氨基酸显色剂茚三酮试剂的研究（三）──自制显色剂与进口显色剂效果比较实验

目前国内引进的大多数氨基酸分析仪,所用的显色剂不但进口周期长,价格昂贵,而且长时间保存后易造成分离效果差和灵敏度下降等问题;因此,我们于一九八０年的开始对自制显色剂进行了存放时间、不同浓度等诸多因素对氨基酸含量影响进行了系统研究,取得了令人满意的结果￣［１,２］,在此基础上,我们还对自制显色剂与进口显色剂的效果进行了比较分析,分别观察了２４ｈ及１—４周内自制显色剂与进口显色剂对３８种标准氨基酸的影响,实验结果表明,自制显色剂的灵敏度显著高于进口显色剂,Ｐ＜０．０１。氨基酸总量的检测灵敏度,（２４ｈ）高于进口２０％,（第一周）提高了２７．４５％（第二周）提高了２１．３９％,（第三周）提高２１．３９％,（第四周）提高２８．１８％。     

氨基酸显色剂茚三酮试剂的实验研究（一）茚三酮显色剂在不同存放时间内对氨基酸含量的影响

本项目采用新的技术,对茚三酮显色试剂进行了研究,利用国内新引进的６３００黄金系列氨基酸分析仪对不同存放时间内的节三酮显色剂对氨基酸含量的影响进行了实验研究。观察了第１天,第７天,第１４天,第２１天,第２８天内进口茚三酮显色剂与自制茚三酮显色剂对氨基酸含量的影响。并对３８种氨基酸与自制茚三酮试剂和进口茚三酮试剂反应后的实验结果进行了观察。实验结果表明,第１天至第２８天内,自制茚三酮试剂的稳定性、灵敏度,重度性,分辨率等项指标均优于进口的茚三酮试剂,统计结果,说明用自制的茚三酮试剂取代进口的茚三酮试剂是可靠和可行的。     

氨基酸显色剂茚三酮试剂的研究（二）──不同浓度显色剂对氨基酸含量的影响

氨基酸显色剂是氨基酸分析的重要试剂之一。主要成份是茚三酮、二甲亚砜、还原剂、氢氧化锂等有机试剂合成的氨基酸显色剂（以下称显色剂）。目前这种显色剂依赖从国外进口,由于受价格、进口周期及有效期限等诸多因素的影响,使之远远不能满足国内用户的需要,为适应国内用户的需要,进一步论证自制显色剂的可行性和可靠性,确定显色剂的最佳配方,本项目对自制显色剂的存放时间［１］、不同浓度显色剂、以及显色剂光学试验等项指标进行了全面系统地分析比较,本研究观察了１００ｍｌ溶液中显色剂含量分别为５ｍｇ、１０ｍｇ、１５ｍｇ、２０ｍｇ、２５ｍｇ等不同浓度的自制和进口显色剂对氨基酸含量的影响,结果表明,当显色剂的浓度为１５ｍｇ／１００ｍｌ时,氨基酸可出现最大峰值、测定所得氨基酸浓度显著高于２０、２５ｍｇ／１００ｍｌ和５、１０ｍｇ／１００ｍｌ所得的结果。提示氨基酸显色剂不但与存放时间有关,而且与其浓度关系密切的有关理论：     

氨基酸显色剂茚三酮试剂的研究（二）：不同浓度显色剂对氨基…

氨基酸显色剂是氨基酸分析的的重要试剂之一,主要成份是茚三酮、二甲亚砜、还原剂、氢氧化锂等有机试剂氨基酸显色剂（以下称显色剂）。目前这种显色剂依赖从国外进口,由于受价格、进口周期及有效期限等诸多因素的影响,使之远远不能满足国内用户的需要,为适应国内用户的需要,进一步认自制显色剂的可行性和可靠性,确定显色剂的最佳配方,本项目对自制显色剂的存放时间、不同浓度显色剂、以及显色剂光学试验等项指标进行了全面系     

贝克曼6300型氨基酸仪蛋白质水解氨基酸分析用试剂的研究

<正> 近十年来,我国进口了多种类型的氨基酸分析仪。与其它厂家的比较,贝克曼6300型氨基酸分析仪在分析灵敏度、分析速度、准确度等方面具有一定优点。但用户也感到有困难之处,那就是试剂需要从美国进口,不但价格较贵,外汇困难,而且千里迢迢,运来的试剂有变质品。为了满足本单位和国内其他用户的需要,我们开展了试剂国产化的研制。经过两年的努力,已取得较好的结果。经最近鉴定,蛋白质水解氨基酸分析所需试剂的主要性能指标已达到进口试剂水平。     

尿微量白蛋白ELISA测定法最适条件的探讨

用自制兔抗人白蛋白抗体;酶标抗原和进口NUNC板, 进行了两种显色剂邻苯二胺(OPD)及四甲基联苯胺(TMB)测定尿微量白蛋白的比较,底物(H₂O₂)浓度对测定的影响,碳酸钠和戊二醛两种包被方法的比较,以及抗体和抗原浓度的选择等影响因素进行了实验探讨,并确定了本实验的最佳分析条件.     

