联合固氮菌Alcaligen faecalis泌铵突变体离子束选育及鉴定

N+注入野生型菌株(Alcaligen faecalis 1.488),筛选出抗51.6mmol/L乙二胺的泌铵突变株EM1105,它以KNO3为氮源时,培养21h泌铵量可达到1.10mmol/L.研究了该突变株在不同氮源下的培养特性,推断为铵载体缺陷型.     

转座子Tn916对固氮螺菌Azospirillum brasilense的接合诱变及氨分 …

以携带质粒ｐＡＭ１２０（Ａｐ＾ｒ,Ｔｃ＾ｒ／Ｔｎ９１６）的大肠杆菌（Ｅ．ｃｏｌｉ ＣＧ１２０）为供体菌株,与受体菌巴西固氮螺菌采用膜接合法进行接合转移,在选择平板上得到具较高频率的接合子（１０＾－５／每个供体菌,选择四环素抗性）。从８４６株四环素抗性接合子中进一步用奈氏法筛选得到氨分泌突变株３株。在无氮培养基上,其氨分泌量可达７．５￣１４．０ｍｍｏｌ／Ｌ。用乙炔还原法分析氨分泌突变株在不同浓度氮源     

被孢霉MA—90发酵生产γ—亚麻酸的研究

本文研究了由被孢霉变株ＭＡ－９０生产了γ－亚麻酸的发酵条件,确定了最适碳源、氮源及Ｃ／Ｎ,初步建立了生产γ－亚麻酸的工艺条件．葡萄糖、蔗糖及天冬酰胺和尿素为最适碳、氮源。在Ｃ／Ｎ为２０／１,葡萄糖浓度为８０ｇ／Ｌ的条件下,油脂产量和油脂中γ－亚麻酸的含量分别为８．５ｇ／Ｌ和１４．１３％,γ－亚麻酸产量及生物量分别为１．．１５７ｇ／Ｌ和３１．２ｇ／Ｌ。后期适当降低培养温度和良好的通气条件均有利于γ－     

白细胞介素－1β对新生大鼠胰岛素分泌的作用及其机制分析

本实验采用分离培养的新生大鼠胰岛，观察了白细胞介素１β（ＩＬ－１β）和Ｎ￣Ｇ－甲基－Ｌ－精氨酸（ＮＭＭＡ，ＮＯ合成酶的竞争性阻断剂）对胰岛素分泌及对胰岛中ｃＧＭＰ水平和亚硝酸盐浓度的影响。结果如下：（１）ＩＬ－１β（５、１０、２０Ｕ／ｍｌ）能抑制基础的和由葡萄糖（２０ｍｍｏｌ／Ｌ）刺激的胰岛素分泌。ＩＬ－１β对葡萄糖刺激的胰岛素分泌的抑制作用呈明显的量效关系，抑制率分别为５３．％，６０．５％和７０．７％。（２）ＮＭＭＡ（０．５ｍｍｏｌ／Ｌ）能阻断ＩＬ－１β对葡萄糖刺激的胰岛素分泌的抑制作用。（３）ＩＬ－１β能增加胰岛内ｃＧＭＰ水平和亚硝酸盐浓度，而ＮＭＭＡ能阻断这一效应。以上结果表明，ＩＬ－１β能抑制新生大鼠胰岛β细胞的功能，这一作用可能是通过ＮＯ实现的。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇对K~＋刺激的小麦根质膜ATP酶活性、K~＋吸收、外渗及再分配的影响

１０－８ｍｏｌ／Ｌ的ＤＯＮ毒素加入小麦根质膜制剂中可促进Ｋ＋刺激的ＡＴＰ酶活力,１０－６ｍｏｌ／Ｌ开始呈抑制效应,抑制程度随ＤＯＮ浓度加大而提高。根尖（５ｃｍ）离体根段于０．５ｍｍｏｌ／Ｌ的ＫＣｌ中,１０－８ｍｏｌ／Ｌ的ＤＯＮ能促进根段Ｋ＋吸收,１０－６ｍｏｌ／Ｌ以上浓度则Ｋ＋吸收呈抑制,１０－２ｍｏｌ／Ｌ浓度下根段的净吸收为负值,表明组织中Ｋ＋大量外渗。根段置蒸馏水中６ｈ,４ｍｍｏｌ／Ｌ的ＤＯＮ即导致振段Ｋ＋渗漏。用ＤＯＮ处理整株小麦根,浓度在０．２５ｍｍｏｌ／Ｌ以上可促进Ｋ＋从植株其它部位向根运输,而浓度在８ｍｍｏｌ／Ｌ时即抑制Ｋ＋向根富集,且根内Ｋ＋明显渗漏。     

