高危型HPV DNA整合导致宫颈癌的作用机制和临床检测进展

高危型人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染是宫颈癌发生发展的必要因素之一。病毒DNA整合到宿主基因组中被认为是导致宫颈癌最重要的病因。高危型HPV DNA整合往往导致其E1和E2区大部分缺失或中断,E6和E7致癌基因过表达,宿主致癌基因激活和抑癌基因失活。目前研究表明高危型HPV整合可作为优质宫颈病变筛查的预测生物标志物,且其检测的有效方法大都基于荧光原位杂交、实时荧光定量PCR和杂交捕获技术结合Sanger测序法等。本文重点阐述了高危型HPV整合导致宫颈癌的主要机制,描述了宫颈病变筛查标志物以及预防性HPV疫苗研发和推广的研究进展,并综述了高危型HPV DNA整合状态的检测方法。     

HPV 58 L1改造基因的表达及其VLP产物抗血清制备

高危型人乳头瘤病毒（human papillomavirus, HPV）慢性持续性感染是诱发宫颈癌的主要病因．体外表达的HPV主要衣壳蛋白（L1）可自组装成病毒样颗粒（virus-like particle, VLP）,免疫后可诱导产生型别特异性中和抗体,有效保护机体免受同型病毒的感染,因此可望预防病毒感染及感染相关的宫颈癌等病变．HPV 58是诱发我国妇女宫颈癌的主要高危型病毒之一,目前尚无针对HPV 58的疫苗问世．本研究联合采用多种策略对HPV 58 L1野生型基因进行改造,获得HPV 58 L1改造基因,命名为HPV 58mL1,用杆状病毒 昆虫细胞表达系统进行HPV 58 mL1的表达,CsCl密度梯度离心法纯化获得HPV 58 mL1重组蛋白,电镜分析结果显示,重组蛋白形成直径约55 nm的VLP．皮下免疫新西兰兔和豚鼠,ELISA检测显示,免疫动物产生高滴度针对HPV 58 mL1 VLP的抗血清,免疫斑点印迹检测显示,抗血清是针对VLP表面表位的．本研究表达了均一性好的HPV 58 mL1 VLP,并获得两个种属的HPV 58 mL1 VLP抗血清,为进一步研究有效预防HPV 58感染的疫苗打下基础．     

HPV病毒感染与宫颈病变发生发展关系的研究进展

宫颈病变是指在宫颈区域发生的各种病变,包括炎症、癌前病变、肿瘤等,人乳头瘤病毒(HPV)是引起多种宫颈病变的主要因素之一,尤其是高危型HPV病毒的持续感染更是宫颈病变的重要病因,目前高危型HPV病毒的检测已成为筛查宫颈癌前病变及宫颈癌的重要手段。现将近年来HPV病毒感染与宫颈病变发生发展关系的研究进展作一综述。     

人乳头瘤病毒58型L1基因重组表达载体的构建及鉴定

目的　人乳头瘤病毒 (HPV)是一种能引起人类皮肤、粘膜的乳头状瘤或疣 ,并可导致恶性病变的病原体。研究表明 ,90 %宫颈癌的发生与人乳头瘤病毒感染有关。近年流行病学研究和文献报道显示 ,HPV5 8型在中国妇女宫颈癌中检出阳性率非常高 ,是仅次于HPV1 6型、1 8型的乳头瘤病毒高发型 ,尤其是东南省份 ,5 8型的感染率有上升趋势 ,与HPV1 6型的检出率相近 ,同时二者在宫颈各病变组的检出强度趋势基本一致。由此可见 ,在我国HPV5 8型感染与宫颈癌关系密切。在HPV5 8基因组中 ,L1和L2基因分别编码主要衣壳蛋白和次要衣壳蛋白 ,其中L1基…     

