人脐血干细胞对兔后肢动脉球囊损伤后内膜增殖和内皮功能的影响

目的探讨人脐血干细胞(HUCBSC)移植对兔后肢动脉球囊损伤后动脉局部内膜增殖和内皮功能的影响。方法新西兰大白兔24只,随机分为正常对照组(A组,8只)、球囊损伤组(B组,8只)及球囊损伤加干细胞移植组(C组,8只)。三组均于全麻下分离兔右侧股动脉;B、C两组均应用3 mm×40 mm球囊扩张股动脉,每次3 min,共3次,并牵拉球囊,形成局部内膜损伤;C组球囊扩张后,以2.5×105的HUCBSC数移植到损伤血管局部,A、B组注入等量的磷酸盐缓冲液(PBS)。术前和术后28 d采用放射免疫法和酶联免疫吸附试验(ELISA)分别测定血浆内皮素-1(ET-1)及血清一氧化氮(NO)水平,并取股动脉采用苏木素-伊红染色(H-E)测定血管内膜面积及内膜面积与中膜面积比值。采用方差分析和配对t检验进行统计分析。结果术后28 d,B组和C组均可见损伤血管内弹力膜多处断裂,有不同程度的内膜增生,C组内膜面积[(0.231±0.033)mm2]及内膜面积与中膜面积比值(0.967±0.193)明显低于B组[(0.589±0.038)mm2,2.365±0.376;t=19.632,P<0.01,t=9.405,P<0.01],但明显高于A组(正常对照组)。术后28 d,A、B、C三组静脉血浆ET-1水平分别为(79.91±7.36)ng/L,(131.51±12.88)ng/L,(103.98±11.13)ng/L,B组明显高于A组(t=8.014,P<0.01),C组也明显高于A组(t=4.329,P<0.01),但明显低于B组(t=4.634,P<0.01)。静脉血清NO水平分别为(120.33±9.02)μmol/L,(48.01±6.20)μmol/L,(102.76±9.73)μmol/L,B组明显低于A组(t=18.914,P<0.01),C组也明显低于A组(t=3.901,P<0.01),但明显高于B组(t=14.083,P<0.01)。结论 HUCBSC血管局部移植可抑制兔后肢动脉球囊损伤后受损血管新生内膜的增殖,促进损伤血管内皮功能的恢复。     

颅内动脉瘤夹闭术、血管内栓塞术治疗颅内动脉瘤的疗效及安全性研究

目的:探讨颅内动脉瘤夹闭术、血管内栓塞术治疗颅内动脉瘤的疗效及安全性。方法:回顾性分析2016年9月-2019年1月接受手术治疗的76例颅内动脉瘤患者的临床资料,根据手术方式的不同分为接受颅内动脉瘤夹闭术治疗的A组40例和接受血管内栓塞术治疗的B组36例。对比两组患者的动脉瘤完全闭合率、住院费用及血清炎性因子[C反应蛋白(CRP)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、脑氧饱和度水平及日常生活能力量表(ADL)评分值,记录并发症发生情况。结果:两组患者的动脉瘤完全闭合率比较差异无统计学意义(x~2=0.515,P=0.473)。A组患者的住院费用低于B组患者(t=17.732,P=0.000);A组患者术后血清中CRP、IL-1β、IL-6、TNF-α的水平高于B组(t=10.580、12.904、9.355、19.176,P均=0.000);A组患者术后脑氧饱和度水平低于B组(t=2.113,P=0.019),两组ADL评分值的差异无统计学意义(t=1.211,P=0.115);A组术中再破裂、脑血管痉挛发生率高于B组患者(x~2=4.817、5.383,P=0.028、0.020)。结论:颅内动脉瘤夹闭术应用于颅内动脉瘤患者,动脉瘤完全闭合率与血管内栓塞术无明显差异,住院费用更低,但对目标血管的刺激较大,可能存在术中再破裂、脑血管痉挛等风险。     

