCl作为渗透压稳定剂,酶解时间为1.5h。在此条件下原生质体的形成量达到5.3×10^5个/mL,再生率为19.4%。    

6.  赤芝原生质体分离与再生研究  
   孙墨可  陈欢  李晰亮  赵竞男  李海燕  李玉《菌物研究》,2015年第13卷第1期
   以赤芝(Ganoderma lucidum)为供试菌种,研究了不同酶解温度、酶解时间、渗透压稳定剂浓度及菌龄、再生培养基等对赤芝菌丝的原生质体制备与再生的影响。结果表明:菌龄为4 d的菌丝,以0.4 mol/m L的甘露醇作渗透压稳定剂配制成浓度为0.02 g/m L的溶壁酶,于p H 5.0、25℃条件下酶解2.0 h,其原生质体数最高可达3.87×107/m L,MYG再生培养基上再生率达到0.016%。    

7.  松茸菌丝原生质体形成与再生条件的研究  被引次数:2
   沙涛  张汉波  丁骅孙  程立忠  周帼萍  陈虹颖  朱宏《生物技术》,2001年第11卷第2期
   采用多因素实验正交优选法比较不同酶、渗透压稳定剂、菌丝生理状况、菌丝培养基、预处理液和酶解时间等因素对松茸原生质体形成的影响和再生培养基、明胶、酪蛋白对松茸原生质体再生的影响.以0.6MMgSO4作为渗透压稳定剂,2-硫基苏糖醇为预处理液,用2%蜗牛酶在30℃酶解6h,每克菌丝可以得到1×106个原生质体.再生最优条件0.6MMgSO4,PDY再生培养基,2.5%明胶,松茸菌丝再生率最高4.97%.    

8.  丝状真菌AL18的原生质体制备和再生条件的优化  被引次数:2
   卢明锋  张月杰《生物技术》,2012年第22卷第3期
   目的:为了建立起产苝醌类光敏剂丝状真菌AL18原生质体制备和再生体系。方法:采用单因素实验法研究了预处理方式、渗透压稳定剂和酶解条件对原生质体制备率和再生率的影响。结果:原生质体制备及再生的最佳条件是用0.3%的β-巯基乙醇预处理15 min,酶解液以0.6 mol/L的MgSO4·7H2O作为渗透压稳定剂,0.02 mol/L的磷酸盐缓冲液pH值为5.8,纤维素酶:蜗牛酶=2:3,酶的总浓度为15mg/mL,36℃酶解2h;以0.6mol/L的蔗糖作为再生培养基的渗透压稳定剂。结论:原生质体的制备率和再生率可分别达到1.42×107/mL和3.2%。    

9.  灰绿拟青霉U—2原生质体形成和再生条件研究  被引次数:1
   戴美学 奚新伟《生物技术》,1997年第7卷第4期
   发绿拟青霉U-2原生质体形成和再生的较为适宜的条件为:YD培养48~52h,用0.15%流基乙醇预处理0.5h,以pH650.6MKCl作为渗透压稳定剂,用1%真菌治壁酶于28℃酶解4h;在合1%琼脂的再生培养基上再生。    

10.  卷枝毛霉孢子原生质体的制备与再生  
   陈清霞  江贤章  刘锦清  宋芬芬  黄建忠《生物加工过程》,2011年第9卷第2期
   为了构建高产γ-亚麻酸的卷枝毛霉稳定遗传转化体系,利用酶解法对卷枝毛霉(Mucor circinelloides sp.)EIM-10的孢子进行原生质体制备。研究酶液组成、渗透压稳定剂、酶解温度、酶解时间等对卷枝毛霉孢子原生质体形成和再生的影响,建立了制备卷枝毛霉孢子原生质体的最适条件:1%纤维素酶和2%溶壁酶为酶解体系,0.5mol/L NaCl作为渗透压稳定剂,酶解温度32℃,酶解时间2.5 h,再生培养基为0.5 mol/L NaCl高渗培养基。用双层平板培养法进行原生质体再生,在此条件下原生质体的形成量为1.2×106个/mL,再生率为70.5%。    

11.  酿酒酵母RasseⅫ原生质体的形成与再生  被引次数:7
   甘志波  赵学慧《微生物学杂志》,1994年第14卷第2期
   研究了菌龄、酶系统、脱壁促进剂、渗透压稳定剂对酿酒酵母RasseⅦ(SaccharonmycescerevisiaeRaceⅫ)原生质体形成与再生的影响。结果表明,对数生长早期的菌体最适于制备原生质体;酶浓度是影响原生质体产量的主要因子,其次为时间,再次是温度;而就再生率而言,温度则是决定因子,酶浓度为第二,时间则几乎不起作用;脱壁促进剂能够加速细胞壁的溶解,尤以巯基乙醇效果较好,然而也有降低再生率之弊,综合考虑原生质体形成与再生的情况,本研究中以选用2%的酶浓度30℃下酶解1-1.5h于17%蔗糖高渗培养基上再生为获得RasseⅫ原生质体形成率和再生率的最佳条件。    

12.  灵芝原生质体分离与再生研究  
   李刚  李宝健《菌物学报》,1999年第1期
   首次详细、系统地探讨了灵芝原生质体分离与再生的条件,结果表明:用0.6mol/L甘露醇配制成含2%溶壁酶和0.5%崩溃酶的复合酶,在30℃,pH为6.0时酶解3小时,可得到最高的原生质体得率。但考虑到原生质体的再生,以酶解2.5小时为最适。酶解2.5小时所得原生质体经精制,用纤维二糖培养基(以0.6mol/L甘露醇为渗透压稳定剂)进行双层平板(上层平板含0.2%琼脂)培养法再生,原生质体的再生率最高。本研究为以后进行灵芝原生质体的融合以及灵芝的转基因研究打下了基础。    

