FS痢疾双价活菌苗治疗慢性腹泻70例疗效初步观察

对７０例临床诊断为慢性腹泻的病例经口服冻干ＦＳ痢疾双价活菌苗一个疗程三次服苗治疗后,除对慢性菌痢和溃疡性结肠炎患者中各有１例无明显效果外（２．８６％）,其余６８例慢性腹泻治疗后,有１７例显效（２４．２９％）,５１例有效（７２．８６％）。大多数病人经两次服苗后慢性腹泻症状,体征消失或缓解;半年随访发现６８例治疗有效的病人中,仅一例於治疗后两个月时复发,其余患者未见复发。     

口服福氏2a和宋内氏痢疾双价活菌苗FS人群粪抗体检测

本文测试了经三剂（共１×１０１１ｃｆｕ）ＦＳ双价活菌苗口服免疫的１６３名中学生免前及免后１、３和６个月时特异性ｓＩｇＡ粪抗体水平。结果发现,服苗后半年内,分别有７１％和７７．９％的免疫人群特异性抗福氏２ａ和抗宋内氏ｓＩｇＡ有四倍以上升高,且有８２．９％的人群粪便中,两种抗体的应答状况表现一致,说明该菌苗具有良好的免疫原性,并具有双价菌苗的免疫学特性。     

肾综合征出血热双价灭活疫苗的研究

为研制包含Ⅰ型和Ⅱ型病毒抗原的肾综合征出血热双价灭活疫苗,以适合全国各出血热疫区使用,通过空斑克隆和终末稀释传代的方法选育了2株出血热Ⅰ型病毒PS-6和JR-C-1。用金黄地鼠肾细胞培养的L99株（Ⅱ型）病毒疫苗,PS-6株病毒疫苗和JR-C-1株病毒疫苗以2：1：1的配伍方式试制三批双价疫苗,结果试制的三批双价疫苗自检和中国药品生物制品检定所复检,各项指标全部合格,疫苗于室温放置3周,37℃放置2周和4℃放置1年、1.5年和2年,效力试验均合格,研制的三批出血热双价疫苗,符合《肾综合征出血热灭活疫苗（双价）试行规程》的要求,疫苗稳定性良好。     

一个双价锤头型核酶在体外对两种不同植物病毒RNA的专一切割作用

根据锤头核酶模型,设计合成了一个以黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）外壳蛋白（ＣＰ）亚基因组ＲＮＡ为底物的锤头型核酶（ＲＺＣ）,在证明它能有效切割该底物后,再将这个核酶与一个能专一性切割烟草花叶病毒（ＴＭＶ）移动蛋白（ＭＰ）亚基因组ＲＮＡ的锤头型核酶（ＲＺ１）相互串联构成了一个双价核酶（ＲＺ１Ｃ）,体外结果表明,这个双价核酶能与相应的单价核酶ＲＺ１和ＲＺＣ一样专一而有效地切割ＣＭＶ ＣＰ和ＴＭＶ ＭＰ ＲＮＡ     

肠毒素源性定居因子CS6在减素伤寒沙门氏菌中表达及免疫原性的研究

将编码肠毒素源性大肠杆菌定居因子抗原ＣＳ６基因克隆到ｐＸＬ６７０,转化ａｓｄ基因突变的Ｅ．ｃｏｌｉ Ｘ６０９７,获得重组质粒ｐＳＳ６４,再将后者转化至减毒的△ａｒｏＡ、△ａｒｏＣ、△ａｓｄ伤寒沙门氏菌,构建了无药物抗性且稳定的大肠杆菌和伤寒双价菌苗候选株。小鼠腹腔免疫和攻击实验表明,该菌株对伤寒沙门氏菌毒株的攻击具有良好的保护作用。家兔免疫实验证明,该菌株能产生抗ＣＳ６和伤寒菌Ｖｉ抗原的血清抗体。     

幼畜腹泻双价基因工程疫苗(K88、K99)的高密度发酵生产工艺及抗原过量表达

本文报道了幼畜腹泻双价基因工程疫苗(K88、K99)的高密度发酵生产工艺和抗原基因的过量表达研究结果。采用New Biunswick公司发酵罐,主要发酵参数为搅拌速度1000rpm,通气量为18L／min,溶氧为25％,pH6．5,罐压为48．3kPa,温度37℃,发酵时间为20h。菌体浓度为A 6 0 0 nm40以上,K88、K99抗原效价分别达212水平。发酵过程中发现表达的抗原除装配细菌伞毛之外,过量表达的抗原以相当于伞毛中抗原浓度游离存在于溶液中。含双价疫苗基因的表选型质粒的稳定性在发酵20h后保持在70％。本文结果表明利用小型发酵罐(10L发酵液)每次可制备10000支疫苗,完全可以满足对幼畜腹泻基因工程疫苗盼大量需要。     

