野生型及启动子区突变的HPFHAγ基因在MEL细胞中的表达

研究了野生型Ａγ珠蛋白基因、中国型胎儿血红蛋白持续存在综合症（ＨＰＦＨ）Ａγ基因（启动子区─１９６Ｃ→Ｔ突变）及希腊型ＨＰＦＨＡγ基因（─１１７Ｇ→Ａ突变）在鼠红白血病（ＭＥＬ）ＧＭ９７９细胞中的表达。比较每个整合的Ａγ基因表达的ｍＲＮＡ量,─１９６Ｃ→Ｔ突变Ａγ基因未显示比野生型Ａγ基因明显增加的表达水平,而─１１７Ｇ→Ａ突变Ａγ基因在未分化的及ＨＭＢＡ或丁酸钠诱导分化的ＭＥＬＧＭ９７９细胞中的表达水平增加到野生型Ａγ基因相应水平的２．３倍至３．１倍。此结果提供了又一个实验证据,说明启动子─１１７Ｇ→Ａ突变是希腊型ＨＰＦＨ中胎儿Ａγ基因在成人中持续活跃表达的原因,这也为β地中海贫血和镰刀性贫血的基因治疗提供了新途径,即可以考虑用转移─１１７Ｇ→Ａ突变Ａγ基因的方法改善患者的贫血症状。     

鸡AChRγ亚基基因远上游增强子样作用依赖生肌因子

先前曾报告鸡ＡＣｈＲγ亚基基因５＇连接区－５３８／－２８８片段（含一对Ｅ盒子）与生肌调节因子（ｍｙｏｇｅｎｉｎ）的相互作用,为进一步观察ＤＮＡ－ｍｙｏｇｅｎｉｎ相互作用对γ基因转录激活功能的影响,利用瞬时表达体系研究了鸡ｎＡＣｈＲγ亚基基因５＇端－５３８／－２８８片段调控机能。ＣＡＴ分析表明：γ基因－５３８／－２８８片段可显著激活ｔｋ启动子在分化的Ｃ２Ｃ１２肌细胞中的转录活性,但不能激活在未分化Ｃ２Ｃ１２肌细胞中的转录活性。这种组织特异性转录激活作用与距离无关,因而是一个典型的增强子;－５３８／－２８８片段的增强子样作用既依赖于两毗邻Ｅ盒子的完整性,又依赖于ｍｙｏｇｅｎｉｎ等生肌调节因子的存在。强化表达ｍｙｏｇｅｎｉｎ可激活ｐＢＬＣＡＴ２－γ（－５３８／－４３３）和ｐＢＬＣＡＴ２－γ（－４３２／－２８８）（各含一个Ｅ盒子）在分化肌细胞中的表达,究竟是克隆片段中的独立Ｅ盒子对这种表达起贡献还是出现在克隆位点附近的反向Ｅ盒子（ＧＴＣＧＡＣ）或ｔｋ启动子中的另一个Ｅ盆子起作用？尚不十分清楚。     

人组织型纤溶酶原激活剂（t—PA）组合突变体FrGGl在CHO细胞中的…

为了得到ｔ－ＰＡ组合突体ＦｒＧＧｌ在ＣＨＯ细胞中的高效表达,将表达质粒筛选基因启动子上游的增强子（ｅｎｈａｎｃｅｒ）去除,构建了ＦｒＧＧｌ真核表达质粒ｐＺＬＦｒＧＧＩ。酶切线化后,采用大剂量ＤＮＡ电击介导法,转染ｄｈｆｒ基因缺陷型中仓鼠卵巢细胞系（ＣＨＯ－ｄｈｆｒ）。氨甲喋呤（ＭＴＸ）筛选转染细胞,混合加压,挑选克隆,在１×１０＾－７ｍｏｌ／ＬＭＴＸ压力下,获得表达水平达１５００～２５００ＩＵ／１     

多叶猴耳环──猴耳环属一新种

多叶猴耳环──猴耳环属一新种文和群（广西植物研究所分类研究室,桂林５４１００６）ＰＩＴＨＥＣＥＬＬＯＢＩＵＭＭＵＬＴＩＦＯＬＩＯＬＡＴＵＭ－ＡＮＥＷＳＰＥＣＩＥＳＯＦＰＩＴＨＥＣＥＬＬＯＢＩＵＭＦＲＯＭＧＵＡＮＧＸＩ,ＣＨＩＮＡＷｅｎＨｅｑｕｎ（Ｇｕ...     

