茶组植物中茶氨酸和没食子酸的高压液相色谱分析

应用高效液相色谱(HPLC)技术对茶属茶组的6种3变种植物叶中的茶氨酸和没食子酸含量进行定量分析.结果表明,茶氨酸和没食子酸均普遍存在于这几种茶组植物中,二者在大理茶与广西茶中的含量与大叶茶最为接近,野生的大理茶在云南民间亦作为茶叶的原料使用,有悠久的历史,提示大理茶有可能是大叶茶的基源植物之一.     

曲霉属真菌在普洱茶后发酵中的作用

为阐明微生物在普洱茶后发酵过程中的作用及其机制,本文进行了普洱茶温湿度试验,并利用从普洱茶后发酵堆中分离鉴定的优势曲霉属真菌,进行接种试验和专用菌剂的发酵生产试验.结果提示,只有在微生物的作用下,普洱茶才具特有的感官特性,曲霉属真菌能控制后发酵的过程,改变茶叶的感官特性.曲霉属真菌的种类及组合对普洱熟茶的茶多酚组成与含量,以及没食子酸、茶氨酸、咖啡因等特征成分的含量均有显著的影响.因此,应用专用菌剂进行后发酵生产,能加快普洱茶的熟化速度,提高发酵成功率,保证产品质量的稳定性,使普洱熟茶的规范化生产成为可能.     

普洱茶后发酵过程中微生物的研究进展

对有关普洱茶后发酵生产与微生物的关系、微生物的种类、微生物对普洱茶品质的影响以及主要微生物的生长特性等方面的研究工作进行综述。指出加强普洱茶后发酵过程中微生物基础研究的必要性,提出建立普洱茶后发酵菌物库,重视对影响普洱茶品质的菌物开展系统研究的建议。     

普洱茶后发酵中咖啡碱变化研究进展(综述)

普洱茶（熟茶）的后发酵加工工艺,是形成其独特品质特征的关键工序。咖啡碱是一种甲基黄嘌呤,是茶叶中含量比较丰富的生化成分之一,也是茶叶主要呈味物质和生理活性成分,具有促进兴奋、强心、解毒、利尿、助消化等功效。咖啡碱在普洱茶后发酵过程中呈增加趋势。文章对普洱茶后发酵过程中咖啡碱变化的相关研究进行系统综述,为普洱茶咖啡碱理论研究提供科学依据。     

白莺山古茶的化学成分分析与栽培茶树的起源

应用高压液相色谱(HPLC)技术,对白莺山古茶的大理茶素、儿茶素类、茶掊素、没食子酸、咖啡因和茶氨酸的含量进行分析.同时,应用分光光度法测定茶多糖和茶多酚含量.在与野生大理茶及栽培大叶茶(普洱生茶)进行多成分比较的基础上,结合形态性状的变异与进化,讨论白莺山古茶种质资源的多样性与野生大理茶和栽培大叶茶的相互关系.分析研究结果不仅为白莺山古茶的品质评价提供可靠的科学数据,为白莺山丰富的古茶种质资源的深人系统研究和合理开发利用提供基础,同时,通过多种过渡类型的化学成分分析与比较,为栽培大叶茶的起源和大理茶作为大叶茶的野生基源之一的假说提供了植物化学方面的证据.     

