海因酶产生菌SHNU01的包埋固定化研究

对从土壤中筛选得到的高选择性产D-海因酶菌株SHNU01的性质进行了研究并探讨了用PVA-硼酸法进行包埋固定的效果。研究结果显示:固定化后的细胞与游离细胞相比,最适反应温度由游离细胞的37℃上升为47℃,在此温度下固定化细胞的酶活可达到游离细胞的3倍;连续反应7批后,固定化细胞活力为初始活力的80%。固定化细胞在操作稳定性、贮存稳定性等方面较游离细胞也有较大提高。     

水稻花药发育过程中腺苷三磷酸酶的分布

水稻花粉母细胞中的ATP酶反应颗粒很少,主要分布在细胞核中。组成花药药壁的4层细胞中只有绒毡层细胞核中有较多的ATP酶。减数分裂后,绒毡层细胞质中分化出许多内质网片层,但ATP酶反应颗粒仍很少,其它3层药壁细胞中质膜ATP酶明显增加。在花粉内、外壁中形成了大量的ATP酶反应颗粒,但花粉外壁在小孢子时期形成,ATP酶反应颗粒来自绒毡层细胞的鸟氏体。花粉内壁在二胞花粉时期形成,其中的ATP酶反应颗粒来自花粉营养细胞。二胞花粉的营养细胞比生殖细胞含有更多的ATP酶反应颗粒。     

几种离子液体的微波法合成及其对脂肪酶催化效果的影响

采用微波法合成9种目标离子液体,对中间体[Bmim]Br的合成条件及其离子液体对全细胞催化剂催化效果的影响进行考察.直接将产脂肪酶真菌粗状假丝酵母(Candida valida) T2细胞固定在聚氨酯颗粒中,制备固定化细胞催化剂,将其应用于合成离子液体介质中催化甲醇与大豆油酯交换反应制备生物柴油.结果表明:微波功率200 W下间隙照射100 s,中间体[Bmim]Br的收率达95.16%,有效地提高了离子液合成产率;在[Bmim]PF6离子液中固定化细胞酶催化转酯化反应30 h,大豆油的转化率达42%,反应效果较其他8种合成离子液体好;固定化细胞颗粒和[Bmim]PF6重复使用4次,其油脂转化率和酶活保持率分别达到29%和69%,表现出较好的催化反应稳定性.     

生物发光法微生物快速检测试剂的性质及其影响因素研究

研究了ATP生物发光微生物快速检测试剂的反应动力学、反应最适温度、pH以及各种影响因素。在ATP生物发光反应中,测试系统中D-荧光素用量为40～50μg／mL时对反应已经足够;发光脉冲计数CPM值随反应时间的延长不断降低,开始的1min内,其CPM值下降最快,然后下降速度不断减缓;反应的最适温度为24℃～25℃;而体系的最佳pH为7．2-7．4。配制好的发光试剂溶液置于4℃保存45h,可以保持86％的活力。在25℃时保温1h,活力下降较少,随时间的增加,活力逐渐下降,到6．5h时,仅剩53．5％的活力,而在33℃时,随着保温时间的延长,酶活力下降较快,保温1．5h,活力剩下59．1％,因此保存温度对发光试剂活力的影响非常大。各种化学物质如酸、碱、盐及表面活性剂都会抑制ATP发光反应,当NaCl浓度达到1．5g／L时,即可以抑制52．5％的发光,TritonX-100及酸、碱对系统均有一定的影响,CTAB、SDS及TCA则严重抑制发光反应。     

不同微生物的α—乙酰乳酸脱羧酶的生理生化特性的研究

分析测定了不同微生物的α-乙酰乳酸脱羧酶（ALDC）酶活力,结果表明不同来源的ALDC酶力有较大差异,酶反应速度曲线存在明显差异;酶反应体系的pH对ALDC酶活力有明显的影响,如乳酸乳球菌的ALDC酶反应最适PH为6．6,而产气气杆菌的ALDC酶反应的最适PH为5．8,酶反应体系中加入不同浓度的亮氨酸,缬氨酸和异亮氨酸对不同来源的ALDC酶活性有较明显的影响。     

