鱼类LZF-IDNA指纹探针的制备

利用Ｏｌｉｇｏ１０００ＤＮＡ合成仪（Ｂｅｃｋｍａｎ）合成了长度为４５ｂｐ的寡核苷酸单链,经纯化后用同位素γ－３２Ｐ－ＡＴＰ作５′末端标记后,制备成鱼类ＬＺＦ－ＩＤＮＡ指纹探针。通过对鱼类的群体实验、亲子鉴定实验、组织细胞的稳定性实验和鱼类种类的适用范围实验后,测得：（１）ＬＺＦ－ＩＤＮＡ指纹探针属多位点寡核苷酸探针;（２）ＬＺＦ－ＩＤＮＡ指纹探针在鱼类种群中的鉴别机率为９．２３×１０－１６;（３）ＬＺＦ－ＩＤＮＡ指纹探针在鱼类亲子鉴定实验中的父系概率为０．９９９９６２;（４）ＬＺＦ－ＩＤＮＡ指纹探针,是一种稳定的,既具有个体识别能力,又具有一定种属特异性的、适用于鱼类ＤＮＡ指纹图研究的基因指纹探针。     

大熊猫基因指纹探针F2ZGP96060801的研制及比较实验分析

利用ＡＢＩ－３９４型ＤＮＡ合成仪合成的寡核苷酸５－「Ａ（Ｘ）ｎ－ｘＴＣＣＡＣ」ｎ－３,经高效液相色谱仪纯化后,制备成了命名为为Ｆ２ＺＧＰ９６０６０８０１的大熊猫基因指纹探针,用同位素标记法标记Ｆ２ＺＧＰ９６０６０８０１,ＬＺＦ－Ｉ、朋５、３３．６和（ＣＡＣ）６／ＧＴＧ）５等５种基因指纹探针,比较检测了大熊猫随机个体的被毛、大熊猫３雄配Ｉ雌所产１个双胞胎计６只个体的福尔马林固定的肝组织和粪便中的胃肠     

小熊猫圈养种群遗传多样性及其影响因子

利用寡核苷酸指纹探针ＬＺＦ－Ｉ检测了成都大熊猫繁育研究基地仿生态圈养场小熊猫种群全部２２只个体的ＤＮＡ指纹,检测结果表明其遗传多样性参数如下：⑴各体间ＤＡＮ指纹图的相似性为０．１７２;个体Ａ的指纹谱带在个体Ｂ中出现的概率为０．１８０６。⑵圈养种群的等位基因频率为０．０９４８,杂合率为９０．５２％,⑶种群中指名亚种亲本个体的引进是影响该种群遗传多样性的主要因子。     

中国东部栗疫病菌群体的遗传分化

本实验采用ＲＦＬＰ技术,对中国东部栗疫病菌进行了群体遗传结构的研究,３１３个参试菌株来自１０个省（市）的１６个群体（子群体）,样本人布在北纬２４°Ｎ－４１°Ｎ。各菌株的ＤＮＡ分别用限制性内切酶Ｐｓｔ Ⅰ和ＥｃｏＲⅠ酶切,先后以１０个低拷贝ＤＮＡ探针和１个ＤＮＡ指纹图谱探针进行了杂交和检测。结果表明,两个探针的杂交图谱呈单态性,其他７个低拷贝探针的杂交图谱都呈多态性、指纹图谱探针的检测结果显示,辽宁     

人r型基因工程干扰素中残余DNA的检测

采用地高辛标记探针,以核酸杂交法检测人ｒ型基因工程干扰素（ＩＦＮ－ｒ）制品中残余ＤＮＡ含量,结果表明,自制的二组ＤＮＡ标准品相应量间显示的色斑相差悬殊,提示高蛋白含量对痕量残余ＤＮＡ的检测干扰较大,添加ＩＦＮ－ｒ的ＤＮＡ标准品比纯ＤＮＡ标准品更合理,以此测得各样品均符合ＷＨＯ要求（〈１００ｐｇ／剂量）,方法敏感性为４ｐｇ。     

一种从鱼类卵巢制备地高辛标记mtDNA探针的简易方法

一种从鱼类卵巢制备地高辛标记ｍｔＤＮＡ探针的简易方法＊ＡＳＩＭＰＬＥＭＥＴＨＯＤＦＯＲＧＥＴＴＩＮＧＤＩＧＯＸＩＧＥＮＩＮＬＡＢＥＬＩＮＧＰＲＯＢＬＥＯＦｍｔＤＮＡＦＲＯＭＯＶＡＲＹＯＦＦＩＳＨ关键词鱼类,线粒体ＤＮＡ,地高辛标记ＫｅｙｗｏｒｄｓＦｉ...     

