金耳子实体体外抗肿瘤和免疫活性部位的筛选研究

为系统地筛选金耳子实体的活性部位,本论文首次采用系统溶剂法分别用氯仿、乙酸乙酯和乙醇等极性不同的有机溶剂依次提取,残渣风干后再分别用冷水(80℃)、热水(100℃)、3%草酸铵和5%氢氧化钠依次提取,并对各提取物进行了体外抗肿瘤和免疫活性的测试。体外抑制肿瘤细胞增殖模型试验结果表明,氯仿提取物对肿瘤细胞株L1210和SW 620的抑制作用效果最好(P<0.05);小鼠脾淋巴细胞的体外免疫增殖试验结果表明,冷水提取物和热水提提取物的刺激小鼠脾淋巴细胞的增殖活性相当,仅次于氢氧化钠提取物的活性,草酸铵提取物的活性最差(P<0.05)。     

纳豆激酶的纯化及活力测定

利用SephadexG—100s柱凝胶层析法从纳豆菌（BacillusNatto）提取液中分离纯化出具有体外活性的纳豆激酶,并通过纤维蛋白平板法测定其纤溶活力,发现其具有较强的促进纤维凝块溶解的作用。     

三七皂苷Rg1对tPA和PAI-1活性的调节作用

探讨三七皂苷Rg1对组织型纤溶酶原激活物(tPA)和纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)活性的调节作用。运用发色底物方法测定三七皂苷Rg1在体外和静脉注射对家兔血浆纤溶酶原激活物(tPA)和血浆或血小板释放的纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)水平的影响。结果表明,三七皂苷Rg1在体外呈浓度依赖性明显抑制血浆PAI-1活性,同时提高血浆tPA活性;30和60 mg/kg的三七皂苷Rg1静脉注射显著抑制血浆PAI-1活性,提高血浆tPA活性,同时降低凝血酶激活的血小板所释放的PAI-1水平。本实验提示三七皂苷Rg1能抑制PAI-1活性,同时升高tPA活性可能是其抗血栓作用的分子机制之一。     

一株产纤溶酶菌株的分离、鉴定及其酶活特征的初步研究

[目的]分离筛选并鉴定产纤溶酶的菌株.[方法]采用血粉培养基富集,琼脂糖-纤维蛋白平板筛选,从自然界中分离筛选出一株产纤溶活性物质的菌株.通过形态学特征、生理生化特征研究,并结合16S rRNA基因序列分析及分子系统发育树的构建结果,确定菌株的种类.[结果]从自然界分离筛到一株产纤溶酶的菌株EF608,经鉴定该菌株为粪肠球菌(Enterococcus faecalis). SDS-PAGE和纤维蛋白自显影表明该纤溶酶的分子量为37 kD,最适反应温度和pH分别为35℃和7.5,EDTA能完全抑制其纤溶活性,而PMSF对其活性无抑制作用.菌株EF608发酵液不仅可以直接水解纤维蛋白,而且具有体外溶栓的作用,对血红细胞没有溶解作用.[结论]筛选到一株具有纤溶活性的粪肠球菌——EF608,为获取新型纤溶酶提供了一种的新的菌源.     

可口革囊星虫体内纤溶酶的初步研究

目的从可口革囊星虫中寻找到纤溶酶,并对其进行初步研究。方法采用匀浆、抽提离心、Sephacryl S-300凝胶过滤等方法对可口革囊星虫纤溶酶初步分离,用纤维蛋白平板法和合成发色底物法检测其纤溶活性,并用该酶进行体外溶血凝块实验。结果可口革囊星虫内脏中存在纤溶酶。此酶既直接降解纤维蛋白又间接激活纤溶酶原,它对体外血凝块有明显溶解作用。结论可口革囊星虫内脏中存在着一种既具直接降解纤维蛋白作用又具激活纤溶酶原作用的纤溶酶。     

