pH值对FOXO1、GDF-8基因反义RNA寡核苷酸吸收的影响

研究不同pH值下,口服靶向FOXO1与GDF-8基因反义RNA寡核苷酸药物对药效的影响.化学合成靶向FOXO1与GDF-8基因的有效反义RNA寡核苷酸片段,调节药物PH值,通过灌胃方式给药,给药20 d后处死小鼠,进行体重,腿部肌肉增长情况分析.提取腿部肌肉组织总RNA,用real time PCR检测FOXO1与GDF-8基因的表达.结果表明,服用RNA oligos的试验组小鼠腿部肌肉重量均比对照组肌肉重量增长快.其中pH为7.0的RNA oligos的效果比pH为5.0的效果好, pH9.0的RNA oligos的作用效果最弱.与小鼠体重变化结果一致,real time PCR检测实验组FOXO1与GDF-8基因转录水平较对照组均有明显下降,其中服用pH为7.0的RNA oligos的下降最多.因此,口服靶向FOXO1与GDF-8基因的反义RNA寡核苷酸药物的最适pH值应为中性偏酸.     

HIV-1假病毒包装的重要影响因素分析

[目的]分析影响HIV-1假病毒包装的主要因素,建立该假病毒包装的优化条件.[方法]用单因素分析对比的方法,比较了对病毒包装效果有重要影响的转染试剂、转染试剂与质粒的数量、培养基血清类型、细胞周期阶段对于病毒包装效果的影响.[结果]对45批150盘病毒包装结果分析显示,使用PEI转染试剂成本低,转染效果好,其N/P在8-40均可以产生高活性的包装病毒;用进口血清包装时,相对于国产血清结果重复性高;细胞周期处于S及G2/M期时转染质粒相对于S以及G0/G1期有较高的病毒活性.[结论]用PEI为转染试剂可以包装出高活性的病毒,包装获取高活性病毒可以通过质粒与PEI梯度比例以及血清类型构成多个组合策略来实现.     

半夏产生物碱内生菌的分离及其抑菌活性的初步研究

用平板分离法从不同产地的半夏根、茎、叶中共分离到内生菌87株.其中,内生真菌48株、细菌34株、放线菌5株;通过点植法、插片法和印片法,并根据菌落、菌丝体、孢子形态特征,将48株内生真菌分为4科、15属;经HPLC法检测,共筛选到12株产生物碱类物质的内生菌,其中,10株为内生细菌,2株为内生真菌;有3株内生细菌对金黄色葡萄球菌有体外抑菌活性.     

旋磁场对健康人和矽肺病人血清铜蓝蛋白活力的影响

目的 :为了解旋磁场对健康人、矽肺患者血清铜蓝蛋白 (Cp)活力的影响。方法 :Cp采用联大茴香胺法进行测定。结果 :在旋磁场中曝磁 30分钟后 ,健康曝磁组血清Cp( 1 0 1 .1 2± 39.35 )与健康对照组血清Cp( 73.0 9± 36.72 )相比活力显著增加 (p <0 .0 5 ) ;矽肺曝磁组血清Cp( 1 63.36± 32 .64)与矽肺对照组血清Cp( 1 2 3.80± 2 8.2 5 )相比活力显著增加 (p <0 .0 1 )。结论 :旋磁场影响健康人和矽肺患者血清铜蓝蛋白的活力。     

用藻类毒素为指标发现湖水中污染点的研究

在太湖选择 2 1个监测点 ,于 1 999年 5— 1 0月每月对太湖水质进行检测。应用统计学方法对各指标与各地区关系进行分析 ,最后应用逐步回归找出主要指标及主要污染地区。结果表明太湖水域中的MC几何平均浓度为 40 7pgmL- 1 ( 2 0 .94— 1 8362 .0 1pgmL- 1 ) ,微囊藻毒素的存在和增长主要与微囊藻毒素生长的环境条件有关。用相关和逐步回归分析法查明微囊藻毒素与其生长与总磷呈正相关 ,与溶解氧呈负相关。其数学关系为 :对数微囊藻毒素(pgmL- 1 ) =6.5 38+ 1 .75 9 对数总磷 (ugL- 1 ) - 7.640 对数溶解氧 (mgL- 1 ) ,(R2 =0 .464,p <0 .0 1 )。用公式中三项指标构成的多元交互图 ,可以寻找湖水中主要污染点的分布。太湖主要污染点在 1 6、2 4和 9、1 0两处湖湾中。     

