锌-α2-糖蛋白(ZAG)在肥胖SD大鼠肝脏中表达的研究

目的:探讨锌-α2-糖蛋白(ZAG)在肥胖与正常SD大鼠肝脏中的表达情况。方法:采用高脂饮食方法建立雄性肥胖大鼠的动物模型,抽提肥胖和正常大鼠肝脏中的蛋白质,运用免疫印迹技术,检测ZAG的表达情况。结果:成功建立肥胖大鼠动物模型,ZAG在肥胖和正常大鼠肝脏中均有表达,其中肥胖大鼠肝脏表达量增加。结论:ZAG在肝脏中均有表达,尤其是在肥胖大鼠肝脏中表达较多,为进一步研究ZAG的功能提供必要的基础。     

血清锌-α2-糖蛋白、骨硬化蛋白、胎球蛋白A水平与维持性血液透析患者冠状动脉钙化的关系及其诊断价值研究

目的:研究血清锌-α2-糖蛋白(ZAG)、骨硬化蛋白(SOST)及胎球蛋白A(FA)水平与维持性血液透析(MHD)患者冠状动脉钙化的关系及其诊断价值。方法:将2018年1月~2021年4月于我院接受MHD的203例患者纳入研究。将其按照冠状动脉钙化积分分作钙化组133例以及无钙化组70例。分析两组各项基线资料以及实验室指标水平的差异,并以多因素Logistic回归分析明确MHD患者冠状动脉钙化的影响因素。另外,通过受试者工作特征(ROC)曲线分析明确血清ZAG、SOST及FA诊断MHD患者冠状动脉钙化的效能。结果:钙化组年龄及血磷、SOST水平均高于无钙化组,而血清ZAG、FA水平均低于无钙化组(P<0.05)。经多因素Logistic回归分析可得:年龄、血磷以及血清SOST、ZAG、FA均是MHD患者冠状动脉钙化的影响因素(P<0.05)。经ROC曲线分析发现:血清ZAG、SOST及FA联合诊断MHD患者冠状动脉钙化的曲线下面积、灵敏度、特异度以及约登指数均高于上述三项指标单独诊断。结论:血清ZAG、SOST及FA均和MHD患者冠状动脉钙化密切相关,可作为辅助诊断MHD患者冠状动脉钙化的生物学标志物。     

早发冠心病患者血清锌a2糖蛋白、单核细胞趋化蛋白-1水平与血脂的关系及其影响因素分析

摘要 目的：分析早发冠心病（PCAD）患者血清锌a2糖蛋白（ZAG）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）水平与血脂的关系及其影响因素。方法：收集2017年1月-2019年12月在我院经冠状动脉造影确诊的冠心病患者184例,其中PCAD 患者86例（PCAD组）,非PCAD患者98例（NPCAD组）,再选取同期男性<55岁,女性<65岁健康体检者86例作为对照组。收集所有研究对象的基线资料并检测空腹血糖(FBG) 、总胆固醇(TC) 、低密度脂蛋白(LDL) 、甘油三酯(TG) 、高密度脂蛋白(HDL)、血清ZAG、MCP-1水平,采用Pearson相关性分析ZAG、MCP-1与血脂相关性。多因素Logistic回归分析PCAD的影响因素。结果：PCAD组、NPCAD组糖尿病史、高血压病史、冠心病家族史比例、体质量指数(BMI)、FPG、TG、MCP-1高于对照组,HDL、ZAG水平低于对照组（P＜0.05）,PCAD组年龄、HDL、ZAG水平低于NPCAD组,冠心病家族史、吸烟史比例高于NPCAD组（P＜0.05）。Pearson相关性分析结果表明,PCAD患者ZAG与HDL呈正相关,MCP-1与HDL呈负相关（P＜0.05）;多因素Logistic回归分析显示,高血压、吸烟史、冠心病家族史、HDL、TG、ZAG、MCP-1是PCAD的独立危险因素。结论：PCAD患者MCP-1水平升高、ZAG、HDL水平降低,MCP-1、ZAG与HDL密切相关,且是PCAD的独立危险因素。     