豆豉抗栓作用的研究

对豆豉提取物进行了哈白兔体内体外溶栓、抗凝试验,分别以蚓激酶和尿激酶按大、中、小剂量组作对照实验,均有显著的溶解血栓功能．另外,对豆鼓提取物纤溶活性、纤维蛋白溶酶原激活活性的测定及溶解天热血块、凝血时间影响的药理学试验,结果证明豆鼓提取物对家兔的动脉血栓形成有抑制作用和溶解血栓作用。     

广西沿海裸体方格星虫纤维蛋白溶解酶的研究

采用离心、硫酸铵分级盐析、离子交换、凝胶过滤层析等方法进行分离纯化,从裸体方格星虫内脏得到纤维蛋白溶解酶(纤溶酶),SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳测定为单一组分,相对分子质量为33250;酶学分析结果最适反应温度约为45℃,最适反应pH值为7.5 Ba2+离子对该酶活力有一定的抑制作用,而Mg2+、Ca2+、K+、Na+和Ag+不影响该酶的活性。裸体方格星虫纤溶酶纤溶活性完全被苯甲基磺酰氟(PMSF)抑制,为丝氨酸蛋白酶;此外,裸体方格星虫纤溶酶具有直接溶解纤维蛋白和激活纤溶酶原的双重作用,对预防和治疗血栓性疾病具有一定的药用价值。     

豆鼓抗栓作用的研究

对豆鼓提取物进行了哈白兔体内体外溶栓、抗凝试验,分别以蚓激酶和尿激酶按大、中、小剂量组作对照实验,均有显著的溶解血栓功能。另外,对豆鼓提取物纤溶活性、纤维蛋白溶酶原激活活性的测定及溶解天然血块、凝血时间影响的药理学试验,结果证明豆鼓提取物对家兔的动脉血栓形成有抑制作用和溶解血栓作用。     

华广虻肠道溶纤活性蛋白的纯化和性质(英文)

经过 75 %饱和度硫酸铵沉淀、SephadexG 75凝胶过滤层析、Lys Sepharose 4B亲和层析和电泳制备洗脱 ,从华广虻 (TabanusamaenusWalker)腹部组织匀浆液中分离纯化出分子量约为 6 7KD的溶纤活性蛋白TAFP。经纤维蛋白平板测定表明 ,TAFP不仅具有纤溶酶作用 ,还具有激活纤溶酶原的作用 ;通过三肽生色底物测定发现 ,TAFP能分解纤溶酶原激活剂的生色底物—ChromozymUK及S 2 2 88。还能水解胰蛋白酶专一底物Bz Phe Val Arg NA及CBZ Gly Pro Arg NA ,表明TAFP具有类胰蛋白酶活性 ,专一水解精氨酸形成的酰胺键 (或肽键 )。TAFP无胰凝乳蛋白酶活性     

具有纤溶活性作用的海洋真菌代谢产物的分离与菌株鉴定

本文旨在分离具有纤溶活性作用的化合物和鉴定产生纤溶活性化合物的菌株FG216的种属分类。以马铃薯蔗糖培养基为种子培养基,改良查氏培养基为发酵培养基对菌株进行发酵培养,用甲醇作为提取溶剂,通过半制备型高效液相色谱从真菌FG216的1 L发酵液中分离和精制了12 mg纤溶活性化合物,该纤溶活性化合物在纤溶酶原和单链尿激酶性纤溶酶原激活剂相互活化反应体系中添加10μg/mL活性最高。对FG216菌株rDNA的ITS基因(ITS-5.8 S rDNA)进行PCR扩增、测序,从GenBank获取相似序列,通过序列比对分析和系统发育分析表明菌株FG216与Stachybotrys longispora同源性最高。从分离的海洋微生物葡萄穗霉属菌株FG216分离得到的纤溶活性化合物具体促进纤溶酶原和单链尿激酶性纤溶酶原激活剂相互活化的作用。     

