人细小病毒B19基因变异的研究进展

人细小病毒Ｂ１９简称Ｂ１９病毒,是细小病毒中惟一能感染人类的病毒,也是动物病毒中对人类具有致病性的最小单链线状ＤＮＡ病毒,其与儿童及成人的多种疾病密切相关。Ｂ１９病毒的基因变异对其致病、传播等具有重要影响,且与Ｂ１９病毒诊断试剂,疫苗的制备等关系密切。本文就Ｂ１９病毒基因组的变异状况,基因变异研究方法及研究Ｂ１９病毒基因变异的意义作一概述。     

多聚酶链反应技术在研究人微小病毒B19中的应用

本文概述了人微小病毒Ｂ１９的基本情况,详细介绍了多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术在Ｂ１９病毒引起的各类感染、血制品等的检测,寻找整合状态的Ｂ１９病毒和其他微小病毒,以及研究Ｂ１９病毒在组织培养中的复制过程等方面的应用,并对其作了初步的评价。     

应用亲和层析法是纯鸡马立克氏病病毒PP38基因重组产物

利用鸡马立氏病病毒（ＭＤＶ）Ｉ型特异单克隆抗体Ｈ１９致敏Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ－ＣＮＢｒ,从感染重组病毒ＢＰ３８Ⅱ的昆虫细胞中提纯鸡马立克氏病毒ＰＰ３８基因重组产物,获得良好效果,提纯的蛋白质的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ中表现出一条分子量约为３８ｋＤａ的蛋白质条带,在免疫印迹试验中该蛋白质带也能被单克隆抗体Ｈ１９识别。利用该提纯的重组ＰＰ３８免疫小鼠,所制备的小鼠抗血清在免疫荧光染色试验中不仅能与感染重组病     

用PCR检测临床血标本中人类细小病毒B19 DNA

用ＰＣＲ检测临床血标本中人类细小病毒Ｂ１９　ＤＮＡ杨洪江,张桦,林书祥,牛艾茹（天津市儿童医院儿研所,天津３０００７４）关键词聚合酶链反应（ＰＣＲ）,人类细小病毒Ｂ１９几种人类细小病毒中,只有Ｂ１９病毒是人类的病原体。由于该病毒不能在体外繁殖,获得该...     

TORCH综合征与先天性畸形

近年来,先天性感染引起新生儿畸形死亡的人数日益增加, Ｔ Ｏ Ｒ Ｃ Ｈ 是一组能引起先天性感染的病原微生物。１９７１ 年 Ｎａｈｍ ｉａｓ 等将引起先天性感染的病原体用英文字头命名,称为 Ｔ Ｏ Ｒ Ｃ Ｈ 感染或 Ｔ Ｏ Ｒ Ｃ Ｈ 综合征。 Ｔ 代表弓形体（ Ｔｏｘｏｐｌａｓｍ ａ ｇｏｎｄｉｉ, Ｔ Ｏ Ｘ Ｏ）, Ｏ为其它（ Ｏｔｈｅｒ,包括很多种病毒）, Ｒ 表示风疹病毒（ Ｒｕｂｅｌｌａ ｖｉｒｕｓ）, Ｃ代表巨细胞病毒（ Ｃｙｔｏｍ ｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ, Ｃ Ｍ Ｖ）, Ｈ 表示单纯疱疹病毒（ Ｈｅｒｐｅｓ ｓｉｍ ｐｌｅｘ ｖｉｒｕｓ, Ｈ Ｓ Ｖ）。随着病原微生物学、免疫学和流行性病学研究的进展,又发现了多种能引起先天性感染的病原微生物,如水痘--带状疱疹病毒（ Ｖａｒｉｃｅｌｌａ ｚｏｓｔｅｒ ｖｉｒｕｓ, Ｖ Ｚ Ｖ）,麻疹病毒（ Ｍｅａｓｌｅｓ ｖｉｒｕｓ, Ｍ Ｖ）, 流 行性腮 腺炎 病毒（ Ｐａｒｏｔｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ, Ｐ Ｖ）, 人类免 疫缺 陷病毒 （ Ｈｕｍ ａｎｉｍ ｍ ｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ, Ｈ Ｉ Ｖ）,丙型肝炎病毒（ Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ, Ｈ Ｃ Ｖ）,人类疱疹病毒６型（ Ｈｕｍ ａｎ ｈｅｒｐｅｓ ｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ ６, Ｈ Ｈ Ｖ ６）,肠道病毒（ Ｅｎｔｅｒｏｖｉｒｕｓ, Ｅ Ｖ）,乙型肝炎病毒（ Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ, Ｈ Ｂ Ｖ）,人类乳头瘤病毒（ Ｈｕｍ ａｎ ｐａｐｉｌｌｏｍ ａｖｉｒｕｓ, Ｈ Ｐ Ｖ）, Ｅ Ｂ 病毒（ Ｅｐｓｔｅｉｎ Ｂａｒｒ ｖｉｒｕｓ, Ｅ Ｂ Ｖ）,人类微小病毒 Ｂ１９（ Ｈｕｍ ａｎ ｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ Ｂ１９, Ｈ Ｐ Ｖ Ｂ１９）和人类嗜血细胞病毒１ 型（ Ｈ Ｔ Ｌ Ｖ １）等。 Ｔ Ｏ Ｒ Ｃ Ｈ 感染的特点是孕妇患其中任何一种疾病后,本人的症状极其轻微,或根本没有症状和特征。病原体虽不相同,却能使胎儿或新生儿出现相同或相似的临床表现,有时还很严重,甚至导致死亡。如在怀孕早期感染,则发生流产、死胎和胎儿畸形。中晚期感染,导致胎儿不同程度畸形和脏器损害。     

