RNA特异性腺苷脱氨酶1在胃癌中的表达及其临床意义

目的：检测ADAR1在胃癌患者中的表达情况,探讨ADAR1的表达水平对胃癌患者的潜在临床意义。方法：通过基因表达谱数据交互分析（GEPIA）数据库获得了胃癌和正常胃组织样本ADAR1在m RNA水平的表达差异情况,在170例胃癌患者的胃癌和配对组织芯片中,通过免疫组织化学手段检测ADAR1的表达情况,并分析ADAR1的表达和临床特征之间的关系。通过癌症基因组图谱（TCGA）数据库获得胃癌的RNAseq数据（level3）和相应的临床信息,用于分析ADAR1与临床诊疗过程中的潜在相关性。通过Kaplan-Meier Plotter平台获得ADAR1的表达对胃癌患者的预后分析预测,结合组织芯片的评分和临床预后资料进行分析、验证。结果：ADAR1在胃癌组织中异常高表达,差异具有统计学意义（P<0.0001）;其高表达与胃癌的组织学分化程度相关（P=0.044）;性别（HR=2.082,95%CI=1.160-3.736,P=0.014）、淋巴结肿大（HR=1.582,95%CI=1.003-2.496,P=0.049）是影响胃癌患者总生存期的独立危险因素;高表达ADAR1的患者总生存期...     

HOXB7在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的:分析同源异型盒基因B7(Homeobox B7,HOXB7)在人胃癌组织中的表达情况,并探讨HOXB7的表达与胃癌患者临床病理特征和预后的关系。方法:收集行手术切除的胃癌组织及对应癌旁组织共120例,采用实时定量PCR(q RT-PCR)技术、蛋白印迹(Western blot)和免疫组化染色分别检测HOXB7m RNA水平及蛋白水平在胃癌及对应癌旁组织中的表达,通过卡方检验分析HOXB7表达水平与胃癌患者临床病理因素间的相关性,采用单因素及多因素Cox回归模型评估HOXB7在胃癌风险评估中的作用,Kaplan-Meier生存曲线分析HOXB7表达水平与胃癌患者无瘤生存期和总生存期的关系。结果:胃癌组织中HOXB7 m RNA和蛋白表达水平均显著高于对应癌旁组织(P0.05);HOXB7蛋白表达与肿瘤临床分期、浸润深度及淋巴结转移均具有显著相关性(P0.05),而与患者性别、年龄、分化程度及远处转移均无显著相关性(P0.05)。单因素和多因素Cox分析提示HOXB7可以作为评估胃癌患者预后的独立风险因素。Kaplan-Meier生存分析结果显示高表达HOXB7的胃癌患者无瘤生存时间和总生存时间均显著低于HOXB7低表达患者组(P0.01)。结论:HOXB7蛋白在胃癌组织中高表达,并与胃癌的恶性表型有关,可能参与胃癌发生及恶性进展过程,可作为判断胃癌患预后的重要参考指标。     

卵巢癌中线粒体转录终止因子1的表达及其意义

目的:探讨人线粒体转录终止因子1(MTERF1)在卵巢癌中的表达及其在预后判断中的作用。方法:利用Oncomine数据库对比分析卵巢癌和正常卵巢组织中MTERF1基因表达水平;提取10例配对卵巢癌组织和正常卵巢上皮组织总RNA和蛋白质,real time RT-PCR检测MTERF1 mRNA在各组织中的表达,Western印迹检测MTERF1蛋白在各组织中的表达;利用Kaplan-Meier plotter数据库分析MTERF1表达对卵巢癌患者的预后价值。结果:Oncomine数据库中共收集了8个不同类型的研究结果,荟萃分析显示MTERF1在卵巢癌中表达增高,且差异具有统计学意义(P0.05)。本研究10例卵巢癌及其配对的正常卵巢上皮组织中,有6例卵巢癌中MTERF1 mRNA和蛋白质表达水平增高。Kaplan-Meier plotter数据库分析显示,MTERF1 mRNA表达水平越高,早于2期的卵巢癌患者无进展生存期越短,预后越差(P0.05);但卵巢癌患者的总生存期与MTERF1 mRNA表达水平无相关性(P0.05)。结论:卵巢癌组织中MTERF1 mRNA和蛋白质表达升高;在早期卵巢癌患者中,MTERF1表达水平越高,预后越差,可作为预测卵巢癌患者预后的潜在分子标记物。     