宫颈癌患者人乳头瘤病毒(HPV)主要型别及其感染研究

本文探讨了江西省和广东省宫颈癌患者人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)感染及其型别分布,分析了高危型HPV对各种宫颈病变的感染情况,为宫颈癌的早期发现和临床诊治提供科学依据。首先采用细胞学、HPV DNA检测(第二代杂交捕获法,HC2)、电子阴道镜和宫颈化学着色方法筛查宫颈癌患者,经病理镜检确诊,然后用GP PCR-SBT法对宫颈癌患者进行HPV基因分型。江西省溪口镇、古市镇及修水县城宫颈癌癌前病变发生率为5．7‰。HC2方法发现宫颈癌患者13种高危型HPV DNA阳性率为89．9％,宫颈上皮内瘤样病变的为84．8％,对照组为24．5％。采用GP PCR-SBT方法进行基因分型发现,江西省宫颈癌患者存在HPV16、58、31、33、18、66、6、11、56和81十种型别,其中HPV81型在国内外鲜有报道。据此提出生殖道高危型HPV感染是妇女宫颈癌发病的重要因素。并发现江西省宫颈癌高发区妇女高危型HPV感染率为24．5％。建立了HPV基因分型的方法,对HPV致宫颈病变的分子机制进行了分析。     

宫颈癌中端粒酶的表达和高危型人乳头瘤病毒感染

目的:研究不同程度子宫颈病变中高危型人乳头瘤病毒HR-HPV感染和端粒酶活性的表达,以探讨两者在宫颈癌及宫颈上皮内瘤变中的作用及相关性。方法:采用第二代杂交捕获技术检测宫颈脱落细胞HPV-DNA含量,并用免疫组织化学EnVision二步法检测宫颈组织标本中端粒酶的表达。结果:(1)端粒酶阳性表达率在对照组、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和宫颈癌组分别为10.00%、16.67%、40.00%、70.00%、95.00%,宫颈癌组高于CINⅢ,CINⅢ高于CINⅡ,CINⅡ高于CINⅠ,差异均有统计学意义(x2=4.329,P=0.037;x2=4.327,P=0.038;x2=4.022,P=0.045)。(2)随着宫颈病变级别的增加,高危型HPV的阳性率和病毒负荷量均增高。高危型HPV的阳性率在宫颈癌和CINⅢ组明显高于对照组、CINⅠ及CINⅡ(x2=29.501~7.414,P<0.01)。高危型HPV的病毒负荷量在对照组与其他4组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);CINⅠ组分别与CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)随着宫颈病变级别的增加,高危型HPV的阳性率和端粒酶阳性表达率依次递增,两者有明显的相关性(r=0.943,P<0.01)。结论:高危型HPV感染和端粒酶活性均与宫颈癌前病变及宫颈癌的发生发展密切相关,有望作为子宫颈癌前病变和宫颈癌筛查的监测指标。     

新疆维吾尔族和汉族妇女宫颈脱落细胞中HPV Ll 壳蛋白的表达比较

目的:研究HPV L1壳蛋白在在新疆维吾尔族和汉族妇女宫颈脱落细胞中的表达情况及差异性。方法:收集2012年9月至2014年3月在新疆维吾尔自治区人民医院妇科门诊就诊或行宫颈癌机会性筛查的新疆维吾尔族和汉族妇女病例1160例,选择其中HPV感染阳性或TCT阳性或两项同时阳性的465例纳入研究队列,通过免疫细胞化学法检测宫颈脱落细胞中HPV L1蛋白的表达情况。结果:新疆维吾尔族与汉族妇女HPV L1壳蛋白的总阳性表达率比较无显著差异(P=0.964);维吾尔族与汉族妇女正常或慢性炎症组、CIN1组、CIN2组、CIN3组和SCC组HPV L1壳蛋白表达的阳性率比较均无显著差异(P=0.988,0.957,0.803,0.892,1.000)。新疆维吾尔族妇女和汉族妇女HPV L1壳蛋白表达的阳性率在C1N1组为最高,高于正常或慢性炎症组及其它高病变组,且HPV L1壳蛋白表达的阳性率随宫颈病变恶性程度的增加而降低,呈负相关(相关系数=-0.687和-0.379,P0.001)。结论:新疆维吾尔族与汉族妇女宫颈脱落细胞中HPV L1壳蛋白的表达不存在民族差异,但其与宫颈病变的恶性程度呈负相关,可能是宫颈病变的保护性因素之一。     