植物叶肉细胞FDPase的电镜细胞化学定位及FDPase的碱性性质

本文研究了植物叶肉细胞内果糖,6-二磷酸酶(FDPase,EC 3.1.3.11)的亚细胞定位和pH对FDPase活性的影响。本实验揭示:FDPase是一种膜束缚酶,它特异性地定位于叶绿体的类囊体膜;FDPase是一种碱性酶,pH 8.6是FDPase较适的反应条件,降低pH值至     

蚯蚓发光体系及其应用研究

发光蚯蚓在世界各地普遍存在。Wampler研究了蚯蚓发光的生理学和生物化学性质。Mulkerrin等还分离纯化了发光蚯蚓的荧光酶,人工合成了荧光素。由于蚯蚓发光体系可用于许多生化分析,因而引起许多学者的注意和兴趣。本文首次报道从我国无锡发现的发光蚯蚓,并从其体液中提取荧光素酶粗提取物,在体外重新组成新的发光体系。研究了这一发光体系的性质,并对蚯蚓发光反应机制和可能应用作了初步探讨。     

细胞壁中的过氧化物酶参与机械刺激诱导的烟草悬浮培养细胞的氧化爆发

细胞壁中的过氧化物酶（CWPOD）是植物细胞中产生H2O2的酶源之一。机械刺激可提高烟草悬浮培养细胞中CWPOD的活性,促进烟草悬浮培养细胞中H2O2的积累,增加悬浮细胞培养介质的pH值。用CWPOD的抑制剂KCN或水杨苷异羟肟酸（SHAM）预处理烟草悬浮细胞后,机械刺激诱发的H2O2爆发和介质pH值的增加都不同程度地受到削弱。这些结果暗示CWPOD有可能参与了机械刺激诱发的烟草悬浮细胞中H2O2爆发的形成。     

微生物细胞ATP释放条件研究

在ATP生物发光法微生物细胞ATP释放剂的筛选研究中,发现采用环糊精等环状化合物可以解除表面活性剂类细胞ATP释放剂对发光反应系统的抑制作用,其中,7．5g／L环糊精CD（a）能中和1．5g／L的表面活性剂Ec和Es、Et,可以完全排除Ec、Es、Et对发光反应的抑制作用。通过比较各种细胞ATP释放剂释放ATP效果,筛选、组合出以表面活性剂Ec为代表的微生物细胞ATP释放剂;通过优化实验,发现用0．25～0．50g／L的Ec处理菌液1～2min时,细胞ATP的释放效果最好,从而建立了室温条件下简便、快速的微生物细胞ATP释放方法和ATP释放剂对发光反应系统抑制的消除方法。     

对羟基苯乙腈水解酶产生菌的筛选及产酶条件研究

以对羟基苯乙腈为唯一氮源,从土壤中筛选到5株腈水解酶产生菌。在初筛的过程中,用薄板层析（TLC）对细胞转化液定性检测,高效液相色谱法（HPLC）定量分析。考察了培养时间、不同碳源对细胞酶产量的影响及在反应过程中金属离子对细胞酶产量的影响,实验结果发现,培养时间在70h左右时细胞酶产量最高,以葡萄糖为碳源质量,质量浓度在12．5～15g／L附近酶产量最高。Cu^2＋对细胞酶活力具有非常强烈的抑制作用,Co^2＋、Hg^2＋、Ni^2＋等对细胞酶活力具有明显的抑制,而Ba^2＋、Mg^2＋具有较明显的促进作用,但在高浓度下促进作用减弱。     

