不同生长调节剂对狗肝菜愈伤组织诱导和离体快繁的影响

目的 :研究不同生长调节剂对狗肝菜愈伤组织诱导和离体快繁的影响。方法 :狗肝菜不同外植体在附加不同生长调节剂的培养基上诱导愈伤组织 ,比较愈伤组织的诱导率 ;用 3因子 5水平的正交实验 ,比较不同生长调节剂对丛生芽诱导的影响 ;在附加不同生长调节剂的培养基上比较芽增殖倍数 ;附加不同浓度NAA的培养基上比较生根效果。结果 :愈伤组织诱导率相对以叶片最高 ,茎段次之 ,最后为叶柄 ;愈伤组织诱导的最佳培养基为MS 6-BA0 .5 NAA1 .5 ;不同激素对茎段芽诱导的影响次序为 6-BA>KT >NAA ,芽诱导的最佳培养基为MS 6-BA2mg/L KT1mg/L NAA0 .5mg/L ;芽继代增殖的最佳激素组合是MS 6-BA2mg/L NAA2mg/L ,增殖倍数达 3.0 0 ,影响芽继代增殖的因素次序为 6-BA >NAANAA0 .5mg/L的生根效果较好。结论 :附加一定的生长调节剂能提高狗肝菜愈伤组织的诱导率和离体快繁的效率。     

生长调节剂对马蹄金外植体离体培养的影响

以草坪地被植物马蹄金的无菌苗子叶、叶片和下胚轴作为外植体进行离体培养,探讨了不同植物生长调节剂对其愈伤组织诱导及分化的影响.结果表明,从不同外植体在含有不同生长调节剂的诱导培养基中进行离体培养时,都可诱导出愈伤且出愈率为43.3%～100%,其中诱导培养基(MS 100 mg/L水解酪蛋白 0.5 mg/Lα-NAA 0.2 mg/L ZT)适合于三种外植体的愈伤诱导,出愈率为100%,愈伤生长旺盛.在所有愈伤分化试验中均形成了绿色芽点,其频率为25.0%～95.0%,仅从下胚轴诱导的愈伤分化获得了再生植株,且在分化培养基(MS 100mg/L水解酪蛋白 0.1 mg/Lα-NAA 3.0 mg/L 6-BA)上的最高愈伤分化频率为20.0%.     

药用植物川东獐牙菜的组织培养

针对川东獐牙菜野生资源受到严重破坏的情况 ,系统地探讨了通过组织培养为手段进行人工繁殖的方法 ,旨在为川东獐牙菜的保护提供坚实的理论依据。研究结果表明 :在所有的实验方案中 ,幼茎和老叶是理想的外植体材料。对叶片来说 ,较适宜的诱导愈伤组织的激素组合是 Zt1.0 m g/L +NAA 0 .0 5m g/L +IBA0 .0 5mg/L、BA 0 .5m g/L+2 ,4 - D0 .5mg/L或 BA 0 .2 m g/L+2 ,4 - D0 .2 mg/L+IBA0 .1m g/L ,对茎段来说 ,较适宜的诱导愈伤组织的激素组合是 BA0 .0 5m g/L+kt0 .0 5mg/L+IBA0 .0 5m g/L;诱导不定芽的适宜激素组合是 BA2 .0 mg/L+N AA0 .0 5mg/L或 BA 2 .0 mg/L+IBA 0 .1m g/L ;而根的诱导则是 MS+BA 0 .0 5mg/L+kt1.0 mg/L+N AA0 .1m g/L或 MS+BA1.0 m g/L+kt0 .3mg/L +IA A0 .5mg/L培养基上进行。     

匙羹藤愈伤组织培养研究

以匙羹藤组培苗为外植体,研究茎段、茎尖和叶片以及不同植物生长调节剂组合对愈伤组织形成的影响;采用4因素4水平正交设计,用SPSS软件其结果进行分析。结果显示:各种外植体诱导愈伤的能力不同,依次是茎段、叶片。叶片诱导出非胚性愈伤组织,茎段、茎尖利于诱导胚性愈伤组织和胚状体;愈伤诱导的最佳培养基为MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,诱导率为84.5%,愈伤生长旺盛,分裂快,颜色为淡黄色。愈伤组织分化成苗效果最好的条件是MS+NAA 1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L,分化率达到90.6%,最佳的生根条件是1/2 MS+NAA1.6 mg/L,生根率为100%。这为研究匙羹藤的组织的脱分化、分化以及胚状体的形成机制提供了参考。     

