核基质与瘤基因,抑瘤基因

核基质与瘤基因、抑瘤基因钟叔平（汕头大学医学院生物化学教研室,汕头５１５０３１）核基质是真核细胞经高盐和ＤＮａｓｅⅠ处理后的一种残留的核网络结构,基因组中ＤＮＡ与核基质结合区为ＭＡＲ（ｍａｔｒｉｘａｔａｃｈｒｅｇｉｏｎ）．核基质的功能十分复杂,它与Ｄ...     

原癌基因抑或原瘤基因

原癌基因抑或原瘤基因姚开泰（湖南医科大学病理生理学教研室）Ｐｒｏｔｏ－ｏｎｃｏｇｅｎ应译为原瘤基因,而不是原癌基因。其理由是：Ｏｎｃｏ是肿瘤,而不是专指癌,癌是恶性肿瘤之一种。例如,在以往的译名中,ｔｕｍｏｒ－ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅｆａｃｔｏｒ译为抑...     

人乳头瘤病毒E5基因

本对人乳头瘤病毒早期基因之一Ｅ５基因的致癌性的分子机理进行了综述,对Ｅ５蛋白与生长因子受体的相互作用,一些癌基因的反式激活作用及细胞缝隙在连接的损伤作用进行了讨论。     

抑瘤基因与细胞周期调节的研究进展

抑瘤基因与细胞周期调节的研究进展廖伟,曹亚（湖南医科大学肿瘤研究所,长沙４１００７８）关键词抑瘤基因,细胞周期调节肿瘤的发生是一个环境与遗传相互作用、多基因参与的多步骤过程。抑瘤基因的改变在肿瘤发生、发展过程中起着重要的作用。人类的十几种肿瘤都存在抑...     

肿瘤抑制基因研究新进展：多种瘤抑制基因MTS分子生…

人类第９号染色体短臂不到４０ｋｂ的座位发现了多种瘤抑制基因。它们分别编码两种蛋白：前叫做Ｐ１６蛋白,抑制依赖细胞周期素激酶。后比Ｐ１６小２０多个残基,功能推测与Ｐ１６相近。ＭＴＳ１基因与Ｐ５３相比,它在７５％的各种癌细胞中发生缺失;而Ｐ５３基因的缺失率在各种癌细胞中为５０％。Ｐ１６蛋白是到目前为止发现的第一个直接控制细胞增殖周期的细胞固有蛋白,而Ｐ５３控制细胞增殖周期要通过Ｐ２１间接发挥抑制作     

125I-UdR提高内皮抑素基因的抑瘤作用

目的：探讨125I-UdR提高内皮抑素基因对大鼠种植癌模型的抑制效应。方法：制作肿瘤株Walker-256细胞大鼠皮下种植癌的动物模型并分为1-4组（对照组、125I-UdR组、Endostatin组和Endostatin＋125I-UdR组）,每组20只,通过实体瘤内注射,分别给与相同体积生理盐水125I-UdR、内皮抑素基因及125I-UdR和内皮抑素基因混合物,测量肿瘤治疗前体积（V0）和治疗后不同时间体积（Vt）,计算10d、20d的肿瘤生长率（f=Vt／V0）,观察各组肿瘤在光镜下的变化。结果：各组大鼠10d、20d肿瘤生长率为：（11．03±1．08、27．35±1．08）,（4．02±0．79、7．58±2．98）,（3．88±0．26、7．02±2．75）,（2．72±1．01、2．94±1．26）,2、3、4组的肿瘤生长率明显小于l组（P〈0．001）;2、3组之间肿瘤生长率差别不明显（P〉0．05）,4组肿瘤生长率小于2、3组（P〈0．01）.结论：通过实体瘤内注射的方法给与125I-UdR、内皮抑素基因及两者混合物后,能够明显抑制肿瘤的生长,内皮抑素基因和125I-UdR联合治疗在抑制肿瘤生长方面作用更加显著。     