大别山野生油茶中茶氨酸检测与茶氨酸合成酶基因克隆

茶氨酸是茶树叶片中最丰富的游离氨基酸,具有重要的生理药理功能,但迄今仅在蘑菇、蕈和一些山茶科(属)植物中检测到茶氨酸。茶氨酸因有一种独特的风味特色"umami鲜爽味"而被人类营养学广泛研究,并发现合成茶氨酸的植物不仅在植物分类上具有积极意义,而且对于植物资源的有效发掘有巨大经济价值;同时还可以间接去研究茶树中茶氨酸的代谢机理以及茶氨酸合成酶的分离纯化和TS基因的克隆表达。该文运用HPLC、LC-TOF/MS对大别山地区野生幼年与成年油茶根、叶中茶氨酸进行检测,并结合分子生物学手段对油茶中茶氨酸合成酶(theanine synthetase,TS)基因进行克隆与生物信息学分析。结果表明:在幼年的油茶根中检测到茶氨酸,含量为0.08mg·g-1(鲜重),而在幼年的油茶叶片和成年油茶根、叶中均未检测到茶氨酸;在幼年油茶根中克隆出一条长为1 071bp油茶TS基因开放阅读框,其基因序列与茶树谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS,AB117934)基因和TS(DD410896)序列的同源性达到98%,氨基酸序列与茶树中GS(AB117934)和TS(DD410896)的相似性高达99%。经生物信息学分析,该序列编码的TS蛋白具有20个磷酸化位点,不存在信号肽序列与跨膜结构,含有卷曲螺旋结构的亲水性细胞质蛋白。该研究将为油茶新经济价值的发掘,为茶氨酸在油茶中合成代谢途径的研究提供一定的理论基础,同时也为进一步研究茶氨酸在茶树中代谢机理提供了新的研究思路。     

核基因组微卫星标记揭示大理茶参与了普洱茶的驯化过程

利用11个核基因组微卫星标记对普洱茶3个居群、大理茶3个居群及过渡型大理茶2个居群共104株古茶树进行了遗传学分析。研究表明,普洱茶、大理茶和过渡型大理茶居群的遗传多样性相对较低,平均等位基因(Na)为4.852,平均香农多样性指数(I)为1.17,平均期望杂合度(He)和观测杂合度(Ho)分别为0.59和0.52,其中大理茶的遗传多样性水平低于普洱茶和过渡型大理茶。AMOVA分析表明,普洱茶和大理茶之间遗传分化显著(FST=0.305),遗传变异主要在居群内(分别为93.51%和89.41%),而居群间的遗传变异较低(分别为6.49%和10.59%)。主成分分析和STRUCTURE聚类分析均支持大理茶和普洱茶为不同的组,过渡型大理茶主要由大理茶驯化而来,并在栽培过程中与大理茶产生了遗传分化。在混栽的大理茶和普洱茶居群间存在由大理茶向普洱茶的明显基因渐渗,证实了大理茶参与了普洱茶的驯化过程。最后,讨论并提出了对大理茶和普洱茶古茶树资源保护的相关建议。     

普洱熟茶后发酵加工过程中曲霉菌的分离和鉴定

从云南省易武、基诺山、普洱和昆明后发酵加工生产的普洱熟茶堆中分离到7种曲霉菌,分别鉴定为：温特曲霉烟色变种,帚状曲霉,具黄曲霉,埃及曲霉,臭曲霉,日本曲霉原变种,以及局限灰曲霉。发现不同产地普洱熟茶中曲霉菌菌群的组成存在差异,对曲霉菌在普洱熟茶生产中的作用与意义进行了初步的讨论。     

核基因组微卫星标记揭示大理茶参与了普洱茶的驯化过程?

利用11个核基因组微卫星标记对普洱茶3个居群、大理茶3个居群及过渡型大理茶2个居群共104株古茶树进行了遗传学分析。研究表明，普洱茶、大理茶和过渡型大理茶居群的遗传多样性相对较低，平均等位基因(Na)为4?852，平均香农多样性指数(I)为1?17，平均期望杂合度(He)和观测杂合度( Ho)分别为0?59和0?52，其中大理茶的遗传多样性水平低于普洱茶和过渡型大理茶。 AMOVA分析表明，普洱茶和大理茶之间遗传分化显著( FST＝0?305)，遗传变异主要在居群内(分别为93?51％和89?41％)，而居群间的遗传变异较低(分别为6?49％和10?59％)。主成分分析和STRUCTURE聚类分析均支持大理茶和普洱茶为不同的组，过渡型大理茶主要由大理茶驯化而来，并在栽培过程中与大理茶产生了遗传分化。在混栽的大理茶和普洱茶居群间存在由大理茶向普洱茶的明显基因渐渗，证实了大理茶参与了普洱茶的驯化过程。最后，讨论并提出了对大理茶和普洱茶古茶树资源保护的相关建议。     