糖的纸层析显色剂的比较

由于在纸层析时一些糖的Rf值相当接近,因而仅靠Rf值难以达到鉴定目的。为此,我们选用14种不同的糖显色剂,比较了各种糖的颜色反应,利用某些糖的特殊颜色反应,可以对Rf值相近的糖作进一步的鉴别。     

HIV-1假病毒包装的重要影响因素分析

[目的]分析影响HIV-1假病毒包装的主要因素,建立该假病毒包装的优化条件.[方法]用单因素分析对比的方法,比较了对病毒包装效果有重要影响的转染试剂、转染试剂与质粒的数量、培养基血清类型、细胞周期阶段对于病毒包装效果的影响.[结果]对45批150盘病毒包装结果分析显示,使用PEI转染试剂成本低,转染效果好,其N/P在8-40均可以产生高活性的包装病毒;用进口血清包装时,相对于国产血清结果重复性高;细胞周期处于S及G2/M期时转染质粒相对于S以及G0/G1期有较高的病毒活性.[结论]用PEI为转染试剂可以包装出高活性的病毒,包装获取高活性病毒可以通过质粒与PEI梯度比例以及血清类型构成多个组合策略来实现.     

LC-8A氨基酸分析仪检修

<正> LC—8A氨基酸分析仪是日本柳本株式会社80年代初的产品,可以满足一般氨基酸分析的要求。它采用三元缓冲液为流动相,以磺酸离子交换树脂为分离柱(φ4×125mm)的固定相,茚三酮显色剂与氨基酸柱后衍生化,570和440nm二波长检测,SYSTEM—1100微机程序控制和信号处理。LC—8A氨基酸分析仪与其它氨基酸仪在结构上有相似之处,输液泵和检测器等基本一致。许多部件在国内买不到,维修有一定难度。在实践中,我根据现有条件,对其曾出现的故障进行了检修。实践证明效果很好。     

茚三酮直接加入展开剂显色的探索

在纸层析和薄层层析中,经典显色法是用显色剂对晾干后的层析谱进行喷显。1984年,朱婉华用微晶纤维素薄层层析法分析氨基酸,将茚三酮直接加进展开剂内,在展开过程中显色,获得成功。最近,我们用纸层析     

用Beckman6300氨基酸分析仪测定近基酸注射液的研究

氨基酸分析在近几十年得到广泛应用,一般均采用进口的氨基酸混合标液进行,仅用一种方法来测定各种各样食品,饲料,药物中的氨基酸或进行课题研究,显然是不能满足需要的。本实验采用的模拟样品的方法自配标样,对２００多个批号六种配方的产品作了测定,与传统方法比较。本方法结果精确可靠,且节省时间。     

生物碱成分常用显色剂及一种检测内酰胺的特效方法

薄层层析 (TLC)中 ,碘化铋钾和改良碘化钾试剂常作为生物碱成分 (天然和合成化合物 )的显色剂。本文对它们进行综述、分析 ,以期对生物碱成分的薄层层析提供参考。同时提供一种检测γ 内酰胺的特效方法。     

氨基酸为显色剂比色法测定京尼平的含量

建立了一种京尼平含量的快速测定方法。研究了京尼平与氨基酸的显色反应条件,京尼平(0.0768mg·mL1)与氨基酸溶液(0.2mg·mL1)体积比为1:1,100℃下显色反应10min,检测波长590nm。该方法检测线性范围为0.76～30.73·g·mL1,线性回归方程为Y=0.2409X 0.0036,相关系数为0.9998,最低检测限为0.38μg·mL1,精密度为1.6%。本方法操作简便、快速,且结果准确可靠。     

用 Beckman 6300 氨基酸分析仪测定氨基酸注射液的研究

氨基酸分析在近几十年得到广泛应用,一般均采用进口的氨基酸混合标液进行。仅用一种方法来测定各种各样食品、饲料、药物中的氨基酸或进行课题研究,显然是不能满足需要的。本实验采用模拟样品的方法自配标样,对２００多个批号六种配方的产品作了测定,与传统方法比较：本方法结果精确可靠,且节省时间。类似方法国内尚未见报道。     

