脑血管的一氧化氮合酶分布的组织化学研究

本研究用ＮＡＤＰＨ－ｄ组织化学方法观察了脑表面及脑实质（皮质、纹状体）血管壁的ＮＯＳ阳性细胞。结果发现,在正常脑大于５０μｍ的血管壁上可见有内皮型一氧化氮合酶（ｅＮＯＳ）阳性内皮细胞,并有神经元型一氧化氮合酶（ｎＮＯＳ）阳性细胞紧贴于管壁或发出突起布于管壁。在神经毒损伤的纹状体中,可见有诱导型一氧化氮阳性胶质细胞,终足附于脑血管壁上,而周围未受损伤的脑实质中未见有诱导型一氧化氮合酶阳性的胶质细胞     

一氧化氮合酶在豚鼠听觉核团的分布

为了研究一氧化氮合酶（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｔｈａｓｅ,ＮＯＳ）在听觉核团的分布特点,探讨一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃｏｘｅｄｅ,ＮＯ）在听觉径路中的作用,本文采用ＮＡＤＰＨ硫辛酸胺脱氢酶（ＮＡＤＰＨ－ｄ）组织化学方法,研究了豚鼠听觉核团内ＮＯＳ的分布。结果发现,在各级听觉传入核团,均有ＮＯＳ阳性神经元,而上橄榄复合体ＮＯＳ反应阴性。耳蜗核ＮＯＳ阳性神经元主要集中在耳蜗后腹核,为圆形或椭圆形双极神经元。下丘ＮＯＳ阳性反应神经元位于下丘中央核团,胞体形状和大小不一。内侧膝状体背侧核ＮＯＳ阳性神经元相对集中,多为双极神经元,部分神经元突起很长,散在阳性纤维,部分阳性纤维穿行于内侧膝状体背侧核与内侧膝状体之间。本研究提示,ＮＯ可能是听觉中枢的神经递质或调质,参与声信号传递的调节。     

胎儿视皮质皮质下层含─氧化氮合酶神经元的发育

本文用出生前１７周至３６周胎儿标本１０个,死后４小时内作常规灌注固定,取脑后作视皮质冰冻切片（３０ｕｍ）,用一氧化氮合酶（ＮＯＳ）组织化学法孵育切片２～４小时,在视皮质皮质下层（ＳＰ）可见ＮＯＳ强阳性神经元。这些神经元胞体大小不一、形态各异、突起显示呈高尔基染色外观,部分神经纤维含有膨体和生长锥。２０周以后,从ＳＰ层有ＮＯＳ阳性神经纤维伸入皮质板或白质。随着胎龄增长,ＮＯＳ阳性神经元密度增加,胞体切面积增大,神经元由幼稚趋向成熟。本研究还观察到胎儿ＳＰ内ＮＯＳ阳性神经元可从形态上明显地划分为两个阶段,并推测ＮＯＳ合成的一氧化氮（ＮＯ）在突触建立和修饰、突触间信息传递、传入纤维对靶器官的识别和脑组织局部血流调节等过程中起着重要作用。     

大鼠胃肌间神经丛中NOS阳性神经元的组织化学研究

采用ＮＡＤＰＨ┐黄递酶（ＮＤＰ）组织化学技术在整装铺片上对大鼠胃肌间神经丛中一氧化氮合酶（ＮＯＳ）阳性神经元进行定量和定位研究。结果显示：大鼠胃肌间神经丛中ＮＯＳ阳性神经元密度（个／ｍｍ２）分别为：６２．１±３７．７（幽门部）、４３．４±３１．７（胃体）、３１．６±２７．８（胃底）。胃底部神经节内神经元数量较少,神经元胞体较大,染色较深;幽门部神经节内神经元数量较多,胞体大小不等,染色深浅不一;胃体部的则介于两者之间,呈过渡态。结果表明：胃各部肌间神经丛中ＮＯＳ阳性神经元的差异可能与胃的生理功能密切相关     