抗癌药物对DNA拓扑异构酶活性的影响

 本文比较了正常组织与肿瘤组织中DNA拓扑异构酶Ⅱ的活力,证实异常增殖的肿瘤组织或细胞的酶活力较正常组织高。同对,我们选用了几类有代表性的抗癌药物或中草药成分,观察了它们对拓扑异构酶Ⅱ的影响。结果表明一些抗癌药物在低浓度时对Ⅱ型酶的解结反应等有明显的抑制作用。因此,肿瘤组织中解结活性异常增高说明Ⅱ型酶可能是抗癌药物的一种靶蛋白;对解结活性的抑制有可能为寻找新的抗癌药物提供一条途径。     

不同微生物的α-乙酰乳酸脱羧酶的生理生化特性的研究*

分析测定了不同微生物的α－乙酰乳酸脱羧酶（ＡＬＤＣ）酶活力，结果表明不同来源的ＡＬＤＣ酶活力有较大差异，酶反应速度曲线存在明显差异；酶反应体系的ｐＨ对ＡＬＤＣ酶活力有明显的影响，如乳酸乳球菌的ＡＬＤＣ酶反应最适ｐＨ为６．６，而产气气杆菌的ＡＬＤＣ酶反应的最适ｐＨ为５．８；酶反应体系中加入不同浓度的亮氨酸、缬氨酸和异亮氨酸对不同来源的ＡＬＤＣ酶活性有较明显的影响。     

植物酶的组织和细胞化学定位研究方法

酶是参与植物体内生化反应的特殊蛋白质。在保持活组织和细胞结构完整性的条件下,利用组织化学、细胞化学、免疫学和显微检测等技术研究酶的即位定位,是了解酶在组织、细胞和亚细胞中的分布、活性动态与定量及酶功能等的重要途径。对植物体中酶定位的组织化学和细胞化学方法的概念、原理与研究进展进行了综述,并根据国际酶化学分类编号顺序,分别介绍了25种酶的组织化学染色定位所用的反应介质和染色方法及46种酶的细胞化学定位方法的参考文献。     

补肾益气活血方对胎儿宫内生长迟缓胎盘组织一氧化氮合酶活性的影响

为了探讨补肾益气活血方对胎儿宫内生长迟缓（ＩＵＧＲ）胎盘组织一氧化氮（ＮＯ）生成的影响,本文对正常孕妇、ＩＵＧＲ患者及补肾益气活血中药治疗后患者各１２例,采用ＮＡＤＰＨ黄递酶法研究了一氧化氮合酶（ＮＯＳ）在胎盘组织的分布,应用化学发光法测定胎盘组织ＮＯＳ活性。结果表明：正常孕妇胎盘绒毛合体滋养层细胞ＮＯＳ呈强阳性反应,绒毛干血管壁呈阳性反应,终末绒毛毛细血管壁呈阴性反应;ＩＵＧＲ患者绒毛合体滋养层细胞和绒毛干血管壁ＮＯＳ染色明显变浅,而终末绒毛毛细血管壁呈阳性反应;中药治疗后合体滋养层细胞和绒毛干血管壁ＮＯＳ染色明显加深。ＮＯＳ活性测定中药组较ＩＵＧＲ未治疗组显著增高,与正常孕妇相比其差异无显著性。结果提示：ＮＯ参与ＩＵＧＲ的病理生理过程,补肾益气活血方通过增强ＮＯＳ活性促进胎盘组织ＮＯ的产生     