甲胎蛋白胶体金检测试剂的的研制

为建立一种快速,简易胶体金免疫层析法（GICA）用于检测血清中的甲胎蛋白（AFP）,将AFP单克隆抗体分别标记胶体金并包被硝酸纤维素膜,制成免疫检测层析试剂,血清中的AFP与金标记抗体结合,沿着硝酸纤维素膜移动,与膜上的固相抗体结合可形成肉眼可见的紫红色线条,此检测试剂对本室自制AFP参比品进行了检测,灵敏度达20ng/ml;对甘肃省肿瘤医院的176份癌症患者血清进行了检测。结果与ELISA法相一致,本法检测AFP快速,简便,结果准确,具有推广价值。     

介绍一种有效的混合氨基酸双向层析法(Atiya Abbasi等方法)

<正> 在蛋白质水解液的氨基酸分离工作中,常用两种溶剂系统作双向层析法,但是由于R_f值接近的氨基酸完全重叠,分离效果不好。1980年Atiya Abbasi Rashida ali 和ZafarH.Zaidi选择了三种溶剂系统,用Whatman 1号层析纸作双向层析,可将已知的二十种氨基酸成功地分离清晰,并改用锶—茚三酮作显色剂,显色决,色斑可保持六星期以上。     

系统比较氨基酸描述子在多肽定量构效关系中的应用

氨基酸描述子是采用多元统计方法从大量氨基酸性质参数中提取得到的少数关键信息成分,目前已被广泛应用于多肽生物活性预测及蛋白质功能判别等领域。鉴于近年来氨基酸描述子种类的极速扩增,收集了目前国内外发表的27种氨基酸描述子,并将其用于8组经典多肽集的结构表征及定量构效关系研究。通过系统比较这些描述子对同一肽集与不同肽集的统计建模结果,我们认为物理化学描述子的建模效果优于拓扑描述子,拓扑描述子的建模效果优于三维结构描述子,且已有诸多氨基酸描述子已经达到性能限度,如未考虑肽链内部各氨基酸残基的交互影响,肽配基与相应靶标蛋白的相互结合,因此不再建议按照传统思路进一步提出新型描述子种类。     

三氯化钛对氨基酸茚三酮显色的影响

在氨基酸的分析中,常用茚三酮显色法进行定性定量测定。无论用离子交换柱层析和液体色谱法还是用氨基酸自动分析仪分析氨基酸,常在茚三酮显色剂中加入二氯化锡还原剂作为增色剂,但由于二氯化锡不稳定,配制茚三酮时加入255毫克/升的三氯化钛代     

评估国产（1,3）-β-D-葡聚糖检测试剂的诊断价值

目的比较国产与进口（1,3）-β-D-葡聚糖（BG）检测试验并对国产试剂在侵袭性真菌感染中的诊断价值进行评估。方法回顾性调查2008年4月～2009年5月我院203例（342份样本）怀疑侵袭性真菌感染的住院患者,根据诊断标准分为感染组和非感染组,对其中同时进行国产与日本试剂检测的100份样本进行配对t检验比较;在不同的判断标准下计算国产试剂的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值等,采用McNemar配对χ2检验对不同方法进行比较。结果国产和日本试剂在感染组和非感染组配对t检验结果分别为P=0.235,P=0.076;国产试剂以单次≥20pg/mL和≥50pg/mL为界值的灵敏度、特异度分别为78.3%,67.2%和56.5%,85.0%,双次≥20pg/mL和≥50pg/mL为界值的灵敏度、特异度分别为25.0%,64.9%和25.0%,87.7%。结论国产与日本试剂检测值无统计学差异;国产试剂单次≥50pg/mL为界值较20pg/mL可以明显提高特异度,降低假阳性率,而不影响灵敏度。连续双份血清阴性（BG〈50pg/mL）具有较高的特异度和阴性预测值。     

用调光开关自制电泳仪电源

利用台灯调光开关与整流电桥的电原理特性,将两者相接自制成电泳仪电源,把交流电压改变为直流电压进行电泳。用自制电泳仪电源进行琼脂糖凝胶电泳能分离出DNA Mark,进行纸电泳能分离出氨基酸,实验证明自制电泳仪电源可行。而且自制电泳仪电源具有价格低廉,取材方便,操作简单等特性,适于在中学实验教学推广。为新课标在“血红蛋白的提取和分离”课题中提出的了解电泳法提供了实验理论基础。