在共培养体系中单克隆抗体AH6对小鼠胚泡着床的影响

以单克隆抗体ＡＨ６「特异结合Ｌｅ＾Ｙ寡糖,Ｆｕｃａ１－２Ｇａｌβ１－４（Ｆ痉－３）ＧｌｃＮＡｃ－」以及其它３种与Ｌｅ＾Ｙ寡糖结构近似的寡糖特异结构的单克隆抗体ａＬｅ＾ａ、ａＬｅ＾ｂ和ＦＥ－Ａ５为工具,采用小鼠体外着床模型。研究细胞表面Ｌｅ＾Ｙ寡糖抗原与着床的关系及其在着床过程中具体作用环节。     

4—甲基组胺和三氟啦嗪对WEHI3细胞增殖的影响

用体外细胞液体培养法研究组胺Ｈ２受体激动剂４－甲基组胺（４－ＭＨ）、Ｈ２受体拮抗剂西咪替丁和钙调素拮抗剂三氟啦嗪（ＴＦＰ）对小鼠粒单白血病ＷＥＨＩ３细胞增殖的影响。结果表明：４－ＭＨ呈剂量依赖性抑制ＷＥＨＩ３细胞增殖。１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ西咪替丁可阻断这种效应。１０＾－５－１０＾－４ｍｏｌ／ＬＴＦＰ阻断ＷＥＨＩ３细胞增殖,１０＾－６ｍｏｌ／ＬＴＦＰ对细胞影响不大,但与高浓度４－ＭＨ合用有协同抑制效     

广东地区健康人肠道菌群调查分析

用直接快速涂片和缩小视野时钟法,检查粪便细菌分布,并与大便菌群培养定量计数比较,观察分析８２例不同年龄广东健康人群。结果表明：老年组（６０岁－７８岁）和儿童组（３岁－１０岁）较婴儿组（３月－１２月）的Ｇ＾－ｂ有明显增加（Ｐ＜０．０５）。男女性别无显著差异：Ｇ＾＋ｂ和Ｇ＾－ｂ的数量,随着年龄的增加而减少;Ｇ＾＋ｃ则随着年龄增加而增加。通过本次调查我们认为缩小视野时钟法,快速准确简便,容易掌握,价格低     

组织纤溶酶原激活剂突变体(La-tPA)转基因鼠的建立

用羊β－乳球蛋白基因（ＢＬＧ）５区５×１０３ｂ（１０３ｂ,旧称ｋｂ）为调控序列,构建了乳腺表达组织纤溶酶原激活剂突变体（Ｌａ－ｔＰＡ）载体．对５４０枚小鼠受精卵进行显微注射,经ＰＣＲ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ检测,获得６只整合有人Ｌａ－ｔＰＡ的转基因小鼠,整合率为３２％．这为未来利用转基因动物生产Ｌａ－ｔＰＡ提供依据     

细胞凋亡过程中bcl-2基因的甲基化

为探讨凋亡过程中,ｂｃｌ－２基因下调与该基因甲基化状态的关系,用５－氟尿嘧啶（５－Ｆｕ）诱导小鼠成纤维细胞ＮＣ３Ｈ１０,ＴＣ３Ｈ１０及人乳腺癌细胞ＭＣＦ－７的凋亡,分别检测了这三种细胞凋亡过程中ｂｃｌ－２的表达变化,与其调控区及编码区的甲基化状况．我们曾观察到５－Ｆｕ作用２４～４８ｈ出现细胞存活率下降,ＤＮＡ梯状断裂及细胞周期凋亡峰显现等典型凋亡现象．Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交显示,在５－Ｆｕ作用１２ｈ时ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ水平已明显降低．由此,我们用小鼠ｂｃｌ－２（ｍｂｃｌ－２）及人ｂｃｌ－２（ｈｂｃｌ－２）基因调控区ＰＣＲ扩增片段及ｂｃｌ－２编码区（ｃＤＮＡ）片段作为探针,与５－Ｆｕ作用１２ｈ的细胞ＤＮＡ的ＭｓｐⅠ／ＨｐａⅡ酶切产物进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交,以未作用的细胞ＤＮＡ同样酶切杂交为对照．通过杂交带谱的变化,分析ｂｃｌ－２基因的甲基化状况．结果显示：ｍｂｃｌ－２及ｈｂｃｌ－２在５－Ｆｕ作用１２ｈ后调控区甲基化水平增高,但其编码区甲基化状态皆未出现可检出的变化．上述结果提示：ｂｃｌ－２基因调控区甲基化水平升高可能与该基因下调有关     

