高压氧在放射性核素治疗大鼠种植癌后乏氧研究

目的:研究大鼠种植癌在高压氧(HBO)干预及放射治疗前后99mTc-HL91乏氧显像的变化,并探讨其与病理学改变之间的关系,为HBO联合放射性药物对恶性肿瘤治疗效果提供实验支持。方法:建立肿瘤株walker-256细胞大鼠皮下种植癌的动物模型,60只荷瘤大鼠随机分为四组:对照组,高压氧(HBO)组、胶体磷[32P]酸铬和HBO+胶体磷[32P]酸铬组。尾静脉注射99mTc-HL91 37MBq(0.1 mL),4 h后利用SPECT显像,计算肿瘤组织与对侧相应部位放射性计数比值(T/NT),显像当日游标卡尺测量肿瘤最大长径(a)和最大垂直横径(b),计算肿瘤体积以及治疗后不同时间的肿瘤生长率(f)。最后一次显像结束后处死全部模型大鼠,取肿瘤组织制成病理切片,观察各组大鼠肿瘤细胞的凋亡情况。比较实验各组T/NT与肿瘤生长率(f)以及凋亡的关系。结果:肿瘤99mTc-HL91显像良好,肿瘤部位与对侧相应部位具有较高的放射性计数比。治疗后大鼠肿瘤的乏氧区域及肿瘤体积均减少,以HBO+胶体磷[32P]酸铬组为著,T/NT与f呈正相关;大鼠肿瘤的细胞凋亡数明显高于对照组,以HBO+胶体磷[32P]酸铬组增加明显,治疗后T/NT与大鼠肿瘤细胞的凋亡数呈负相关。结论:HBO在放射性核素治疗大鼠种植癌中起到协同作用,通过99mTc-HL91乏氧显像观察HBO干预后胶体磷[32P]酸铬治疗肿瘤效果,从而为二者联合在肿瘤治疗的应用提供依据。     

烟草毛状根多倍体诱导及其植株再生

为了提高烟草的烟碱含量,采用发根农杆菌遗传转化和人工染色体加倍技术,进行了烟草毛状根及其多倍体诱导、植株再生及其烟碱含量测定。结果表明,发根农杆菌ATCC15834感染烟草叶片外植体8 d后产生白色毛状根,15 d后所有叶片外植体产生毛状根。毛状根能在无外源激素的MS固体和液体培养基上自主生长。PCR扩增结果显示发根农杆菌Ri质粒的rol B和rol C基因以及冠瘿碱合成酶基因已在烟草毛状根基因组中整合并得到表达。烟草毛状根多倍体诱导的最适条件为0.1%的秋水仙素溶液处理36 h,其多倍体诱导率为64.71%。经秋水仙素加倍的烟草毛状根多倍体植株再生的最适宜培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L。与对照(二倍体非转化植株)相比,烟草二倍体毛状根再生植株的顶端优势减弱,腋芽增多,叶片变窄;而烟草毛状根多倍体再生植株茎更粗,节间变短,叶色更深,叶片的宽度和厚度均较对照明显增大。根尖细胞染色体压片观察证实,所获得的烟草毛状根多倍体再生植株为四倍体,其根尖细胞染色体数约为4n=96。盆栽实验表明,烟草二倍体毛状根植株和多倍体毛状根再生植株比对照植株延迟约21 d开花。GC-MS检测表明,烟草毛状根多倍体再生植株的烟碱含量比对照及二倍体毛状根再生植株显著提高,分别约为对照及二倍体毛状根再生植株的6.90倍和4.57倍。     