何首乌愈伤组织的诱导

研究了外植体、光暗条件、植物激素等因子对何首乌愈伤组织诱导的影响 ,以及 6 -BA和何首乌组织提取液对愈伤组织增殖的影响。结果表明 :茎段的愈伤组织诱导优于带侧芽茎段和叶片 ;光照有利于愈伤组织的诱导 ;4因子 4水平的正交实验表明 ,对何首乌茎段愈伤组织诱导的影响 2 ,4 -D >6 -BA >IBA >IAA ,最佳激素搭配是 :MS +2 ,4 -D 2mg L +6 -BA 1mg L +IBA1mg L或MS +2 ,4 -D 2mg L +6 -BA 2mg L +IAA 1mg L ;MS培养基中附加 6 -BA或组织提取液均促进愈伤组织的增殖。     

怀山药微型块茎愈伤组织的诱导形成及高频率再生

对怀山药微型块茎愈伤组织的诱导及高频率再生进行了研究。结果表明 :(1)光下诱导铁棍山药脱分化形成愈伤组织 ,6 -BA2 mg/L NAA2 mg/L 为最佳激素组合。KT2 mg/L 2 ,4 - D2 mg/L 有利于铁棍山药愈伤组织的增殖。附加 2 mg/L NAA能缩短 4 7号山药愈伤组织的诱导时间。KT2 mg/L NAA2 m g/L 有利于 4 7号山药愈伤组织增殖 ;(2 )不同光照条件对愈伤组织的诱导和增殖影响不同。光照是缩短 4 7号山药愈伤组织诱导时间的另一因素。暗培养有利于愈伤组织的增殖 ,对 4 7号山药来说 ,暗培养下诱导率也较高 ;(3)基因型不同 ,愈伤组织类型不同 ,诱导率和不定芽分化率也有差异 ,4 7号山药高于铁棍山药 ;(4 )KT对 4 7号山药愈伤组织分化形成不定芽起主要作用 ,2 ,4 - D2 mg/L KT2 mg/L 为最佳激素组合 ;(5 )光培养有利于不定芽的分化     

青叶胆愈伤组织的诱导与液体继代培养

以青叶胆(Swertia mileensis)幼叶为外植体,在添加不同生长调节剂组合的MS培养基上进行愈伤组织诱导。结果表明,最有效的生长调节剂组合为IAA 1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+KT 1.0 mg/L和NAA 4.0 mg/L+KT 2.0 mg/L+GA₃ 1.0 mg/L,其诱导率分别为96.6%和96.0%。使用以上两种生长调节剂组合进行愈伤组织的液体继代培养,10 d可使愈伤组织增殖率分别达257.3%和310.2%。     

盐肤木体细胞胚胎发生及植株再生

以盐肤木(Rhus chinensis Mill.)幼胚为外植体,研究不同植物生长调节剂组合对其愈伤组织诱导及体细胞胚胎发生的影响,以建立盐肤木体细胞胚胎发生及植株再生体系。结果表明,最适愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA 0.2 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L,诱导率为84.57%,诱导出的初代愈伤组织白色或淡黄色,质地疏松,表面光滑,为非胚性愈伤。初代愈伤组织转移到1/2 MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基上培养1个月后,长出淡黄色质地紧密的胚性愈伤组织,诱导率高达100%,在此培养基上胚性愈伤组织增殖倍数为854.73%。所获得的胚性愈伤组织转接到1/2 MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖4%的培养基上培养1个月后可诱导体细胞胚胎发生,诱导率可达32.67%。诱导得到的体细胞胚胎经历球形胚、心形胚、鱼雷胚、子叶胚进一步分化发育成苗。无菌苗炼苗后栽种到泥炭土∶蛭石∶珍珠岩为2∶1∶1的生长基质上,能100%稳定成活。经过细胞学观察分析,体细胞胚的发育与合子胚相似。     

苦豆子的组织培养及植株再生的研究

用4种诱导培养基P1(MS+2,4-D0.5mg/L)、P2(MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.5mg/L)、P3(MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L)、P4(MS+NAA1.0mg/L+KT0.5mg/L),3种分化培养基(MS+6-BA1mg/L;MS+6-BA0.5mg/L;MS+6-BA1mg/L+NAA0.2mg/L)和4种生根培养基(MS;MS+IBA1mg/L;MS+IBA1mg/L+IAA0.5mg/L;1/2MS+IAA0.2mg/L)对苦豆子愈伤组织进行诱导和植株再生,研究影响苦豆子组织培养的因素,结果表明愈伤组织的诱导频率主要依靠激素的种类和浓度,培养基中加入0.2～2mg/L的2,4-D有利于苦豆子愈伤组织生长,但使褐化发生时间提前;培养基中加入活性炭对苦豆子愈伤组织褐化有明显的抑制作用;加入IAA对苦豆子根的分化是必需的。     