乳腺癌组织中转化生长因子-β1和血管内皮生长因子的表达及其与血管生成的关系

目的:研究转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和血管内皮生长因子(vascular endothelial cell growth factor,VEGF)在乳腺癌组织中的表达及其与血管生成的关系。方法:选取65例手术切除乳腺癌蜡块标本及其周围正常乳腺组织,分为两组:A组为对照组,检测标本为乳腺癌癌旁正常乳腺组织;B组为实验组,检测标本为乳腺癌组织,采用免疫组织化学染色和形态计量检测TGF-β1和VEGF在乳腺癌组织中的表达。利用CD34相关抗原标记血管内皮细胞,计数微血管密度(intratumoral mier oveseulardensity,MVD),并分析其与TGF-β1和VEGF表达的关系。结果:65例乳腺癌组织中,TGF-β1的阳性表达率为69.23%(45/65),TGF-β1阳性表达者MVD值(25.31±4.05)显著高于TGF-β1阴性表达者(21.23±4.29);VEGF的阳性表达率为78.46%(51/65),VEGF阳性表达者MVD值(26.62±3.41)亦明显显著高于VEGF阴性表达者(18.95±6.52)(均P0.05)。不同病理类型的乳腺癌组织中TGF-β1、VEGF的阳性表达率比较差异无统计学意义(P0.05),但TGF-β1、VEGF的阳性表达与乳腺癌的组织分级、淋巴结转移呈显著正相关(均P0.05),且组织学分级越高、淋巴结转移越多,MVD值越大。结论:TGF-β1与VEGF在乳腺癌组织的表达高于正常乳腺组织,并与乳腺癌肿瘤血管的生成有关,二者有望作为乳腺癌恶性程度、浸润转移等生物学行为的评估指标。     

乳腺癌组织中转化生长因子-beta1 和血管内皮生长因子的表达 及其与血管生成的关系

目的:研究转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和血管内皮生长因子(vascular endothelial cell growth factor,VEGF)在乳腺癌组织中的表达及其与血管生成的关系。方法:选取65例手术切除乳腺癌蜡块标本及其周围正常乳腺组织,分为两组:A组为对照组,检测标本为乳腺癌癌旁正常乳腺组织;B组为实验组,检测标本为乳腺癌组织,采用免疫组织化学染色和形态计量检测TGF-β1和VEGF在乳腺癌组织中的表达。利用CD34相关抗原标记血管内皮细胞,计数微血管密度(intratumoral mier oveseulardensity,MVD),并分析其与TGF-β1和VEGF表达的关系。结果:65例乳腺癌组织中,TGF-β1的阳性表达率为69.23%(45/65),TGF-β1阳性表达者MVD值(25.31±4.05)显著高于TGF-β1阴性表达者(21.23±4.29);VEGF的阳性表达率为78.46%(51/65),VEGF阳性表达者MVD值(26.62±3.41)亦明显显著高于VEGF阴性表达者(18.95±6.52)(均P<0.05)。不同病理类型的乳腺癌组织中TGF-β1、VEGF的阳性表达率比较差异无统计学意义(P>0.05),但TGF-β1、VEGF的阳性表达与乳腺癌的组织分级、淋巴结转移呈显著正相关(均P<0.05),且组织学分级越高、淋巴结转移越多,MVD值越大。结论:TGF-β1与VEGF在乳腺癌组织的表达高于正常乳腺组织,并与乳腺癌肿瘤血管的生成有关,二者有望作为乳腺癌恶性程度、浸润转移等生物学行为的评估指标。     

早期生长反应因子-1的特异脱氧核酶对球囊损伤大鼠颈动脉后转化生长因子-β1表达的影响

目的观察局部转染早期生长反应因子-1(Egr-1)的特异脱氧核酶(ED5)对球囊损伤颈总动脉后内膜增生及转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,并初步探讨ED5抑制球囊损伤后内膜增生的机制。方法96只健康雄性Wistar大鼠,随机分为4组,每组24只。除假手术组外均应用2F球囊导管行颈总动脉内膜球囊损伤术,术中采用转染试剂FuGENE6介导ED5转染至损伤后大鼠血管中,以假手术组、单纯损伤组,FuGENE6组作为对照。术后3、7、14、21d处死动物每组6只。应用HE染色,RT-PCR,Western-blot和免疫组织化学方法观察大鼠颈动脉球囊损伤后内膜增生情况和TGF-β1的表达及ED5对它们的影响。结果(1)内皮损伤后3d内膜增厚不明显,7d内膜开始增厚,14、21d时内膜明显增厚。(2)TGF-β1mRNA于术后3d开始升高,7d达高峰,14d时下降。TGF-β1蛋白表达于术后3d开始升高,14d达高峰。(3)转染ED5治疗后,在各个时间点内膜增厚程度减轻,TGF-β1表达减少,与对照组比较差异有显著性(P<0·01)。结论血管内皮损伤后内膜增生过程中TGF-β1表达增加,ED5能抑制TGF-β1的表达,从而减轻血管损伤后内膜的增生。     