贮藏条件对普洱茶品质成分的影响研究

将云南普洱茶放在不同的温度、水份和时间等条件下,观察外界的不同条件对普洱茶品质成分的影响。观察结果显示:水份和温度对普洱茶贮藏的品质成分影响最为显著,在相同的贮藏时间内,提升温度以及增加水份的含量,普洱茶的茶褐素会增加,出现变色,内含的成分会有所下降,如茶多酚和儿茶素等。经过实验证明,高温、低水分是普洱茶贮藏的较好条件,能够保持茶叶色泽和香味;而低温和高水份含量则会加速普洱茶的发霉。     

Chemical Analysis of Old Tea Trees in Bai Ying Shan Mountain and the Origin of Cultivated Tea

The contents of dalichasu (1,2-di-O-galloyl-4,6-O-(S) hexahydroxydiphenoyl-β-D-glucopyranose), catechins, theogallin, gallic acid, caffeine and theanine in old tea trees from Bai Ying Shan mountain were quantitatively analyzed by HPLC method, while their total polysaccharides and polyphenols were measured by an UV Vis spectrophotometer. Based on the chemical composition and morphological variation, the germplasm resource diversity of tea trees in Bai Ying Shan Mountain and their relationship with wild Camellia taliensis and cultivated tea (Csinensis var assamica) were discussed. The results provided not only the scientific data of quality evaluation of the old tea trees in Bai Ying Shan Mountain, but also the chemical evidence for the origin of cultivated tea and the hypothesis that Ctaliensis might be one of the origins of cultivated tea during the long natural variation and artificial breeding.     

白化和黄化茶树品种绿茶游离氨基酸、儿茶素类及咖啡碱差异分析

为探究以白化和黄化茶树品种鲜叶为原料制成的绿茶滋味品质和代谢物差异,对广德市6个白化品种绿茶(奶白茶)和14个黄化品种绿茶(黄金芽茶)进行感官审评和代谢物分析。结果表明,奶白茶滋味鲜爽而收敛性略弱;黄金芽茶滋味收敛性强而鲜度低于奶白茶。游离氨基酸总量以及呈现鲜味、甜味的游离氨基酸在奶白茶中的含量显著高于黄金芽茶,而贡献收敛性的儿茶素类化合物和没食子酸含量以及呈现苦味的咖啡碱含量在奶白茶中显著低于黄金芽茶。偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)表明导致两种绿茶滋味差异的标志性化合物有7种,分别是茶氨酸、精氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、表儿茶素没食子酸酯和咖啡碱。味觉活性值(Dot)最高的EGCG在黄金芽茶中的呈味贡献显著高于奶白茶。因此,游离氨基酸、儿茶素类化合物、没食子酸和咖啡碱含量差异导致白化和黄化茶树品种绿茶滋味不同。     

HPLC Analysis of Theanine and Gallic Acid inthe Species of Camellia sect. Thea

Bymeans of HPLC technique, the theanine and gallic acid in the leaves of six species and three varieties of Camellia sect. Thea were analyzed. The results showed that both of them were generally occured in these plants and the contents in C. taliensis and C. kwangsiensis are mostly close to those of C. sinensis var. assamica. Since the leaves of C. taliensis have also been historically used for preparing tea by folk peoples of Yunnan province, it could be suggest that C. taliensis might one of the original plants of tea     

Theanine transporters identified in tea plants (Camellia sinensis L.)