脂肪细胞因子锌α2- 糖蛋白的研究进展

锌α2-糖蛋白(ZAG)是一种广泛存在于人体内的可溶性糖蛋白,是I 类主要组织相容性复合物(MHC-I)家族中的一员.ZAG被认为是不同类型癌可能的生物标志物,由于它的氨基酸序列与脂质动员因子(LMF)高度同源,因此它被认为是一个新的脂肪因子.它的表达受多种因素调控,在人体内能够发挥重要的功能.ZAG刺激脂肪细胞的脂质分解,并导致一些高分化癌症中脂肪的大量损失.本文主要从ZAG的基因结构、分布和功能等方面进行论述.     

慢性牙周炎患者血清miR-205-5p、miR-28-5p的表达与诊断价值研究

摘要 目的：探讨慢性牙周炎（CP）患者血清微小核糖核酸（miRNA）-205-5p、miR-28-5p表达与牙周指标、炎症反应的关系及诊断价值。方法：选取2021年1月～2022年12月我院口腔科收治的102例CP患者为CP组,根据病情严重程度分为轻度组31例、中度组37例、重度组34例,另选取同期我院65名体检健康者为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）检测血清miR-205-5p、miR-28-5p表达,酶联免疫吸附法检测白细胞介素（IL）-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平,检查各组牙周指标[菌斑指数（PLI）、牙龈出血指数（BI）、附着丧失（AL）、探诊深度（PD）]。CP患者血清miR-205-5p、miR-28-5p表达与牙周指标和炎症指标的相关性采用Pearson相关性分析。受试者工作特征（ROC）曲线分析血清miR-205-5p、miR-28-5p表达诊断CP的价值。结果：与对照组比较,CP组血清miR-205-5p、miR-28-5p表达降低,PLI、BI、AL、PD和IL-1β、IL-6、TNF-α水平升高（P＜0.05）。轻度组、中度组、重度组血清miR-205-5p、miR-28-5p表达依次降低,PLI、BI、AL、PD和IL-1β、IL-6、TNF-α水平依次升高（P＜0.05）。Pearson相关性分析显示,CP患者血清miR-205-5p、miR-28-5p表达与PLI、BI、AL、PD、IL-1β、IL-6、TNF-α呈负相关（P＜0.05）。ROC曲线分析显示,血清miR-205-5p联合miR-28-5p诊断CP的曲线下面积分别为0.885大于miR-205-5p、miR-28-5p单独检测的0.792、0.790。结论：CP患者血清miR-205-5p、miR-28-5p低表达,与牙周指标、炎症反应密切相关,血清miR-205-5p、miR-28-5p的表达情况可能成为CP辅助诊断指标,且miR-205-5p联合miR-28-5p诊断CP的价值较高。     

脂肪细胞因子锌α 2-糖蛋白的研究进展

锌α 2-糖蛋白（ZAG）是一种广泛存在于人体内的可溶性糖蛋白,是Ι类主要组织相容性复合物（MHC-Ι）家族中的一员。ZAG被认为是不同类型癌可能的生物标志物,由于它的氨基酸序列与脂质动员因子（LMF）高度同源,因此它被认为是一个新的脂肪因子。它的表达受多种因素调控,在人体内能够发挥重要的功能。ZAG刺激脂肪细胞的脂质分解,并导致一些高分化癌症中脂肪的大量损失。本文主要从ZAG的基因结构、分布和功能等方面进行论述。     