血清bFGF、TGF-β、VEGF的高表达有助于大鼠脑外伤合并肢体骨折的快速愈合

为揭示脑外伤对血清b FGF、TGF-β、VEGF表达和肢体骨折愈合速度的影响机制,本研究选择SD大鼠作为研究对象,分别建立中等程度脑外伤模型和股骨骨折模型,将大鼠分为A组(正常对照)、B组(单纯股骨骨折)、C组(单纯脑外伤)和D组(脑外伤合并股骨骨折),每组25只,分别检测手术前0 d及手术后3 d、7 d、15 d和30 d时的血清bFGF、TGF-β和VEGF水平,并考察不同时间点骨折愈合情况。结果发现,B组在术后3 d时bFGF、TGF-β和VEGF水平迅速达到高峰,此后逐渐降低。而C组和D组的三种细胞因子水平变化趋势类似,均在术后15 d时达到最高。组间比较显示,D组大鼠在术后3～30 d期间内bFGF水平显著高于C组,并且在7 d、15 d和30 d时bFGF水平高于B组。D组在7 d、15 d和30 d时的TGF-β水平显著高于B组和C组。D组在15 d和30 d时的VEGF水平显著高于B组和C组。并且,D组3种生长因子在整个实验期间的最高值均显著高于其他组。HE染色结果显示,脑外伤合并骨折的大鼠其肉芽组织、成纤维细胞、骨小梁、板层骨形成速率均显著高于单纯骨折大鼠,而X线显示该组骨痂量和密度明显高于单纯骨折组。本研究的结果说明,脑外伤合并股骨骨折大鼠的b FGF、TGF-β和VEGF水平显著高于单纯脑外伤或股骨骨折大鼠,并且其骨折愈合速度也更快。bFGF、TGF-β和VEGF水平均可在脑外伤和骨折大鼠血清中高度表达,而脑外伤的发生可能通过改变bFGF、TGF-β和VEGF等生长因子水平,从而间接促进大鼠自身的骨折愈合,本研究的成果可作为临床骨科治疗研究的借鉴与参考。     

虫草菌丝在大鼠肝硬化过程中对TGF-β1 和VEGF 表达影响研究

目的:研究虫草菌丝在大鼠肝硬化中对TGF-β1和VEGF的影响,探讨虫草菌丝在大鼠肝硬化治疗中的作用机制.方法:取健康成年雄性SD大鼠60只,随机分为3组:正常组(A组)、急性CCLA肝硬化模型组(B组),虫草菌丝组(C组),12周后比较分析3组TGF-β31和VEGF表达.结果:治疗后,C组TGF-β1、VEGF和B组比较有统计学意义,(P＜0.05).结论:虫草菌丝在大鼠肝硬化治疗中具有明显的效果,可能与抑制TGF-β1和VEGF表达有关.     

