辣椒转基因植株再生

用改建的农杆菌转化辣椒,已建立有效的转化两再生系统。辣椒无菌苗（１２天苗龄）子叶在再生培养基（ＭＳ＋３ｍｇ／Ｌ ＢＡ）上预培养２天,再用农杆菌感染,共培养２天,再转入含Ｋｍ（１００μｇ／ｍｌ）的再生培养基中培养２－３周后,子叶基部有多丛芽形成。分切多丛芽,将芽转选择性的芽伸长培养基（ＭＳ基本成分＋Ｂ５维生素类＋２ｍｇ／Ｌ ＢＡ＋７５μｇ／ｍｌ）上,待芽长至２－３ｃｍ后,切下并转入生根培养基（ＭＳ＋     

玉米幼胚高效再生系统的建立

建立了玉米幼胚高效再生系统。经研究发现,苏玉1号、农大3138、农大108的幼胚培养在含有2,4－D（2.5mg/L）的IM培养基上后,大多数幼胚能愈伤化并增大,形成基部相连、上部分开的微芽结构;微芽结构在转移到BM培养基上后,形成小植株;进一步转移到RM培养基上,它们长根并形成完整杆株。玉米幼胚高效再生植株与下列因素有关：玉米基因型、幼胚大小、幼胚长芽至分化时间、6－BA、IBA、Gelrite。不同品种玉米再生能力有显著差异,幼胚大小在1－2mm之间再生能力强,幼胚长芽至分化时间4－6d最好。激素6－BA浓度在0.5-0.6mg/L之间有利于微芽形成小植株,IBA浓度在0.6-1.0mg/L促进生根。Gelirte可代替琼脂粉用于玉米生根。     

基因枪转化小麦幼胚的再生培养与转基因植株的获得

以小麦幼胚为受体,用基因枪法对Trx-S反义基因 目的基因 和Bar基因 标记基因 进行了共转化,以轰击后的小麦幼胚为实验材料,对幼胚培养的基本培养基、分化和生根培养基进行了筛选优化.结果表明:4种基本培养基中,L3培养基的成愈率最高,且增殖速度快;MS培养基次之.以L3为基本培养基,分化培养基中添加NAA1mg·L-1和ZT2mg·L-1配比对愈伤组织诱导分化的效果最好,分化率达到50%以上.1/2MS培养基中添加IAA0.8mg·L-1的生根效果好,且移栽成活率高.以优化的培养方案对来自7个小麦品种的幼胚进行转化与再生培养,多数品种的出愈率都达到90%以上,分化率在40%以上,并在5个品种上获得再生植株,经检测证实在4个品种上获得转基因再生植株.     

菊芋的组织培养及植株再生

TissueCultureandPlantletRegenerationofHelianthustuberosusWANGLi－Lin，CHENLi－Ming，LINWen-Li(DepartmentofBiology,HangzhouTeachersCollege,Hangzhou310036）1植物名称菊芋（Helianthustuberosus）。2材料类别茎尖。3培养条件茎尖生长、愈伤组织诱导及分化培养基：（1）MS＋6－BA2．0mg·L-1（单位下同）＋NAA02；（2）MS＋6－BA2．0＋NAA0．1。生根培养基：1／2MS＋NAA0．2。每种培养基中均附加3％蔗糖、0．7％青岛产琼脂，pH调整到5．8左右。培养温度25±2℃，光照14h·d-1，光照度8001x左右。4生长与分化情…     

烟草叶片组织培养及植株再生(简报)

烟草叶片外植体在MS 2,4-D0．5mg／L 6-BA1．0mg,L的培养基上培养15d后,产生絮状疏松的浅黄绿色的愈伤组织,30d后开始从愈伤组织表面分化产生幼芽,60d后平均每块愈伤组织产生30棵幼芽。将幼芽转至含0．2mg/L NAA的MS培养基上形成根,并得到完整植株。     

大白菜的组织培养和植株再生

1　植物名称　白菜 (Ｂｒａｓｓｉｃａｐｅｋｉｎｅｎｓｉｓ)品种豫白菜 5号亲本 1 30 4。2　材料类别　下胚轴和子叶。3　培养条件　培养基 :( 1 )ＭＳ ;( 2 )ＭＳ ＢＡ 2ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) ＮＡＡ 1 ;( 3)ＭＳ ＢＡ 2 ＮＡＡ 1 ＡｇＮＯ34;( 4 )ＭＳ ＮＡＡ 0 .2 ＰＰ3330 .1。以上培养基均加 0 .7%琼脂、3%蔗糖 ,ｐＨ 5 .8。培养温度 ( 2 5± 1 )℃ ,光照 1 2ｈ·ｄ- 1 ,光照度 20 0 0ｌｘ。4　生长与分化情况4.1　无菌苗的获得　大白菜种子经自来水清洗后用 70 %酒精浸 30ｓ,再用 0 .1 %ＨｇＣｌ2 消毒 6ｍｉｎ ,并用无菌…     