125I-UdR提高内皮抑素基因的抑瘤作用

目的:探讨125I-UdR提高内皮抑素基因对大鼠种植癌模型的抑制效应。方法:制作肿瘤株Walker-256细胞大鼠皮下种植癌的动物模型并分为1-4组(对照组、125I-UdR组、Endostatin组和Endostatin+125I-UdR组),每组20只,通过实体瘤内注射,分别给与相同体积生理盐水125I-UdR、内皮抑素基因及125I-UdR和内皮抑素基因混合物,测量肿瘤治疗前体积(V0)和治疗后不同时间体积(Vt),计算10d、20d的肿瘤生长率(f=Vt/V0),观察各组肿瘤在光镜下的变化。结果:各组大鼠10d、20d肿瘤生长率为:(11.03±1.08、27.35±1.08),(4.02±0.79、7.58±2.98),(3.88±0.26、7.02±2.75),(2.72±1.01、2.94±1.26),2、3、4组的肿瘤生长率明显小于1组(P<0.001);2、3组之间肿瘤生长率差别不明显(P>0.05),4组肿瘤生长率小于2、3组(P<0.01)。结论:通过实体瘤内注射的方法给与125I-UdR、内皮抑素基因及两者混合物后,能够明显抑制肿瘤的生长,内皮抑素基因和125I-UdR联合治疗在抑制肿瘤生长方面作用更加显著。     

宫颈癌组织人乳头瘤病毒的荧光偏振基因分型

采用荧光偏振人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)分型新方法探讨了8种常见型别HPV在陕西宫颈癌患者中的流行情况。首先,用HPV GP5 ／GP6 通用引物PCR扩增65例早期宫颈癌(Ⅱa期内)和72例慢性宫颈炎病变组织DNA粗提物,继之将模板指导的末端延伸反应与荧光偏振检测技术结合(TDI-FP),用GP5 ／GP6 扩增区内的HPV6、11、16、18、31、33、35和58型特异性探针与PCR产物杂交后,荧光素标记的特异碱基(TAMRA-ddTTP或R110-ddGTP)在GP5 ／GP6 产物中相应的模板指导下,掺入延伸至相应探针末端,致使对应的TAMRA或R110 FP值升高,从而对扩增的HPV阳性产物进行HPV分型。65例宫颈癌患者中检出HPV57例,阳性率87．69％,72例慢性宫颈炎患者中检出HPV28例,阳性率38．89％,两组间HPV阳性率有显著性差异。宫颈癌与慢性宫颈炎患者中4种最常见的HPV型别分别是HPV 16(45．6％)、HPV 18(22．8％)、HPV 58(17．5％)、HPV 31(7．02％)和HPV 16(35．7％)、HPV 11(32．1％)、HPV 6(21．4％)、HPV 18(10．7％)。慢性宫颈炎患者中检出的HPV型别57．14％属高危型。HPV 16在两组中均最为多见。中国陕西宫颈疾病患者中HPV感染有其特点,世界范围内少见的HPV 58在陕西宫颈癌与慢性宫颈炎患者中均较为多见,在进行HPV新诊断方法及疫苗研制时应考虑到这种特点。     

水稻瘤矮病毒基因组S9片段的基因结构特征

应用RT-PCR技术克隆了水稻瘤矮病毒(RGDV)中国广东信宜分离物(RGDV-C)的基因组S9片段,测定了全序列并进行了生物信息学分析。结果表明,RGDV-C S9片段全长共有1202bp(登录号AY556483),含有一个长的开放阅读框,这一开放阅读框编码一个由323个氨基酸残基组成的多肽,推测分子量约35.6kDa,与泰国分离物(RGDV-T)的全序列相比,它们的核苷酸长度相等,核苷酸同源性为98.1%,氨基酸同源性为98.5%。RGDV S9片段编码的Pns9蛋白在植物呼肠孤病毒属内未发现同源蛋白,其功能尚待确定。利用NCBI的BLAST查找与比较,发现Pns9与伯氏疏螺旋体(Borrelia burgdorferi)ATP依赖的Clp蛋白水解酶组分[ATP-dependent Clp prote-ase proteolytic component(clpP-1)]有21.8%的氨基酸序列同源性。     

人乳头瘤病毒转化基因致癌的分子机制研究进展

人乳头瘤病毒１６型（ＨＰＶ１６）与宫颈癌及其他生殖道和肛周等恶性肿瘤有密切关系。本文综述了近年来ＨＰＶ１６转化基因在转录耕接、转录调控及致癌机制等方面的研究进展。     