13.  灵芝原生质体分离与再生研究*  
   李刚 李宝健《菌物学报》,1999年第18卷第1期
   首次详细、系统地探讨了灵芝原生质体分离与再生的条件,结果表明:用0.6mol/L甘露醇配制成含2%溶壁酶和0.5%崩溃酶的复合酶,在30℃,pH为6.0时酶解3小时,可得到最高的原生质体得率。但考虑到原生质体的再生,以酶解2.5小时为最适。酶解2 5小时所得原生质体经精制,用纤维二糖培养基(以0.6mol/L甘露醇为渗透压稳定剂)进行双层平板(上层平板含0.2%琼脂)培养法再生,原生质体的再生率最高。本研究为以后进行灵芝原生质体的融合以及灵芝的转基因研究打下了基础。    

14.  γ-亚麻酸生产菌深黄被孢霉原生质作的形成和再生  
   李明春  邢来君《菌物学报》,1997年第1期
   采用2%的溶壁酶加4%的蜗牛酶,从深黄被孢霉的菌丝中获得了大量的原生质体。同时对菌丝的培养时间、渗透压稳定剂、酶解系统和酶解温度等因素进行了系统的观察,从而获得了制备深黄被孢霉原生质体的最适条件。并对该原生质体在高渗培养基上进行了再生实验,其再生率为32%。    

15.  γ—亚麻酸生产菌深黄被孢霉原生质体的形成和再生  
   李明春 邢来君《菌物学报》,1997年第16卷第1期
   采用2%的溶壁酶加4%的蜗牛酶,从深黄被孢霉的菌丝中获得了大量的原生质体。同时对菌丝的培养时间、渗透压稳定剂、酶解系统和酶解温度等因素进行了系统的观察,从而获得了制备深黄被孢霉原生质体的最适条件。并对该原生质体在高渗培养基上进行了再生实验,其再生率为32%。    

16.  深黄被孢霉3.3410原生质体的制备和再生研究  被引次数:2
   徐新丽  谢必峰《生物技术》,2009年第19卷第2期
   目的:为了获得数目较多且稳定性较好的深黄被孢霉原生质体,对影响深黄被孢霉原生质体制备和再生的因素进行了研究.方法:以培养20h的幼嫩菌丝体为材料,在1.5%纤维素酶+0.5%的蜗牛酶+1%溶菌酶混合酶作用下,以0.8mol/L MgSO4·7H2O作渗透压稳定剂于30℃酶解3h,然后用血球计数板计数,计算原生质体产量.结果:在上述条件下,原生质体浓度可达到5.5 × 107个/ml.并对该原生质体在高渗培养基上进行再生实验,其再生率达到25.40%.为深黄被孢霉原生质体诱变及融合育种奠定了基础.    

17.  假丝酵母原生质体形成与再生的研究Studies on Formation and Regeneration of Protoplast from Candida sp.  被引次数:5
   王沁WANG Qin《遗传》,1996年第18卷第2期
   本文研究了菌龄、酶系统、脱壁促进剂、渗透压稳定剂对假丝酵母Y002 原生质体形成与再生的影响。综合考虑形成率与再生率后,选用对数生长中期的菌体于1%蜗牛酶、 35℃下作用60分钟制备原生质体,并于以17%蔗糖作渗透压稳定剂的再生培养基中再生效果为好。    

18.  无花果曲霉原生质体形成与再生条件的探讨  被引次数:7
   宛晓春 丁霄霖《应用生态学报》,1998年第9卷第4期
   根据正交试验得出无花果曲霉原生质体形成的最佳条件,用1%的混合酶液(0.5%纤维素酶+0.25%蜗牛酶+0.25%溶菌酶)作用无花果曲霉菌体细胞,原生质体产量达3.2×107个·ml-1,渗透压稳定剂为0.6mol·L-1KCl于0.2mol·L-1PO3+4(pH5.8)中,酶解时间和酶解温度分别为3.0h、30℃.比较不同酶解时间、再生稳定剂和碳源等因素对原生质体再生的影响,可确定最佳再生条件,再生率达30%以上.    

19.  茯苓原生质体制备与再生条件的研究  被引次数:9
   王伟霞  李福后《菌物研究》,2006年第4卷第4期
   研究了酶、酶解时间、菌龄、稳渗剂等对茯苓原生质体制备与再生的影响。茯苓原生质体制备的最佳条件为:纤维素酶(1.5%)和蜗牛酶(1.5%)的等量混合酶解系统,酶解时间3h,7d菌龄菌丝,产量可达1.77×10~7个/mL。以甘露醇为稳渗剂,采用CYM再生培养基,酶解时间3h,7d菌龄菌丝,其原生质体再生率最高,为0.164%。这一结果为茯苓通过原生质体技术进行菌种改良提供了重要技术参数。    

20.  平菇原生质体制备与再生条件初探  
   孟庆国  赵杰  周建树  田浩  陈超  韩冰  王志《微生物学杂志》,2008年第28卷第2期
   平菇原生质体制备最佳条件是菌丝培养5 d、酶浓度1.5%、pH 5.5、0.6 mol/L甘露醇渗透压稳定剂、酶解温度30℃、酶解时间2 h、OS培养基。原生质体过滤、纯化、稀释后涂布再生培养基,再生率为2.6%。    

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