新疆雪莲植株再生体系研究初探

以新疆雪莲叶片、叶柄和根为外植体,诱导新疆雪莲植株再生,获得愈伤组织诱导、分化和生根最佳培养基,并初步建立其再生体系.研究结果表明:所用培养基均能诱导出愈伤组织且诱导率最高可达100%,分化率最高可达78%.对不同外植体的愈伤组织诱导结果表明:叶片和叶柄的诱导效果最好,根的诱导效果较差.其中对叶片愈伤组织诱导效果最好的培养基是MS+NAA0.50 mg/L+2,4-D0.10 mg/L+6-BA1.00mg/L,对叶柄的诱导效果最好的培养基是MS+NAA1.00mg/L+2,4-D0.10mg/L+6-BA0.10mg/L;分化培养基以MS+NAA0.20 mg/L+6-BA1.00mg/L较适宜,生根培养基以1/2MS0+NAA1.00mg/L较适宜.     

多花黄精诱导愈伤组织与不定芽培养基筛选

以多花黄精Polygonatum cyrtonema的根状茎为外植体,通过L9(34)正交试验比较不同植物生长调节剂及其组合对多花黄精愈伤组织诱导的影响,筛选最适生长调节剂配方,同时筛选通过器官发生方式直接成芽较为合适的培养基。结果表明,含有2,4-D和KT的培养基诱导愈伤组织效果显著,多花黄精愈伤组织诱导的最适培养基为MS + 6-BA 2.0 mg·L-1 + 2,4-D 0.5 mg·L-1 + NAA 0.1 mg·L-1 + KT 1.0 mg·L-1,该培养基的愈伤组织诱导率可达39.10%;培养基MS + 6-BA 4.0 mg·L-1 + NAA 0.2 mg·L-1可诱导多花黄精根状茎直接产生不定芽。     

枇杷叶片愈伤组织的诱导与保存

在不同成熟度的枇杷叶片中,最适宜诱导愈伤组织的是中度成熟叶;最适合的愈伤组织诱导培养基是MS+6-BA 1.0mg/L+2,4-D 0.5mg/L,诱导出的愈伤组织为黄绿色、颗粒状、硬度适中;适合愈伤组织继代保存的培养基为MS+6-BA 0.5~1.0mg/L+2,4-D 0.1~0.2mg/L。     

百合体细胞胚胎发生和植株再生

以切花百合(Lilium)品种‘黄天霸’(‘Manissa’)花器官为外植体诱导体细胞胚胎发生与植株再生。结果表明,不同花器官、不同激素配比对愈伤组织形成均具有显著影响。花丝为最佳外植体,激素对愈伤组织诱导的影响效应为NAA>6-BA>2,4-D,最适培养基为MS+1.0 mg.L-1NAA+0.2 mg.L-16-BA;激素诱导体细胞胚胎发生的影响效应为2,4-D>KT>6-BA,最佳培养基配方为MS+1.0 mg.L-12,4-D+0.2 mg.L-1KT+1.0 mg.L-16-BA;MS培养基添加IBA可促进体细胞胚萌发成苗,体细胞胚芽成苗的最佳培养基为MS+0.2 mg.L-16-BA+1.0 mg.L-1IBA。     

月光花素对彩叶芋愈伤组织细胞生长和分化的影响

在含有NAA0.2mg/L,2.4-D 0.2mg/L的MS基础培养基中添加月光花素培养彩叶芋愈伤组织,结果显示,低浓度的月光花素能促进愈伤组织生长,高浓度则有明显的抑制作用,最适浓度为1.0~2.0mg/L;培养两个月后,添加适宜浓度的月光花素(0.2~2.0mg/L)的培养基能促进体细胞分化和植株再生,而高浓度(10.0mg/L)处理和对照均未能分化出绿苗。表明适宜浓度的月光花素在合适的生长素剂量的协同作用下,对植物愈伤组织细胞的生长和分化有较强的调节作用。     