被孢霉W_（A－90）发酵生产γ－亚麻酸的研究

本文研究了由被抱霉变株ＭＡ－９０生产了γ－亚麻酸的发酵条件．确定了最适碳源、复源及Ｃ／Ｎ．初步建立了生产γ－亚麻酸的工艺条件。葡萄糖、蔗糖及天冬酰胺和尿素为最适碳、氮源。在Ｃ／Ｎ为２０／１,葡萄糖浓度为８０ｇ／Ｌ的条件下．油脂产量和油脂中γ－亚麻酸的含量分别为８．２ｇ／Ｌ和１４．１３％,γ－亚麻酸产量及生物量分别为１．１５７ｇ／Ｌ和３１．２ｇ／Ｌ。后期适当降低培养温度和良好的通气条件均有利于γ－亚麻酸的积累。     

南方红豆杉细胞培养合成紫杉醇诱导子浓度的优化

本文利用短期诱导实验考察了几种诱导子的最优诱导浓度,结果表明,在南方红豆杉细胞培养体系中分别加入１．０ｍｍｏｌ／Ｌ硝酸铈铵、０．０１ｍｍｏｌ／Ｌ硝酸银、０．１ｍｇ／Ｌ花生四烯酸、０．１ｍｇ／Ｌ水杨酸以及１０．０ｍｇ／Ｌ甲基苯莉酮酸最有利于紫杉醇产量的提高。     

高产油脂酵母菌选育及摇瓶发酵条件的研究

经紫外线和ＥＭＳ复合诱变选育出一株高产油脂的优良酵母菌株,命名为Ｌｉｐｏｍｙｃｅｓ．Ｓｔａｒｋｅｙｉ　ＨＬ。通过摇瓶培养,对各项与菌体产油脂相关的因素作了单因子实验,确定了摇瓶发酵培养的最佳产油脂条件：碳源,废糖液１６５．７ｍｌ／Ｌ;氮源,硫酸铵１．０８ｇ／Ｌ;Ｃ／Ｎ：６１：１;培养温度为２８℃;接种量１０％;发酵时间９６ｈ; ｐＨ５．０。最后可得油脂产量 ５．９ｇ／Ｌ;菌体生物量 １１．０ｇ／Ｌ;油脂含量 ５３．６％。对菌体内油脂组成进行了气相色谱与质谱分析,结果如下：软脂酸３３．２％,棕     

影响高山红景天细胞悬浮培养中细胞生长和红景天苷积累的几个…

高山红景天细胞悬浮培养过程中３ｍｇ·Ｌ＾－１６－ＢＡ,０．３ｍｇ·Ｌ＾－１ＮＡＡ,６０ｍｍｏｌ·Ｌ＾－１氮源、０．５￣１．２５ｍｍｏｌ·Ｌ－１ＫＨ２ＰＯ４和２０ｍｇ·Ｌ＾－１蛋白胨,较适合于细胞生长和红景天苷的积累。在适宜的接种量下细胞培养２４ｄ后,生物量达１４．０４ｇ·Ｌ＾－１,干细胞中红景天苷含量为５．６６ｍｇ·ｇ＾－１。     

不同钾水平对钾饥饿墨兰生长发育和生理的影响

墨兰钾饥饿两个月后,培养在低于１０ｍｍｏｌ／Ｌ的不同钾水平的营养液中．以比较各处理植株的生长发育、抗病和生理反应．结果表明：在正常生长状态下,墨兰体内钾含量高于氮和磷．Ｎ、Ｐ、Ｋ三者比例为６：１：９,因此栽培墨兰要重视钾肥．墨兰在缺钾（０ｍｍｏｌ／Ｌ）或低钾（０．１ｍｍｏｌ／Ｌ）条件下生长不良、花数少,叶片褐斑病较多;当供给较高钾含量（１、５或１０ｍｍｏｌ／Ｌ）时,植株生长良好,光合速率和呼吸速率亦高,根系活力较强,叶片生长快,花数多．褐斑病发病率低．作者认为,５ｍｍｏｌ／Ｌ钾水平的营养液较适合于墨兰生长发育．     

粪产碱菌nifH启动子与LacZ的融合基因构建及其表达调控

在ｐＲＫ２９０载体上将粪产碱菌固氮酶基因ｎｉｆＨ的启动子与报告基因ＬａｃＺ相融合,获得表达载体ｐＳＫ６,并转导到粪产碱菌Ａ１５０１菌株中,探讨了铵和氧对该启动子的表达调控．结果表明,粪产碱菌ｎｉｆＨ启动子仍受到铵和氧的调节．当铵浓度大于３ｍｍｏｌ／Ｌ时,其表达水平大幅度下降,但铵浓度高达４０ｍｍｏｌ／Ｌ,仍有很低水平表达．而且,带有巴西固氮螺菌ｎｉｆＨ∶ｌａｃＺ的粪产碱菌接合子在高铵条件下（４０ｍｍｏｌ／Ｌ）也有低水平表达．此外,氧对粪产碱菌的ｎｉｆＨ启动子有抑制作用,这在无铵条件下表现最为明显．     