盘基网柄菌细胞分化和凋亡中酸性磷酸酶的定位

利用电镜酶细胞化学方法,观察盘基网柄菌细胞分化和凋亡过程中酸性磷酸酶的变化。在细胞丘阶段,酶反应颗粒出现在线粒体内自噬空泡内,随着内自噬空泡的逐渐增大,线粒体内的酶反应颗粒逐渐增多,线粒体内嵴结构不断破坏,直至遍布整个空泡化的线粒体内;当细胞发育至前孢子细胞时,由于嵴结构被完全破坏,酶反应颗粒主要集中在前孢子细胞空泡的单层膜上,空泡化的线粒体内酶反应颗粒逐渐消失。在凋亡的柄细胞中,自噬泡内酶反应强烈,凋亡中期的前柄细胞的细胞核中出现酶反应颗粒,均匀分布在细胞核中,直至细胞核与自噬泡融合。在孢子细胞外被与质膜间也观察到非溶酶体酸性磷酸酶。所得结果证实:线粒体内自噬小泡具有消化功能;自噬泡内酶活性与细胞器消亡有关;细胞核中的酸性磷酸酶可能作为一种非溶酶体酸性磷酸酶参与细胞核中核蛋白的脱磷酸化过程,与发育相关基因表达有关     

发光蚯蚓的发光体系研究进展

发光蚯蚓在世界范围内广泛分布。大多数发光蚯蚓的发光体系包含于蚯蚓体腔液内充满颗粒的细胞内。早期对不同种发光蚯蚓的生理学及生物化学方面的对比研究表明大多数发光蚯蚓的发光体系是类似的,但最近对线蚓科的两个种的研究发现它们不仅发光源的定位特殊,而且发光反应所需要的成分也明显不同于其他种类。本文对发光蚯蚓的发光器官和发光体系的研究现状及其进展进行了综述,并将有代表性的发光蚯蚓的发光体系进行了对比总结。     

东方弧菌的无细胞系统的发光：一种由长链脂肪醛启动的生物发光

采用常规的硫酸铵分级沉淀和DEAE-纤维素柱层析从东方弧菌(Vibrio otientalis)518菌株的细胞裂解液中分离到一种组分,仅需长链脂肪醛就可以启动发光。对其反应的动力学、生物发光光谱、荧光激发光谱．荧光发射光谱和吸收光谱等作了研究。其生物发光的衰减为一级反应,速度常数K=0．1 49秒。生物发光光谱与发光细菌的活体发光光谱一致。荧光光谱和吸收光谱的持征表明,该组分与细菌发光反应的中间产物11相似。用本菌株的COS制备物作对比,表明该组分确与COS的发光反应所需的条件不同。     

用发光水母细胞诊断癌症

<正>英国约克大学约克郡癌症研究实验室日前开发出一种新型癌症诊断方法——可以利用来自水母的发光细胞诊断身体内部较深处的癌症。这种诊断方式是,利用从发光水母细胞中获得的绿色荧光蛋白     

固定化细胞生产L—苹果酸动力学及两种酶反应器的比较

研究了产氨短杆菌ＭＡ－２,黄色短杆菌ＭＡ－３的固定化细胞在富马酸铵转化体系中生成Ｌ－苹果酸的动力学参数,同时比较了固定化细胞在填充床及连续机械搅拌反应器中酶转化反应的差异。研究结果表明：当转化率小于４０％时,酶反应在两种反应器所需的停留时间相当。随着转化率的提高,填充床反应器较连续机械搅拌反应器所需的停留时间短且不会因剪切力使固定化颗粒受到损伤,因此,在富马酸铵体系中用固定化酶生产Ｌ－苹果酸采用填     

应用Tn5—1uxAB—sacB基因盒对根瘤菌巨型质粒进行定向标记,缺失或消除

根瘤菌是农业生产实际中应用最多的微生物肥料。随着遗传工程技术的发展和农业生产实际的需求,遗传改良根瘤菌势必要进入田间应用（l）。如何对根瘤菌在田间的应用情况如占瘤率、与土著根瘤菌的竞争生存情况等进行监测,我们采用了发光酶基因工XXAB（2）对根瘤菌实行标记。考虑到发光酶基因在根瘤菌基因组中的不同标记位置,对根瘤菌的应用情况会产生影响,特别是对标记基因的活性强弱和标记基因的稳定性造成影响,从而影响监测结果和随后的安全性评价。因此我们首先对含发光酶基因的载体进行了改造（3）,以利于对根瘤菌的染色体和巨型…