晚妊人胎脊髓内一氧化氮合酶阳性神经元和阳性纤维的分布及其生物学意义

取７例人胎脊髓标本,用还原型辅酶Ⅱ（β－ＮＡＤＰＨ）组织化学方法对人胎脊髓内一氧化氮合酶（ＮＯＳ）阳性神经元和阳性纤维的分布进行了观察。ＮＯＳ阳性神经元在妊娠３２周至３９周胎龄人胎脊髓内的分布和细胞形态无明显差异,主要位于后角深层（Ⅲ、Ⅳ层）、中央管周围灰质和中间带外侧核（ＩＭＬ）;前角内可见少数散在的ＮＯＳ阳性神经元;在脊髓白质内有密集的ＮＯＳ阳性的胶质样细胞分布。ＮＯＳ阳性纤维主要见于后角浅层（Ⅰ、Ⅱ层）和中间带。脊髓内ＮＯＮ阳性神经元和阳性纤维的分布,提示脊髓内ＮＯＳ可能与内脏活动的调节和躯体感觉传入的调制有关;ＮＯＳ阳性的胶质样细胞可能参与白质内神经纤维的髓化过程。     

大鼠内侧隔核、斜角带中NOS与ChAT、NGF-R、AChE的共存神经元

用酶组织化学和免疫组织化学双标技术,观察了正常ＳＤ大鼠基底前脑内侧隔核（ＭＳ）、斜角带垂直支（ＶＤＢ）和水平支（ＨＤＢ）中ＮＯＳ阳性神经元的形态和分布及ＮＯＳ与胆碱能神经元标志物ＣｈＡＴ、ＮＧＦ受体（ＮＧＦ－Ｒ）和ＡＣｈＥ之间的共存关系。结果发现,ＭＳ、ＶＤＢ和ＨＤＢ的头端ＮＯＳ阳性神经元较多、胞体较大、突起多,尾端ＮＯＳ阳性神经元数目较少、胞体较小、突起少而短。ＮＯＳ＋ＣｈＡＴ双标神经元占ＮＯＳ阳性神经元总数的９０％,占ＣｈＡＴ阳性神经元总数的３９％;ＮＯＳ＋ＮＧＦ－Ｒ双标神经元占ＮＯＳ阳性神经元总数的８３％,占ＮＧＦ－Ｒ阳性神经元总数的４０％;ＮＯＳ＋ＡＣｈＥ双标神经元占ＮＯＳ阳性神经元总数的９６％,占ＡＣｈＥ阳性神经元总数的３９％。这些结果为研究Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ＇ｓｄｉｓｅａｓｅ病理过程中基底前脑隔区胆碱能神经元退变与ＮＯ的关系提供了形态学依据。     

大鼠肺内NOS阳性神经及其来源的研究

应用还原型尼可酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸硫辛酰胺脱氢酶（ＮＡＤＰＨｄ）组织化学技术和ＨＲＰ逆行追踪与ＮＡＤＰＨｄ组化结合法,对大鼠肺内一氧化氮合酶（ＮＯＳ）阳性神经及其来源进行了研究。结果证实,肺内支气管和肺血管存在不同密度的ＮＯＳ阳性神经纤维,肺内神经节中存在少量ＮＯＳ阳性神经细胞。用ＨＲＰ与ＮＡＤＰＨｄ结合法,在迷走神经结状节和胸。。脊神经节中发现ＨＲＰ－ＮＯＳ双标记细胞,说明肺内ＮＯＳ神经纤维部分来自结状节和脊神经节,并对此进行了讨论。     

心房利钠肽样免疫反应神经元在大鼠中脑和脑桥中某些锥体外系神经核内的分布

采用PAP免疫组织化学方法对大鼠中脑和脑桥内心房利钠肽(ANP)样免疫反应神经元的分布进行了研究,结果显示阳性神经元除存在于其他作者报导过的导水管周围灰质、Edinger-Westphal核、中缝核、脚间核和蓝斑核外,还存在于属于锥体外系的红核、黑质和脑桥核内,因此,推测脑内的ANP可能在锥外系对躯体运动的调节中起着一种神经递质或神经调质的作用。这为脑内ANP可能具有与液体和电解质平衡以及心血管功能的调节无关的其它作用提供了部分形态学证据。     

人胎视网膜含NOS神经元的发育

本文用一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的组织化学方法对胎龄１５周至３６周的人胎视网膜含ＮＯＳ神经元的发育进行了研究。胚胎１５周视网膜颞侧半少部分神经元即有ＮＯＳ的表达,２０周视网膜含ＮＯＳ神经元数密度达峰值。大部分含ＮＯＳ神经元胞体位于内核层内带,只少部分位于节细胞层,其突起均分布于内同层,形成内同层的１、３、５亚层。含ＮＯＳ神经元的形态各异,依据其突起的多少分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ等三种类型,其中Ⅱ、Ⅲ型含ＮＯＳ神经元在２８周以后才开始出现,且愈近晚期胎龄,它们所占含ＮＯＳ神经元的数量比呈上升趋势。随视网膜发育成熟,含ＮＯＳ神经元胞体均面积呈不断增大的变化。本文结果显示：人胎视网膜内核层含ＮＯＳ神经元为无长突细胞,节细胞层的Ⅰ型含ＮＯＳ神经元为移位无长突细胞,推测它们在视网膜的发育过程中对内网层突触的形成与修饰可能起有重要作用。     