高危型HPV 复制相关蛋白在宫颈组织中的研究

人乳头瘤病毒(Human Papillomavirus,HPV)复制机制的研究,对复制与宫颈病变的相关性可提供重要的依据。HPV是有衣壳包裹的小型环状双链DNA病毒。其基因组可分早期及晚期蛋白编码区和一个调控区。高危型HPV通过E1、E2蛋白及Ori序列启动复制。高危型HPV在宫颈上皮细胞中的复制是分化依赖型的,在高危型HPV感染的成熟的宫颈表皮细胞中,HPV E7蛋白使细胞再次进入增殖分裂期,HPV-DNA得以复制,但同时E7蛋白亦会诱发宿主细胞染色体不稳定,增加癌变风险。由此推理,高危型HPV的复制与宫颈癌的发病有一定相关性。目前有学者对高危型HPV的复制机制,复制与致癌的关系方面正开展相关研究。     

高危人乳头瘤病毒基因型与宫颈癌筛查

应用第二代基因杂交捕获技术（HC-Ⅱ）对7068例21-58岁妇女官颈细胞进行13种高危型人乳头瘤病毒（HPV）DNA的检测。该人群中13种高危型HPVDNA的总检出率为23．45％。在检出的1440例HPV阳性者中,宫颈癌、官颈上皮内高度病变（CINⅡ／Ⅲ）及宫颈上皮内低度病变（CINⅠ）的高危型HPVDNA检出率分别为100％、100％、65．06％。女性生殖道高危型HPV感染是宫颈癌及CIN流行的主要危险因素,提示言颈癌的防治应重点预防HPV感染,而对HPV感染的筛查和密切监测应是已感染高危型HPV的对象;     

P21蛋白在不同级别宫颈组织中的表达及其与高危HPV感染相关性的研究

目的通过检测宫颈组织中p21waf基因表达与高危HPV感染的情况,研究P21蛋白与高危HPV感染在宫颈组织恶性转化过程中的作用及其相互关系。方法应用免疫组化检测P21蛋白及基因杂交捕获Ⅱ代技术(HC-Ⅱ)检测高危HPV在正常宫颈组、宫颈炎、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)及宫颈癌组这4组中的表达情况。结果在正常宫颈组、宫颈炎、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)、及宫颈癌组中P21的阳性表达率分别为11.8%、15.4%、39.1%和57.7%;高危HPV的阳性表达率分别为20%、23.5%、65.2%和88.5%,这两项指标在CIN、宫颈癌组有明显的升高趋势且与正常宫颈和宫颈炎两组相比差异具有显著性统计学意义(P<0.05);各级别宫颈组织中高危HPV阳性组的P21蛋白阳性率明显高于阴性组的P21蛋白阳性率。差异在统计学上具有显著性意义(P<0.05)。结论P21蛋白的表达和高危HPV感染与宫颈病变的恶化均有高度的相关性,其检出率和阳性表达率随着宫颈病变恶性程度的增加而升高。在CIN向宫颈癌恶性转化过程中,P21与高危HPV共同促进肿瘤的发生。     

人乳头瘤病毒及其致瘤机制的研究进展

高危型人乳头瘤病毒（humanpa pilloma virus,HPV）的持续感染是导致妇女宫颈癌发生的一个关键因素。HPV感染宫颈上皮细胞后,可以通过抑制免疫应答,在部分个体中建立潜伏感染。高危HPV编码的蛋白在持续感染的过程中,操控了细胞多种重要功能,如凋亡、增殖、细胞周期调控等,使得宫颈上皮细胞的形态学、遗传物质、表观遗传学等都发生重要改变。部分感染人群的宫颈上皮细胞因此会被转化,并在协同因子相互作用下,逐渐转化为宫颈癌。HPV在宫颈癌发生过程中起着重要的作用,本文将对HPV感染致宫颈癌机制最近的研究进展进行综述。     