NSCLC中低氧诱导因子-1α对血管生成素-2表达的影响

目的探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible fac-tor-1α,HIF-1α)对血管生成素-2(angiopoietin-2)表达的影响及意义。方法免疫组化SP法检测46例NSCLC组织HIF-1α、血管生成素-2蛋白的表达;培养人肺腺癌细胞株A549细胞,CoCl2模拟缺氧处理6h、12h、24h,以及缺氧条件下不同浓度genistein处理细胞12h后,采用Western Blot和RT-PCR方法分别检测A549细胞HIF-1α蛋白和血管生成素-2 mRNA的表达情况。结果46例NSCLC中HIF-1α、血管生成素-2的阳性表达率分别为73.9%(34/46)、63.0%(29/46),明显高于癌旁肺组织(P<0.05);HIF-1α的表达与血管生成素-2的表达呈正相关。急性缺氧可以诱导A549细胞HIF-1α蛋白和血管生成素-2 mRNA表达增加,分别在6h,12h达到高峰,随着缺氧时间延长,HIF-1α蛋白和血管生成素-2 mRNA表达相对减少;genistein抑制HIF-1α蛋白后,血管生成素-2 mRNA的表达也相应减少,呈浓度依赖。结论缺氧时NSCLC中HIF-1α可参与血管生成素-2的调控,HIF-1α、血管生成素-2表达增加与肿瘤新生血管形成有关,二者共同促进NSCLC的发生发展过程。     

慢性鼻病中乏氧诱导因子与5-脂加氧酶表达变化及其与疾病严重程度关系研究

摘要 目的：探究慢性鼻病中乏氧诱导因子（HIF-1α）与5-脂加氧酶（5-LOX）表达变化及其与疾病严重程度关系。方法：选取我院2019年7月-2020年11月期间收治的75例慢性鼻病患者作为研究对象;其中鼻息肉25例,变态反应性鼻炎25例,鼻窦炎25例;同期选择30例经鼻中隔偏曲矫正下鼻甲成形术患者的下鼻甲黏膜组织设为对照组。比较四组患者乏氧诱导因子与5-脂加氧酶蛋白及mRNA水平;并分析在不同鼻部疾病中,HIF-1α、5-LOX的相关性。结果：鼻息肉组、变态反应性鼻炎组、鼻窦炎组患者HIF-1α、5-LOX表达水平高于对照组（P<0.05）;鼻息肉组、变态反应性鼻炎组、鼻窦炎组患者HIF-1α、5-LOX表达水平比较无统计学意义（P>0.05）。鼻息肉组、变态反应性鼻炎组、鼻窦炎组患者HIF-1α、5-LOX mRNA表达水平高于对照组（P<0.05）;鼻息肉组、变态反应性鼻炎组、鼻窦炎组患者HIF-1α、5-LOX mRNA表达水平比较无统计学意义（P>0.05）。Parman相关分析,在不同鼻部疾病中,HIF-1α蛋白表达与5-LOX蛋白表达呈正相关（P<0.05）。结论：在慢性鼻病（鼻息肉、变态反应性鼻炎、鼻窦炎）中,HIF-1α、5-LOX表达水平显著升高,且在慢性疾病发展中可能相互促进、互相影响。     

血清α-syn、Aβ1-42、SSA在帕金森病患者中的表达及与认知功能损害的关系

摘要 目的：探讨血清α-突触核蛋白（α-synuclein,α-syn）、β淀粉样蛋白1-42（β-amyloid 1-42,Aβ_1-42）、淀粉样蛋白A（serum amyloid A,SSA）在帕金森病患者中的表达及与认知功能损害的关系。方法：收集本院2018年7月~2020年11月收治的136例帕金森病患者为病例组,依据Hoehn-Yahr（H-Y）分级分为早期组（n=76）与中晚期组（n=60）;依据蒙特利尔认知评估量表（Montreal Cognitive Assessment Scale,MoCA）分为认知功能正常组（n=94）与认知功能损害组（n=42）。另选同期本院体检正常者105例纳入对照组。对比各组血清α-syn、SSA、Aβ_1-42水平及MoCA,并用Pearson相关系数分析病例组患者血清α-syn、SSA、Aβ_1-42水平与MoCA的相关性,用受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve,ROC）分析血清α-syn、SSA、Aβ_1-42水平对帕金森病和认知功能损害的诊断价值。结果：病例组血清α-syn、SSA水平高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;病例组Aβ_1-42、MoCA评分低于对照组（P<0.05）。病例组晚期患者血清α-syn、SSA水平高于早期患者（P<0.05）;病例组晚期患者Aβ_1-42、MoCA评分低于早期患者,差异有统计学意义（P<0.05）。病例组有认知功能损害患者血清α-syn、SSA水平高于认知功能正常患者（P<0.05）;病例组有认知功能损害患者Aβ_1-42、MoCA评分低于认知功能正常患者（P<0.05）。病例组患者血清α-syn、SSA与MoCA均呈正相关（P<0.05）,Aβ1-42与MoCA呈正相关（P<0.05）。血清α-syn、SSA、Aβ_1-42水平对帕金森病诊断的曲线下面积分别为0.858、0.821、0.785;血清α-syn、SSA、Aβ_1-42水平对帕金森病认知功能损害预测的曲线下面积分别为0.877、0.825、0.783。结论：帕金森病患者血清α-syn、SSA、Aβ_1-42水平较健康者变化明显,且可能和帕金森病的诊断、病情进展和认知功能损害有一定关系。     