Caspase-9在胃间质瘤中表达下调的临床病理学意义

目的了解caspase-9在胃间质瘤中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用实时荧光定量PCR技术检测108例胃间质瘤患者的肿瘤组织和胃壁正常组织中caspase-9 m RNA的表达;免疫组织化学染色检测其蛋白表达水平。通过卡方检验判断caspase-9表达变化与胃间质瘤的临床病理学特征的关系。结果 Caspase-9 m RNA在胃间质瘤组织的表达较正常胃壁组织低,且无论是m RNA还是蛋白水平,caspase-9表达变化与胃间质瘤的核分裂象均密切相关,caspase-9表达下调的患者核分裂象高的可能性更大。结论 Caspase-9在胃间质瘤中低表达,且表达下调的肿瘤的核分裂象更高,提示可能与胃间质瘤的发生发展及预后有关。     

基于数据挖掘分析POLR2A基因在脑胶质瘤的表达及意义

目的:基于数据挖掘分析POLR2A基因在低级别脑胶质瘤及正常脑组织中的表达情况,进一步探讨POLR2A基因对低级别脑胶质瘤患者的预后意义。方法:利用Oncomine和GEPIA数据库对POLR2A基因mRNA在正常脑组织和低级别脑胶质瘤组织中的表达进行分析;通过cBioportal分析POLR2A基因在低级别脑胶质瘤组织中的突变情况;利用Onco Lnc数据库对POLR2A基因的表达水平与低级别脑胶质瘤患者生存率做Kaplan-Meier生存分析;使用String-DB数据库探索真核生物表达调控过程中的POLR2A相关蛋白。结果:与正常脑组织相比,低级别脑胶质瘤组织中的POLR2A基因mRNA水平呈显著高表达(P≤0.05);POLR2A基因的表达水平与低级别脑胶质瘤患者的总生存时间无明显相关性;POLR2A基因在低级别脑胶质瘤组织中存在高突变率;真核生物RNA聚合酶POLR2E、POLR2F、POLR2G、POLR2K、POLR2L等与POLR2A有明显的相互作用。结论:数据库中荟萃了POLR2A基因在低级别脑胶质瘤组织中表达的相关信息,证实POLR2A基因在低级别脑胶质瘤组织中呈高表达。     

人类正常胃肠道组织基因表达谱特征的生物信息学分析

目的:筛选人类正常胃肠道组织特异性高表达基因.方法:以公开发表的人类正常组织基因表达数据库资料为研究对象,应用单侧 Student T检验筛选胃、回肠和结肠组织的特异性高表达基因.Ingenuity软件和KEGG分析特异性高表达基因相关的生理功能;Cluster软件分析胃特异性高表达基因谱在胃癌基因数据库中的表达特征.结果:筛选出胃高表达基因196个,回肠高表达基因203个,结肠高表达基因224个,高表达基因的功能与胃肠道的主要生理功能相吻合.筛选出的正常胃肠高表达基因中含有一些癌基因和抑癌基因.系统聚类分析发现胃特异性高表达基因在胃癌数据库的胃正常组织中高表达,而相应的胃癌组织低表达,癌组织和正常组织可以完好聚类分组,并且可以区分中分化和低分化胃癌.结论:人类正常胃、回肠和结肠具有组织特异的与生理功能密切相关的高表达基因群.     

IARS2在胃癌预后中的临床应用

为检测IARS2和MYO5B在胃癌组织中的表达并探讨IARS2表达与胃癌患者临床病理特征及预后的关系,本研究使用荧光定量PCR (quantitative polymerase chain reaction, qRT-PCR)及Western blotting检测30例胃癌组织和癌旁组织中IARS2和MYO5B的表达,使用线性回归分析两者m RNA表达相关性。使用免疫组化方法检测86对胃癌组织及癌旁组织中IARS2蛋白的表达情况,根据免疫组化IARS2表达情况将胃癌患者分为IARS2阳性组和阴性组,比较两组患者临床病理特征及预后情况。结果发现,较之癌旁组织,IASR2在胃癌组织中显著高表达(p<0.05),而MYO5B在胃癌组织中显著低表达(p<0.05),且两者表达负相关(r=0.5768, p=0.0008)。免疫组化显示IASR2阳性细胞在胃癌组织中的阳性率为70.9%。IASR2高表达提示更高的胃癌淋巴结转移(p=0.041)和TNM分期(p=0.004)及更低的患者术后5年总生存率(p=0.000 6)。研究提示IARS2在胃癌组织中高表达,可作为评估胃癌预后的标志物。     