胰岛素样生长因子Ⅱ对大鼠离体培养黄体细胞孕酮生成的影响

本实验观察了胰岛素样生长因子Ⅱ（ＩＧＦ－Ⅱ）对大鼠离体培养黄体细胞孕酮生长的影响,并对其作用机制进行了探讨。结果显示,ＩＧＦ－Ⅱ能显著地促进大鼠离体培养黄体细胞孕酮生成并呈剂量－效应关系,同时还能促进＾３Ｈ－亮氨酸掺入黄体细胞蛋白质的合成,促进＾３Ｈ－胸腺嘧啶掺入ＤＮＡ的合成,而上述效应分别被放线菌酮（ＣＹＸ）和放线菌素Ｄ所抑制。此外,ＩＧＦ－Ⅱ对大鼠离体黄体细胞内泊性ｃＡＭＰ和ｈＣＧ诱导的ｃＡＭ     

脊髓灰质炎减毒活疫苗的高效纯化及特性研究

用就Ｑ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ Ｆａｓｔ Ｆｌｏｗ对Ｖｅｒｏ细胞基质制备的Ｉ型口服脊髓灰质炎减毒活疫苗悬液进行纯化。病毒液经滤过澄清和超浓缩,获得８５％的病毒感染性滴度回收率,而经Ｑ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ Ｆ．Ｆ．纯化的病毒悬液,病毒感染性滴度回收率达１００％。纯化后的病毒液用α－＾３２ＰｄＡＴＰ标记ＤＮＡ探针膜杂交法测定,宿主Ｖｅｒｏ细胞基质ＤＮＡ残余含量远低于１００ｐｇ／剂量的标准;ｒｃｔ／４０特征     

人类基因组辞汇(续)

人类基因组辞汇（续）柴建华ＨｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎＰｒｏｂｅ杂交探针。一个小的ＤＮＡ（或ＲＮＡ）分子。用同位素（或非放射性染料,或荧光染料）标记后可用分子杂交的方法探测同源顺序的存在。ＨＴＦＩｓｌａｎｄＨＴＦ岛。“Ｈｐａｌｌ-Ｔｉｎｙ-Ｆｒａｇ－ｍｅｎｔ”（Ｈｐａｌｌ小片段岛）,也叫做ＣｐＧ岛。单拷贝,在脊椎动物基因组内为非甲基化位点。     

大熊猫父权认定的DNA指纹图分析

本文以大熊猫１４胎次,１９只幼子,２５只次雄兽个体的被毛、血液、精液、福尔马林固定的器官组织、粪和尿等为材料作了ＤＮＡ指纹检测。（１）同一大熊猫个体的被毛、血液、精液、固定组织及粪、尿检测,其ＤＮＡ指纹图完全一致。（２）大熊猫无论１雄配１雌,２雄配１雌、３雄配１雌,甚至４雄配１雌,受配雌兽所产任一子代个体的ＤＮＡ指纹图谱中,杂交谱带均分别来自父亲、母亲,以及父母双亲,没有新带出现,无误地认定了１９只幼子的真正父亲,排除了非父。（３）３只大熊猫雌兽的５个双胞胎,即１０只子代个体的ＤＮＡ指纹图谱,均具有个体特异性,表明为异卵双生,其中４个双生子为异卵异父双生,为大熊猫在一个发情期不一定同时排卵提供了佐证,亦为圈养雌兽发情高峰期用多只雄兽作多次配种或输精,能提高受孕产仔率提供了理论和应用依据。（４）ＤＮＡ指纹技术用于大熊猫的亲子鉴定,灵敏稳定,准确无误,为圈养大熊猫多雄配１雌,增加受配雌兽的受孕机会,提高产子率提供了鉴别手段,解除了多雄配１雌,其子代的父亲是谁的后顾之忧。（５）应用寡核苷酸探针ＬＺＦ－１作大熊猫亲子鉴定较ＪＨ１２．６探针更为适合     