肾综合征出血热双价纯化疫苗（Vero细胞）病毒株的筛选及其免疫原性研究

选用在Vero细胞上初步适应的LR1（Ⅰ型）、R22（Ⅱ型）株病毒,经乳鼠脑或腹腔接种,收剖感染鼠脑并在Vero细胞传代适应,此收获病毒与直接以Vero细胞传代的病毒比较表明：抗原效价、毒力滴度有明显提高。用LR1、LR22株病毒感染的Vero细胞培养物制备单价粗制疫苗和双价精制纯化疫苗免疫家兔,经空斑减少中和试验检测中和抗体,结果表明经乳鼠和Vero细胞交替传代适应后的LR1、R22株病毒具有良好的抗原性和免疫原性。     

双特异性抗体及其在肿瘤治疗中的应用

双特异性抗体（BsAb）是改造抗体治疗效果的发展方向之一,现已成为抗体工程研究领域的热点。在过去20年的研究中．研究人员看到了常规BsAb的潜能以及它的不足。随着分子生物学技术的迅速发展,出现了利用基因工程手段构建的BsAb的多种模式,并且有多种BsAb制剂已经用于肿瘤的初期临床诊断和治疗。该文对BsAb最新的研究进展和肿瘤治疗中的应用进行了阐述。     

HFRS疫苗佐剂吸附前后加入保护剂对其免疫原性的影响

为提高肾综合征出血热(HFRS)双价纯化疫苗抗原的有效利用率,在保证疫苗免疫效果的前提下,合理地降低疫苗的成本,确定最佳疫苗配制方法和最合适的疫苗浓缩倍数。将抗原含量不同的出血热纯化疫苗原液及疫苗配制的两种主要成分———人血白蛋白和A l(OH)3佐剂按不同的配制顺序配制成4批纯化疫苗,分别抽样,测其上清液中抗原量并做效力试验。结果表明人血白蛋白和A l(OH)3佐剂加入的顺序不同,配制的4批纯化疫苗上清液抗原量也不同,效力试验结果显示其中和抗体阳转率(PRNT)也有很大差别。因此在纯化疫苗的配制过程中,人血白蛋白和A l(OH)3的加入顺序影响到佐剂A l(OH)3对疫苗抗原的吸附,也影响到疫苗的免疫效果;先加A l(OH)3再加人血白蛋白的疫苗免疫效果要好于先加人血白蛋白再加A l(OH)3的疫苗。     

转双价基因抗虫棉及其杂交F1代对棉铃虫幼虫的抗性研究

利用室内生物测定法和田间调查法研究双价抗虫棉及其杂交F1代不同生育期主茎功能叶和花铃期不同组织器官的抗虫性。结果表明:双价抗虫棉及其杂交F1代的抗虫性变化规律与B t基因棉的抗虫性变化规律相近,为生育前期(苗期、蕾期)抗性强,生育后期(花铃期、吐絮期)抗性弱,在花铃期为:棉铃>棉蕾>花>棉叶,且差异极显著。与B t基因棉相比,生育前期双价抗虫棉及其杂交F1代的抗虫性略弱,但差异不显著;生育后期双价抗虫棉及其杂交F1代的抗虫性显著强于B t基因棉。     

肾综合征出血热双价纯化疫苗（Vero细胞）安全性的研究

在肾综合征出血热（HFRS）双价纯化疫苗（Vero细胞）的研制中,对病毒培养用Vero细胞致瘤性和试制疫苗的过敏原性进行了动物实验研究,结果表明,病毒培养用Vero细胞无致瘤性,三批试制疫苗无过敏原性。说明用Vero细胞为培养介质的HFRS双价纯化疫苗是安全的。     

几丁质酶基因与抗真菌蛋白基因、葡聚糖酶基因双价表达载体的构建及农杆菌工程菌株的重组

几丁质酶（Chitinase,Chi.)、β-1,3－葡聚糖酶（β－1,3－Glucanase,Glu.)和萝卜抗真菌蛋白（Rs-AFP2)是植物体内正常的表达产物,它们对防御植物的真菌病害具有重要的作用。基于它们在功能上具有协同作用,本研究利用基因工程技术构建了几丁质酶和抗真菌蛋白、几丁质酶和葡聚糖酶双价表达载体,通过农杆菌直接转化技术将双价表达载体转入农杆菌EHA105,最后采用PCR、DNA dot blotting技术对所获得的农杆菌工程菌株进行了鉴定分析。     