TGF-β2在低氧条件下诱导骨髓基质干细胞向软骨细胞分化 的研究

目的：探讨转化生长因子β2(TGF-β2)在低氧条件下诱导骨髓基质干细胞(BMSCs)向软骨细胞分化的作用。方法：无菌条件下 分离Wistar 大鼠股骨骨髓,采用全贴壁培养法纯化BMSCs。传6 代后,将细胞随机分为3 组,A组加入25 ng/mL TGF-β2在1%氧 浓度条件下培养;B 组加入25 ng/mL TGF-β2在21%氧浓度条件下培养;C 组仅加入含10%胎牛血清的DMEM-α培养液在1%氧 浓度条件下培养。3 周后,通过甲苯胺蓝染色检测细胞糖胺多糖,聚合酶链反应检测Ⅱ型胶原和蛋白聚糖(Aggrecan)的表达水平。 结果：骨髓细胞经换液后贴壁聚集生长,形态均一,连续传代后形态无明显改变。分组培养第1 周,A、C 组生长速度低于B 组;第 2 周各组均出现不规则形态细胞,A、C 组细胞形态小于B 组;第3 周各组均可见透明样基质,以A组最明显。3 周后行甲苯胺蓝 染色,A 组细胞内外均可见丰富的蓝染颗粒,B、C 组染色较A 组略浅。A 组Ⅱ型胶原的表达相对量(1.246± 0.287) 高于B 组 (0.973± 0.365)、C组(0.802± 0.196),差异有统计学意义(P＜0.05);B、C 组比较无明显差异(P＞0.05)。A 组Aggrecan 的表达相对量 (0.833± 0.375)高于B组(0.724± 0.173)、C 组(0.602± 0.091),差异有统计学意义(P＜0.05);B、C 组比较无明显差异(P＞0.05)。结 论：TGF-β2联合低氧环境可明显促进骨髓基质干细胞分化为软骨细胞。     

过敏性紫癜血管内皮生长因子含量及其与肾损害指标的相关性

目的:探讨紫癜性肾炎(APN)、过敏性紫癜(AP)和正常对照组血中血管内皮生长因子(VEGF)和肾损害指标的含量变化,以及APN中VEGF和肾损害指标的相关性,以证实VEGF参与了AP的部分发病机理。方法:采用ELISA法检测APN组22例,AP组28例及健康儿童30名为正常对照组的血VEGF的含量。生化分析仪检测三组患儿的血清肌酐(Cr),β2微球蛋白(β2-MG)和双缩脲法检测24h尿蛋白定量。比较APN组、AP组和正常对照组之间VEGF和肾损害指标的差异,及APN组、AP组分别与肾损害指标血Cr、β2-MG和24h尿蛋白定量的相关性分析。结果:血浆VEGF含量APN组AP组正常对照组,差异有统计学意义(P0.01),APN组患儿血β2-MG、Cr和24小时尿蛋白量较AP组患儿显著增高(P0.01);AP组患儿血清β2-MG、Cr较对照组患儿显著增高,24小时尿蛋白量无明显差异;APN组患儿血浆VEGF的含量与血β2-MG、血Cr、24小时尿蛋白量呈正相关(r0,P0.01)。结论:儿童AP血浆VEGF含量,APN比无肾损害的AP更高,说明了血浆VEGF水平增高与肾损害的程度密切相关,VEGF参与了AP和APN血管炎的发生发展过程,并可与肾损害指标反映其病情程度。     

干细胞对环孢素肾病大鼠肾组织转化生长因子β1的影响

目的观察干细胞治疗技术对环孢素肾病大鼠肾组织转化生长因子β1(TGF-β1)的影响。方法实验大鼠分成3组,每组10只大鼠:C组:正常对照组;H组:模型组;B组:骨髓间充质干细胞治疗组。28 d处死大鼠切取肾脏,免疫组织化学染色、RT-PCR、Western blot测定肾组织TGF-β1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平。采用单因素方差分析比较各组数据。结果 (1)免疫组织化学染色结果显示:与C组比较,H组、B组TGF-β1(0.899±0.046vs 9.524±1.232,6.437±0.728;P0.01)、α-SMA(2.427±0.188 vs 11.912±2.610,9.232±2.268;P0.01)表达水平均显著升高,差异具有统计学意义。与H组比较,B组大鼠的TGF-β1(9.524±1.232 vs 6.437±0.728;P0.01)、α-SMA(11.912±2.610 vs 9.232±2.268;P0.01)表达水平显著下降,差异具有统计学意义;(2)RT-PCR结果显示:与C组比较,H组、B组TGF-β1(0.119±0.003 vs 0.826±0.004,0.651±0.004;P0.01)、α-SMA(0.370±0.006 vs 0.900±0.007,0.642±0.007;P0.01)m RNA水平均显著升高,差异具有统计学意义(P0.05)。与H组比较,B组大鼠的TGF-β1(0.826±0.004 vs 0.651±0.004;P0.01)、α-SMA(0.900±0.007 vs 0.642±0.007;P0.01)m RNA水平显著下降,差异具有统计学意义;(3)Western blot结果显示:与C组比较,H组、B组TGF-β1(0.218±0.004 vs 0.825±0.003,0.650±0.006;P0.01)、α-SMA(0.263±0.003vs 0.841±0.003,0.615±0.003;P0.01)蛋白水平均显著升高,差异具有统计学意义。与H组比较,B组大鼠的TGF-β1(0.825±0.003 vs 0.650±0.006;P0.01)、α-SMA(0.841±0.003 vs 0.615±0.003;P0.01)蛋白水平显著下降,差异具有统计学意义。结论骨髓间充质干细胞治疗可以下调环孢素肾病大鼠肾组织TGF-β1表达水平,减少α-SMA表达水平,从而改善大鼠肾间质纤维化程度。     