基于公共数据库分析TCF3在胃癌中的表达及临床意义

[目的]探讨TCF3在胃癌组织中的表达水平及其与临床预后的相关性。[方法]通过GEPIA、ULCAN数据库分析TCF3在胃癌组织中的差异性表达、临床病理资料以及与错配修复基因之间的关系,并利用Kaplan-Meier Plotter数据库绘制TCF3与胃癌患者生存预后曲线。根据Spearman相关系数寻找胃癌中和TCF3作用相关的基因,另外对TCF3及其相关基因进行G0/KEGG富集分析,找出其中最具差异性的生物学注释,最后使用String数据库搭建TCF3蛋白质和上下游蛋白的调控互作网络。[结果]胃癌组织中TCF3表达水平明显高于正常胃组织(P<0.05),而且TCF3与错配修复基因MLH1、MSH2、MSH6、PMS2之间存在显著相关性(P<0.001),另外TCF3表达与肿瘤组织分化程度高低、是否感染幽门螺旋杆菌有关(P<0.05)。生存分析数据表明TCF3表达量越高,胃癌患者的总生存率和进展后生存率越低(P<0.001)。生信富集分析结果显示TCF3及其相关基因在生物遗传信息保存、细胞周期、肿瘤发生发展方面有重要作用(P<0.05),蛋白质网络提示...     

AIB1影响卵巢癌预后及增强卵巢癌对顺铂抵抗的研究

据报道,乳腺癌扩增因子(AIB1)能促进乳腺癌的发生发展和转移。然而,AIB1和卵巢癌的发生发展关系尚不清楚。本研究提取了TCGA数据库中卵巢癌患者癌组织的m RNA表达数据,利用在线软件Kaplan-Meier plotter分别分析了aib1基因表达与卵巢癌患者以及经过顺铂治疗过的患者的总生存期(OS)、进展后生存期(PPS)和无进展生存期(PFS)之间的相关性。结果表明,无论在总的卵巢癌患者群体中还是在顺铂治疗后的群体中,aib1基因高表达患者的OS、PPS以及PFS都显著降低。在人卵巢癌细胞系(SKVO3)中,通过转染AIB1过表达质粒和小干扰RNA(si RNA),分别上调和下调AIB1表达来检测SKVO3对顺铂的敏感性。结果表明,上调AIB1表达抑制了SKVO3细胞对顺铂的敏感性,而下调AIB1表达促进了SKVO3细胞对顺铂的敏感性。进一步研究发现,AIB1高表达上调了卵巢癌细胞中B淋巴细胞瘤-2(BCL2)、B细胞淋巴瘤/白血病x基因长片段(BCL2L1)的表达,而干扰AIB1表达下调了细胞中BCL2、BCL2L1的表达。通过提取TCGA数据库中的卵巢癌患者癌组织m RNA表达数据,利用在线软件GEPIA分析了aib1基因m RNA表达与bcl2、bcl2l1基因m RNA表达的相关性。结果发现,aib1基因表达与bcl2、bcl2l1基因表达呈显著正相关。其结果进一步表明,AIB1可能调节BCL2和BCL2L1的表达。总之,AIB1能作为判断卵巢癌预后的标志物以及卵巢癌治疗的潜在分子靶点,并且抑制AIB1能够增强顺铂对卵巢癌的治疗效果。本研究为卵巢癌对顺铂抵抗的机制提供了新的见解,对克服卵巢癌化疗抵抗具有一定的价值。     