人乳头状瘤病毒分型及病毒载量与宫颈病变的研究进展

宫颈癌作为目前妇女最常见的恶性肿瘤,新发病例在全球范围内仍处于上升趋势。已有实验证明,HPV感染是宫颈癌发生发展的必要条件。然而不同分型及其病毒载量高低仍会影响诊断率,从而影响病情,使之发展为持续性感染,最终演变为癌前病变或宫颈癌。目前,研究者对于高危型HPV病毒载量与宫颈病变之间是否存在依存关系尚存争议。研究表明,高病毒载量可能成为预测宫颈癌前病变进展的指标,然而对于病理诊断明确的宫颈癌患者而言,病毒载量并不能代表病理分期。本文综述了人乳头状瘤病毒,不同基因分型,病毒载量等因素对于宫颈病变及宫颈癌的相关性的近年研究进展,希望有助于指导临床工作。     

人乳头瘤病毒（HPV）及其诱发子宫颈癌的新进展

子宫颈癌是一类发病率仅次于乳腺癌并严重危害女性生殖系统健康的最常见的妇科恶性肿瘤,在发展中国家,是女性癌症死亡的第一因素。自德国科学家哈拉尔德.楚尔豪森（Harald zur Hausen）因发现人乳头瘤病毒（Human papillomavirus,HPV）导致子宫颈癌而获得2008年度的诺贝尔生理学或医学奖后,全世界广泛认可人乳头瘤病毒（HPV）是引起子宫颈癌的最主要生物学因素。HPV病毒的持续感染在子宫颈癌的发生、发展过程中起了重要作用。本文就HPV病毒的生物学结构、女性生殖道HPV病毒的感染途径以及HPV病毒诱发子宫颈癌机制的最近的研究进展进行扼要综述。     

人乳头瘤病毒中和表位及抗体中和作用机制的研究进展

人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)是一类无包膜的小DNA病毒,其衣壳蛋白由主要衣壳蛋白L1和次要衣壳蛋白L2组成,持续感染HPV将引起宫颈癌和尖锐湿疣等多种疾病。HPV衣壳蛋白L1和L2中分布着大量中和表位,并具有较强的免疫原性,HPV疫苗可诱导机体产生高滴度的中和抗体并阻碍病毒感染,进而预防宫颈癌等疾病的发生。分析阐述HPV衣壳蛋白中和表位及抗体的中和作用机理,有助于阐明HPV疫苗预防病毒感染的作用机制,为今后设计新一代保护范围更广的HPV疫苗奠定良好的基础。本文就HPV衣壳蛋白中和表位及抗体的中和作用机制进行综述。     

Immune response in cervical dysplasia induced by human papillomavirus: the influence of human immunodeficiency virus-1 co-infection -- review

Human immunodeficiency virus (HIV-1) has become an important risk factor for human papillomavirus (HPV) infection and the development of HPV associated lesions in the female genital tract. HIV-1 may also increase the oncogenicity of high risk HPV types and the activation of low risk types. The Center for Disease Control and Prevention declared invasive cervical cancer an acquired immunodeficiency virus (AIDS) defining illness in HIV positive women. Furthermore, cervical cancer happens to be the second most common female cancer worldwide. The host's local immune response plays a critical factor in controlling these conditions, as well as in changes in the number of professional antigen-presenting cells, cytokine, and MHC molecules expression. Also, the production of cytokines may determine which arm of the immune response will be stimulated and may influence the magnitude of immune protection. Although there are many studies describing the inflammatory response in HPV infection, few data are available to demonstrate the influence of the HIV infection and several questions regarding the cervical immune response are still unknown. In this review we present a brief account of the current understanding of HIV/HPV co-infection, emphasizing cervical immune response.     