沙利度胺对原发性肝癌介入后血管内皮生长因子及生存质量的影响

目的:探讨沙利度胺对原发性肝癌(HCC)介入后血管内皮生长因子(VEGF)及生存质量的影响。方法:将2014年1月至2016年1月期间我院收治的拟行肝动脉栓塞化疗(TACE)的HCC患者60例按照随机数字表法分为A、B两组,各30例。A组患者采用TACE+沙利度胺治疗,每晚200 mg,口服一个月;B组患者单行TACE治疗。分别于治疗前、治疗后3周检测两组患者的VEGF水平,于治疗前、治疗后1个月应用生存质量评分量表(QOL)评价患者生存质量,并比较两组患者治疗前后的体重及治疗过程中的不良反应。结果:治疗前两组患者血清VEGF水平差异无统计学意义(P0.05)。治疗后两组患者VEGF水平均较治疗前升高,其中A组患者治疗后VEGF水平显著低于B组患者(P0.01)。治疗前两组患者QOL分数和体重比较差异无统计学意义(P0.05)。而治疗后两组患者的QOL分数较治疗前均有所降低,但A组患者的QOL分数显著高于B组患者(P0.05),而两组患者治疗后的体重无统计学差异(P0.05)。A组30例患者中有1例(3.33%)患者因严重嗜睡、2例(6.67%)患者因严重口腔干燥而终止口服沙利度胺,其余27例患者均能耐受。结论:沙利度胺联合TACE方法治疗HCC可降低VEGF水平和改善癌症患者的生存质量,值得在临床上推广使用。     

造血干细胞动员与移植治疗脑梗死的对比研究

目的对比造血干细胞（HSCs）内源性动员与外源性移植治疗大鼠脑梗死疗效。方法根据Longa线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞模型（MCAO）,7d后随机分成四组：A组（HSCs移植组）、B组（PBS组）、C组（HSCs动员组）、D组（对照组）。A组定向植入1×10^6个HSCs;B组植入PBS液;C组皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子（rhG—CSF）10ug／kg／d,连用5d;D组不进行干预。移植前、后进行NSS评分;经免疫组化观察CD34、Nestin、VEGF、vWF阳性细胞的分布情况;TCC染色观察梗死体积的变化。结果第1周A组梗死侧半球CD34、Nestin、VEGF、vWF细胞高于其它3组（P〈0．01）,C组Nestin、VEGF、vWF细胞高于B组和D组（P〈0．05）;第4周各组未见CD34细胞,A、C两组Nestin、VEGF细胞减少,vWF细胞增多（P〈0．05）;A组Nestin、VEGF、vWF细胞高于其它3组（P〈0．01）,B、C、D组Nestin、VEGF细胞的差异无统计学意义,C组vWF细胞高于B组、D组（P〈0．05）。A组神经功能改善最显著,C组次之,B、D组间差异无统计学意义（P〉0．05）。A组梗死体积明显缩小（P〈0．01）,B、C、D组间无差异（P〉0．05）。结论HSCs外源性移植对脑梗死后袄的大鼠治疗效果好于动员。     