钙通道阻滞剂对肾上腺素能受体激动剂促血管平滑肌细胞增殖的抑制

本工作观察到１０＾－６－１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ去甲明上腺素（ＮＥ）用１０＾－７－１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ异丙基肾上腺素（ＩＳＯ）可明显促进离体培养的血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）的增殖和ＤＮＡ的合成,并呈剂量依赖效应,该效应可为相应的受体阻断剂ｐｈｅｎｔｏｌａｍｉｎｅ（１０＾－６ｍｏｌ／ｌ）和ｐｒｏｐｒａｎｏｌｏｌ（１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ）所抑制;ｎｉｆｅｄｉｐｉｎｅ（１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ）和ｖｅｒａｐａｍｉ     

丙型肝炎病毒C33_c单克隆抗体的研制和鉴定

用丙型肝炎病毒重组蛋白Ｃ３３_ｃ抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,运用杂交瘤技术成功地建立了７株能稳定分泌抗Ｃ３３_ｃ单克隆抗体的杂交瘤细胞１Ｈ６Ｄ２、２Ｇ１Ａ６、３Ａ４Ａ８、３Ｅ３Ｅ７、４Ｇ１２Ｃ１０、４Ａ１０Ｃ２、５Ｆ４Ｂ６．试验结果表明,７株ＭｃＡｂｓ具有良好的ＨＣＶ特异性,间接ＥＬＩＳＡ法测得小鼠腹水ＭｃＡｂ效价为１：１０￣４－１：４×１０￣４;竞争抑制实验和相加指数测定证实７株ＭｃＡｂｓ识别相关的抗原表位;７株ＭｃＡｂｓ中１株为ＩｇＭ（５Ｆ４Ｂ６）,其它６株为ＩｇＧ（２ａ）。     

杜氏盐藻细胞质膜氧化还原系统

杜氏盐藻细胞质膜具的氧化ＮＡＤ（Ｐ）Ｈ,还原Ｆｅ（ＣＮ）＾３－６和Ｏ２的氧化还原系统。当Ｆｅ（ＣＮ）＾３－６浓度为０．６ｍｍｏｌ／Ｌ,氧化ＮＡＤＨ的Ｋｍ为９６μｍｏｌ／Ｌ,Ｖｍａｘ为１５９ｎｍｏｌ１０＾－８ｃｅｌｌｓｍｉｎ＾－１,最适ｐＨ为８．５。ＴｒｉｔｏｎＸ－１００可促进ＮＡＤＨ和Ｆｅ（ＣＮ）＾３－６的氧化还原活性。ＮＡＤＨ能促进藻细胞的氧吸收,最适ｐＨ为８．５。在无外源电子供体存在时,细胞质     

斜纹夜蛾核多角体病流行的时间动态

通过对病病幼虫进行跟踪观察,观察了病毒不同浓度处理下,斜纹夜蛾核多角体病的田间流行动态结果表明,在试验病毒浓度范围（３．１＊１０＾５－３．１＾１０＾８ＰＩＢｓ．ｍｌ＾－１）内,幼虫大多在喷施病毒后第４天开始发病,第５－７天为发病高峰,第５－６天开始病死,第６－天为病死高峰,宿主现患高峰民发病高峰基本一致。宿主种群发病和病死时间分布可用时间－剂量－死亡率模型较好地拟合,模型模拟与实测值有较好的吻合（     

缓激肽对大鼠背根神经节分离神经元ATP激活电流的调制作用

在新鲜分离大鼠背根神经节（ＤＲＧ）的５６个细胞标本上,应用全细胞膜片箝技术进行记录。胞外加缓激肽（ＢＫ,１０＾－６￣１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ）引坊的ＤＲＧ细胞膜反应结果如下：（１）７１．４％的细胞为内向电流,其电流反应的幅值具有明显的浓度信赖性;（２）１２．５％的细胞为外向电流;（３）１６．１％的细胞未引起可检测的膜反应,单独给予ＡＴＰ（１０＾－６￣１０＾－３ｍｏｌ／Ｌ）在大多数受栓细胞（５４／５６）     