基因改造的溶瘤痘病毒在肿瘤治疗中的研究进展

目前,肿瘤的标准治疗包括手术、放射疗法、化学疗法、温热疗法和生物/免疫疗法。溶瘤病毒治疗,即利用病毒的复制能力,选择性感染和破坏肿瘤细胞,同时保留正常细胞和组织,是肿瘤生物/免疫治疗的一个新疗法。基因治疗一直是肿瘤生物治疗的重要策略,利用基因工程策略在溶瘤病毒载体上插入抗癌基因,将病毒治疗与基因治疗有机结合,成为具有很强杀伤作用的基因–病毒治疗手段。近年来,以溶瘤痘病毒为载体的肿瘤基因治疗受到较多关注,通过基因工程策略对痘病毒进行改造是提高其抗肿瘤作用的重要策略。目前,用于基因工程改造的溶瘤痘病毒主要有Wyeth株、WR(Western Reverse)株、Lister株、Copenhagen株和天坛株。该文就目前对痘病毒进行基因工程改造的常见形式以及经基因工程改造的痘病毒用于治疗肿瘤的研究进展作一综述。     

抑瘤基因NGX6启动子的克隆与功能鉴定

NGX6是一个结直肠癌候选抑瘤基因,其转录调控机制不明．采用生物信息学技术预测其启动子区,并构建NGX6启动子荧光素酶报告基因重组体pGL3/Enhancer/1126．荧光素酶活性检测结果表明该区域具有强启动子活性．应用PromoterInspector program,FistEF,CpGplot和MatInspector Professional软件分析发现,NGX6基因转录调控区为一个不含TATA盒,而含有CAAT盒的GC富集区．凝胶迁移阻滞实验确定NGX6基因启动子区域具有Sp1特异性结合位点,Sp1特异性阻断剂光神霉素(mithramycin A)能明显抑制NGX6启动子的活性和NGX6基因的表达;封闭内源性Sp1能下调NGX6基因mRNA表达水平．     

c-kit和PDGFRA基因对胃肠间质瘤的影响

胃肠间质瘤(gastrointestinal stromal tumors,GIST)是较常见的人消化道间叶性肿瘤,多发于胃部.尽管有不同临床病理特征,但绝大多数GIST均存在c-kit或血小板衍生生长因子受体α(PDGFRA)基因突变. c-kit、PDGFRA的抑制剂—格列卫是目前主要应用于GIST治疗的分子靶向治疗药物,c-kit、PDGFRA的不同基因状态会对分子靶向治疗药物呈现不同的反应.c-kit基因外显子11发生突变的GIST对格列卫呈现良好的反应,而外显子 9突变对格列卫的反应略差.另外发现,c-kit、PDGFRA基因的二次突变会引起格列卫抗性.本文简要介绍c-kit、 PDGFRA基因与GIST的临床表现、分子靶向治疗之间的关系及其二次突变的特征.     

水稻瘤矮病毒基因组S9片段的基因结构特征

应用RT-PCR技术克隆了水稻瘤矮病毒(RGDV)中国广东信宜分离物(RGDV-C)的基因组S9片段,测定了全序列并进行了生物信息学分析.结果表明,RGDV-C S9片段全长共有1202bp(登录号AY556483),含有一个长的开放阅读框,这一开放阅读框编码一个由323个氨基酸残基组成的多肽,推测分子量约35.6kDa,与泰国分离物(RGDV-T)的全序列相比,它们的核苷酸长度相等,核苷酸同源性为98.1%,氨基酸同源性为98.5%.RGDV S9片段编码的Pns9蛋白在植物呼肠孤病毒属内未发现同源蛋白,其功能尚待确定.利用NCBI的BLAST查找与比较,发现Pns9与伯氏疏螺旋体(Borrelia burgdorferi)ATP依赖的Clp蛋白水解酶组分[ATP-dependent Clp protease proteolytic component(clpP-1)]有21.8%的氨基酸序列同源性.     

GM—CSF基因瘤苗抗肿瘤活性的实验研究

转细胞因子基因的肿瘤细胞疫苗是当今肿瘤免疫－基因治疗研究的热点。本文用逆转录病毒载体将人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子基因转入大鼠Ｗａｌｋｅｒ瘤细胞株ＷＲＣ２５６,经Ｘ－射线灭活制备肿瘤疫苗。经ＰＣＲ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ检测证实,ＧＭ－ＣＳＦ基因已成功地导入了ＷＲＣ２５６细胞。     

