丝裂素活化的蛋白激酶在双歧杆菌预防大肠癌中的作用

目的:从信号转导这一层次探索双歧杆菌预防大肠癌生长的机制.方法:以大肠癌裸鼠移植瘤为动物模型,预先用青春型双歧杆菌注射于裸鼠腹腔,然后以激光共聚焦显微镜检测大肠癌移植瘤组织丝裂素活化的蛋白激酶(MAPK)家系中的ERK1/2、JNK和p38的含量.结果:双歧杆菌预防组大肠癌组织ERK1/2的平均荧光强度明显低于肿瘤对照组(P＜0.01),而JNK和p38的平均荧光强度在两组间差异无显著性(P＞0.05).结论:青春型双歧杆菌通过抑制ERK1/2的活化来预防大肠癌的生长.     

双歧杆菌预防大肠癌生长的信号转导机制

目的:从信号转导这一层次探索青春型双歧杆菌预防大肠癌生长的机制.方法:以大肠癌裸鼠移植瘤为动物模型,用膜结合法和免疫组化分别测定了大肠癌组织蛋白酪氨酸激酶(PTK)的含量以及NF-κB的表达.结果:双歧杆菌预防组大肠癌组织PTK的活性以及NF-κB的阳性细胞密度均明显低于肿瘤对照组(P＜0.01).结论:青春型双歧杆菌体内预防大肠癌生长的途径之一为降低其PTK的活性,同进抑制NF-κB的活化.     

双歧杆菌对实验性大肠癌诱导型一氧化氮合酶表达的影响

目的:用免疫组化法观察大肠癌移植瘤诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达。方法:以大肠癌裸鼠移植瘤为动物模型,将青春型双歧杆菌注射于裸鼠腹腔。结果:显示双歧杆菌注射组大肠癌移植瘤iNOS的表达率、表达强度和阳性细胞数量均显著高于肿瘤对照组(P<0.01)。结论:青春型双歧杆菌能增强大肠癌移植瘤iNOS的蛋白表达水平。它的表达可能介导了双歧杆菌诱导大肠癌移植瘤细胞的凋亡。     

双歧杆菌预防大肠癌生长的凋亡途径

目的探索青春型双歧杆菌预防大肠癌生长有凋亡的途径。方法首先建立大肠癌裸鼠移植瘤动物模型,然后以免疫组化法检测大肠癌裸鼠移植瘤组织caspase-3基因的蛋白表达水平。结果双歧杆菌预防组大肠癌Caspase-3的阳性细胞密度以及表达率明显高于肿瘤对照组（P〈0.01）。结论青春型双歧杆菌可通过上调caspase-3基因的蛋白表达来预防大肠癌的生长。     

血管形成在双歧杆菌预防大肠癌生长中的作用

目的 从血管形成角度探索青春型双歧杆菌预防大肠癌生长的途径。方法 建立大肠癌裸鼠移植瘤模型,以免疫组化法检测大肠癌组织血管内皮生长因子（VEGF）的蛋白表达水平及其微血管密度（MVD）。结果 双歧杆菌预防组大肠癌VEGF的阳性细胞密度及MVD的数量均明显低于肿瘤对照组（P〈0．01）。结论 青春型双歧杆菌能下调大肠癌VEGF的表达,进而抑制其血管形成,这可能是它预防大肠癌生长的途径之一。     

蛋白激酶C在双歧杆菌预防大肠癌生长中的作用

目的:从信号分子蛋白激酶C(PKC)这一角度探索青春型双歧杆菌预防大肠癌生长的途径.方法:建立大肠癌裸鼠移植瘤模型,用激光共聚焦显微镜测定大肠癌组织PKC α、βⅠ、βⅡ、γ、ε和ζ的含量.结果:荷瘤鼠经双歧杆菌预先处理后,其大肠癌组织PKC α和βⅡ的平均荧光强度明显低于肿瘤对照组(P＜0.01),而PKC βⅠ、γ、ε和ζ的平均荧光强度在两组间差异无显著性(P＞0.05).结论:青春型双歧杆菌体内可通过降低PKCα、βⅡ的活性来预防大肠癌的生长.     