Wnt7a抑制胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移

目的探讨Wnt7a在胃癌发生发展中的作用及机制,为胃癌的临床治疗提供潜在靶点。方法实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)及Western blot技术检测胃癌组织中Wnt7a mRNA及蛋白水平的表达变化,通过免疫组织化学法检测癌胃癌组织中Wnt7a的表达和分布情况,以癌旁正常组织作为对照;观察Wnt7a的差异表达与胃癌临床病理参数及预后的关系;Wnt7a过表达质粒转染胃癌细胞系SGC7901,通过MTS实验和EDU实验检测细胞的活性和增殖状态,流式细胞仪检测细胞的凋亡状态,Transwell实验检测细胞的侵袭和迁移状态。结果 qRT-PCR及Western blot结果显示,与癌旁正常组织相比,Wnt7a在m RNA及蛋白水平表达下调,免疫组织化学结果显示Wnt7a阳性表达呈棕黄色颗粒状,主要分布于细胞胞质,在胃癌组织的阳性率明显低于正常胃组织;与高表达Wnt7a患者相比,Wnt7a低表达患者胃癌的肿瘤体积相对较大,TNM分期较高,淋巴结转移率较高,预后较差;在SGC7901细胞中过表达Wnt7a能够显著抑制肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移,对细胞的凋亡能力无明显影响。结论在胃癌的发生发展中,Wnt7a发挥了抑癌基因的作用,抑制细胞增殖、侵袭和迁移。     

胃癌组织中Bag-1蛋白表达特点及与临床病理学特征、预后的关系

目的:探讨Bc1-2相联系的抗凋亡基因1(Bag-1)蛋白在胃癌组织中的表达及与患者临床病理学特征、预后的关系。方法:选取病理科收集的79例胃癌组织及30例癌旁组织,标本收集时间2010年2月至2013年12月,采用免疫组化SP染色检测两组标本中的Bag-1蛋白表达水平,并分析Bag-1蛋白表达与胃癌患者临床病理学、预后的关系。结果:胃癌组织中的Bag-1蛋白阳性表达率65.82%显著的高于癌旁组织的13.33%(P0.05);Bag-1蛋白阳性表达的胃癌患者3年生存率30.77%显著的低于阴性表达患者的55.56%(P0.05);Bag-1蛋白阳性和阴性表达的患者1年以及2年生存率相差不大,差异无统计学意义(P0.05);Bag-1蛋白阳性表达的胃癌患者3年生存率30.77%显著的低于阴性表达患者的55.56%(P0.05)。结论:胃癌组织中的Bag-1蛋白高表达,并且与患者的胃癌临床分期和淋巴结转移以及预后有关。     

肌层浸润性膀胱癌组织KMT2D、MCM6与临床病理特征和预后的关系

摘要 目的：探讨肌层浸润性膀胱癌（MIBC）组织赖氨酸甲基转移酶2D（KMT2D）、微小染色体维持蛋白6（MCM6）与临床病理特征和预后的关系。方法：选择2017年5月至2019年10月长治医学院附属和平医院行手术治疗的MIBC患者96例,应用逆转录-实时定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测癌组织及癌旁正常组织KMT2D 信使核糖核酸（mRNA）、MCM6 mRNA表达,分析KMT2D mRNA、MCM6 mRNA表达与MIBC患者临床病理特征的关系,应用Pearson相关分析法分析MIBC患者癌组织KMT2D mRNA及MCM6 mRNA表达的相关性。随访3年,比较死亡MIBC患者与存活MIBC患者癌组织KMT2D mRNA、MCM6 mRNA表达,并应用Kaplan-Meier生存曲线分析不同KMT2D mRNA、MCM6 mRNA表达分组MIBC患者预后情况。结果：MIBC癌组织中KMT2D mRNA表达水平显著低于癌旁组织,MCM6 mRNA表达水平显著高于癌旁组织（P<0.05）。MIBC患者癌组织中KMT2D mRNA、MCM6 mRNA表达与侵犯输尿管、淋巴结转移、TNM分期显著相关（P<0.05）,且两者表达呈负相关（P<0.05）。至随访截止,MIBC患者死亡45例,死亡组患者癌组织中KMT2D mRNA表达水平显著低于存活组、MCM6 mRNA表达水平显著高于存活组（P<0.05）。生存曲线结果显示KMT2D mRNA高表达组3年生存率显著高于KMT2D mRNA低表达组;MCM6 mRNA低表达组3年生存率显著高于MCM6 mRNA高表达组（P<0.05）。结论：MIBC癌组织中KMT2D低表达、MCM6高表达,与MIBC侵犯输尿管、淋巴结转移、TNM分期及患者预后不良有关。     

