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摘要 目的:探讨m6A甲基化修饰结合蛋白YTHDF2(YTH domain-containing family protein 2)在肝癌(Hepatocellular carcinoma, HCC)组织中的表达及临床意义。方法:1)采用Western blot和实时荧光定量PCR(Quantitative Real Time PCR, qRT-PCR)检测20对肝癌和癌旁组织中YTHDF2在蛋白和mRNA水平的表达情况。2)通过免疫组织化学(Immunochemistry, IHC)检测40对肝癌和癌旁组织芯片YTHDF2的表达情况,并以H-score评分法进行半定量分析。3)通过基因表达谱数据动态分析数据库GEPIA(http://gepia.cancer-pku.cn/)分析YTHDF2在肝癌组织中的表达及对患者生存预后的影响;通过肿瘤免疫评估资源数据库TIMER(https://cistrome.shinyapps.io/timer/)分析YTHDF2与肝癌免疫微环境的相关性。结果:相比于癌旁肝组织,YTHDF2在肝癌组织中蛋白和mRNA水平均显著高表达(P<0.05);GEPIA数据库分析验证:YTHDF2肝癌组织表达水平高于正常肝组织,且YTHDF2在肝癌不同分期中表达水平均高于正常肝组织(P=0.0206),Stage III期最为明显;YTHDF2高表达患者的总体生存率(Overall Survival,OS)和无复发生存率(Disease Free Survival, DFS)均较差(P=0.00027和P=0.013);TIMER数据库分析表明:YTHDF2在肝癌免疫微环境中与各类免疫细胞呈正相关(P<0.05),但肝癌患者的累积存活率不受免疫细胞的影响(P>0.05),YTHDF2高表达对患者的生存预后具有不良影响(P=0.007)。结论:YTHDF2在肝癌组织中显著高表达,且YTHDF2高表达水平对肝癌患者生存预后具有不良影响,YTHDF2可作为肝癌临床预后判断的分子标志物,为今后肝癌治疗靶点提供新的策略。 相似文献
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为研究p38MAPKmRNA在斑马鱼卵母细胞发育中的表达变化,采用实时荧光定量PCR技术,检测p38MAPK的两个亚型p38α和p38β在不同发育阶段卵母细胞及卵母细胞体内成熟过程中的表达。研究显示,p38α和p38βmRNA在初级生长期(PG期)卵母细胞中表达量最低,p38αmRNA在卵黄发生早期(EV期)表达量最高,p38βmRNA在充分生长未成熟期(FG期)卵母细胞中表达量显著高于其他各期(p0.05)。在排卵前卵细胞体内成熟过程中,p38α和p38βmRNA在FG期未成熟卵母细胞中高水平表达,随后p38α和p38β均先下降,但在卵母细胞成熟后显著增加(p0.05)。上述结果提示,斑马鱼卵母细胞发育与p38MAPK的表达变化有关,p38MAPK信号通路在鱼类卵母细胞发育中发挥重要的作用。 相似文献
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里氏木霉和鸡腿菇利用秸秆共发酵产木质降解酶 总被引:2,自引:0,他引:2
为了更好地利用农业废弃物,提高其综合利用率,减少传统化学方法及秸秆焚烧过程造成的环境污染,实验对鸡腿菇、黑曲霉和里氏木霉3株产木质纤维素降解酶系的菌株进行混合平板产酶筛选,结果显示鸡腿菇和里氏木霉平板培养相容性良好,且产酶量高。在相容性实验的基础上,对鸡腿菇和里氏木霉的最优产酶条件进行了研究。在最优条件下:鸡腿菇和里氏木霉接种比例按5:2,接种时间间隔为12h,26oC、150r/min下,发酵3d产漆酶活力达3267.2U/mL,比单独发酵提高106%。 相似文献
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[目的]为了了解无机盐与米根霉L-乳酸代谢之间的关系,提高米根霉菌株RLC41-6发酵产L-乳酸的产率与质量,研究了ZnSO4浓度与菌株乳酸代谢和细胞内乳酸脱氢酶活性的关系.[方法]在米根霉培养基中加入不同浓度ZnSO4,经过36℃培养36 h后,应用HPLC-反相色谱法测定产物中的L-乳酸含量,并利用活性PAGE分析法测定细胞内乳酸脱氢酶的活性和组成.[结果]实验结果显示,ZnSO4对除LDH1之外的其它几条同工酶都有促进作用,尤其对LDH4,LDH5作用明显,当ZnSO4浓度大于0.02%时,LDH4,LDH5达到最大水平,同时高浓度的锌离子在体外抑制了LDH的活性.当ZnSO4浓度为0.02%时LDH酶活达到最大200 U/mL,HPLC图谱表明,此时发酵产物的只有L-乳酸,且产量达到最大137g/L,乳酸转化率为91%.[结论]Zn+会影响米根霉的乳酸代谢过程,并导致发酵过程中产物类型的变化,合适浓度的ZnSO4在米根霉代谢产乳酸的过程中,提高了乳酸脱氢酶LDH的表达,抑制丙酮酸进入苹果酸和富马酸途径,从而有利于提高葡萄糖到乳酸的代谢. 相似文献
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