药用植物金荞麦愈伤组织诱导与植株再生

目前转基因技术已成为植物定向遗传改良的重要手段,而建立稳定高频的离体再生系统是实现遗传转化的基础和前提.本试验以25 ～30 d苗龄的金养麦(Fagopyrum dibotrys)无菌苗叶片、茎节间、叶柄为外植体进行愈伤组织诱导与植株再生研究.结果表明:叶片在MS +2,4-D 4.0 mg/L +6-BA 1.0 mg/L培养基上愈伤组织诱导率达到89％.茎节间在MS +2,4-D 2.0 mg/L +6-BA 2.0 mg/L培养基上愈伤组织诱导率为87％.叶柄在MS +2,4-D 4.0 mg/L +6-BA 2.0 mg/L+ IBA 0.2 mg/L培养基上的最高诱导率仅为54％.愈伤组织分化不定芽的适宜培养基为MS +6- BA2.0 mg/L +TDZ0.2 mg/L +NAA0.2 mg/L;金荞麦不定芽在1/2 MS +NAA 0.5 mg/L的培养基上生根效果最好.组培再生植株经炼苗后移栽到田间成活率达80％以上,且生长表现正常.高频完整再生体系的建立,为金荞麦进一步遗传操作和扩大药材资源奠定了基础.     

草麻黄植株再生体系的建立

目的:以草麻黄的子叶为材料,建立草麻黄植株再生体系.方法:采用组织培养的方法进行了愈伤组织诱导、愈伤组织分化和不定芽生根研究.结果:MS+2,4-D 2.0mg/1+6-BA 1.0mg/l为诱导子叶形成具有分化能力愈伤组织的理想培养基;MS+2,4-D 1.5mg/l+6-BA 1.5mg/l是愈伤组织的最佳继代培养基;MS+IAA 0.2mg/l+TDZ 2.0mg/l是愈伤组织不定芽分化的最佳培养基,分化率为75%;试管苗生根培养基为MS+2,4-D 1.0mg/l.结论:建立了草麻黄子叶再生系统,为开发和保护麻黄野生资源提供一定的材料来源和技术方法.     

小麦遗传转化受体系统建立的研究

选用‘小偃22’和‘宁春16’小麦品种的成熟胚和幼胚进行培养,研究不同种类的胚和培养因子对愈伤组织诱导和分化的影响。结果表明,幼胚和成熟胚的愈伤组织诱导率无明显差异,但较高浓度的2,4-D有利于成熟胚的诱导,而幼胚培养时2,4-D浓度的影响效果因品种而异;两种外植体分化率的高低与KT/IAA的配比均有密切关系,但高浓度的激素水平不利于成熟胚的分化;诱导培养基中低浓度的2,4-D有利于所诱导的愈伤组织的分化。同时,在诱导培养基中添加低浓度的KT能显著提高两品种成熟胚愈伤组织的分化率;各种培养基处理与品种间都存在显著的互作效应,‘小偃22’成熟胚培养的最佳培养基组合为MSD 3.0 mg/L 2,4-D和MSD 0.5 mg/LIAA 1.0 mg/L KT,幼胚培养为MSD 4.0 mg/L 2,4-D和MSD 0.5 mg/L IAA 1.0 mg/L KT;‘宁春16’成熟胚培养为MSD 4.0 mg/L 2,4-D和MSD 1.0 mg/L IAA 1.0 mg/L KT,幼胚培养时为MSD 1.0 mg/L 2,4-D和MSD 2.0 mg/L IAA 2.0 mg/L KT。     

中华结缕草(Zoysia sinica Hance)组织培养和再生植株研究

以中华结缕草(Zoysia sinica Hance)成熟种子为外植体在附加2．5mg／L2,4-D、0．25mg／L 6-BA和1～2mg／L VB1的改良MS培养基(MSm)上愈伤组织的诱导率最高为43．0％。愈伤组织的最佳继代培养基为MSm附加0．1mg／L 6-BA和2．0mg／L 2,4-D。在无生长调节物质的MS培养基(MS0)上,外观呈白色到淡黄色、含有密实颗粒的愈伤组织再生率为30％～60％。     

徐长卿子叶组织培养及再生体系的建立

以徐长卿子叶为材料,进行愈伤组织诱导、愈伤组织和不定芽分化、试管苗生根、移栽及移植等研究。结果表明,MS+6-BA 0.3 mg/L+NAA 0.2 mg/L+2,4-D 0.4 mg/L是子叶愈伤组织诱导和继代培养的理想培养基;MS+6-BA 0.8 mg/L+NAA 0.2 mg/L是愈伤组织分化培养的理想培养基;MS+6-BA 0.6 mg/L+NAA 0.2 mg/L是不定芽分化继代培养的理想培养基;炉灰渣是试管苗移栽的理想基质,移栽成活率可达97%。试管苗移植后长势旺盛,根系发达,当年开花。根据本试验结果可建立徐长卿子叶诱导再生体系。