α-银环蛇毒素基因的克隆与表达

与传统的捕蛇或养蛇提毒的方法相比,利用基因工程方法生产蛇神经毒素具有明显的潜在优势。本研究结合国内外的研究现状,以α-银环蛇毒素(α-bungarotoxin,α-BgTx)为例子来探讨蛇神经毒素基因在大肠杆菌表达体系中的表达情况及其规模生产的可行性。首先根据文献报道α-银环蛇毒素的氨基酸序列,推导出其DNA序列并设计成部分互补的4条寡核苷酸片段,利用DNA合成仪人工合成、纯化其寡核苷酸片段,通过片段退火、切口补平、连接、克隆、测序鉴定获得了α-银环蛇毒素基因;然后将α-银环蛇毒素基因克隆至pGEX-2T质粒中分别转化大肠杆菌DH5(和JM109进行表达分析,融合蛋白约占细菌总蛋白的30％～40％,其中部分为可溶性表达,部分以包含体的形式表达;对可溶性表达的条件进行了优化。最后以天然纯化的α-银环蛇毒素作为对照,分析融合方式表达的重组α-银环蛇毒素的活性,ELISA结果显示其与天然的α-银环蛇毒素比较具有相似的抗原性。     

血清外泌体lncRNA PCGEM1、miR-129-5p与非小细胞肺癌患者临床病理特征及预后的关系

摘要 目的：研究血清外泌体长链非编码核糖核酸（lncRNA）前列腺癌基因表达标记1（PCGEM1）、微小核糖核酸（miR）-129-5p与非小细胞肺癌（NSCLC）患者临床病理特征及预后的关系。方法：选取2016年2月-2018年1月南京脑科医院收治的125例NSCLC患者作为NSCLC组,同期选取体检的70例健康人群作为健康组。采集两组静脉血,提取血清外泌体;采用实时定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测血清外泌体lncRNA PCGEM1、miR-129-5p表达情况;采用Pearson相关性分析lncRNA PCGEM1与miR-129-5p的关系。并分析血清外泌体lncRNA PCGEM1、miR-129-5p与NSCLC患者临床病理特征的关系。对NSCLC患者行5年随访,绘制Kaplan-Meier曲线分析预后情况,多因素Cox比例风险回归模型分析预后不良危险因素,受试者工作特征（ROC）曲线分析lncRNA PCGEM1、miR-129-5p对NSCLC预后的预测价值。结果：：NSCLC组lncRNA PCGEM1相对表达量高于健康组,miR-129-5p相对表达量低于健康组（P＜0.05）。血清外泌体lncRNA PCGEM1相对表达量与miR-129-5p表达呈负相关（r= -0.420,P＜0.05）。血清外泌体lncRNA PCGEM1、miR-129-5p表达与患者TNM分期、分化程度、淋巴结转移有关（P＜0.05）。Kplan-Meier生存曲线显示,lncRNA PCGEM1低表达组5年生存率69.05%高于lncRNA PCGEM1高表达组35.53%,miR-129-5p高表达组5年生存率68.09%高于miR-129-5p低表达组33.80%。多因素Cox比例风险回归显示,TNM分期III期、有淋巴结转移、lncRNA PCGEM1高表达、miR-129-5p低表达为NSCLC患者预后不良的独立危险因素（P＜0.05）。ROC曲线显示,lncRNA PCGEM1、miR-129-5p联合检测对NSCLC预后的预测曲线下面积（AUC）为0.865,预测价值高于两者单独预测。结论：NSCLC患者血清外泌体lncRNA PCGEM1表达上调、miR-129-5p表达下调,二者表达与NSCLC患者TNM分期、分化程度、淋巴结转移有关,且与患者预后密切相关,对NSCLC预后不良具有较好预测价值。     