高压氧在放射性核素治疗大鼠种植癌后乏氧研究

目的：研究大鼠种植癌在高压氧（HBO）干预及放射治疗前后99mTc-HL91乏氧显像的变化,并探讨其与病理学改变之间的关系,为HBO联合放射性药物对恶性肿瘤治疗效果提供实验支持。方法：建立肿瘤株walker-256细胞大鼠皮下种植癌的动物模型,60只荷瘤大鼠随机分为四组：对照组,高压氧（HBO）组、胶体磷[^32P]酸铬和HBO＋胶体磷[^32P]酸铬组。尾静脉注射99mTc-HL9137MBq（0．1mL）,4h后利用SPECT显像,计算肿瘤组织与对侧相应部位放射性计数比值（T小T）,显像当日游标卡尺测量肿瘤最大长径（a）和最大垂直横径（b）,计算肿瘤体积以及治疗后不同时间的肿瘤生长率（f）。最后一次显像结束后处死全部模型大鼠,取肿瘤组织制成病理切片,观察各组大鼠肿瘤细胞的凋亡情况。比较实验各组T／NT与肿瘤生长率（f）以及凋亡的关系。结果：肿瘤99mTc-HL91显像良好,肿瘤部位与对侧相应部位具有较高的放射性计数比。治疗后大鼠肿瘤的乏氧区域及肿瘤体积均减少,以HBO＋胶体磷[^32P]酸铬组为著,T／NT与f呈正相关;大鼠肿瘤的细胞凋亡数明显高于对照组,以HBO＋胶体磷[^32P]酸铬组增加明显,治疗后T／NT与大鼠肿瘤细胞的凋亡数呈负相关。结论：HBO在放射性核素治疗大鼠种植癌中起到协同作用,通过99mTc—HL91乏氧显像观察HBO干预后胶体磷[^32P]酸铬治疗肿瘤效果,从而为二者联合在肿瘤治疗的应用提供依据。     

分支杆菌噬菌体D29 Lysin B的表达、纯化及酶学性质分析

克隆表达噬菌体D29 LysinB(LysB)并对其酶学性质进行研究。以噬菌体D29基因组为模板,用PCR方法扩增lysB基因,与表达载体pET22b连接,将重组质粒转化至Escherichiacoli BL21(DE3)中表达,镍柱亲和层析(Ni-NTA)纯化可溶性表达产物,并对重组蛋白的活性进行分析检测。结果表明:成功构建了pET22b-lysB表达载体,并从1L的LB培养物中获得了33.2mg高纯度重组蛋白(His-LysB);His-LysB具有分解脂肪的能力,属于脂肪酶;生物化学特性分析表明:丁酸对硝基苯(pNPB)为水解底物,His-LysB热稳定性不佳,30℃以下比较稳定,随着温度的升高,稳定性逐渐降低;该蛋白具有较高的pH值适应性,pH5.0~9.5范围内稳定性较高;在23℃和pH7.5时酶活力最高,其比酶活为1.3U/mg;金属离子Zn2+、Cu2+、Mg2+、Mn2+和苯甲基磺酰氟(PMSF)抑制剂对酶活具有强烈的抑制作用。本研究为开发新的治疗结核药物提供了一个新的选择。     

125I-UdR提高内皮抑素基因的抑瘤作用

目的：探讨125I-UdR提高内皮抑素基因对大鼠种植癌模型的抑制效应。方法：制作肿瘤株Walker-256细胞大鼠皮下种植癌的动物模型并分为1-4组（对照组、125I-UdR组、Endostatin组和Endostatin＋125I-UdR组）,每组20只,通过实体瘤内注射,分别给与相同体积生理盐水125I-UdR、内皮抑素基因及125I-UdR和内皮抑素基因混合物,测量肿瘤治疗前体积（V0）和治疗后不同时间体积（Vt）,计算10d、20d的肿瘤生长率（f=Vt／V0）,观察各组肿瘤在光镜下的变化。结果：各组大鼠10d、20d肿瘤生长率为：（11．03±1．08、27．35±1．08）,（4．02±0．79、7．58±2．98）,（3．88±0．26、7．02±2．75）,（2．72±1．01、2．94±1．26）,2、3、4组的肿瘤生长率明显小于l组（P〈0．001）;2、3组之间肿瘤生长率差别不明显（P〉0．05）,4组肿瘤生长率小于2、3组（P〈0．01）.结论：通过实体瘤内注射的方法给与125I-UdR、内皮抑素基因及两者混合物后,能够明显抑制肿瘤的生长,内皮抑素基因和125I-UdR联合治疗在抑制肿瘤生长方面作用更加显著。     