原位末端标记技术观察双歧杆菌诱导实验性大肠癌的凋亡

本文以大肠癌裸鼠移植瘤为动物模型,将实验分为双歧杆菌注射组以及肿瘤对照组,用原位末端标记法观察了移植瘤组织的凋亡细胞百分率。结果显示：双歧杆菌注射组大肠癌移植瘤的凋亡细胞百分率为２６４２８±１８６２,而对照组则为２０６２±８８０,两者比较具有显著的统计学意义（Ｐ＜０００１）。提示青春型双歧杆菌可诱导大肠癌组织的凋亡,这可能是其抑瘤机理的一个方面     

双歧杆菌对实验性大肠癌PCNA和bcl-2表达的影响

目的：观察青春型双歧杆菌对大肠癌移植瘤增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）和ｂｃｌ－２基因蛋白表达水平的影响。方法：以大肠癌裸鼠移植瘤为动物模型,用免疫组化法。结果：显示双歧杆菌注射组大肠癌移植瘤ＰＣＮＡ阳性细胞密度以及ｂｃｌ－２蛋白表达率、表达强度、阳性细胞密度均显著低于肿瘤对照组（Ｐ＜０．０１）。结论：青春型双歧杆菌能明显降低大肠癌的增殖活性,同时使其ｂｃｌ－２基因的表达下调。     

双歧杆菌的完整肽聚糖对实验性大肠癌NF-κB和IκB α的影响

目的 :探索分叉双歧杆菌的完整肽聚糖 (WPG)的体内抑瘤途径。方法 :以激光共聚焦显微镜和免疫组化检测了大肠癌裸鼠移植瘤IκBα的含量以及NF κB的活化状况。结果 :大肠癌裸鼠移植瘤经WPG处理后 ,其IκBα的平均荧光强度明显高于肿瘤对照组 (P <0 0 1) ;而NF κB的活化状态则相反 ,WPG注射组大肠癌NF κB的阳性细胞密度显著低于肿瘤对照组 (P <0 0 1)。结论 :分叉双歧杆菌的WPG体内能明显抑制大肠癌IκBα的降解 ,最终阻抑NF κB的活化。     

双歧杆菌对实验性大肠癌凋亡促进基因表达的影响

目的：探讨青春型双歧杆菌体内诱导大肠癌裸鼠移植瘤细胞凋亡的具体途径。方法：以免疫组化法检测大肠癌移植瘤细胞凋亡促进基因bad和Caspase-3基因的蛋白表达率和阳性细胞密度。结果：双歧杆菌注射组大肠癌移植瘤细胞凋亡促进基因bad和Caspase-3基因的蛋白表达率以及阳性细胞密度均显著于肿瘤对照组。结论：双歧杆菌可通过促进bad和Caspase-3基因的表达,最终诱导大肠癌的凋亡。     

FOS／JUN介导佛波酯对内皮素基因表达的诱导作用

利用凝胶电泳迁移率改变实验、RNA印迹和蛋白质印迹分析分别检查了c-jun抗体对内皮素-1(ET-1)基因AP-1位点与核蛋白结合的影响及肿瘤促进剂佛波酯(TPA)对c-fos/c-jun基因表达的作用.结果发现,c-jun抗体可使AP-1位点-核蛋白复合物的电泳迁移率发生改变,TPA显著促进c-fos/c-jun基因表达和血管内皮细胞的AP-1结合活性.实验表明,TPA对ET-1基因表达的诱导作用是通过促进AP-1转录因子c-fos/c-jun合成来介导的.     

Induction of early response genes in trypsin inhibitor-induced pancreatic growth

Endogenous CCK release induced by a synthetic trypsin inhibitor, camostat, stimulates pancreatic growth; however, the mechanisms mediating this growth are not well established. Early response genes often couple short-term signals with long-term responses. To study their participation in the pancreatic growth response, mice were fasted for 18 h and refed chow containing 0.1% camostat for 1-24 h. Expression of 18 early response genes were evaluated by quantitative PCR; mRNA for 17 of the 18 increased at 1, 2, 4, or 8 h. Protein expression for c-jun, c-fos, ATF-3, Egr-1, and JunB peaked at 2 h. Nuclear localization was confirmed by immunohistochemistry of c-fos, c-jun, and Egr-1. Refeeding regular chow induced only a small increase of c-jun and none in c-fos expression. JNKs and ERKs were activated 1 h after camostat feeding as was the phosphorylation of c-jun and ATF-2. AP-1 DNA binding evaluated by EMSA showed a significant increase 1-2 h after camostat feeding with participation of c-jun, c-fos, ATF-2, ATF-3, and JunB shown by supershift. The CCK antagonist IQM-95,333 blocked camostat feeding-induced c-jun and c-fos expression by 67 and 84%, respectively, and AP-1 DNA binding was also inhibited. In CCK-deficient mice, the maximal response of c-jun induction and AP-1 DNA binding were reduced by 64 and 70%, respectively. These results indicate that camostat feeding induces a spectrum of early response gene expression and AP-1 DNA binding and that these effects are mainly CCK dependent.