细支气管肺泡细胞增生和细支气管肺泡细胞癌内生长因子和蛋白激酶C的表达

表皮生长因子（ＥＧＦ）、转化生长因子－α（ＴＧＦα）、表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）和蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）与细胞生长、增殖分化调节和细胞癌变有密切关系。作者用免疫组织化学方法检测了细支气管肺泡细胞增生（ＢＡＨ）和细支气管肺泡细胞癌（ＢＡＣ）的ＥＧＦ、ＴＧＦα、ＥＧＦＲ和ＰＫＣ表达。结果表明：ＢＡＣ中的ＥＧＦ、ＴＧＦα阳性率和阳性强度以及ＥＧＦＲ、ＰＫＣ阳性强度均明显高于ＢＡＨ。ＢＡＨ的重度不典型增生病例,其ＥＧＦ、ＴＧＦα、ＥＧＦＲ和ＰＫＣ均呈高表达。ＴＧＦα、ＥＧＦＲ和ＰＫＣ三者在ＢＡＣ和ＢＡＨ中的表达存在明显相关性。提示：ＴＧＦα及其受体ＥＧＦＲ和ＰＫＣ是细支气管肺泡细胞增生、恶性转化和肺泡癌细胞失控生长的重要因素。     

小麦灌浆后期雨后青枯逼熟的生理机制

小麦灌浆后期雨后青枯逼熟的生理机制刘兴坦朱启忠（山东菏泽师范专科学校,菏泽２７４０１５）卢皖黄善斌（山东菏泽地区气象局,菏泽２７４０００）ＰＨＹＳＩＯＬＣＧＩＣＡＬＭＥＣＨＡＮＩＳＭＯＦＬＡＴＥＲＷＨＥＡＴ’ＳＷＩＬＴＮＧＡＦＴＥＲＲＡＩＮＬｉｕＸ...     

黑龙江铜木蚜蝇雌性的描述

黑龙江铜木蚜蝇雌性的描述ＤＥＳＣＲＩＰＴＩＯＮＯＦＴＨＥＦＥＭＡＬＥＣＨＡＬＣＯＳＹＲＰＨＵＳ（ＸＹＬＯＴＯＭＩＭＡ）ＡＭＵＲＥＮＳＩＳ（ＳＴＡＣＫＥＬＢＥＲＧ）（ＤＩＰＴＥＲＡ：ＳＹＲＰＨＩＤＡＥ）￥ＨＥＪｉｌｏｎｇ;ＣＨＵＸｉｐｉｎｇ（Ｄｅｐａｒ...     

猕猴桃果实的生理生化特征

猕猴桃果实的生理生化特征魏玉凝,李曜东（中国科学院植物所,北京１０００４４）ＴＨＥＰＨＹＳＩＯＬＯＧＩＣＡＬＡＮＤＢＩＬＣＨＥＭＩＣＡＬＣＨＡＲＩＣＴＥＲＩＳＴＩＣＳＯＦＫＩＷＩＦＲＵＩＴ￥ＷｅｉＹｕ－ｎｉｎｇ;ＬｉＹａｏ－ｄｏｎｇ（Ｉｎｓｔｉｔｕｔ...     