NDRG2在上皮性卵巢癌中的表达及与预后的关系

目的:探讨NDRG2在上皮性卵巢癌中的表达及其与预后的关系。方法:收集新鲜的上皮性卵巢癌和正常卵巢组织各15例,采用real-time PCR检测和比较其NDRG2 m RNA的表达。收集上皮性卵巢癌病理切片96例进行免疫组化检测其NDRG2蛋白的表达,并收集患者的临床病理资料,随访患者的生存情况,分析NDRG2蛋白的表达与上皮性卵巢癌患者临床病理特征和预后的关系。结果:上皮性卵巢癌组织中NDRG2 mRNA和蛋白的表达均显著低于正常卵巢组织(P0.05)。NDRG2在上皮性卵巢癌组织中的表达随着上皮性卵巢癌病理分期的升高而降低,而且其表达降低和患者不良预后显著相关(P=0.002),但其表达和不同上皮性卵巢癌的病理类型、分化程度以及年龄均无明显相关性。去除手术病理分期的影响,NDRG2表达下调和肿瘤细胞减灭术的满意程度以及术后规范化疗是三个影响上皮性卵巢癌预后的重要因素。结论:NDRG2在上皮性卵巢癌中的表达下降,并与患者的不良预后呈显著正相关。     

NGX6基因在多种常见癌组织中的原位表达及其临床意义的研究

研究新的候选抑瘤基因NGX6在多种常见癌组织中的mRNA原位表达谱,分析NGX6 mRNA阳性率与肿瘤1临床病理特征的关系并评估其作为肿瘤转移、预后预测分子标志物的有效性.利用已制作的多肿瘤组织和鼻咽癌组织微阵列,原位杂交检测NGX6 mRNA在多种常见癌组织中的阳性率.结果显示.NGX6 mRNA在鼻咽癌、肺癌、胃癌和结、直肠癌中的阳性率低于其对应的正常组织(P＜0.05,P＜0.01).淋巴结转移性鼻咽癌、肺癌、结、直肠癌和喉癌组织中的NGX6 mR.NA阳性率显著降低(P＜0.05,P＜0.01).NGX6 mRNA阳性率与鼻咽癌、肺癌和结、直肠癌临床分期有关,临床Ⅱ期、Ⅲ期或Ⅳ期癌组织NGX6 mRNA阳性率明显低于其相应的临床Ⅰ期癌(P＜0.05,P＜0.01).研究表明,鼻咽癌、肺癌、胃癌和结、直肠癌中存在低水平的NGX6 mRNA,NGX6 mRNA可作为鼻咽癌、肺癌和结、直肠癌侵袭、转移和临床进展预测的分子标志.     

TGR5和CDX2在胃黏膜肠化生及胃癌中的表达及意义

目的:探讨G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptor,TGR5)和尾型同源盒2(Caudal type homeobox 2,CDX2)在胃黏膜肠化生(Intestinal Metaplasia,IM)及胃癌中的表达和意义。方法:采用免疫组织化学染色法检测TGR5和CDX2在57例慢性胃炎、85例IM、98例胃癌组织中的表达。比较各组间TGR5和CDX2的表达差异,并分析其与胃癌临床病理参数的关系及与胃癌患者预后的关系。利用Spearman秩相关检验分析TGR5和CDX2表达的相关性。结果:IM和胃癌组织中TGR5的高表达率分别为54.1%和58.2%,二者比较无显著差异(P0.05),但均显著高于慢性胃炎组织(P0.01)。TGR5高表达与胃癌患者TNM分期(III+IV期)(P=0.004)、淋巴结转移(P=0.046)及预后较差(P=0.006)相关。胃癌组织中CDX2的高表达率(30.6%)较IM组织(48.2%)显著降低(P0.05),但其均显著高于慢性胃炎组织(P0.01)。CDX2高表达与胃癌患者TNM分期(I+II期)(P=0.008)、无淋巴结转移(P=0.014)、预后较好(P=0.023)相关。TGR5和CDX2表达在慢性胃炎和IM中无相关性(P0.05),在胃癌中呈显著正相关(P=0.003)。结论:TGR5和CDX2在IM和胃癌组织中均显著上调,可能参与了IM和胃癌的发生发展。     