冻融小鼠卵巢移植后细胞凋亡及血管内皮生长因子表达的变化及意义研究

目的:探讨冻融小鼠卵巢同种异体移植后细胞凋亡及血管内皮生长因子表达的变化及意义。方法:收集C57BL/6j雌鼠和BALB/c雄鼠杂交后F1代4周龄小鼠卵巢,慢冻速融后移植至杂交后F1代8～12周雄鼠的肾被膜下,分别于移植后1d(24h)、2d(48h)和7d回收移植物,将冻融以及移植后不同时间段的卵巢组织进行HE染色、全卵巢卵泡计数、电镜观察、免疫组织化学分析细胞凋亡及RT-PCR检测VEGF基因表达。结果:冻融小鼠卵巢移植后随着时间的推移、各级卵泡数和卵泡存活率逐渐下降;移植后48h内细胞凋亡指数最高;电镜观察发现小鼠卵巢组织移植后损伤主要发生在移植后48h内;移植后VEGF的表达有上升的趋势,至第7d仍维持较高水平;移植后48hVEGF120mRNA和VEGF188mRNA水平明显升高(P0.05),至7d下降恢复至移植前水平,而VEGF164mRNA水平移植后无明显变化(P0.05)。结论:小鼠卵巢组织移植后48h内细胞凋亡最为严重,移植后引起大量卵泡的丢失;在移植后血管化的过程中VEGFmRNA表达量增加,VEGF120mRNA和VEGF188mRNA可能参与卵巢移植后早期血管化过程。     

脐带间充质干细胞移植对糖尿病肾病的临床观察

目的探讨脐带间充质干细胞(UCMSC)移植治疗糖尿病肾病的临床效果及安全性。方法选择福州总医院干细胞治疗科收治的15例经胰背动脉、双肾动脉介入及外周静脉移植UCMSC治疗糖尿病肾病的患者为实验组,肾内科收治的15例单纯采用口服缬沙坦,皮下注射胰岛素治疗糖尿病肾病的患者为对照组。通过监测两组患者治疗前及治疗后3个月的血压、血糖、C肽值以及肾功能指标的变化情况来分析比较两组患者的治疗效果。采用配对样本t检验分别对实验组治疗前、后及对照组治疗前、后各项指标的差异进行统计分析比较,采用两独立样本t检验对实验组、对照组治疗前、后各项指标的差值进行统计分析比较。结果两组患者各项监测指标治疗后均较治疗前有所下降,差异均有统计学意义(P0.05)。对两组患者治疗前及治疗后3个月各项指标差值进行比较,实验组、对照组患者舒张压、尿素氮、血清肌酐、24 h尿白蛋白定量治疗前后差值分别为[(14.6±3.68)mm Hg,(12.1±2.49)mm Hg,t=2.208,P=0.037],[(1.97±0.77)mmol/L,(1.04±0.32)mmol/L,t=4.261,P=0.000],[(57.6±14.08)μmol/L,(39.5±14.61)μmol/L,t=3.448,P=0.002],[(1.48±0.45)g/d,(0.74±0.35)g/d,t=5.017,P=0.000],差异有统计学意义(P0.05)。结论经胰背动脉、双肾动脉介入及外周静脉移植UCMSC治疗糖尿病肾病安全有效,在改善舒张压、肾功能方面的临床疗效优于单纯控制血压、血糖等常规方法治疗糖尿病肾病。     

使用规律间隔的短回文重复序列cas9系统研究转化生长因子β1在小鼠黑色素瘤细胞中的作用

目的研究在小鼠黑色素瘤细胞系(B16)中使用成簇的、规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)靶向敲除转化生长因子β1(TGF-β1)后,细胞体外增殖、侵袭、迁移能力的变化。方法使用CRISPR-cas9系统建立敲除TGF-β1的小鼠黑色素瘤细胞系,用细胞培养计数法检测对照组、载体对照组与TGF-β1-组B16细胞的生长速度,用平板克隆与软琼脂克隆实验来检测三组细胞体外增殖能力,分别用Transwell小室与加基质胶Transwell小室检测三组细胞的体外迁移与侵袭能力。结果成功建立TGF-β1敲除了的B16细胞系,生长曲线在24、48、72、96 h测得3组细胞数目之间差异均无统计学意义(P均0.05);平板克隆一周结果显示:TGF-β1-组的克隆形成率0.067±0.032小于载体对照组0.489±0.034,而载体对照组小于对照组0.633±0.041,F=198.710,P=0.000;平板克隆2周时,TGF-β-组的细胞克隆形成率0.443±0.012与对照组0.489±0.064均大于载体对照组0.370±0.005,F=7.599,P=0.023;还发现虽然TGF-β-组的克隆形成数量多,但是克隆的直径小于其他两对照组;软琼脂克隆实验:对照组的形成率0.008±0.0001低于载体对照组0.012±0.0006与TGF-β1-组0.012±0.0007,F=65.39,P0.0001。侵袭能力实验显示:TGF-β1-组穿过膜的B16细胞数目(12±4.359)个明显的低于对照组(101±18.735)个与载体对照组细胞(100±8.889)个,F=52.34,P=0.0002;迁移能力实验结果显示:TGF-β1-组的B16通过Transwell膜的细胞数量(2.037±0.132)个明显的少于对照组(4.07±0.481)个与载体对照组(8.683±1.017)个,F=81.34,P0.0001。结论 TGF-β1敲除后的小鼠黑色素瘤细胞的体外生长、增殖能力并没有受到影响,但是侵袭与迁移能力受到了抑制。     