地鼠肾原代细胞双价肾综合征出血热疫苗免疫效果的研究

对新近研制成功的地鼠肾原代细胞肾综合征出血热双价疫苗（汉滩型＋汉城型）进行了Ⅱ期临床扩大观察,考核其对人体的安全性和中和抗体反应。将观察人群分别选择在中国南方和北方两个点,每个点接种589人和600人,观察其接种对象的副反应程度和采集血清样品测定其光抗体并以蚀斑减少中和法测定中和抗体,考核疫苗效果。观察结果显示,在观察的253人中分别有6人呈现轻度局部副反应和1人37．5℃以下的低热全身反应,总反应率分别为2．77％（7／253）。IFAT抗体阳转率对I型病毒为94．85％（184／194）,对Ⅱ型病毒为89．69％（174／194）,ELISA抗体阳转率为99．44％（179／180）,GMT1325。PRNT抗体阳转率I型为92．55％（87／94）,GMT10．17,Ⅱ型为93．62％（88／94）,GMT11．08。经过Ⅱ期临床人体观察结果显示,该双价疫苗仅有轻度局部反应和良好的中和抗体应答。证明该疫苗对人体安全,具有较好的免疫原性。     

基于双工程菌的“锁扣”生物活材料构建及其体内肠道滞留应用

生物活材料的研究主要集中在利用单一细菌生产生物膜、水塑料等体外应用。由于菌株尺寸较小，当其应用于体内时，容易发生逃逸，导致滞留效果较差。为解决这一难题，本研究借助大肠杆菌(Escherichia coli)表面展示系统(Neae)，在两个菌株表面分别展示SpyTag和SpyCatcher，构建一种双菌“锁扣”型生物活材料生产系统。两菌株之间通过SpyTag和SpyCatcher的结合，发生原位交联，从而长时间滞留在肠道部位。体外实验表明两菌株混合几分钟后，会发生明显的沉降。此外，利用共聚焦成像和微流控平台进一步证明了该系统在流动状态下的粘附效果。最后，为了验证该系统在体内应用的可行性，小鼠连续3d口服A菌(p15A-Neae-SpyTag/sfGFP)和B菌(p15A-Neae-SpyCatcher/mCherry)，收集肠道组织进行冷冻切片染色。结果表明，相较于未结合菌株，该双菌系统能更多滞留在小鼠肠道，为生物活材料进一步的体内应用奠定了基础。     

双碱性氨基酸内肽酶末端剪切修饰显著提高酶活及其高效水解大豆蛋白

【目的】将酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和毕赤亚库德里亚夫泽维(Pichia kudriavzevii)来源的双碱性氨基酸内肽酶基因sckex2和pkkex2克隆到大肠杆菌(Escherichia coli)BL21中,实现双碱性氨基酸内肽酶的异源表达,研究重组酶的酶学性质及其与碱性蛋白酶的协同高效水解大豆蛋白释放出小分子活性肽的作用。【方法】按照大肠杆菌的密码子偏好性,对S.cerevisiae和P.kudriavzevii的kex2基因进行优化,分析KEX2蛋白的非功能区域,对其C-末端、N-末端氨基酸进行剪切修饰获得4种突变酶基因sckex2?3、sckex2?4、pkkex2?3和pkkex2?4,构建在载体pGEX-6P-1上,转入E.coli BL21感受态细胞中,经DNA测序验证,获得重组菌株E.coli BL21/pGEX-ScKEX2?3、E.coli BL21/pGEX-ScKEX2?4、E.coli BL21/pGEX-PkKEX2?3和E.coli BL21/pGEX-PkKEX2?4。利用GST亲和层析柱和PreScission蛋...     

活分子

有生命物质最重要的化学组成当然是蛋白貭和核酸,我主要想讲的也就是这些,其中尤其是核酸,一方面因为一二年来,我们已经知道了不少有关蛋白貭和核酸方面令人鼓舞的消息,另一方面或许是出于自私,因为我已与它们打了二十多年交道。所有细胞组成中,蛋白貭是最多变化和最丰富的,是极复杂的高分子物貭,但是依靠现代技术的帮助,已经得到许多有关它们结构的知识。氨基酸是蛋白貭的组成单元,大约有20种,它们都有相同的通式结构:     

双唑泰泡腾片与乳酸杆菌活菌胶囊联合治疗细菌性阴道病的临床疗效分析

本文旨在探讨双唑泰泡腾片与乳酸杆菌活菌胶囊联合治疗细菌性阴道病的临床疗效.将100例就诊于江苏省中西医结合医院妇产科的细菌性阴道病患者随机平均分为两组:治疗组给予阴道内放置双唑泰泡腾片与乳酸杆菌活菌胶囊联合治疗;对照组单用阴道内放置双唑泰泡腾片.药物剂量、治疗时间相同.结果显示,治疗组细菌性阴道病48例(失访2例),3...