慢病毒载体沉默ADAMTS6人非小细胞肺癌稳转株的构建

目的:通过数据库预测ADAMTS6在非小细胞肺癌(Non-small-cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达及其与NSCLC患者临床预后的关系,构建ADAMTS6的shRNA干扰载体并建立ADMATS6的NSCLC稳定敲减细胞株。方法:通过Oncomine数据库分析ADAMTS6在NSCLC组织和肺正常组织的表达差异,通过Kaplan-Meier Plotter数据库分析ADAMTS6的表达水平与临床NSCLC患者预后关系,设计合成ADAMTS6的shRNA干扰序列,shRNA模板退火并与双酶切pGLV3-GFP线性化载体连接,转化挑取阳性菌落后送测序。干扰质粒进行病毒包装并感染人NSCLC细胞株NCI-H358,使用嘌呤霉素进行稳定敲减细胞株筛选。荧光观察慢病毒感染细胞密度,通过qRT-PCR和Western blot检测ADAMTS6的mRNA和蛋白水平的敲减效果。结果:Oncomine数据库分析结果显示NSCLC组织中ADAMTS6 mRNA表达较正常肺组织显著升高(P0.001);Kaplan-Meier Plotter数据库分析结果显示高表达ADAMTS6的NSCLC患者预后较低表达ADAMTS6的NSCLC患者差(P0.05);pGLV3-GFP载体双酶切线性化后与shRNA退火模板连接成功,测序结果正确。荧光观察显示慢病毒感染细胞密度在95%左右,通过qRT-PCR和Western blot检测ADAMTS6慢病毒干扰质粒已成功敲减ADAMTS6的m RNA和蛋白水平。结论:ADAMTS6的高表达可能与NSCLC患者的不良临床预后密切相关。本研究构建了ADAMTS6的慢病毒感染质粒,并成功建立NCI-H358稳定敲减细胞株,为进一步研究ADAMTS6在NSCLC中的作用及机制奠定了基础。     

PIG11、Caspase-3蛋白在胃癌中的表达及临床意义

目的:探讨PIG11、Caspase-3蛋白在胃癌中的表达及临床意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测80例胃癌组织、36例正常胃黏膜组织、30例肠上皮化生组织及31例异型增生组织中PIG11、Caspase-3蛋白的表达水平,并分析其表达与胃癌临床病理特征的关系及两者之间的相关性。结果:胃癌组织中PIG11、Caspase-3蛋白的阳性表达率均显著低于正常胃黏膜、肠上皮化生及异型增生组织(P0.01);PIG11、Caspase-3蛋白表达水平与胃癌的分化程度、临床分期、有无淋巴结转移及远处转移密切相关(P0.05),但与患者的年龄、性别及肿瘤的浸润深度无关(P0.05);PIG11、Caspase-3蛋白在胃癌组织中的表达呈正相关(r=0.859,P0.01)。结论:PIG11、Caspase-3蛋白在胃癌中明显表达下调,且与胃癌的分化程度、临床分期、有无淋巴结转移及远处转移密切相关,可能作为胃癌预后评估的参考指标。PIG11表达下调可能通过抑制Caspase-3的表达促进胃癌的发生和发展。     

The Suppressive Role and Aberrent Promoter Methylation of BTG3 in the Progression of Hepatocellular Carcinoma

Background

BTG3 (B-cell translocation gene 3) has been identified as a tumor suppressor and hypermethylation contributes to its down-regulation in some tumors, but its role in hepatocellular carcinoma (HCC) remain unknown. This study aimed to detect the expression and methylation status of BTG3 in HCC cell lines or tissues, and determine its function in HCC progression.

Methodology

The expression of BTG3 was detected in HCC cell lines and HCC tissue by real-time RT-PCR, Western blot or immunohistochemistry. The promoter methylation status of BTG3 was measured by using methylation-specific PCR in HCC cell lines. A series of assays were performed to evaluate the effect of BTG3 on proliferation, invasion and cell cycle transition in vitro.