液态生产胞外漆酶大型真菌高产菌株筛选

依照真菌漆酶催化特定作用底物进行氧化还原反应结果的特性,设计了一个采用愈创木酚和α-萘酚作为酶反应显色判别依据和产酶菌株筛选的限制性驯化剂,同时结合选用木质素作为产酶诱导强化因子的筛选分析模版,对保藏和外购的常见大型担子菌和食用真菌进行产酶性能分析。结果发现,这些菌株均不能有效地生产漆酶或酶活性很低,以该模版作为初筛手段从杨树林等野生菌菇生长地中分离得到15株产酶野生微生物,经反复筛选得到3株酶活性较高的大型真菌株A21、X18和Y11,其胞外漆酶活力分别为255.9、248.7 和277.3 U·ml^-1,具有可观的产业化生产开发应用潜力。     

液态生产胞外漆酶大型真菌高产菌株筛选x

依照真菌漆酶催化特定作用底物进行氧化还原反应结果的特性,设计了一个采用愈创木酚和α-萘酚作为酶反应显色判别依据和产酶菌株筛选的限制性驯化剂,同时结合选用木质素作为产酶诱导强化因子的筛选分析模版,对保藏和外购的常见大型担子菌和食用真菌进行产酶性能分析。结果发现,这些菌株均不能有效地生产漆酶或酶活性很低,以该模版作为初筛手段从杨树林等野生菌菇生长地中分离得到15株产酶野生微生物,经反复筛选得到3株酶活性较高的大型真菌株A21、X18和Y11,其胞外漆酶活力分别为255.9、248.7和277.3U.ml-1,具有可观的产业化生产开发应用潜力。     

逆转录病毒载体介导的猪瘟病毒配基因的真核表达

利用DNA重组技术将猪瘟病毒(Classicalswinefevervirus,CSFV)石门株囊膜蛋白E2基因插入逆转录病毒载体pBABE-puro中构建成重组逆转录病毒载体pBABE-puro-E2,该重组逆转录病毒载体与pVSVg质粒经磷酸钙共转染法将其转入293GP细胞中包装逆转录病毒假病毒。用包装的假病毒感染PK-15细胞,经嘌呤霉素筛选阳性细胞后进行流式细胞技术(FACS)分析,结果表明CSFVE2基因在PK-15细胞膜上成功表达。将表达E2蛋白的PK-15细胞腹腔免疫Balb/c小鼠,成功诱导小鼠产生了抗E2蛋白的抗体。     

小麦-玉米轮作长期肥料定位试验中土壤磷库的变化Ⅰ.磷肥产量效应及土壤总磷库、无机磷库的变化

研究了冬小麦 夏玉米→春玉米轮作中 ,长期施用磷肥、有机肥对土壤总磷库、无机磷库的影响及磷肥的产量效应 .结果表明 ,长期施用磷肥、有机肥土壤全磷、总无机磷均有不同程度的积累 ,土壤磷素的积累以无机磷为主 .根据土壤磷素的收支平衡状况 ,计算出维持土壤磷素收支平衡磷肥的临界用量 :冬小麦 夏玉米种植年份为P2 O594.7kg·hm-2 ,春玉米种植年份为P2 O55 1.5kg·hm-2 .根据肥料效应函数计算出磷肥 (P2 O5)的经济最佳、最高产量用量分别为 :冬小麦 夏玉米种植年份为 13 5 .8、14 9.8kg·hm-2 ,春玉米种植年份为 88.6、95 .9kg·hm-2 .     

小麦-玉米轮作长期肥料定位试验中土壤磷库的变化Ⅱ.土壤Olsen-P及各形态无机磷的动态变化

研究了冬小麦 夏玉米→春玉米轮作的长期肥料定位试验中 ,不同磷肥、有机肥用量下土壤Olsen P及各形态无机磷的动态变化 .结果表明 ,土壤Olsen P及各形态无机磷含量增减决定于土壤磷素的积累与消耗量 .长期不施磷肥 ,土壤Olsen P含量逐渐下降并趋向于临界水平 ,磷肥用量与作物吸磷量基本持平时 ,可以维持土壤Olsen P动态平衡 .磷肥用量高于作物的吸磷量时 ,土壤Olsen P及各形态无机磷均有不同程度的积累 .土壤无机磷的积累以Ca2 P ,Ca8 P为主 ,平均占无机磷积累总量的 5 2 .3 % ,其中Ca8 P占二者积累磷总量的 78.3 % .其次为Al P ,Fe P的积累 ,平均占无机磷积累磷总量的 2 6.1% ,O P、Ca10 P平均占 2 0 .4% .长期有机肥、化学磷肥配合施用明显地增加了磷肥的有效性 .