In vitro and in vivo evaluation of antioxidant activity of Trichosanthes cucumerina aerial parts

The present study was conducted to determine whether aerial parts of Trichosanthes cucumerina extracts can exert significant antioxidant activity. The antioxidant activity of a hot water extract (HWE) and a cold ethanolic extract (CE) of T. cucumerina aerial parts was evaluated by assessing its (a) radical scavenging ability and prevention effect of lipid peroxidation in vitro, and (b) effects on lipid peroxidation and antioxidant enzyme activities, in vivo.In vitro antioxidant assays (DPPH, TBARS and carotene-linoleic acid assays) clearly demonstrated the antioxidant potential of HWE and CEE. Moreover, HWE increased SOD: by 91.2% and GPX by 104.4% while CEE increased SOD: by 115.5% and GPX by 96.4%) in CCl4-induced rats. Treatments with HWE and CE prevented the accumulation of lipid peroxidation products by 30.5% and 33.8%, respectively, in liver tissues compared to the rats exposed only to CCl4. In conclusion, the present investigation demonstrates for the first time that components in T. cucumerina aerial parts can exert significant antioxidant activity in vivo and in vitro.     

不同植物药提取物对灵芝细胞生长和胞内三萜产物形成的影响

研究了不同植物药的水提和醇提物对灵芝深层发酵过程中菌丝量和胞内三萜产量的影响。将不同植物药的水提物和醇提物分别加入到发酵基础培养基中,培养7d后检测灵芝生物量和胞内三萜含量。结果表明,金银花和枸杞子水提物添加浓度为100mg/L时,可促进灵芝细胞的生长（p＜0.05）。连翘水提物对灵芝生长和胞内三萜的形成都有显著促进作用,当连翘水提物浓度为400mg/L时,胞内三萜产量从对照的（192.54±8.99）mg/L提高到（302.52±3.79）mg/L。金银花和枸杞子醇提物浓度为200mg/L时能显著促进灵芝细胞生长;枸杞子醇提物在同样浓度下还能促进灵芝胞内三萜的形成。但板蓝根和银杏叶水提物和醇提物都对灵芝的细胞生长和胞内三萜形成有较强的抑制作用。     

超声提取和超声水解法从野葛根中提取纯化葛根素和大豆苷元

采用超声法从野葛根中提取葛根异黄酮,再将提取物在盐酸水溶液中超声水解结合有机溶剂萃取法从野葛根中分离纯化葛根素和大豆苷元。葛根素收得率为1．2％,纯度为97．8％;大豆苷元收得率为0．5％,纯度为98．2％。超声法从野葛根中提取分离葛根异黄酮活性成分葛根素和大豆苷元具有省时、节能、提取率和产品纯度高的优点。     

金银花配方颗粒、标准汤剂含量测定及指纹图谱研究

本文主要为金银花配方颗粒的质量评价提供依据,并建立金银花配方颗粒、标准汤剂含量测定及HPLC指纹图谱的研究方法。主要采用HPLC法测定金银花饮片、标准汤剂、配方颗粒绿原酸、木犀草苷含量,建立三者指纹图谱共有模式。结果显示金银花饮片、标准汤剂、配方颗粒中绿原酸、木犀草苷含量差异较大;分别建立金银花饮片、标准汤剂、配方颗粒的指纹图谱;金银花配方颗粒HPLC指纹图谱中的12个共有峰均可在标准汤剂中追踪到,有11个可以在饮片中得到追踪,并指认出绿原酸、芦丁、木犀草苷3种成分。表明所建立的定性、定量分析方法简便,准确度高,专属性强,对金银花配方颗粒的鉴定及质量控制具有指导意义和参考价值。     

一种简便方法从野葛根中提取纯化葛根异黄酮

采用超声法70%乙醇为溶剂从野葛根中提取葛根异黄酮,将其以水为溶剂结合盐析法进行纯化,并且利用分光光度法和HPTLC法分别对超声提取物和纯化的葛根异黄酮产品中总黄酮和葛根素的含量进行了测定.结果表明以70%乙醇为溶剂超声萃取30 min提取葛根异黄酮和纯化葛根异黄酮产品的产率分别为17.8%和4.9%,异黄酮含量分别为42.55%和91.02%,葛根素含量分别为19.54%和67.15%.该方法从野葛根中提取纯化异黄酮具有省时、节约能源、操作方法简便和总异黄酮产品纯度高的优点.     