N42—A神经生长因子诱导PC12细胞分化的抑制作用

研究表明,缺乏神经生长因子（ＮＧＦ）的营养支持是Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ′ｓ等神经元退行性疾病发生发展的重要原因,而ＮＧＦ和／或ＮＧＦ受体的过度表达则与一些神经系统肿瘤的发生发展有着十分密切的因果关系。采用＾１２５Ｉ－ＮＧＦ受体特异结合实验作为ＮＧＦ受体活性物质筛选实验模型从中药牛膝中筛选出了能强烈地抑制＾１２５Ｉ－ＮＧＦ受体结合的活性成分Ｎ４２－Ａ（ＩＣ５０＝６．１８±３．４３,ｎ＝４）;细胞培养实验     

大熊猫DNA指纹在野生种群数量调查中的应用

本文用荧光素标记ＬＺＦ－１基因指纹探针,以四川省冕宁县冶勒野外大熊猫的脱落被毛及尽量新鲜的粪便作样品,进行了ＤＮＡ指纹检测。１．在相同或不同时间、巢域采集的粪便与被毛样品,显现出相同或不同的ＤＮＡ指纹图谱,达到个体认定的目的．表明了大熊猫野外脱落被毛和粪便,能作为ＤＮＡ指纹分析材料,进行野生种群数量调查．２．根据检测６个被毛和９个粪便样品的结果,认定该生境中有７只大熊猫个体,纠正了有８只和８±２只的记载．３．应用ＤＮＡ指纹技术及微机个体识别进行大熊猫野外数量调查,准确可靠,节省人力、物力和财力,能获得大熊猫在野外的真实个体数量。     

LZ—410盼生安对肝癌细胞细胞周期时相的影响及对DNA损伤效应…

ＬＺ－４１０盼生安是一种广谱抗肿瘤药物。本文以５－Ｆｕ作为阳性对照药物从对ＢＥＬ－７４０２肝癌细胞周期时相的影响及对ＤＮＡ损伤效应两个方面进行了初步探讨。结果表明,ＬＺ－４１０能将细胞阻滞在Ｇ０／Ｇ１期,抑制了细胞的生长增殖作用。并且在本实验条件下,ＬＺ－４１０并不引起ＤＮＡ的损伤。这表明ＬＺ－４１０抑制肝癌细胞生长增殖不是通过对ＤＮＡ损伤引起的,而主要是通过阻滞肿瘤细胞于Ｇ０／Ｇ１期实现的。     

人组织型纤溶酶原激活剂（t—PA）组合突变体FrGGl在CHO细胞中的…

为了得到ｔ－ＰＡ组合突体ＦｒＧＧｌ在ＣＨＯ细胞中的高效表达,将表达质粒筛选基因启动子上游的增强子（ｅｎｈａｎｃｅｒ）去除,构建了ＦｒＧＧｌ真核表达质粒ｐＺＬＦｒＧＧＩ。酶切线化后,采用大剂量ＤＮＡ电击介导法,转染ｄｈｆｒ基因缺陷型中仓鼠卵巢细胞系（ＣＨＯ－ｄｈｆｒ）。氨甲喋呤（ＭＴＸ）筛选转染细胞,混合加压,挑选克隆,在１×１０＾－７ｍｏｌ／ＬＭＴＸ压力下,获得表达水平达１５００～２５００ＩＵ／１     

人βNGFDNA地高辛标记探针的制备及在小鼠颌下腺中的基因表达

本研究在国内首先制备非放射性地高辛标记的人βＮＧＦＤＮＡ（ｄｉｇ－ｈ－βＮＧＦＤＮＡ）探针,并应用原位杂交技术结合计算机图像分析,对ＮＧＦｍＲＮＡ在ＩＣＲ雄性小鼠颌下腺中的分布进行了观察。实验结果显示ＮＧＦｍＲＮＡ主要分布于颌下腺纹状管（ＳＳＴ）和颗粒曲管（ＧＣＴ）的上皮细胞,其细胞基底部胞质呈杂交反应强阳性,细胞顶部呈弱阳性,图像分析显示二者具有显著性差异。本实验制备的ｄｉｇ－ｈ－βＮＧＦＤＮＡ探针灵敏度高达０．１ｐｇ／ｍｌ,并且特异性强,分辨力高,重复性好,是研究ＮＧＦｍＲＮＡ基因表达和调控的有力工具。     