辽宁省地区人乳头瘤病毒33型基因多态性分析

研究人乳头瘤病毒（Human papillomavirus,HPV）33型E6和E7基因在辽宁省地区的基因多态性分布情况,增加对HPV33基因多态性地理分布情况的了解,为HPV33的诊断,靶向药和疫苗的研发提供理论依据。使用巢式PCR扩增方法对从已确诊HPV33阳性患者宫颈细胞提取的DNA样本进行E6和E7基因的扩增并测序,随后应用MegaX软件将所得测序结果与参考序列比对确定突变位点并进行系统发育树的构建。应用PAML4.9软件中的Codeml程序找出突变中的正向选择位点。分别应用ABC Pred server,ProPred-I server和ProPred server寻找理想的B细胞免疫表位,人类白细胞抗原（Human leukocyte antigen,HLA）I类结合表位和人类白细胞抗原（HLA）II类结合表位。共得到HPV33E6和E7序列各136个。与HPV33参考序列（M12732.1）进行比对后,E6基因中观测到17个单核苷酸突变,同义突变7个,非同义突变10个。E7基因中观测到9个单核苷酸突变,其中同义突变3个,非同义突变6个。系统发育分析显示HPV33E6和E7...     

脑组织特异性基因/脑胶质瘤抑瘤基因LRRC4的功能研究进展

LRRC4是一个脑组织相对特异性表达基因,是采用表达序列标签(EST)介导的定位-候选克隆策略结合5′-RACE技术从染色体7q31～32区域克隆出来的一个富亮氨酸重复(LRR)超家族的新成员.LRRC4是神经系统发育与轴突生长的功能基因.LRRC4的表达与胶质瘤的级别进展呈负相关,其表达缺失参与脑胶质瘤进展的晚期事件.LRRC4能够下调一系列神经生长因子或受体(如IGF,EGF,PDGF,CNTF,bFGF,GDNF和BDNF等)的表达,通过调控多种信号转导通路(K-Ras/c-Raf/ERK/MAPK,PI-3K/AKT/NF-κB,p70S6/PKC,STAT3以及JNK2/c-Jun/mp53等)将U251细胞阻滞在G1晚期,抑制脑胶质瘤细胞的增殖和侵袭,而且这种抑制作用依赖于它的LRR结构域.LRRC4不能诱导胶质瘤细胞的凋亡,而是诱导胶质瘤细胞向胶质样细胞分化.     

候选抑瘤基因 BRD7 及家族蛋白的功能研究进展

溴区结构(bromodomain)是近年来发现的广泛分布于多种生物中的一种高度保守的结构域,溴区结构蛋白通过参与信号依赖性的基因转录调控而广泛参与细胞内重要的生命活动.BRD7基因是1999年克隆的一个新的bromodomain基因,GenBank登录号为AF152604或AF152605.eMotif分析表明,BRD7蛋白包含多个磷酸化位点和一个保守bromodomain功能域,Blast显示BRD7蛋白与人的Celtix-1及鼠的bromodomain蛋白BP75具有高度的同源性.利用转基因技术已证实,在鼻咽癌细胞系HNE1中过表达BRD7基因可以抑制其细胞生长和细胞周期G1-S的进程,并部分逆转鼻咽癌细胞HNE1的恶性表型.为了全面地揭示BRD7基因的细胞内生物学功能,深入了解BRD7基因的细胞内整体信息流向,中南大学肿瘤研究所细胞遗传室已从上、中、下游三个不同层面对BRD7基因的功能研究展开了初步的探索.     

候选抑瘤基因 BRD7 及家族蛋白的功能研究进展

溴区结构（bromodomain）是近年来发现的广泛分布于多种生物中的一种高度保守的结构域,溴区结构蛋白通过参与信号依赖性的基因转录调控而广泛参与细胞内重要的生命活动．BRD7基因是1999年克隆的一个新的bromodomain基因,GenBank登录号为AF152604或AF152605．eMotif分析表明,BRD7蛋白包含多个磷酸化位点和一个保守bromodomain功能域,Blast显示BRD7蛋白与人的Celtix-1及鼠的bromodomain蛋白BP75具有高度的同源性．利用转基因技术已证实,在鼻咽癌细胞系HNEl中过表达BRD7基因可以抑制其细胞生长和细胞周期G1-S的进程,并部分逆转鼻咽痛细胞HNE1的恶性表型．为了全面地揭示BRD7基因的细胞内生物学功能,深入了解BRD7基因的细胞内整体信息流向,中南大学肿瘤研究所细胞遗传室已从上、中、下游三个不同层面对BRD7基因的功能研究展开了初步的探索．