Development of prophylactic HPV vaccines

Since several years it has been accepted that persistent infection with certain (so called-high risk: HR) types of Human papillomaviruses (HPV) represents a strong risk factor for cervical cancer. The most frequent HR HPV types 16 and 18 account for about 70% of this tumour, which is the second most frequent malignancy in women worldwide. Several studies in animal papillomavirus models revealed that protection against infection is conferred by neutralizing antibodies directed against conformational epitopes of the major structural protein L1. Such antibodies can most efficiently be induced by immunization with virus-like particles (VLP) that assemble spontaneously following expression of L1 in recombinant vectors. Large-scale production of HPV 16 and 18 VLPs proved to be successful facilitating, a few years ago, first clinical trials on safety and immunogenicity. In the meantime more than 25,000 women have been included into several efficacy trials which demonstrated protection against persistent infection with HPV 16 and 18 and against the development of precursor lesions to cervical cancer. Although the ultimate proof of success, i.e. reduction of cancer incidence still requires the immunization of large populations and many years of follow-up, the existing data are so persuasive that the responsible agencies in several countries permitted the licensing of the first HPV vaccine in 2006. Several questions such as the duration of protection, the need development of for post-exposure vaccination strategies and availability of such vaccine in low-budget countries are open and will be discussed.     

HPV分型及其高危亚型与宫颈病变的关系

目的研究HPV分型及其高危亚型与宫颈病变程度的关系。方法采用HPV基因分型技术对2014年7月至2015年8月在广州中医药大学第一附属医院妇科门诊就诊和体检的3 142例患者进行HPV分型检测,其中327例患者进行宫颈病理检查,分析高危型HPV感染与宫颈病变程度的关系。结果 3 142例受检对象中,21种HPV型别均被检测出,阳性检出者共969例,总检出率为30.80%,其中高危型741例,检出率为23.58%。随着宫颈病变级别的升高,高危型HPV阳性率也相应升高(P0.05),HPV16型感染阳性者宫颈癌发生率最高(P0.05)。高危型HPV阳性者中单一感染和多重感染与宫颈病变程度无关(P0.05)。结论高危型HPV亚型检测在宫颈病变预防和诊治中具有重要意义。     

Acquired immune response to oncogenic human papillomavirus associated with prophylactic cervical cancer vaccines

Human papillomavirus (HPV) is a common infection among women and a necessary cause of cervical cancer. Oncogenic HPV types infecting the anogenital tract have the potential to induce natural immunity, but at present we do not clearly understand the natural history of infection in humans and the mechanisms by which the virus can evade the host immune response. Natural acquired immune responses against HPV may be involved in the clearance of infection, but persistent infection with oncogenic virus types leads to the development of precancerous lesions and cancer. B cell responses are important for viral neutralization, but antibody responses in patients with cervical cancer are poor. Prophylactic vaccines targeting oncogenic virus types associated with cervical cancer have the potential to prevent up to 80% of cervical cancers by targeting HPV types 16 and 18. Clinical data show that prophylactic vaccines are effective in inducing antibody responses and in preventing persistent infection with HPV, as well as the subsequent development of high-grade cervical intraepithelial neoplasia. This article reviews the known data regarding natural immune responses to HPV and those developed by prophylactic vaccination.     

Expression of the HPV18E2 Gene in Cervical Cancer and Premalignant Lesions and its Clinical Significance

This study aims to observe the expression of the HPV18E2 gene in cervical cancer and premalignant lesions and to investigate its clinical significance. The expression of the HPV18E2 gene in the cervical tissues obtained from 38 women with cervical lesions was detected using the RT-PCR method. The pathological changes were graded based on cervical intraepithelial neoplasia (CIN) criteria. The HPV18E2 gene was expressed mainly in cervical premalignant lesions, 60 % in Grade I CIN, 33.3 % in Grade II CIN, and 28.6 % in Grade III CIN. No expression was detected in cervical cancer and chronic cervical inflammation. This study suggests that peptides vaccine targeting the HPV18E2 protein may disrupt and prohibit the progress of diseases induced by HPV 18 infection (i.e., CIN and cervical cancer).