自发性高血压大鼠下丘脑加压素能神经元形态学研究

本文用光、电镜和免疫组织化学方法观察了自发性高血压大鼠（ＳＨＲｓ）下丘脑加压素能神经元的形态结构。电镜下ＳＨＲｓ加压素能神经元胞体大,电子密度高,核大有皱褶细胞质内密集充满各种细胞器。可见膜包神经分泌颗粒。ＰＡＰ法显示精氨酸加压素（ＡＶＰ）阳性细胞主要分布于视上核（ＳＯＮ）腹外侧部及室旁核（ＰＶＮ）内。在ＳＯＮ和ＰＶＮ之间尚有一个ＡＶＰ阳性细胞的密集核团。说明ＳＨＲ下丘脑也有产生ＡＶＰ功能。ＳＯＮ和ＰＶＮ之间的核团是否与ＳＨＲｓ下丘脑－垂体－肾上腺轴ＡＣＴＨ的异常有关？有待进一步研究。本文为探讨ＳＨＲｓ正常生理功能及高血压的发生提供形态学资料。     

5-羟色胺和一氧化氮合酶在大鼠中脑导水管周围灰质 和中缝核簇神经元内的共存

实验采用 NADPH组织化学和 5 - HT免疫组织化学双重显色方法研究了 5 - HT和一氧化氮合酶在大鼠中脑导水管周围灰质 (PAG)和中缝核簇神经元的分布特征及共存情况。结果表明 ;(1 )在 PAG腹外侧区中观察到大量的 NOS阳性神经元和 5 - HT样免疫阳性神经元 ,但是 NOS/ 5 - HT双标神经元较少 ,仅占该区 5 - HT样免疫阳性神经元 2 0 .1 % ,并且主要分布在该区的内侧部 ;在 PAG的背外侧区中观察到密集的 NOS阳性神经元 ,但是几乎未见 5 - HT免疫阳性神经元分布。(2 )在中缝核簇的大多数亚核内均可观察到大量的 NOS神经元和 5 - HT免疫阳性神经元。在中缝背核的内侧部、中缝背核的尾侧部、中缝正中核、尾侧线形核、中缝大核和中缝隐核内双标神经元分别占所在部位中 5 - HT免疫阳性神经元的 44 .6 %、5 3.4%、 44 .4%、 2 6 .2 %、 2 6 .7%和 2 1 .8%。然而在中缝苍白核内仅偶见少数双标神经元。研究结果表明 ,在 PAG和中缝核簇的一些神经元内 5 - HT可以与 NOS共存 ,提示这两种神经活性物质在功能上可能存在着某种相关性 ,有关这些双标神经元的功能意义尚需进一步研究。     

颈动脉注射辣椒素对脑干心血管相关核团一氧化氮合酶和Fos表达的影响

实验采用NADPH－d组化技术和Fos蛋白免疫组化技术相结合的方法,观察了颈动脉注射辣椒不时,大鼠脑干心血管相关核团内NOS和Fos蛋白的分布以及两者的共存关系。结果显示：（1）颈动脉注射辣椒不可诱发脑干中最后区（AP）、孤束核（NTS）、巨细胞旁外侧核（PGL）和蓝斑（LC）等多个部位Fos样免疫反应（FLI)神经元显著增加 中脑中央灰质（PAG）和中缝核群（RN）的FLI神经元无明显改变。（2）PGL和NTS内NO合成神经元以及PGL内双标神经元数量也明显增加,而AG和RN中NO合成神经元无明显变化,在LC和AP仅偶见或未见NO合成神经元。（3）预先应用辣椒素受体阻断剂钌红或NMDA受体阻断剂MK－801,则明显减弱辣椒素的上述效应,以上结果表明,颈动脉注射辣椒素可兴奋脑干心血管活动相关核团神经元,NO在脑干核团对辣椒素的反应中发挥间接的调制作用,辣椒素的效应由香草酸受体（辣椒素受体）介导并有谷氨酸参与。     