枸杞胚乳植株的诱导

在被子植物中,大多数植物的胚乳是精子和两个极核融合的产物,胚乳细胞应是三倍性的,因此,不少植物学者企图利用组织培养的方法获得三倍体植株,以便有可能为瓜、果类等经济植物提供一条新的育种途径。从30年代开始至今已有30余种植物的胚乳培养获得了愈伤组织或胚状体。但得到完整植株的不超过10种。茄科植物的胚乳培养,除马铃薯获得成功外,其它还未见报道。本文报道我们对枸杞未成熟的胚乳进行     

猕猴桃高频直接再生体系的建立

为了建立猕猴桃高频再生体系,以MS为基本培养基,猕猴桃(Actinidia deliciosaQinmei)茎及叶片为外植体,研究了2,4-D、6-BA和NAA在美味猕猴桃愈伤组织形成及分化过程中的作用。方差分析结果表明,6-BA能够显著促进愈伤组织形成,6-BA和NAA可以显著促进愈伤组织形成和分化,而2,4-D抑制愈伤组织形成。附加2.0 mg/L 6-BA、1.0 mg/L NAA和600 mg/L水解酪蛋白的MS培养基是茎段培养的最佳培养基,在该培养基上,以再生的无菌苗为起始材料,一个月时叶圆盘的直接再生频率达到100%,平均每个叶圆盘产生9.33个芽,其中23.21%芽高度超过0.5 cm。     

以根为外植体建立大蒜的组织培养体系

以国内4个大蒜栽培品种为材料,建立了以根为外植体的再生体系。将蒜瓣去皮后灭菌消毒,萌发后选取苗龄为5~7 d的无菌苗的根接种到含不同激素配比的培养基中进行愈伤组织诱导,发现MS+2,4-D 1 mg/L+2ip 0.1 mg/L组合愈伤诱导效率最高,平均为56.06%;愈伤组织经过2~3次继代培养,选取胚性愈伤组织置于不同分化培养基上进行培养,2~3个月后可见小芽产生,分化培养基为MS+KT 1 mg/L时,植株再生效率最高,平均达到35.01 %。本研究建立了一种以根为外植体的高效的大蒜愈伤诱导和再生体系,为大蒜遗传转化体系的建立打下良好基础。     

药用植物金荞麦愈伤组织诱导与植株再生

目前转基因技术已成为植物定向遗传改良的重要手段,而建立稳定高频的离体再生系统是实现遗传转化的基础和前提.本试验以25 ～30 d苗龄的金养麦(Fagopyrum dibotrys)无菌苗叶片、茎节间、叶柄为外植体进行愈伤组织诱导与植株再生研究.结果表明:叶片在MS +2,4-D 4.0 mg/L +6-BA 1.0 mg/L培养基上愈伤组织诱导率达到89％.茎节间在MS +2,4-D 2.0 mg/L +6-BA 2.0 mg/L培养基上愈伤组织诱导率为87％.叶柄在MS +2,4-D 4.0 mg/L +6-BA 2.0 mg/L+ IBA 0.2 mg/L培养基上的最高诱导率仅为54％.愈伤组织分化不定芽的适宜培养基为MS +6- BA2.0 mg/L +TDZ0.2 mg/L +NAA0.2 mg/L;金荞麦不定芽在1/2 MS +NAA 0.5 mg/L的培养基上生根效果最好.组培再生植株经炼苗后移栽到田间成活率达80％以上,且生长表现正常.高频完整再生体系的建立,为金荞麦进一步遗传操作和扩大药材资源奠定了基础.     

诱导茶树成熟胚培育成幼苗的研究

以茶树品种——农抗早的成熟胚为外植体离体培养,初次研究了2,4-D、6-BA等不同植物激素对茶树成熟胚诱导成幼苗的影响。结果表明,在合适的激素组合条件下,愈伤组织诱导为97%,在附加2.5mg/L 6-BA 0.5mg/L NAA的MS培养基上,愈伤组织的芽分化率为14.2%,附加1.5mg/L NAA的1/2 MS培养基,幼苗的根分化率为5%。     

火龙果愈伤组织诱导与植株再生

为了建立火龙果愈伤组织诱导与植株再生体系,以火龙果茎段、幼苗和子叶为外植体进行离体培养试验。结果表明：茎段诱导愈伤组织的最优培养基为1／2MS＋2,4-D2．0mg·L^-1＋6-BAO．5mg·L^-1,诱导子叶愈伤组织的最适培养基是1／2MS＋2,4-D2．0mg·L^-1＋6-BA1．0mg·L^-1,诱导愈伤组织分化的最优培养基为1／2MS＋6-BA4．0mg·L^-1＋NAA0．5mg·L^-1,最佳生根培养基为1／2MS＋6．BA1mg·L^-1＋NAA0-3mg·L^-1。     