人主动脉硫酸乙酰肝素蛋白聚糖对培养的人血管壁细胞生长的作用

通过培养的人主动脉平滑肌细胞（ｈＡＳＭＣ）及脐静脉内皮细胞（ｈＵＶＥＣ）,应用３Ｈ－ＴｄＲ参入、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析、逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）、放射免疫分析（ＲＩＡ）、和紫外比色法等技术观察了人主动脉中硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（ＨＳＰＧ）对ｈＡＳＭＣ和ｈＵＶＥＣＤＮＡ合成的作用及对血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）、ＰＤＧＦ受体、转化生长因子β（ＴＧＦ－β）、内皮素－１（ＥＴ－１）或碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）基因表达和肾素－血管紧张系统（ＲＡＳ）的影响,结果显示,ＨＳＰＧ明显抑制培养的ｈＡＳＭＣ基础的ＤＮＡ合成（ｃｐｍ值为：１０３８５±３２６３ｖｓ,２５５４１±６４２１,Ｐ＜０．０１）及外源性ＰＤＧＦ诱导的ＤＮＡ合成（ｃｐｍ值为：９８７８±１９４７ｖｓ．１３４８１±４４ｌ０,Ｐ＜０．０５）;抑制ＰＤＧＦＡ链、ＴＧＦ－Ｂｐ和ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达,提高ＰＤＧＦａ和β受体ｍＲＮＡ的表达;显著降低ｈＡＳＭＣ培养液中血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）的浓度和血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）的活性,推测ＨＳＰＧ抑制ＰＤＧＦＡ链、ＴＧＦ－β及ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达,降低ＡＣＥ活性及ＡｎｇⅡ浓度是其抑制ｈＡＳＭＣ增殖的重要机     

Mn-SOD与抗癌胚抗原单链抗体基因的融合及高效表达

将Ｍｎ－ＳＯＤ与抗癌胚抗原（ＣＥＡ）单链抗体基因（Ｓｃ－Ｆｖ ｇｅｎｅ）融合,重组到含Ｔ７启动子的表达载体ｐＥＴ－２２ｂ（＋）中,构建表达质粒ｐＥＴＭｎ－ＳＯＤ－ＳｃＦｖ,并转化大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）,进行高效表达,表达物占菌体可溶性总蛋白的２４％。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和蛋白质和迹图谱显示表达物分子量为４５ｋＤ与融合基因编码蛋白质的理论值相符。该蛋白质在大肠杆菌中为泌型表达有利于纯化。ＲＩＡ测定表     

大鼠卵巢绒毛膜促性腺激素受体在CHO中的表达和扩增

本文报道了利用二氢叶酸还原酶放大系统将大鼠ＬＨ／ｈＣＧ受体（记为Ｆ－ｈＣＧＲ）及其胞外肽段（记为Ｔ－ｈＣＧＲ）在中国苍鼠卵巢细胞（ＣＨＯ）中的表达。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明,Ｆ－ｈＣＧＲ为一条蛋白质带,其表观分子量为９２ｋｄ,而Ｔ－ｈＣＧＲ为３５ｋｄ和３７ｋｄ两条带。表达受体对其配基ｈＣＧ表现出高的亲合力,Ｆ－ｈＣＧＲ的解离常数为７×１０－９ｍｏｌ／Ｌ,Ｔ－ｈＣＧＲ为６．４×１０－９ｍｏｌ／Ｌ。表达Ｆ－ｈＣＧＲ的转染ＣＨＯ细胞可结合１２５Ｉ－ｈＣＧ,而表达Ｔ－ｈＣＧＢ者不结合１２５Ｉ－ｈＣＧ。这提示Ｆ－ｈＣＧＲ主要存在于细胞质膜表面上。表达Ｆ－ｈＣＧＲ的转染ＣＨＯ细胞能刺激。ｃＡＭＰ的形成,而表达Ｔ－ｈＣＧＲ者不能刺激ｃＡＭＰ形成。免疫荧光定位结果表明,Ｔ－ｈＣＧＲ主要分布于质膜的细胞质侧以及胞内其他一些细胞器膜上。用免疫亲和层析可以得到纯化的Ｔ－ｈＣＧＲ。     

中国伞滑刃线虫属─新纪录（真滑刃目：寄生滑刃科）

中国伞滑刃线虫属─新纪录（真滑刃目：寄生滑刃科）ＴＨＥＮＥＷＲＥＣＯＲＤＯＦＢＵＲＳＡＰＨＥＬＥＮＣＨＵＳＦＲＯＭＣＨＩＮＡ（ＡＰＨＥＬＥＮＣＨＩＤＡ：ＰＡＲＡＳＩＴＡＰＨＥＬＥＮＣＨＩＤＡＥ）￥ＹＩＮＧａｎ－ｌｉｕ;ＦＡＮＧＹｕ－ｓｈｅｎｇ（Ｄｅｐ...     

粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子／白细胞介素—3融合蛋白的表达研究

利用ＰＣＲ扩增得到粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）、白细胞介素－３（ＩＬ－３）完整基因片段,将其分别克隆ｐＧＥＭ－Ｔ构建成ＧＭ－ＣＳＦ／ＩＬ－３融合蛋白基因,ＤＮＡ序列与设计预期一致。将得到的融合蛋白基因克隆对７２ＲＮＡ聚合酶表达载体ｐＴ７ｚｚ,得到表达质粒ｐＦｕ,经转化至表达宿主Ｅ．ｃｏｌｉ ＢＬ２１（ＤＥ３）,在ＩＰＴＧ诱导下获得融合蛋白目的产物的直接表达。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳鉴     

转化生长因子－β对细胞外基质基因表达调节作用的研究进展

转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）是一类具有激素样活性的多肽生长因子,许多正常和转化细胞均可合成并分泌ＴＧＦ－β,ＴＧＦ－β既可刺激细胞的增殖,又可刺激细胞的分化,对细胞进行双向调节。细胞外基质（ＥＣＭ）对细胞的增殖和分化也具有控制作用,ＥＣＭ主要成份的ｍＲＮＡ表达可被ＴＧＦ－β诱导和调节,而且两者具有一定的相关性。提示ＴＧＦ－β可能是通过ＥＣＭ实现其对细胞的双向调节。     

抗结肠癌相关抗原单链抗基因的构建和表达

通过ＰＣＲ扩增和酶切分别得到抗结肠癌相关抗原抗体的重链可变区序列,轻链可变区序列及连接肽序列,将它们构建成为ＶＨ－ｌｉｎｋｅｒ－ＶＬ形式的单链抗体基因片段,并在大肠杆菌中进行了表达,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析结果表明,以ｐＣｏｍｂ３为载体,在大肠杆菌ＪＭ８３中,ｓｃＦｖ未获得有效表达,而以ｐＥＴ－２２ｂ（＋）为载体的ｓｃＦｖ在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中,３０℃诱导培养获得了高效表达,表达水平占全菌蛋白     

牛生长激素释放因子的融合表达及其产物的化学加工

通过寡核苷酸引导的定位突变,在人工全合成的第２７位为Ｉｌｅ的牛生长激素释放因子［Ｉｌｅ２７］ｂＧＲＦ（１－４４）ＯＨ基因的５＇端ＡＴＧ后插入Ｔｒｐ密码子序列,并分别了构建了Ｐｌ ｐｒｏｍｏｔｅｒ控制下、以β－半乳糖苷酶和ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ结合ＩｇＧ ｄｏｍａｉｎＢ、Ｃ为载体蛋白的融合型基因表达质粒ｐＢＬＥ３１０和ｐＢＬＰＡＥ２Ｄ,在大肠杆菌中得到高效表达。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析,表达产物β－Ｇａｌ     