可乐定对背根神经节神经元GABA激活电流的抑制作用

本实验在新鲜分离大鼠背根神经节（ＤＲＧ）细胞上应用全细胞膜片的箝记录研究贤上腺素α２－受体激动剂可乐定（ｃｌｏｎｉｄｉｎｅ）对ＧＡＢＡ－激活电流的调制作用。发现缘大多数ＤＲＧ细胞对ＧＡＢＡ（１０＾－６￣１０＾－３ｍｏｌ／Ｌ）敏感（７２／７５）,产生浓度依赖性的内向电流;并且可被ｂｉｃｕｃｕｌｉｎｅ（１０＾－５￣１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ）所阻断。在多数细胞中（５１／７２）预加可乐定（１０＾－８￣１０＾－     

玉米赤霉烯酮单克隆抗体和免疫酶技术研究

采用蛋白质连接技术合成玉米赤霉烯酮抗原,免疫Ｂａｌｂ／ｃ鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术建立六株分泌抗玉米赤霉烯酮的单克隆抗体杂交瘤细胞株。间接酶联免疫吸附试验测定细胞上清抗体效价为１：２０８４（４Ｈ８）、１：２５６（６Ｈ９、４Ｈ３、２Ｈ５、２Ｃ８）１：１６（３Ｆ１０）;腹水抗体效价为１０＾９（４Ｈ３、４Ｈ８）、１０＾８（２Ｈ５）、１０＾７（６Ｈ９）、１０＾５（３Ｈ１０）。竞争间接酶联免疫吸附试验测定六     

尾加压素增加血管平滑肌细胞粘着斑激酶的含量和活力

在体外培养的血管平滑肌细胞上,采用蛋白印迹杂交免疫沉淀的方法,研究尾加压素Ⅱ（ＵⅡ）与粘着斑激酶（ＦＡＫ）介导的信号传导之间的关系。结果表明,ＵⅡ在１０＾－８、１０＾－７和１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ的深度时,可分别使ＦＡＫ活力增加２．２、３．０４和０．７３倍。加入ＵⅡ在（１０＾０７ｍｏｌ／Ｌ）５ｍｉｎ后,ＦＡＫ活力增加９５％,但与对照组相比无显著性差异（Ｐ〉０．０５０,刺激１０ｍｉｎ后,ＦＡＫ活力升高３     

CellCul—20A反应器的丝网间液体交换速率及氧传递模型

针对笼式通气搅拌生物反应器的特点,本提出了一种简单可信的测量丝网内外液体交换速率的实验方法,根据此方法,在ＣｅｌｌＣｕｌ－２０Ａ生物反应器中得出了通过丝网的液体交换速率关联式：单层丝网：Ｑｓ＝１．９３×１０＾－５Ｎ＾１．８１＋１．１３×１０＾－４ＵＧ０．６１ （Ⅰ）双层丝网：Ｑｓ＝３．４２×１０＾－５Ｎ＾１．４９＋１．４６×１０＾－４ＵＧ０．６８ （Ⅱ）并在此基础上,建立了合适的深层通气的氧传递     

用5-Fu治疗MT/p210bcr-abl转基因小鼠的研究

以５－氟脲嘧啶（５－ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ,５－Ｆｕ）腹腔注射治疗了１２只携有金属硫蛋白（Ｍｅｔａｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ,ＭＴ）启动子和增强子序列、ｂｃｒ－ａｂｌｃＤＮＡ（ｐ２１０）序列及ＳＶ４０剪切和Ｐｏｌｙ（Ａ）信号序列的转基因慢粒白血病（ｃｈｒｏｎｉｃｍｙｅｌｏｉｄｌｅｕｋｅｍｉ－ａ,ＣＭＬ）ＭＴ／ｐ２１０ｂｃｒ－ａｂｌ小鼠,于治疗的第５ｄ及第１０ｄ从不同脏器提取总ＲＮＡ、ＤＮＡ及蛋白质,分别进行ＰＣＲ分析、ＲＴ－ＰＣＲ检测被转移基因的表达水平及免疫沉淀法分析ｐ２１０ｂｃｒ－ａｂｌ转基因产物的激酶活性．结果表明,被转移基因在脾脏和骨髓中表达水平较高,胸腺和肾脏中呈低水平表达．５－Ｆｕ活体治疗１０ｄ后,被转移基因的表达水平及其表达产物的激酶活性均被明显抑制     