两个地区食管鳞癌中Epstein—Barr病毒的PCR检测

应用聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）检测两个不同地区４８例食管鳞状细胞癌中ＥＢ病毒的感染。结果广州食管鳞癌中ＥＢ病毒ＤＮＡ检出率为９５．８％（２３／２４）；郑州食管鳞癌中ＥＢ病毒ＤＮＡ检出率为１９．６％（４／２４）。两者差异有显著性（Ｐ〈０．０５）。提示食管鳞癌的病因在不同的地区可能有所差异。郑州食管癌的发生可能是由其它致癌物质引起而与ＥＢ病毒感染无关；广州食管癌的发生可能与ＥＢ病毒的感染有一定的关系。     

用PCR检测临床标本中人类微小病毒B19 DNA

以自行设计及合成的两对引物,利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测临床标本中人类微小病毒Ｂ１９ＤＮＡ。结果：两对引物的ＰＣＲ检测结果无显著差异性。自然流产组Ｂ１９病毒ＤＮＡ检出率为３４．６％（９／２６）,明显高于人工流产组５％（１／２０）,进一步证明Ｂ１９病毒感染与自然流产的发生密切相关。本方法亦为Ｂ１９病毒感染的临床诊断提供了新的手段。     

细小病毒B19感染检测方法的研究进展

本文综述了细小病毒Ｂ１９感染检测方法的研究进展。病毒分离目前仍处于实验研究阶段;电镜及免疫组化法检测阳性率不高,限制了其使用;血清学方法多用重组抗原进行,血清中病毒特异性ＩｇＭ阳性可做为近期感染的指标,但由于与风疹病毒的交叉反应,该方法与病毒ＤＮＡ检测结合使用结果更为可靠;核酸杂交法敏感性高,可用于常规诊断和流行病学调查,但易出现假阳性,特别是同位素探针,敌目前多倾向于用非放射性标记探针;ＰＣＲ法     

病毒感染与细胞凋亡

本文叙述了ＥＢ病毒、甲级病毒、单纯疱疹病毒１型（ＨＳＶ－１）、牛痘病毒、腺病毒、人类免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）和杆状病毒等感染细胞后对宿主细胞凋亡的影响,初步探讨了可能的机制,并作了展望。     

人单核细胞系U_（937）和T细胞系HSB_2细胞的HSV－1感染

用ＨＳＶ－１接种人单核细胞传代株Ｕ＿（９３７）和Ｔ淋巴细胞传代株ＨＳＢ＿２细胞,通过对病毒滴度、细胞增殖与病变、病毒抗原表达及病毒ＤＮＡ的动态观察,研究了ＨＳＶ－１感染两种细胞的特点。结果发现接种病毒后,Ｕ（９３７）细胞仅允许病毒短时间低滴度复制,培养上清中病毒滴度在１２天内降至测不出水平,细胞经过１～２周后增殖受抑、死亡增多,然后又逐渐恢复;用ＬＰＳ持续刺激则能提高病毒感染滴度,延长感染时间,形成短期持续感染。ＨＳＢ＿２细胞允许病毒复制至较高滴度,呈现急性杀细胞性感染;用ＰＨＡ持续刺激也不改变细胞感染的特点。     