广西广义山蚂蝗属部分种类的核型及染色体数目报道

本文分析了广义山蚂蝗属６种１变种的核型,并报道了９种１亚种的染色体数目。假地豆Ｄｅｓｍｏｄｉｕｍｈｅｔｅｒｏｃａｒｐｏｎ（Ｌ．）ＤＣ．,伏毛假地豆Ｄ．ｈｅｔｅｒｏｃｏｒｐｏ。（Ｌ．）ＤＣ．ｖａｒ．ｓｔｒｉｇｏｓｕｍｖａｎＭｅｅｕｗｅｎ,单叶假地豆Ｄ．ｒｕｂｒｕｍ（Ｌｏｕｒ．）ＤＣ．．金钱草Ｄ．ｓｔｙｒａｃｉｆｏｌｉｕｍ（Ｏｓｂｅｃｋ．）Ｍｅｒｒ．及假木豆Ｄｅｎｄｒｏｌｏｂｉｕｍｔｒｉａｎｇｕｌａｒｅ（Ｒｅｔｚ．）Ｓｃｈｉｎｄｌ．的核型均为Ｋ（２ｎ）＝２２＝２２ｍ,属１Ａ类型．但它们的染色体相对长度变化范围有一定的差异,假木豆的较大,假地豆的较小。舞草Ｃｏｄｏｒｉｏｃａｌｙｘｍｏｔｏｒｉｕｓ（Ｈｏｕｔｔ．）Ｏｈａｓｈｉ和圆叶舞草Ｃ．ｇｙｒｏｉｄｅｓ（Ｒｏｘｂ．ｅｘＬｉｎｋ．）Ｈａｓｓｋ．的核型为Ｋ（２ｎ）＝２２＝２２ｍ,有的细胞可见随体染色体,属１Ｂ类型．根据核型资料比较．作者发现狭义的舞草属比狭义的山蚂螟属和假木豆属较为进化。本文还报道大叶山蚂蝗ＤｅｓｍｏｄｉｕｍｌａｘｉｆｌｏｒｕｍＤＣ,波叶山蚂蝗Ｄ．ｓｅｑｕａｘＷａｌｌ．绒毛山蚂蝗Ｄ．ｖｅｌｕｔｉｎｕｍ（Ｗｉｌｌｄ．）ＤＣ,异叶山绿豆Ｄ．ｈｅｔｅｒｏｐｈ?     

Macrofilaricidal and microfilaricidal effects of Neurolaena lobata, a Guatemalan medicinal plant, on Brugia pahangi

Twelve extracts of 11 Guatemalan medicinal plants were initially screened in vitro for potential macrofilaricidal activity against Brugia pahangi, a lymphatic dwelling filarial worm, using concentrations from 125 to 1000 microg ml(-1) of each extract that could be dissolved in the culture medium. Of 12 extracts used, the ethanol extract of leaves of Neurolaena lobata showed the strongest activity against the motility of adult worms. Subsequently, the extract of N. lobata was extensively examined in vitro for macro- and micro-filaricidal effects using a series of concentrations of 500, 250, 100, 50 and 10 microg ml(-1). The effects were assessed by worm motility, microfilarial release by female worms and a MTT assay. The effect on the motility of adult worms was observed in a concentration- and time-dependent manner. The time required to stop motility of both sexes of adult worms was 6 h at 500 microg ml(-1), 24 h at 250 microg ml(-1), and 3 days for females and 4 days for males at 100 microg ml(-1). The movement of females ceased at 4 days at a concentration of 50 microg ml(-1) whereas the motility of males was only reduced. The loss of worm's viability was confirmed by the MTT assay and was similar to the motility results. These concentrations, including 10 microg ml(-1), prevented microfilarial release by females in a concentration- and time-dependent manner. Concentrations higher than 100 microg ml(-1) even induced mortality of the microfilariae. The present study suggested that the ethanol extract of Neurolaena lobata has potential macro- and micro-filaricidal activities.     