固氮粪产碱菌谷氨酰胺合成酶的分离纯化及其特性

联合固氮细菌粪产碱菌（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓｆａｅｃａｌｉｓ）Ａ１５０１菌体经超声破碎后,无细胞粗提液以ＰＥＧ－６０００分级沉淀,丙酮沉淀,再经蓝琼脂糖（ＢｌｕｅＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６８）亲和层析分离、纯化。获得的纯谷氨酰胺合成酶（ＧＳ）在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和４－３０％梯度ＰＡＧＥ上均呈均一的一条带。ＧＳ亚基及整酶分子量分别为５５ｋＤ和６４５ｋＤ,亚基由４５６个氨基酸残基组成。ＧＳ的Ｋｍ值,在以Ｇｌｕ为氮源的介质中培养时分别为２０ｍｍｏｌ／Ｌ（Ｇｌｕ）,５０ｍｍｏｌ／Ｌ（ＡＴＰ）和４５ｍｍｏｌ／Ｌ（ＮＨ~＋_４）;在以ＮＨ~＋_４为氮源的介质中培养时则分别为７０ｍｍｏｌ／Ｌ（Ｇｌｕ）,４９ｍｍｏｌ／Ｌ（ＡＴＰ）和８０ｍｍｏｌ／Ｌ（ＮＨ~＋_４）,表明ＮＨ~＋_４培养下形成高度腺苷化的ＧＳ对Ｇｌｕ及ＮＨ~＋_４的亲和力有所下降。     

白细胞介素—1β对新生大鼠胰岛素分泌的作用及其机制分析

本实验采用分离培养的新生大鼠胰岛,观察了白细胞介素１β（ＩＬ－１β）和Ｎ＾Ｇ－甲基－Ｌ－精氨酸（ＮＭＭＡ,ＮＯ合成酶的竞争性阻断剂）对胰岛素分泌及对胰岛中ｃＧＭＰ水平和亚硝酸盐浓度的影响。结果如下：（１）ＩＬ－１β（５、１０、２０Ｕ／ｍｌ）能抑制基础的和由葡萄糖（２０ｍｍｏｌ／Ｌ）刺激的胰岛素分泌。ＩＬ－１β对葡萄糖刺激的胰岛素分泌的抑制作用呈明显的量效关系,抑制率分别为５３．４％,６０．５％和７     

LHRH—A2及无机离子促进草鱼脑垂体离体分泌GH的初步研究

用培养瓶（皿）培养法研究ＬＨＲＨ－Ａ２、Ｃａ＾２＋、Ｋ＾＋对草鱼脑垂体器官分泌ＧＨ的影响。结果表明，１ｎｍｏｌ／Ｌ、１０ｎｍｏｌ／Ｌ、１００ｎｍｏｌ／Ｌ和１０００ｎｍｏｌ／Ｌ的ＬＨＲＨ－Ａ２都能显著促进ＧＨ的分泌；随着Ｃａ＾２＋浓度（０．１、１、３ｍｍｏｌ／Ｌ）的增高ＧＨ的分泌增强，在１ｍｏｌ／Ｌ和３ｍｍｏｌ／Ｌ Ｃａ＾２＋条件下的ＧＨ分泌水平显著高于在０．１ｍｍｏｌ／Ｌ Ｃａ＾２＋条件下的ＧＨ分     

硝态氮和铵态氮对墨兰生长发育的影响

以无土栽培的方法研究不同氮水平的硝态氮和铵态氮对墨兰［Ｃｙｍｂｉｄｉｕｍｓｉｎｅｎｓｅ（Ａｎｄｒ．）Ｗｉｌｌｄ．］生长发育和某些生理特性的影响。１ｍｍｏｌ／Ｌ和１０ｍｍｏｌ／Ｌ的硝态氮和铵态氮处理都促进叶芽和叶片正常生长,前者似乎比后者好一些。５０ｍｍｏｌ／Ｌ的两种形态的氮均使叶片生长缓慢,尤其是铵态氮。１和１０ｍｍｏｌ／Ｌ硝态氮处理则正常开花,而５０ｍｍｏｌ／Ｌ则例外。铵态氮处理各种浓度均不形成花芽。建议墨兰营养生长期施用１ｍｍｏｌ／Ｌ的硝态氮或铵态氮,但生长后期则应施１—１０ｍｍｏｌ／Ｌ硝态氮,以利花芽分化。作者认为,墨兰生长缓慢与光合速率极慢和硝酸还原酶活性极低有关,墨兰开花与否和Ｅ／Ｎ比大小有关。     