基因组步移技术克隆思茅松α-蒎烯合成酶基因及表达分析

蒎烯合成酶(α-pinene synthase, APS)是α-蒎烯生物合成的关键酶。本研究利用同源克隆及基因组步移法从思茅松中克隆得到一个α-蒎烯合成酶基因,命名为PkAPS (GenBank登录号为KX394684),基因全长3 523 bp,含有10个内含子,其c DNA全长1 956 bp,编码651个氨基酸残基。生物信息学分析显示PkAPS属于萜烯合成酶家族蛋白;系统进化树分析显示PkAPS与马尾松α-蒎烯合成酶亲缘关系最近。基因表达分析显示:PkAPS在高产脂思茅松个体各组织的表达量均高于低产产脂思茅松个体;而在高产脂思茅松不同组织中的表达比较中,PkAPS在小枝中的表达量最高。本研究将有利于进一步研究思茅松α-蒎烯合成酶调控机理及培育高产α-蒎烯思茅松新品种的研究。     

帕金森病患者血清胱抑素C、β-淀粉样蛋白1-42检测的临床意义

目的:探讨帕金森病(PD)患者血清胱抑素C(Cys C)、β-淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)检测的临床意义。方法:选取2018年1月～2019年12月期间本院收治的帕金森病患者97例为研究对象纳入观察组,根据Hoehn-Yahr(HY)病情分期将观察组患者分为早期组(32例)、中期组(37例)、晚期组(28例),另选同期在我院进行体检的健康受试者50例为对照组。对各组受试者的血清Cys C、Aβ1-42、炎性因子、氧化应激指标等进行检测对比,并采用Pearson检验对PD患者的Cys C、Aβ1-42与炎性指标、氧化应激指标的相关性进行分析。结果:观察组血清Cys C、白介素-1β(IL-1β)、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、丙二醛(MDA)水平均高于对照组,Aβ1-42、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平均低于对照组(P0.05)。在观察组内随着PD病情的加重,血清Cys C、IL-1β、CRP、TNF-α、MDA水平均逐渐升高,Aβ1-42、SOD、GSH-Px水平均逐渐降低,各组间对比差异有统计学意义(P0.05)。经Pearson检验分析,PD患者的Cys C与IL-1β、CRP、TNF-α、MDA呈正相关,与SOD、GSH-Px呈负相关,Aβ1-42与IL-1β、CRP、TNF-α、MDA呈负相关,与SOD、GSH-Px呈正相关(P0.05)。结论:PD患者血清中Cys C呈现高表达,Aβ1-42呈现低表达,其表达随着患者的病情加重而变化,并且与患者的炎症反应、氧化应激水平有密切的相关性。     

猪α-干扰素的原核表达及活性测定

目的：表达并纯化出具有生物学活性的重组猪α-干扰素。方法：根据前期合成的猪α-干扰素基因序列设计引物,用PCR方法扩增出猪α-干扰素基因,并将其定向克隆入原核表达载体pET28中,酶切及测序鉴定正确后,转化大肠杆菌BL21进行诱导表达,对表达产物通过镍琼脂糖凝胶柱亲和层析纯化、透析法复性后,采用微量细胞病变抑制法测定重组猪α-干扰素的活性。结果：测序结果表明构建了猪α-干扰素原核表达载体pET28-poIFN-α;诱导表达后经SDS-PAGE分析,在相对分子质量约21×10^3的位置出现明显的诱导蛋白条带,与目的蛋白大小相近;经分析表达产物主要以包涵体形式存在,约占菌体总蛋白的36%,纯化后的目的蛋白纯度约为90%;采用微量细胞病变抑制法测定其活性约为1.67×10^6U/mg。结论：获得了纯度较高并具有较高活性的重组猪α-干扰素,为下一步研究猪α-干扰素药物价值及其生物制剂的生产、应用奠定了基础。     