单羧酸类Cl-通道阻断剂对心室肌CFTR Cl-通道的影响

本文采用全细胞膜片箝与细胞内灌注技术,观察了单羧酸类Ｃｌ＾－通道阻断剂对豚鼠心室肌囊性纤维变性膜透性调节蛋白（ＣＦＴＲ）Ｃｌ＾－电流的影响,细胞包９－ＡＣ以可逆方式增强异丙肾上腺素（ＩＳＯ）激发的ＣＦＴＲＣｌ＾－的外向电流成分,５－ｎｉｔｒｏ－２－（３－ｐｈｅｎｙｌｐｒｏｐｙｌａｍｉｎｏ）－ｂｅｎｚｏａｔｅ（ＮＰＰＢ）和二苯胺羧酸（ＤＰＣ）对ＩＳＯ发的ＣＦＴＲＣｌ＾－电流的作用呈现先增强后抑制的双     

前列腺素F2α对大鼠肾小球系膜细胞DNA合成的影响

本实验应用（＾３Ｈ）胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法测定前列腺素Ｆ２α（ＰＧＦ２α）对大鼠肾小球系膜细胞ＤＮＡ合成的作用,测定系膜细胞合成的二脂酰甘油（ＤＡＧ）及磷酸肌醇（ＩＰ）。结果表明,ＰＧＦ２α促进系膜细胞的ＤＮＡ合成、ＤＡＧ及ＩＰ的生成。提示ＰＧＦ２α使系膜细胞的磷脂酶Ｃ活化,产生ＩＰ及ＤＡＧ,激活蛋白激酶Ｃ,从而促进ＤＮＡ合成及细胞增殖。     

毛细胞白血病5q13.3断裂位点线性DNA荧光原位杂交定位

毛细胞白血病经常与５ｑ１３．３断裂位点相关联,该断裂位点区域及位于这一区域的重要基因有待研究。我们探索了ＤＮＡ纤维荧光原位杂交方法（即ＤＮＡ纤维ＦＩＳＨ）检测该断裂位点的可行性。实验选用含有断裂位点区域的两个基因组克隆及位于断裂位上是的两个ｃｏｓ质粒探针与带有结构性到位（５）（ｐ１３．１ｑ１３．３）的线性ＤＮＡ共杂交（ＤＮＡ来自ＨＣＬ患者的细胞系）。实验证明该断裂位点将探针信号一分为二。根据这些结果描绘出断裂位点区域图。研究表明,ＤＮＡ纤维ＦＩＳＨ方法是绘制高精度物理图谱和检出遗传重排的一种有效的研究手段。     

钙通道阻滞剂对肾上腺素能受体激动剂促血管平滑肌细胞增殖的抑制

本工作观察到１０＾－６－１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ去甲明上腺素（ＮＥ）用１０＾－７－１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ异丙基肾上腺素（ＩＳＯ）可明显促进离体培养的血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）的增殖和ＤＮＡ的合成,并呈剂量依赖效应,该效应可为相应的受体阻断剂ｐｈｅｎｔｏｌａｍｉｎｅ（１０＾－６ｍｏｌ／ｌ）和ｐｒｏｐｒａｎｏｌｏｌ（１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ）所抑制;ｎｉｆｅｄｉｐｉｎｅ（１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ）和ｖｅｒａｐａｍｉ     

白介素－18

白介素－１８日本研究者ＵｓｈｉｏＳ等（１９９６）根据ＩＦＮ－γ诱导因子（ＩＧＩＦ）的结构特征和功能,将它命名的白介素－１８（ＩＬ－１８）。Ｈｙｏｇｏ医学院细菌学系Ｏｋａｍｕｒａ等（１９９５）从内毒素休克小鼠肝脏里克隆了小鼠ＩＬ－１８ｃＤＮＡ,其ＯＲＦ...