棉铃虫质型多角体病毒AB两种类型体外复制特性的比较研究

分析比较了棉铃虫质型多角体病毒江苏株Ａ,Ｂ两种类型的离体复制特性,ＨａＣＰＶ－Ａ型病毒可在多种昆早细胞系中复制,而Ｂ型病毒只能在同源细胞系中增殖;Ａ型病毒的感染率和细胞内游离病毒粒子的滴度均高于Ｂ型病毒;感染细胞持续传供表明,ＨａＣＰＶ－Ａ型病毒感染的ＨＡ－８３１细胞在连续传代７次后,感染率从最初的１０．６％上升到８０％以上,反之,Ｂ型病毒的感染的细胞,传供９次后已不能形成典型的多角体。     

柯萨奇B组病毒在Hep—2细胞内增殖特性的研究

采用ＩＦＡ、ＲＴ－ＰＣＲ法观察了柯萨奇Ｂ组病毒（ＣＢＶ）５型在Ｈｅｐ－２细胞内的增殖动态。ＣＢＶ感染细胞后４ｈ可检出病毒ＲＮＡ,８ｈ可检出病毒抗原,１２ｈ可观察到细胞病变,２０ｈ可检出病毒颗粒。结果为ＣＢＶ增殖特性的研究提供了新的资料,并指出ＰＣＲ是监测ＣＢＶ增殖的敏感方法。     

肾综合征出血热人体组织中病毒包涵体的性质及意义的进一步研究

应用免疫组化、原位分子杂交、电镜及免疫电镜等方法进一步对肾综合征出血热人体尸检组织中病毒包涵体（ＩＢ）的抗原、核酸性质和超微结构特点作了进一步观察。结果,在３９例中的２０例尸检病例组织中显示出病毒核蛋白抗原和血凝素抗抗原阳性的ＩＢ,其中包括１６例陕西尸检病例组织中的６例休克期和１例多尿期病例,１７例上海病例中的３例休克期和９例少尿期病例及３例江西病例中的１例休克期病例。ＩＢ主要分布在呼吸道和肺泡、肾远曲小管和集合管、胃肠道、腺垂体、扁桃体、胰腺、前列腺等组织的粘膜上皮和腺上皮细胞及肝细胞和睾丸生精上皮细胞胞浆中,阳性细胞形态基本正常。应用原位分子杂交,可在该组细胞小同时检测到病毒ＲＮＡ,多为胞浆内弥漫阳性,仅少数组织中显示出病毒ＲＮＡ阳性ＩＢ结构。电镜观察阳性组织细胞中出现由大量微丝微管及颗粒样结构组成的ＩＢ结构,其小的病毒颗粒状结构、内质网及纤维丝状结构呈病毒抗原阳性,上述结构位于高尔基体区。结果说明该病毒有感染上皮细胞的特性,对其宿主细胞的致细胞病变作用是极其温和的,且多表现在亚细胞水平。ＩＢ可能是病毒过量表达抗原的堆积或病毒复制部位,而微丝微管结构可能参与病毒的感染过程。     

鸡传染性支气管炎病毒免疫原基因cDNA的克隆和序列分析

从含有鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）的鸡胚尿囊液中快速提取病毒ＲＮＡ,得到约２３ｋｂ全长ＩＢＶ ＲＮＡ。运用反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）得到１．７２ｋｂ编码全长ＩＢＶ免疫原糖蛋白Ｓ１的基因片段。进一步将此基因片段插入到质粒ｐＵＣ１９中,进行全长片段的序列分析。结果表明,ＩＢＶ北京株和Ｂｅａｕｄｅｔｔｅ株的核酸同源性为９７．８％,与Ｍ４１株的核酸同源性达９８．５％。     