α-溶血素的表达及其纳米孔的制备

α-溶血素(α-hemolysin,αHL)是金黄色葡萄球菌分泌的一种水溶性穿孔毒素,在双脂膜上可组装成结构稳定的七聚体蛋白纳米孔,是理想的单分子检测器件。以大肠杆菌BL21(DE3)p Lys S作为表达宿主菌株诱导表达野生型和单位点突变型α-溶血素,超滤膜分子截留法纯化蛋白质,使用兔血红细胞膜将αHL单体组装成七聚体蛋白纳米孔,并在人工脂双层膜上构建适于单分子分析的分子器件。通过溶血实验和单通道电流记录,证实αHL溶血活性良好,组装的αHL七聚体纳米孔在双脂膜上打孔能力和离子通透性良好,结构稳定,可作为理想的单分子检测器件。此方法为大量制备αHL单体及其在单分子分析和应用研究方面奠定了基础。     

双歧三联活菌胶囊对溃疡性结肠炎患者血清白介素-1β、10和肿瘤坏死因子-α水平的影响及疗效观察

目的探讨双歧三联活菌胶囊对溃疡性结肠炎(UC)患者血清白介素(IL)-1β、10和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平的影响及疗效观察。方法选取UC患者76例随机分为观察组和对照组。两组患者均予以常规治疗(根据病情轻重选用抗生素、5-氨基水杨酸、糖皮质激素等治疗)。观察组患者在此基础上加用口服双歧三联活菌胶囊420mg/次,3次/d,连用8周。观察两组患者治疗前后血清IL-1β、10和TNF-α水平变化,并比较其临床疗效。结果治疗8周后,两组患者血清IL-1β和TNF-α水平明显下降,IL-10水平明显上升(P<0.05或P<0.01),且观察组下降值或上升值较对照组更明显(P<0.05);同时观察组患者临床总有效率明显高于对照组(94.74%vs 78.95%)(χ2=4.15,P<0.05)。结论双歧三联活菌胶囊治疗UC具有良好的临床效果,作用机制与其能降低血清IL-1β和TNF-α水平,提高血清IL-10水平,通过纠正促炎症因子与抗炎症因子的比例失衡,减轻肠道黏膜局部炎症反应密切相关。     

血清微小RNA-141-3p、微小RNA-150-5p与鼻咽癌患者临床病理特征和放疗敏感性的关系研究

摘要 目的：探讨血清微小核糖核酸（miRNA）-141-3p、miR-150-5p与鼻咽癌（NPC）患者临床病理特征和放疗敏感性的关系。方法：收集2019年1月～2022年7月在我院接受放疗的92例NPC患者为NPC组,根据放疗疗效分为抵抗组和敏感组,另选取同期80名在我院体检的健康志愿者为对照组。比较对照组、NPC组血清miR-141-3p、miR-150-5p表达。分析NPC患者血清miR-141-3p、miR-150-5p表达与临床病理特征的关系。利用单因素和多因素Logistic回归分析NPC患者放疗抵抗的影响因素。结果：与对照组比较,NPC组血清miR-141-3p表达升高,miR-150-5p表达降低（P＜0.05）。NPC患者血清miR-141-3p、miR-150-5p表达在不同分化程度、TNM分期和淋巴结转移中比较有差异（P＜0.05）。92例NPC患者放疗抵抗发生率为22.83%（21/92）。单因素分析显示,抵抗组TNM分期Ⅲ～Ⅳa期和miR-141-3p ≥ 2.60比例高于敏感组,miR-150-5p ≥ 0.80比例低于敏感组（P＜0.05）。多因素Logistic回归分析显示,miR-141-3p ≥ 2.60为NPC患者放疗抵抗的独立危险因素,miR-150-5p ≥ 0.80为独立保护因素（P＜0.05）。结论：NPC患者血清miR-141-3p高表达,miR-150-5p低表达,与分化程度、TNM分期、淋巴结转移和放疗敏感性有关,有望成为NPC患者放疗抵抗的评价指标。     