Isoflavanones and their O-glycosides from Desmodium styracifolium

Two isoflavanones (5,7-dihydroxy-2',3',4'-trimethoxy-isoflavanone and 5,7-dihydroxy-2'-methoxy-3',4'-methylenedioxy-isoflavanone), four isoflavanone O-glycosides (5,7-dihydroxy-2',3',4'-trimethoxy-isoflavanone 7-O-beta-glucopyranoside, 5,7-dihydroxy-2'-methoxy-3',4'-methylenedioxy-isoflavanone 7-O-beta-glucopyranoside, 5,7-dihydroxy-2',4'-dimethoxy-isoflavanone 7-O-beta-glucopyranoside, and 5,7,4'-trihydroxy-2',3'-dimethoxy-isoflavanone 7-O-beta-glucopyranoside), and a coumaronochromone (3,5,7,4'-tetrahydroxy-coumaronochromone), along with 25 known compounds, were isolated from the aerial parts of Desmodium styracifolium. This is for the first time isoflavanone O-glycosides were isolated from a natural source.     

不同季节灰毡毛忍冬茎叶中绿原酸和木犀草苷含量的分析

目的：比较分析不同季节的灰毡毛忍冬茎叶中绿原酸和木犀草苷的含量,为综合利用茎叶资源提供参考依据.方法：采用蒸制晒干法对灰毡毛忍冬的茎叶进行干燥处理,利用超声波法提取样品中的绿原酸和木犀草苷并通过高效液相色谱法进行含量测定.结果：绿原酸和木犀草苷含量在不同季节的灰毡毛忍冬茎叶中差异明显.绿原酸含量依次为花＞叶＞茎,以秋季（11月份）叶片样品中的绿原酸含量最高（3.031％）,是花蕾中含量的96％;木犀草苷含量总体趋势为叶＞花和茎,以冬季（2月份）叶片样品中的含量最高（0.558％）,是花蕾中含量的4.6倍;二者均高于2010版《中国药典》对山银花和金银花指标物质含量的规定.结论：秋冬季节对灰毡毛忍冬进行休眠期整型修剪,副产物叶片资源丰富,药源成分充足,具有广阔的开发应用前景.     

忍冬属植物开花过程中绿原酸类化合物含量的变化

忍冬是中国传统中药材金银花的药源植物。采用高效液相色谱—光电二极管阵列检测器联用技术(HPLC-PAD)和高效液相色谱—电喷雾离子化—多级质谱联用技术(HPLC-ESI-MSn)对忍冬和4种同属植物在开花不同阶段中绿原酸类化合物进行了定性和定量分析,以明确忍冬属植物花的利用价值及其最佳采收期。结果发现:4种忍冬属植物花蕾及开放花朵中均含有新绿原酸、绿原酸、绿原酸甲酯、异绿原酸A和一种异绿原酸的异构体;绿原酸和总绿原酸在花蕾中的含量高于开放花朵,但贯月忍冬变化不显著;火焰忍冬、贯月忍冬、台尔曼忍冬中绿原酸和总绿原酸的含量在花蕾膨大期(大白期)和初花期(银花期)都高于忍冬,而格雷姆忍冬和忍冬差异不显著,研究表明,4种忍冬属植物花及花蕾都具有较高的开发利用价值。