重组人MCAF／GM－CSF融合蛋白表达及其生物学活性研究

利用ＰＣＲ技术和ＤＮＡ体外重组方法,把作为导向效应细胞到靶部位的单核细胞趋化激活因子（ＭＣＡＦ）和粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）进行基因融合,置于ｐＢＶ２２０载体的λＰＲＰＬ串联启动子下游,构建了ＳＤ序列与ＡＴＧ之间含有不同核苷酸组成的重组质粒ｐＭＧ０１、ｐＭＧ０２和ｐＭＧ０３。ｐＭＧ０１、ｐＭＧ０２和ｐＭＧ０３的翻译起始区都不存在稳定的二级结构,但ＤＨ５α（ｐＭＧ０２、ＤＨ５α（ｐＭＧ０３）的表达水平远远高于ＤＨ５α（ｐＭＧ０１）,ＤＨ５α（ＰＭＧ０１）几乎没有表达。表达产物经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测表明,它能分别与ＭＣＡＦ和ＧＭ－ＣＳＦ抗体发生特异反应。生物学活性测定表明,表达产物具有明显的单核细胞趋化活性和维持ｈＧＭ－ＣＳＦ依赖的ＴＦ１细胞生长的特性,说明ＭＣＡＦ和ＧＭ－ＣＳＦ的生物学功能是相容的．     

内皮素和bFGF对MC的促增殖作用及胰岛素的协同效应

采用３Ｈ－ＴｄＲ参入法,测定碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）、胰岛素和内皮素－１（ＥＴ－１）对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞（ＭＣ）增殖的影响,以及胰岛素与ｂＦＧＦ或ＥＴ－１促ＭＣ增殖的协同作用。结果表明,不同浓度的ｂＦＧＦ（５－２００ｎｇ／ｍｌ）和胰岛素（０．１－２．４Ｕ／ｍｌ）均显著升高ＭＣ的３Ｈ－ＴｄＲ参入值（ｃｐｍ值）（Ｐ＜０．０１）。ＥＴ－１对ＭＣ的ｃｐｍ值的影响依剂量不同呈现两种不同的效应,在１０－９－１０－７ｍｏｌ／Ｌ时,随着浓度的升高,ＭＣ的ｃｐｍ值明显升高（Ｐ＜０．０１）,并以１０－８ｍｏｌ／Ｌ作用最强;当升高到１０－６ｍｏｌ／Ｌ时,ＭＣ的ｃｐｍ值出现降低趋势。胰岛素与ｂＦＧＦ或低浓度ＥＴ－１（≤１０－８ｍｏｌ／Ｌ）共同作用于ＭＣ时,ＭＣ的ｃｐｍ值明显高于二者单独作用之和（Ｐ＜０．０１）,与高浓度ＥＴ－１（＞１０－７ｍｏｌ／Ｌ）共同作用于ＭＣ时,ＭＣ的ｃｐｍ值小于二者单独作用之和（Ｐ＞０．０５）。上述结果说明,胰岛素、ｂＦＧＦ和ＥＴ－１均能显著促进ＭＣ增殖;胰岛素与ｂＦＧＦ或低浓度的ＥＴ－１促ＭＣ增殖具有正协同作用,与高浓度ＥＴ－１呈现负协同作用。     

COMPARISON OF HEPATIC ULTRASONOGRAHIC CHANGES WITH ENZYMATIC HISTOCHEMICAL CHANGES IN OBSTRUCTION OF BILE DUCT

ＣＯＭＰＡＲＩＳＯＮＯＦＨＥＰＡＴＩＣＵＬＴＲＡＳＯＮＯＧＲＡＨＩＣＣＨＡＮＧＥＳＷＩＴＨＥＮＺＹＭＡＴＩＣＨＩＳＴＯＣＨＥＭＩＣＡＬＣＨＡＮＧＥＳＩＮＯＢＳＴＲＵＣＴＩＯＮＯＦＢＩＬＥＤＵＣＴＣＯＭＰＡＲＩＳＯＮＯＦＨＥＰＡＴＩＣＵＬＴＲＡＳＯＮＯ...     

热激蛋白的分子生物学研究进展

热激蛋白的分子生物学研究进展费云标,黄涛,舒念红,江勇（中国科学院发育生物研究所,北京１０００８０）ＡＤＶＡＮＣＥＳＯＦＭＯＬＥＣＵＬＡＲＢＩＯＬＯＧＹＯＮＨＥＡＴＳＨＯＣＫＰＲＯＴＥＩＮＳ￥ＦｅｉＹｕｎ－ｂｉａｏ;ＨｕａｎｇＴａｏ;ＳｈｕＮｉａｎ－...