硝基左旋精氨酸对睡眠抑制作用的机制研究

本文观察了硝基左旋精氨酸（Ｌ－ＮＮＡ,５０ｍｇ／ｋｇ,ｉｐ）和Ｌ－精氨酸（Ｌ－ａｒｇ,１１０ｍｇ／ｋｇ,ｉｐ）对慢性植入电极的大鼠睡眠－觉醒周期的影响及中缝核５－羟色胺（５－ＨＴ）神经元免疫阳性反应的变化。结果表明：Ｌ－ＮＮＡ显著抑制慢波睡眠和快眼动睡眠,使平均动脉压（ＭＡＰ）升高。Ｌ－ａｒｇ则使ＭＡＰ显著降低,对睡眠无明显影响。预先给予Ｌ－ａｒｇ可逆转Ｌ－ＮＮＡ的效应。腹腔给予Ｌ－ＮＮＡ后２ｈ,     

大鼠脑内5-HT能神经元对咽肌的支配及调控

用ＰＲＶ和５－ＨＴ免疫组织化学双标记方法研究脑内５－ＨＴ能神经元对咽肌的神经支配及调控。观察到中缝核群的中缝苍白核、中缝隐核、中缝大核、中缝桥核、中缝正中核、中缝背核、和中缝尾侧线形核等部位有ＰＲＶ和５－ＨＴ双标记细胞,直接证明中缝核群的５－ＨＴ能神经元投射到支配咽肌的疑核运动神经元和孤束核中的前运动神经元,调控咽肌的运动。并推测脑干中缝核群中的５－ＨＴ能神经元对咽肌运动的调控可能经由５ＨＴ３和５ＨＴ１Ａ两种受体介导。     

大鼠下丘脑内一氧化氮合酶阳性神经元的分布

用ＮＡＤＰＨ－ｄ组织化学方法观察了大白鼠下丘脑内一氧化氮合酶（ＮＤＳ）阳性神经元的分布及形态特征。结果显示：在视上核、室旁核的大细胞部、环状核、穹窿周核、下丘脑外侧区、下丘脑腹内侧核、下丘脑背内侧核、乳头体区大部分核团均可见一氧化氮合酶阳性神经元聚集成团。在视前内侧区、视前外侧区、下丘脑前区、下丘脑背侧区、下丘脑后区、室周核、室旁核小细胞部及穹窿内可见散在的一氧化氮合酶阳性神经元。室周核内可见呈阳性反应的接触脑脊液神经元的胞体及突起。一氧化氮合酶阳性神经元大多可见突起,有的突起上可见１～２级分支,并可见膨体。下丘脑大部分区域内可见阳性神经纤维。弓状核内可见许多弧形纤维连于第三脑室室管膜和正中隆起。     

大鼠延髓网状背侧亚核内5-羟色胺能、P物质样和脑啡肽样阳性终末的中枢起源

研究用荧光金（ＦＧ）逆行追踪与免疫荧光组化染色相结合的双标技术对大鼠脑干向延髓网状背侧亚核（ＳＲＤ）的５┐羟色胺（５┐ＨＴ）能、Ｐ物质（ＳＰ）能和亮氨酸┐脑啡肽（Ｌ┐ＥＮＫ）能投射进行了观察。将ＦＧ注入ＳＲＤ后,ＦＧ逆标神经元主要见于中脑导水管周围灰质、脑干中缝核簇（中缝背核、中缝正中核、中缝桥核、中缝大核、中缝隐核和中缝苍白核）、巨细胞网状核α部、延髓网状结构的内侧部和外侧部、延髓外侧网状核、三叉神经脊束核尾侧亚核和孤束核。５┐羟色胺（５┐ＨＴ）样、Ｐ物质（ＳＰ）样和亮氨酸脑啡肽（Ｌ┐ＥＮＫ）样阳性神经元主要见于中脑导水管周围灰质、脑干中缝核簇和巨细胞网状核α部;此外,ＳＰ样和Ｌ┐ＥＮＫ样阳性神经元还见于臂旁核、背外侧被盖核和孤束核。ＦＧ逆标并呈５┐ＨＴ样、ＳＰ样或Ｌ┐ＥＮＫ样阳性的双标神经元也主要见于中脑导水管周围灰质、脑干中缝核簇和巨细胞网状核α部,尤其是位于延髓中缝核团内的双标神经元数量较多。本研究的结果说明ＳＲＤ内的５┐ＨＴ样、ＳＰ样和Ｌ┐ＥＮＫ样阳性终末主要来自中脑导水管周围灰质、脑干中缝核簇和巨细胞网状核α部,向ＳＲＤ发出５┐ＨＴ能、ＳＰ能和Ｌ┐ＥＮＫ能投射的上述核团对ＳＲＤ发挥“弥漫性伤害抑     