新生儿持续性肺动脉高压患儿血浆VEGF与TGF-β1水平变化及临床意义

目的:探讨新生儿持续性肺动脉高压(PPHN)患儿血浆血管内皮生长因子(VEGF)与转化生长因子-β1水平变化及临床意义。方法:选择2014年5月至2016年2月我院PPHN患儿(观察组)及足月正常儿(对照组)各30例,根据肺动脉压力(PAMP)将观察组患儿分为轻度(n=11),中度(n=11)及重度(n=8)。对观察组患儿进行常规治疗(NO+高频振荡通气),采用酶联免疫吸附(ELISA法)检测对照组与观察组治疗前、后血浆VEGF、TGF-β1水平,分析各指标与PAMP的相关性。结果:观察组治疗前血浆VEGF、TGF-β1与PAMP水平高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);且观察组治疗后显著降低,与治疗前比较差异具有统计学意义(P0.05)。观察组患儿血浆VEGF、TGF-β1与PAMP水平随着严重程度的增加而增加,其中重度中度轻度,差异具有统计学意义(P0.05)。线性相关分析显示,血浆VEGF、TGF-β1水平均与PAMP呈正相关(r=0.744,r=0.765,均P0.05)。结论:PPHN患儿血浆VEGF、TGF-β1水平显著升高,与病情的发生发展有关,可用于临床疾病诊断及疗效评估。     

非小细胞肺癌组织血管生成相关因子表达及临床病理分析

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(Flt-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)在非小细胞肺癌(non-smallcelllungcancer,NSCLC)组织血管形成中的意义及与肿瘤临床、生物学行为的关系。方法免疫组化染色观察VEGF、血管内皮生长因子受体-1(Flt-1)、TGF-β1在NSCLC组织中的表达,以CD34免疫组化染色来显示NSCLC组织中微血管生成情况和进行微血管密度判断。结果NSCLC组织中癌细胞不同程度地表达VEGF、血管内皮生长因子受体因子、TGF-β1,而对照组肺组织基本不表达(P<0·05);VEGF、Flt-1、TGF-β1阳性表达的NSCLC组织内微血管计数明显高于VEGF、Flt-1、TGF-β1表达阴性的NSCLC组织(P<0·05);NSCLC组织中VEGF、Flt-1、TGF-β1的阳性表达率和表达强度均与肿瘤淋巴结转移密切相关;随年龄增长,VEGF及其受体Flt-1的阳性表达率有所降低(P<0·05)。结论VEGF、Flt-1、TGF-β1的表达与NSCLC组织内肿瘤血管生成和淋巴结转移有密切关系,VEGF、Flt-1的表达与患者的年龄有一定关系。     

转化生长因子β1对心脏移植排斥反应中穿孔素和颗粒酶B表达的影响

目的探讨转化生长因子β1（TGF-β1）对大鼠心脏移植排斥反应中穿孔素和颗粒酶B表达的影响。方法采用大鼠颈部心脏移植模型,实验动物随机分为3组：同系移植组、异系移植组和TGF-β1组。于术后第5d取移植心脏,用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）法观察穿孔素和颗粒酶B的表达情况。结果异系移植组穿孔素和颗粒酶B表达明显升高（与同系移植组相比,P〈0．01）。TGF-β1组穿孔素和颗粒酶B表达明显降低（与异系移植组相比,P〈0．01）。结论TGF-β1对心脏移植排斥反应的免疫抑制作用可能与其抑制穿孔素和颗粒酶B的表达有关。     