Results

BTG3 expression was lower in HCC cell lines than in hepatocyte cell line LO2 (P<0.05). BTG3 was also down-regulated in HCC tissues. Its expression was positively correlated with differentiation and distant metastasis (P<0.05). Patients with lower BTG3 expression had shorter overall survival time (P=0.029). DNA methylation directed repression of BTG3 mRNA expression in HCC cell lines. BTG3 suppressed proliferation, invasion and induces G1/S cycle arrest of HCC cells in vitro.

Conclusion

Down-regulation of BTG3 due to the promoter hypermethylation is closely associated with proliferation, invasion and cell cycle arrest of HCC cells. It may be a novel prognostic biomarker for HCC patients.     

泛素相关蛋白样因子2在肝癌中的表达及意义

目的:探讨肝癌中泛素相关蛋白样因子2(UBAP2L)的表达水平与预后的关系及其对肝癌细胞侵袭、转移能力的影响。方法:挖掘oncomine数据库,提取UBAP2L在肝癌与正常组织转录水平的变化及相关临床资料,采用Kaplan-Meier法分析UBAP2L表达水平与肝癌患者预后的关系。采用实时定量PCR、Western blot检测HCCLM3、MHCC97H、Hep3B、Huh7肝癌细胞株及正常肝细胞LO2中UBAP2L mRNA及蛋白水平,免疫组织化学染色法检测本院80例肝癌组织与癌旁组织中UBAP2L的表达水平加以验证。通过慢病毒载体使UBAP2L高表达的肝癌细胞株HCCLM3表达下调,采用克隆形成和划痕实验检测UBAP2L对肝癌细胞增殖能力和侵袭、转移的影响。结果:UBAP2L在oncomine数据库大多数队列呈高表达。UBAP2L在肝癌细胞株中的mRNA和蛋白的表达水平显著高于正常肝细胞(P0.05)。肝癌组织中UBAP2L阳性、强阳性表达率高于癌旁组织(P0.05),下调UBAP2L表达可明显抑制HCCLM3肝癌细胞的克隆形成能力和运动能力(P0.05)。UBAP2L高表达组的中位生存时间与UBAP2L低表达组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:UBAP2L在肝癌组织中呈高表达,下调UBAP2L表达可抑制肿瘤增殖和侵袭、转移表型,其可能成为肝癌早期诊断的生物标志物和治疗的潜在靶点。     

m6A甲基化修饰识别蛋白YTHDF2在肝癌组织中的表达及临床意义

摘要 目的：探讨m6A甲基化修饰结合蛋白YTHDF2(YTH domain-containing family protein 2)在肝癌（Hepatocellular carcinoma, HCC）组织中的表达及临床意义。方法：1）采用Western blot和实时荧光定量PCR（Quantitative Real Time PCR, qRT-PCR）检测20对肝癌和癌旁组织中YTHDF2在蛋白和mRNA水平的表达情况。2）通过免疫组织化学（Immunochemistry, IHC）检测40对肝癌和癌旁组织芯片YTHDF2的表达情况,并以H-score评分法进行半定量分析。3）通过基因表达谱数据动态分析数据库GEPIA（http://gepia.cancer-pku.cn/）分析YTHDF2在肝癌组织中的表达及对患者生存预后的影响;通过肿瘤免疫评估资源数据库TIMER(https://cistrome.shinyapps.io/timer/)分析YTHDF2与肝癌免疫微环境的相关性。结果：相比于癌旁肝组织,YTHDF2在肝癌组织中蛋白和mRNA水平均显著高表达（P＜0.05）;GEPIA数据库分析验证：YTHDF2肝癌组织表达水平高于正常肝组织,且YTHDF2在肝癌不同分期中表达水平均高于正常肝组织（P=0.0206）,Stage III期最为明显;YTHDF2高表达患者的总体生存率（Overall Survival,OS）和无复发生存率（Disease Free Survival, DFS）均较差（P=0.00027和P=0.013）;TIMER数据库分析表明：YTHDF2在肝癌免疫微环境中与各类免疫细胞呈正相关（P＜0.05）,但肝癌患者的累积存活率不受免疫细胞的影响（P＞0.05）,YTHDF2高表达对患者的生存预后具有不良影响（P=0.007）。结论：YTHDF2在肝癌组织中显著高表达,且YTHDF2高表达水平对肝癌患者生存预后具有不良影响,YTHDF2可作为肝癌临床预后判断的分子标志物,为今后肝癌治疗靶点提供新的策略。