正常豚鼠耳蜗核一氧化氮合酶阳性神经元的投射

本文采用辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）逆行追踪技术结合硫辛酰胺脱氨酸（ＮＡＤＰＨ－ｄ）组织化学方法,研究正常豚鼠耳蜗核一氧化氮合酶（ＮＯＳ）阳性神经元的上行投射特点。探讨耳蜗核ＮＯＳ阳性神经元在听觉信号传递中的可能作用。结果表明,一侧上橄榄复合体加压注射ＨＲＰ后,两侧耳蜗核均出现ＨＲＰ标记细胞,同侧耳蜗核ＮＯＳ－ＨＲＰ双标细胞较多占８２．６３％,并可见ＨＲＰ阳性纤维和终末包绕ＮＯＳ阳性胞体,对侧耳蜗核ＮＯＳ－ＨＲＰ双标细胞相对较少,仅占１４．８７％。一侧下丘加压注入ＨＲＰ后两侧耳蜗核均无ＨＲＰ－ＮＯＳ双标细胞。结果提示,耳蜗核ＮＯＳ阳性神经元向上橄榄复合体投射,可能具有调节听觉声信号传递的作用     

捕食应激过程中大鼠脑边缘系统一氧化氮合酶神经元的变化

探讨应激状态下大鼠脑边缘系统内一氧化氮合酶 (Nitricoxidesynthase,NOS )阳性神经元的变化及这种变化与脑神经元损伤发生的关系。采用捕食应激动物模型 ,将 80只雄性SD大鼠随机分为 3组 :对照组 (n =2 0 )、单纯捕食应激组 (n =30 )、加强捕食应激组 (n =30 )。采用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸黄递酶(NADPH d)组织化学方法 ,研究应激后 1、 3、 6、 12、 2 1、 30dNOS阳性神经元的分布规律。结果表明 :对照组NOS活性平稳 ,但应激后NOS活性变化明显。与对照组比较 ,应激 1- 3d ,单纯应激组和加强应激组NOS阳性神经元数目在皮质、纹状体、海马、下丘脑等部位增多 ,即NOS活性升高 ;第 4 - 12d ,NOS活性进一步升高 ,除皮质外与对照组相比具显著性差异 (P <0 0 1) ;其中 ,应激单纯组和加强组海马和下丘脑室旁核分别在第 6d、第 12dNOS活性最高。从第 13d起NOS阳性神经元的活性开始逐渐降低 ;到第 30dNOS活性下降明显 ,但其活性仍高于对照组 (P <0 0 5 )。对于同一时间点而言 ,与对照组相比 ,加强应激组的NOS活性变化大于相应的单纯应激组。结果提示 :NOS活性程度与心理应激程度密切相关 ;应激过程中大鼠脑边缘系统过量增多的NO产生的神经毒性可能是应激导致大鼠脑边缘系统神经元受损的原因之一     

Comparative distribution of nitric oxide synthase- and serotonin-containing neurons in the raphe nuclei of four mammalian species

 Monoclonal antibodies were generated against serotonin (5-HT) and the C-terminal portion of the neuronal form of nitric oxide synthase (nNOS), the enzyme producing nitric oxide in neurons. These antibodies were used to compare the distribution of 5-HT- and nNOS-containing neurons in the raphe nuclei of four animal species (rat, mouse, guinea pig, and cat). It was found that the rat was the only species in which the raphe nuclei contain a substantial number of nNOS-immunoreactive (IR) cell bodies. In this species and as observed by other authors, all mesencephalic raphe nuclei contained nNOS-IR cells, the largest group being located in the nucleus raphe dorsalis. The coexistence of nNOS and 5-HT immunoreactivities in these nuclei was visualized by double labeling. In the medulla, the nuclei raphe magnus and obscurus displayed a rather low number of nNOS-IR neurons. In the other species, nNOS-IR cell bodies were found in very low numbers, whatever raphe nucleus was considered. The rostral pole of the nucleus raphe dorsalis and the nuclei raphe magnus and obscurus contained a few nNOS-IR neurons which did not show any coincidence with the 5-HT neurons. In addition, nNOS-IR axons were rare. It is concluded that in the mouse, guinea pig, and cat the involvement of nitric oxide in functions subserved by 5-HT within the raphe nuclei might be minimal. Accepted: 5 May 1998