双酶电极法测定L-苯丙氨酸的研究

本文以Ｃｌａｒｋ氧电极为基础,把水杨酸羟化酶和苯丙氨酸脱氨酶同时固定在氧电极的表面,制成了双酶生物传感器。在磷酸缓冲液中,水杨酸浓度为０．５ｍｍｏｌ／Ｌ,烟酰胺腺嘌呤二核甘酸（ＮＡＤ＾＋）的浓度为１．０ｍｍｏｌ／Ｌ,其响应电流的变化对应反池中Ｌ－苯丙氨酸的浓度在０－０．１５ｍｍｏｌ／Ｌ之内有良好的线性范围。     

胍基丁胺在离体豚鼠乳头肌的电生理效应

应用细胞内微电极技术,观察了胍基丁胺（ａｇｍａｔｉｎｅ,ＡＧＭ）对豚鼠乳头肌细胞的电生理效应。结果表明：（１）ＡＧＭ浓度依赖地缩短正常乳头肌动作电位的时程;（２）对部分去极化的乳头肌,ＡＧＭ（１ｍｍｏｌ／Ｌ）除缩短动作电位时程外,还抑制动作电位零相最大上升速度,并降低其幅值和超射值;（３）预先应用一氧化氮合酶抑制剂ＬＮＡＭＥ（０５ｍｍｏｌ／Ｌ）,不能影响ＡＧＭ（１ｍｍｏｌ／Ｌ）的电生理效应;（４）预先应用咪唑啉受体（ｉｍｉｄａｚｏｌｉｎｅｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＩＲ）和α２肾上腺素能受体（ａｌｐｈａ２ａｄｒｅｎｅｒｇｉｃｒｅｃｅｐｔｏｒ,α２ＡＲ）拮抗剂ｉｄａｚｏｘａｎ（０１ｍｍｏｌ／Ｌ）,则可完全阻断ＡＧＭ（１ｍｍｏｌ／Ｌ）的电生理效应。以上结果提示,ＡＧＭ对乳头肌的电生理效应似由α２ＡＲ和ＩＲ介导,并与胞浆内Ｃａ２＋减少有关。     

微生物发酵合成L—缬氨酸—15N

采用含有稳定同位素１５Ｎ－硫铵为主要氮源的专用发酵培养液配方和相应的工艺条件,在国内首次微生物直接发酵研制成Ｌ－缬氨酸－１５Ｎ高丰度精制产品。产品１５Ｎ丰度９７．６８％,反比原料１５Ｎ－硫铵丰度下降０．５３％,Ｌ－缬氨酸－１５Ｎ产酸率最高达４％以上（未校正）。每克１５Ｎ－硫可得到１克以上的Ｌ－缬氨酸－１５Ｎ（分析值）提取精制收率平均为８０－９０％（单程）,最高达到９５％以上（二次提取）。实际每克１     

芽孢杆菌M50产生β—甘露聚糖酶的条件研究

从土壤中分离到９株产生β－甘露聚糖酶的芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．）。Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．Ｍ５０２５０ｍＬ三角瓶摇瓶培养试验,以４％的魔芋粉为碳源,１．０％（ＮＨ４）２ＳＯ４为氮源,０．３５％Ｎａ２ＣＯ３,３０～３４℃培养６０ｈ产酶达到高峰。酶活力为１８０～２２０ｕ／ｍＬ。１００Ｌ罐发酵,在３０～３２℃,１：０．７５ｖｖｍ通气量,２００ｒ／ｍｉｎ条件下,发酵液酶活力高达３３０ｕ／ｍＬ。     

玉米赤霉烯酮单克隆抗体酶联免疫测定方法的建立及初步应用

用ＺＥＮ－ＢＳＡ人工抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ鼠,经融合,筛选和克隆化得到可稳定可泌抗ＺＥＮ单克隆抗体的杂交瘤细胞株ＺＥＮ－１Ｃ６。ＺＥＮ－１Ｃ６属ＩｇＧ１,纯化腹水抗体效价为１０＾－５,与５种衍生物的交叉反应系数为０．１６～１．２０％,用ＺＥＮ－１Ｃ６建立了检测食品（玉米,小麦,大米）中玉米赤霉烯酮的ＣＩＥＩＡ法。该法检测纯毒素的线性范围为５～１０００ｎｇ／ｍｌ,最低检出浓度为０．１ｎｇ／ｍｌ。平均回