无创通气在AECOPD机械通气患者撤机中的研究

目的：通过前瞻性随机对照研究比较应用NIPPV与PSV两种撤机方法在治疗AECOPD合并II型呼吸衰竭进行机械通气撤机困难患者中的优越性。方法：达到撤机标准但经两小时自主呼吸试验（SBT）失败的患者被分为两组：PSV组和无创通气组。观测有创通气时间、机械通气总时间、再插管率、住呼吸重症监护室时间和VAP发生率等指标。结果：NIPPV组较PSV组气管插管时间显著缩短,VAP发生率、再插管率及住院费用均较PSV通气组显著降低。结论：采用无创通气撤机法治疗AECOPD合并II型呼吸衰竭较传统的机械通气方式在有效缩短有创通气时间,降低VAP发生率,改善患者预后方面更优越。     

125I-UdR提高内皮抑素基因的抑瘤作用

目的:探讨125I-UdR提高内皮抑素基因对大鼠种植癌模型的抑制效应。方法:制作肿瘤株Walker-256细胞大鼠皮下种植癌的动物模型并分为1-4组(对照组、125I-UdR组、Endostatin组和Endostatin+125I-UdR组),每组20只,通过实体瘤内注射,分别给与相同体积生理盐水125I-UdR、内皮抑素基因及125I-UdR和内皮抑素基因混合物,测量肿瘤治疗前体积(V0)和治疗后不同时间体积(Vt),计算10d、20d的肿瘤生长率(f=Vt/V0),观察各组肿瘤在光镜下的变化。结果:各组大鼠10d、20d肿瘤生长率为:(11.03±1.08、27.35±1.08),(4.02±0.79、7.58±2.98),(3.88±0.26、7.02±2.75),(2.72±1.01、2.94±1.26),2、3、4组的肿瘤生长率明显小于1组(P<0.001);2、3组之间肿瘤生长率差别不明显(P>0.05),4组肿瘤生长率小于2、3组(P<0.01)。结论:通过实体瘤内注射的方法给与125I-UdR、内皮抑素基因及两者混合物后,能够明显抑制肿瘤的生长,内皮抑素基因和125I-UdR联合治疗在抑制肿瘤生长方面作用更加显著。     

北美驼绒藜主要性状遗传变异特性的初步研究

对北美驼绒藜的4个世代12个主要性状遗传变异特性初步分析结果表明:在世代内12个主要性状变异都不显著,在世代间除枝条节数和着生雄花节数外,其它10个性状变异程度都达到了显著或极显著水平,表明北美驼绒藜各性状主要变异来自世代间;10个性状表型变异系数和遗传变异系数总体趋势基本一致,但程度上存在差异,说明这些性状遗传变异潜力较大;株高、叶腋雌花数、叶宽、再生小枝数性状遗传力较高(72-62),其变异主要是遗传因素决定,而叶长、株幅性状遗传力较低(16-14),其变异主要是环境因素决定。     

利用正交设计建立与优化北美驼绒藜ISSR-PCR反应体系

利用正交试验设计的方法,对北美驼绒藜ISSR-PCR反应的5因素(Taq酶、dNTP、引物、Mg²⁺和模板DNA)4水平进行试验,试验结果运用MINITAB软件进行分析,建立了适合北美驼绒藜的既稳定又谱带多的ISSR-PCR最佳反应体系,即20 μL的反应体系中含有1×buffer,1.5 U Taq酶,0.2 mmol·L^-1 dNTP,0.5 μmol·L^-1引物,2.5 mmol·L^-1 Mg²⁺和10 ng模板DNA。这一优化的ISSR-PCR反应体系的建立,为今后利用ISSR技术进行驼绒藜属植物种质资源分类、遗传图谱构建和遗传变异奠定了技术基础。     

基于牧户尺度的草原火灾风险评价——以东乌旗汗敖包嘎查为例

草原火灾给牧区人民生命财产及牧区生境带来了严重的威胁。以牧区村落汗敖包嘎查为例，从牧户微观尺度出发，基于实地调查获取的牧民社会经济数据，并结合气象和遥感数据，运用自然灾害风险指数法、主成分分析法和加权综合法构建了汗敖包嘎查草原火灾风险评价指标体系，获取了汗敖包嘎查草原火灾风险分布图。结果表明：汗敖包嘎查草原火灾风险从中部地区向四周递减，西北部地区风险高于东部、南部地区，中、高风险区占研究区总面积的49.85%。研究结果从微观尺度为草原火灾风险评价提供了新的视角和参考。