骨干玉米自交系丹598遗传再生体系的建立

目的:以玉米骨干自交系丹598的幼胚为外植体,诱导愈伤组织建立遗传再生体系。方法:探讨胚龄、培养基种类、2,4-D浓度对愈伤组织诱导的影响。结果:在授粉后16～18 d,2,4-D浓度为2.0 mg/L时诱导最佳;设置N6、NB、改良NB、MS、MB等5种培养基,筛选出改良NB培养基为最佳诱导培养基;分化培养基中添加1 mg/L激动素、0.5 mg/L 6-卞基嘌呤和0.5 mg/L萘乙酸能促进绿苗分化和根系生长。结论:建立了玉米自交系丹598的优良再生体系,为以后的基因转化工作打下了良好基础。     

荞麦高频离体再生及发根农杆菌转化体系的建立

荞麦无菌苗下胚轴切段在不同激素配比的MS培养基上诱导愈伤组织,出愈率均为100％。在2．0mg/L2,4-D和1．5mg/L 6-BA组合下诱导产生的愈伤组织;转入2．0mg/L 6-BA和1．0mg/L KT的MS培养基,再生苗分化率在80％以上。根尖色体分析表明再生植株具一定的遗传稳定性。发根农杆菌A4转化荞麦下胚轴和子叶获得发状根,纸电泳检测所有随机取样测定的发状根均有相应冠瘿碱的存在。     

发根农杆菌对骆驼刺的转化及转化组织的形态发生

将骆驼刺离体再生苗的茎切段经发根农杆菌A4菌株感染后,在含500mg/L头孢霉素的MS无激素培养基上培养,产生了转化的发根和愈伤组织.转化根在附加2mg/L2,4-D和0.5-1mg/L6BA的MS培养基上培养后,亦可诱导出愈伤组织.在含3mg/L6BA和0.5mg/LNAA的培养基上诱导出了苗的分化.冠瘿碱分析表明,在95%以上的发根和75%的转化愈伤组织及再生植株中都显示了T-DNA的整合和表达.染色体检查发现,约81%的发根细胞具有正常染色体数(2n=18),其余则存在染色体数目的变化,在继代培养一年之后,转化体仍维持旺盛的再生能力.     

水杉愈伤组织诱导及植株再生

通过愈伤组织诱导器官发生途径,建立了水杉（Metasequoia glyptostroboides）的植株再生体系,探讨了不同外植体（种胚、幼叶切块、茎段、根段）和植物生长调节剂对不定芽直接再生和愈伤组织诱导器官发生的影响。结果表明：以种胚、无菌苗叶片、茎段和根作为外植体,在MS补加2,4-D、NAA和6-BA不同组合的培养基上都能诱导得到愈伤组织,其中种胚诱导愈伤组织效果最好,诱导率可达100%,茎诱导效果次之,诱导率为97.1%。诱导愈伤组织效果较好的培养基有：MS＋1.0mg·L-12,4-D＋0.5mg·L-16-BA、MS＋0.1mg·L-16-BA＋1.0mg·L-1NAA、MS＋0.5mg·L-16-BA＋1.0mg·L-1NAA、MS＋1.0mg·L-16-BA＋1.0mg·L-1NAA、MS＋0.5mg·L-16-BA＋2.0mg·L-1NAA、MS＋1.0mg·L-16-BA＋2.0mg·L-1NAA和MS＋0.5mg·L-12,4-D＋0.5mg·L-1NAA。以愈伤组织在MS培养基上植株再生效果最好,再生率为62.5%。     

Agrobacterium rhizogenes-mediated transformation and the regeneration of transformants in Alhagi pseudalhagi]

The regenerated shoot segments of Alhagi pseudalhagi were sliced and infected with Agrobacterium rhizogenes strain A4. The hairy roots and transformed calli were obtained through selection on hormone free MS medium. The transformants were cultured on MS medium with 2 mg/L 2,4-dichlorophenoxy acetic acid (2,4-D) and 0.5-1 mg/L 6-benzylaminopurine (6-BA) to induce calli. 3 mg/L 6-BA and 0.5 mg/L naphthalene acetic acid (NAA) were applied for shoot differentiation. Shoots were planted on MS medium with 2 mg/L indole-3-butyric acid (IBA) and produced roots. Opine analysis proved the integration and expression of T-DNA in over 95% hairy roots, 75% transformed calli and transformed plantlets respectively. The 81% hairy root cells had normal chromosome numbers (2n = 18). The alterations of chromosome number were observed. After one year of subculturing, the regeneration ability of transformants was maintained.