3-甾酮-9α-羟基化酶基因在分枝杆菌中的异源表达与9α-羟基雄烯二酮的制备

9α-羟基雄烯二酮(9-OH-AD)是制备甾体类药物的重要中间产物。3-甾酮-9α-羟基化酶(KSH)能够转化雄烯二酮(AD)产生9α-羟基雄烯二酮(9-OH-AD),该酶由Ksh A和Ksh B两个亚基构成。为获得高效积累9-OH-AD的重组菌株,本研究选择耻垢分枝杆菌Mycobacterium smegmatis mc2155和戈登氏菌Gordonia neofelifaecis NRRL B-59395,对其在胆固醇为唯一碳源条件下表达明显上调的ksh A和ksh B候选基因进行克隆,插入到分枝杆菌表达载体p NIT中,构建共表达质粒,并将它们导入分枝杆菌Mycobacterium sp.NRRL B-3805中,获得重组菌株。利用重组菌株分别对植物甾醇、胆固醇和谷甾醇进行生物转化,分离纯化转化产物,采用光谱学方法鉴定其化学结构,确定该转化产物为9α-羟基雄烯二酮,说明分枝杆菌Mycobacterium sp.NRRL B-3805由积累雄烯二酮变为积累9α-羟基雄烯二酮(9-OH-AD),进而证明导入的候选基因ksh A和ksh B确实为有功能的基因。生物转化实验表明,与胆固醇、谷甾醇相比,植物甾醇作为底物更易于转化;而用来源于耻垢分枝杆菌的ksh A、ksh B构建的重组菌转化率更高,可达90%,具有较高的应用价值。本研究通过对KSH编码基因的异源表达,成功地进行了分枝杆菌生物转化特性的改造,为探索各种甾体药物中间体的工业生产奠定了基础。     

人干扰素α-2b生产工艺的研究

人干扰素α-2b的简易、高效生产工艺研究,包括高效率、小型化的发酵技术．不用单克隆抗体亲和层析的纯化工序．以及大肠杆菌表达的人干扰索α-2b包涵体蛋白的天然构型复性等问题．从10L基因工程大肠杆菌发酵液所得l000g菌体中得人干扰素α-2b约500mg,效价为l×10³u／mg,设备投资少,生产成本低,产品表现了高纯度、高效价。适宜大量生产,为广大人民群众提供廉价高质量药品创造了条件。     

甲亢患者β2-微球蛋白与血脂水平相关性研究

目的:探讨甲亢患者β2-微球蛋白含量与血脂水平的相关性。方法:以甲状腺功能亢进症患者40例作为观察组,另选择同期在我院进行体检的健康人群40例为对照组,分别于治疗前和治疗后检测患者血清和尿β2-微球蛋白、血外周血载脂蛋白、血脂,并进行血清和尿β2-微球蛋白与血脂的相关性分析。结果:治疗前甲亢组血清和尿β2-微球蛋白均高于对照组(P<0.01);TC、TG、HDL-C、LDL-C和APOB均低于对照组(P<0.01);治疗后,血清和尿β2-微球蛋白与治疗前相比均有所下降(P<0.01),TC、TG、HDL-C、LDL-C和APOB与脂类前相比均有所升高(P<0.01);血清和尿β2-微球蛋白与TC、TG、HDL-C、LDL-C和APOB均呈负相关。结论:甲亢患者血清和尿β2-微球蛋白与血脂关系密切,可作为评价患者脂质代谢状态和病情变化的重要指标。