药物对病毒感染培养心肌细胞Ca^2＋内流及CVB3—RNA复制的影响

应用放射性同位素＾４５Ｃａ＾２＋示踪技术及光敏生物素标记ｃＤＮＡ探针杂交方法,观察了维拉帕米、黄芪、地塞米松等药物对感染柯萨奇Ｂ３病毒（ＣＶＢ３）的大鼠培养心肌细胞Ｃａ＾２＋内流及细胞中ＣＶＢ３－ＲＮＡ复制的作用。结果发现：在病毒感染４８ｈ,上述三药均可显著减少感染细胞及正常对照的心肌Ｃａ＾２＋内流;若在病毒感染后即加入上药物,经４８ｈ培养后,黄芪组细胞中的ＣＶＢ３－ＲＮＡ含量显著少于病毒对照组,     

柯萨奇B组病毒在病毒性心肌炎的研究进展

本文综述了柯萨奇Ｂ组病毒（ＣＶＢ）在分子生物学方面的研究进展,包括其基因组结构及各基因产物的功能,在机体内感染过程,基因且的复制与毒力的关系,病毒包装,免疫病理等方面,结合病毒性心肌炎的临床病理,分析了该病毒与心肌炎的关系,及各种分子生物学技术在致病机制研究中的应用。     

Epsten—Barr病毒诱导永生化人上皮细胞恶性转化

为了使ＥＢ病毒能直接感染人上皮细胞,将ＰＳＧ－ＣＲ２－Ｈｙｇ载体转入永生化人上皮细胞（２９３细胞）中。通过间接免疫荧光法测定发现,转化的细胞表达ＥＢ病毒受体。用ＥＢ病毒感染ＣＲ２－２９３细胞后,２３％的细胞可表达ＥＢ病毒抗原。用ＴＰＡ作用于这些细胞后,表达病毒抗原的细胞数增加,。用ＰＣＲ法从ＥＢ病毒感染细胞ＤＮＡ中扩增出ＥＢ病毒ＤＮＡＷ片段。在ＴＰＡ持续作用下,ＥＢ病毒感染的形态特征发生改变。把Ｅ     

油桐尺蠖核型多角体病毒感染Bs484细胞的增殖与病理研究

用油桐尺蠖核型多角体病毒（ＢｓＮＰＶ）感染Ｂｓ４８４细胞,对感染后病毒增殖的部分性质及细胞病理变化进行了研究。结果表明：１．病毒子代的增殖在感染后的不同时间具有不同的变化形式,且增殖量与感染剂量具有一定程度的相关,２．病毒感染细胞后１２小时开始在培养物上清检测到明显的胞外病毒粒子;３．就ＢｓＮＰＶ的增殖而言,２４～２６℃是其最佳发育温度;４．病毒感染细胞后的明显病变特征是核内充满多用体,细胞堆积以及细胞体积膨大,同时观察到二类感染细胞,一种核内含较多的多角体,另一种核内则只有几个多用体。     

犬细小病毒单克隆抗体的制备及其与免疫血清在血凝抑制中的比较

将用犬细小病毒免疫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠的脾细胞与Ｓｐ２／０骨髓瘤细胞在聚乙二醇作用下融合,经筛选、克隆,得到６株稳定分泌犬细小病毒单克隆抗体的杂交瘤。用杂交瘤腹水作血凝抑制试验,检测分别含有犬细小病毒、猫泛白细胞减少症病毒和水貂肠炎病毒的标本,及ＣＰＶ感染犬粪便标本,并与免疫血清作对比。结果表明,用单克隆抗体作血凝抑制试验,比用免疫血清作具有特异性高、操作简便省时等优点,而二者敏感性一致。     

恶生肿瘤组织中结核杆菌DNA的检测

目的 探讨结核杆菌感染与恶性肿瘤的关系。方法 采用多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术检测两种恶性肿瘤组织中结核杆菌ＤＮＡ（ＴＢ－ＤＮＡ）。结果４１例恶性肿瘤组织中检出ＴＢ－ＤＮＡ阳性患者８例,占１９．５％,且ＴＢ－ＤＮＡ阳性患者肿瘤发病部位基本与结核病的好发部位一致。结论 结核杆菌感染可能与一些恶性肿瘤存在在特殊相关性。