Theanine, a unique non‐proteinogenic amino acid, is an important component of tea, as it confers the umami taste and relaxation effect of tea as a beverage. Theanine is primarily synthesized in tea roots and is subsequently transported to young shoots, which are harvested for tea production. Currently, the mechanism for theanine transport in the tea plant remains unknown. Here, by screening a yeast mutant library, followed by functional analyses, we identified the glutamine permease, GNP1 as a specific transporter for theanine in yeast. Although there is no GNP1 homolog in the tea plant, we assessed the theanine transport ability of nine tea plant amino acid permease (AAP) family members, with six exhibiting transport activity. We further determined that CsAAP1, CsAAP2, CsAAP4, CsAAP5, CsAAP6, and CsAAP8 exhibited moderate theanine affinities and transport was H⁺‐dependent. The tissue‐specific expression of these six CsAAPs in leaves, vascular tissues, and the root suggested their broad roles in theanine loading and unloading from the vascular system, and in targeting to sink tissues. Furthermore, expression of these CsAAPs was shown to be seasonally regulated, coincident with theanine transport within the tea plant. Finally, CsAAP1 expression in the root was highly correlated with root‐to‐bud transport of theanine, in seven tea plant cultivars. Taken together, these findings support the hypothesis that members of the CsAAP family transport theanine and participate in its root‐to‐shoot delivery in the tea plant.     

Nonaqueous fractionation and overexpression of fluorescent‐tagged enzymes reveals the subcellular sites of L‐theanine biosynthesis in tea

l ‐Theanine is a specialized metabolite in the tea (Camellia sinensis) plant which can constitute over 50% of the total amino acids. This makes an important contribution to tea functionality and quality, but the subcellular location and mechanism of biosynthesis of l ‐theanine are unclear. Here, we identified five distinct genes potentially capable of synthesizing l ‐theanine in tea. Using a nonaqueous fractionation method, we determined the subcellular distribution of l ‐theanine in tea shoots and roots and used transient expression in Nicotiana or Arabidopsis to investigate in vivo functions of l ‐theanine synthetase and also to determine the subcellular localization of fluorescent‐tagged proteins by confocal laser scanning microscopy. In tea root tissue, the cytosol was the main site of l ‐theanine biosynthesis, and cytosol‐located CsTSI was the key l ‐theanine synthase. In tea shoot tissue, l ‐theanine biosynthesis occurred mainly in the cytosol and chloroplasts and CsGS1.1 and CsGS2 were most likely the key l ‐theanine synthases. In addition, l ‐theanine content and distribution were affected by light in leaf tissue. These results enhance our knowledge of biochemistry and molecular biology of the biosynthesis of functional tea compounds.     

茶氨酸的制取及应用

茶氨酸是茶叶中的一种主要氨基酸 ,通常占茶叶干重的 2 %左右 ,约占茶树体内游离氨基酸5 0 %。茶氨酸具有鲜甜味 ,是茶叶特征物质之一 ,与茶叶品质呈正相关。现已作为食品添加剂应用于食品领域。除此以外 ,茶氨酸还具有一些重要的药理作用。如抗肿瘤、降压安神、拮抗咖啡碱等医疗功效。本文综述了茶氨酸的性质、制取方法及应用前景等方面的内容。     

8-氧化咖啡因和嘧啶类生物碱在普洱熟茶中的存在

应用柱层析分离技术,从普洱熟茶中首次分离到8-氧化咖啡因,嘧啶类生物碱(胸腺嘧啶脱氧核苷、胸腺嘧啶和尿嘧啶) ,黄酮类配糖体(黄杞甙) ,以及简单酚类化合物(1 ,2 ,4-苯三酚、1 ,3-苯二酚和4-甲基-1 ,2-二苯酚)。由于普洱熟茶是由大叶茶经微生物后发酵生产的, 8-氧化咖啡因显然是茶叶中的咖啡因在微生物作用下形成的转化产物。胸腺嘧啶脱氧核苷亦可能是茶叶中的嘧啶类生物碱与微生物中的核苷类化合物在后发酵过程中缩合形成的。二者均为新发现的普洱熟茶的特征性成分。