血小板生长因子（PDGF—BB）刺激体外培养兔肺动脉平滑肌细？…

应用细胞培养、＾３Ｈ－ＴｄＲ和＾３Ｈ－Ｌｅｕｃｉｎｅ掺入方法,观察血小板生长因子ＢＢ对体外培养兔肺动脉平滑肌细胞ＤＮＡ和蛋白质合成的影响。结果表明：（１）当ＰＤＧＦ－ＢＢ浓度为１０ｎｇ／ｍｌ时,＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入值已较对照组显著提高（６２６２．５±４１２．９ｖｓ８３３．５±１２４．０,Ｐ〈０．０５）;当ＰＤＧＦ－ＢＢ浓度为２０ｎｇ／ｍｌ时,＾３Ｈ－Ｌｅｕｃｉｎｅ掺入值亦较对照线显著增高（１０２１２     

^60Co—γ辐射对尼氏钝绥螨抗多虫畏性状的诱导及其它生物学效应

本文首次报道了＾６０Ｃｏ－γ射线辐笛射诱导抗药性产生的方法,以２０００拉德的剂量辐射３次,约１年时间培育出尼氏钝绥螨Ａｍｂｌｙｓｅｉｕｓ ｎｉｃｈｏｌｓｉ Ｅｈａｒａ ｅｔ Ｌｅｅ对拟除虫菊酯农药多虫畏具抗性的两个品系：单抗１（ＦＲ１）与双抗（ＰＦＲ）品系。多虫畏对其致死中浓度ＬＣ５０由敏感品系的８．２２×１０＾－５ｐｐｍ分别提高到１．３３４７×１０＾－３和１．４３０７×１０＾－３,抗性水平提高２     

细胞内外钙离子浓度对鲎腹神经感光器光适应的影响

用细胞内记录的方法研究了由微弱持续光刺激（６×１０＾６￣９×１０＾６光子／ｃｍ＾２,１０ｓ引起鲎（Ｌｉｍｌｕｓ ｐｏｌｙｐｈｅｍｕｓ）腹神经光器膜电流的变化－－光碰击。结果表明,在生理盐水（１０ｍｍｏｌ／ＬＣａ＾２＋）中光碰击的平均面积为（３９．５±１．７６）ｐＣ,微弱光适应（记录前２．５ｓ加１次光闪,９×１０＾９光子／ｃｍ＾２）使得光碰击的面积下降至（１０．５±２．２９）ｐＣ（ｎ＝４）。在低钙溶     

同质化叶绿体转基因植株的获得

构建了含有外源目的基因表达盒（ｐｓｂＡ５’－ｍｉｆＨ－ｐｓｂＡ３’）和选择标记基因表达盒（Ｐｒｒｎ－ａａｄＡ－ＴｐｓｂＡ）以及两段质体基因组同源片段的烟草叶绿体转化载体ｐＴＲＣＨ２０５。基因枪聂击受试外植体后,经抗生素筛选获得转化再生植株。为探索提高转基因植株同质化程度的可能途径,对再生植株再高浓度的壮观霉素选择压下进行了３轮次分化再生,并结合腋芽繁殖方式继代６￣１０次。ＰＣＲ扩增和以同源片段为探     

采用一种新介质纯化神经生长因子

采用一种新闻子交换介质Ｅｘｐｒｅｓｓ－ＩｏｎＣ（简称ＩｏｎＣ）使鼠神经生长因子（ｍＮＧＦ）能得到规模纯化。以鼠颌下腺为原料,匀浆后,经Ｅｘｐｒｅｓｓ－ＩｏｎＣ纯化得单一组分的ｍＮＧＦ,用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定其相对分子质量约为１３．７×１０＾３,比活约２．３×１０＾５Ｕ／ｍｇ。结果表明ＩｏｎＣ可替代ＣＭ－５２,且更适于工因子的规模化生产。