MPC30-DEA70载AMO-miR-222对大鼠颈总动脉球囊损伤后血管狭窄的影响

目的:阳离子磷酸胆碱聚合物(MPC30-DEA70)为非病毒类转基因载体,可与AMO-mi R-222络合,通过导管球囊系统将MPC30-DEA70/AMO-mi R-222基因复合物导入大鼠颈内动脉球囊损伤处,观察对血管平滑肌细胞增生及血管狭窄程度的影响。方法:90只雄性SD大鼠随机分为未损伤组、多聚赖氨酸(PLL组)、MPC30-DEA70/AMO-mi R-222组、PLL/AMO-mi R-222组、PLL/MPC30-DEA70组、AMO-mi R-222组、单纯损伤组、PLL载P/A=3:1组和P/A=5:1组,每组各10只。构建大鼠颈总动脉球囊损伤模型,予血管损伤段行PLL、MPC30-DEA70/AMO-mi R-222、PLL/AMO-mi R-222、PLL/MPC30-DEA70、AMO-mi R-222、PLL载P/A=3:1和P/A=5:1复合物的转运。4周后通过光学显微镜观察HE染色血管段组织形态学改变。Western blot法检测各组血管段p57Kip2、p27Kip1蛋白的表达情况。RT-PCR法检测各组血管段mi R222扩增情况。结果:光学显微镜下,多聚赖氨酸(PLL组)、裸MPC30-DEA70/AMO-mi R-222组、PLL/AMO-mi R-222组、PLL/MPC30-DEA70组、AMO-mi R-222组、MPC30-DEA70组可见内膜显著增生,新生内膜/中膜比值无组间差异,较PLL载P/A=3:1组和P/A=5:1组有组间差异,后两组比较无组间差异,未损伤组未见新生内膜增殖。Western blot法检测显示PLL载P/A=3:1组和P/A=5:1组P57kip2、P27kip1蛋白表达含量较未损伤组降低(P0.05),较余六组增高(P0.05),组间比较无显著差异(P0.05)。RT-PCR法检测显示,mi R-222表达在未损伤组很低,PLL载P/A=3:1组和P/A=5:1组增高,余六组过表达(组间比较无显著差异)。结论:MPC30-DEA70可与AMO-mi R-222络合,有效抑制球囊损伤后血管mi R222表达,从而抑制新生内膜增生及血管狭窄。     

覆膜支架腔内修复术对Stanford B型主动脉夹层动脉瘤患者术后血清血管内皮生长因子、核因子-κB水平的影响

目的:分析覆膜支架腔内修复术对Stanford B型主动脉夹层动脉瘤患者术后血清血管内皮生长因子(VEGF)、核因子-κB(NF-κB)水平的影响。方法:选取2015年6月～2017年6月空军军医大学第一附属医院收治的150例Stanford B型主动脉夹层动脉瘤患者,根据治疗方法不同分为两组。对照组(75例)采用药物治疗,观察组(75例)采用覆膜支架腔内修复术治疗,对比两组治疗前后血清血管内皮生长因子(VEGF)、核因子-KB(NF-κB)、白细胞介素-1β(IL-1β)、干扰素-γ(IFN-γ)、急性生理和慢性健康状况(Acute physiology and chronic health evaluation,APACHEⅡ)评分、SF-36量表评分的变化,并发症(内漏、动脉栓塞、左上肢乏力、支架后移等)发生情况,再次手术或介入治疗发生率及病死率。结果:治疗后,观察组血清VEGF、NF-κB、IL-1β、IFN-γ水平显著低于对照组(P0.05);两组治疗后APACHEⅡ评分均较治疗前降低,SF-36量表评分均较治疗前升高,且观察组APACHEⅡ与SF-36量表评分改善程度大于对照组(P0.05);观察组并发症总发生率4%、再次手术或介入治疗发生率为5.33%,病死率为1.33%,均显著低于对照组(17.33%、21.33%、10.67%,P0.05)。结论:覆膜支架腔内修复术能显著提高Stanford B型主动脉夹层动脉瘤患者生活质量与生存率,并发症与再治疗发生率,改善其病情,可能降低VEGF、NF-κB水平有关。