猴头菌子实体小分子提取物的分离与体外抑制幽门螺旋杆菌的分析

本研究以甲硝唑为阳性对照,利用HPD-100大孔树脂和95%乙醇将猴头菌子实体中小分子活性物质进行富集,得到乙醇制备液（MREEs）;然后对乙醇制备液分别使用石油醚（60-90℃）和氯仿进行多次萃取,得到石油醚萃取物（A1、A2）和氯仿萃取物（B）,并进行GC-MS测定;对MREEs和A1、A2、B分别进行药敏试验,同时对5种幽门螺旋杆菌进行最低抑菌浓度测定。结果表明,使用大孔树脂得到的MREEs有较好的抑菌活性,得到的A1、A2和B对幽门螺旋杆菌的抑菌率均高于40.0%,其中石油醚萃取物A1在Helicobacter pylori SSI中的抑菌率甚至高达62.9%;A1、A2和B使用GC-MS测定出的主要成分分别是邻苯二甲酸二丁酯（A1,4.53%和A2,6.93%）和棕榈酸2.87%,但仍有大量成分没有被测出。另外,在最低抑菌浓度试验中,A1相应组分对Helicobacter pylori W₂504、Helicobacter pylori 9和Helicobacter pylori ATCC 43504的最低抑菌浓度都为0.25mg/mL,A2对Helicobacter pylori 78的最低抑菌浓度仅为0.25mg/mL,而B对Helicobacter pylori W₂504、Helicobacter pylori 9的最低抑菌浓度均仅为0.125mg/mL,说明通过石油醚和氯仿萃取得到的猴头菌子实体提取物对幽门螺旋杆菌具有潜在的抑菌作用。     

不同方法提取光皮树籽油的GC-MS分析

目的 :利用GC-MS分析了三种方法提取的光皮树籽油化学成分。方法 :采取超临界CO₂ 、超声波和微波三种方法提取光皮树籽油。结果 :超临界CO₂ 萃取的光皮树籽油与超声波和微波的主要化学成分有差异 ,超临界CO₂ 萃取的油酸含量最高 ,并且品质高 ,质量稳定 ,处理工艺简单 ;而后二者亚油酸含量最高 ,品质较低 ,质量不稳定 ,需要脱色 ,处理工艺复杂。结论 :超临界CO₂ 萃取的光皮树籽油更具天然性和稳定性 ,超临界CO₂ 萃取法为提取光皮树籽油的较理想方法。     

胡芦巴超临界CO2萃取物的萃取条件优化及其对谷蠹的触杀活性

对胡芦巴Trigonella foenum-graecum L.中杀虫活性成分进行超临界CO₂萃取分离,并以主要储粮害虫谷蠹Rhyzopertha dominica Fabricius为对象,对其触杀活性进行研究。采用正交试验设计,以萃取液中活性成分的得率、毒力为考察指标,对杀虫活性成分的提取条件进行优化。结果表明：最佳萃取工艺为萃取压力25 MPa,萃取温度55℃,夹带剂为95%乙醇,固液比为200 g:30 mL。萃取压力和夹带剂体积对试验指标有非常显著的影响,萃取温度和夹带剂浓度的影响较小。优化后的萃取方案可达到5.96%的得率。萃取产物对谷蠹的触杀试验结果显示,优化后的超临界CO₂萃取工艺对胡芦巴中的杀虫物质具有良好的选择性,得到的萃取物对谷蠹处理10天后的致死中浓度为65.03 μg/cm²,触杀活性明显增加。     

超临界CO2萃取红景天中红景天苷、苷元酪醇的研究

采用超临界CO₂ 萃取法和乙醇常温浸提法相比较, 研究从红景天中提取红景天苷、苷元酪醇的工艺条件, 结论是:采用超临界CO₂ 萃取法能萃取出红景天生药中红景天苷的1.2%, 提取率不高, 但该方法能萃取出80%的苷元酪醇, 萃取液中苷元酪醇的相对含量可达45.68%;乙醇常温浸提法能将红景天苷、苷元酪醇同时有效萃取, 且得率较高, 但是萃取液中两物质相对含量较低, 进一步分离纯化将有难度。本研究结果表明, 将超临界CO₂ 萃取法和乙醇常温浸提法有效结合, 可实现两物质的有效分离, 推进红景天有效成分的产业化进程。     

超临界CO2萃取石香薷挥发油工艺的研究

石香薷（Molsa chinensis）为多年生草本植物,具有重要的药用价值。本文首次探讨了超临界CO2萃取的压力,温度,流量,时间等条件对石薷挥发油收率的影响,确定其最佳萃取条件,萃取压力15MPa,温度45℃,CO2流量25kg/h和90min,得率为3.56%,水蒸气蒸馏提取得率为1.62%,石油醚提取得率为1.87%,结果表明超临界CO2萃取挥发油比后二者质优,收率大大提高,萃取时间短,无溶剂残留。     

桑黄菌丝体和子实体中次级代谢产物及其活性的比较

研究桑黄发酵菌丝体次级代谢产物及活性与子实体的差异性,探讨其替代子实体的可能性。研究通过高效液相色谱分析和化学法比较菌丝体和子实体石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇4个萃取相中的成分差异,以二苯基三硝基苯肼自由基（DPPH）清除率和Trolox当量抗氧化能力（TEAC）作为抗氧化活性的指标、HepG2和MCF-7癌细胞的抑制率作为抑制肿瘤细胞生长的指标,比较其活性差异。结果表明,菌丝体和子实体4个萃取相在化学成分上存在差异;在活性方面,菌丝体各萃取相的抗氧化活性高于子实体,而子实体抗肿瘤活性优于菌丝体。菌丝体醇提取的总黄酮含量高于子实体醇提物,抗氧化活性和总黄酮含量有显著相关性,发酵菌丝体在抗氧化活性方面具有替代子实体的可行性。     

北五味子果实超临界CO2萃取工艺的研究

通过正交设计的试验方法,探讨了超临界CO₂法萃取五味子果实中木脂素的工艺条件,确定了最佳工艺条件为萃取压力30 Mpa,萃取温度50℃,萃取时间120 min。     

不同生长期草菇提取物的生物活性研究

对草菇不同生长期的菌丝体及子实体分别用95%乙醇提取,对获得的5个提取物进行了化学成分定性检验、HPLC图谱分析和体外抗肿瘤、抑制DPP-IV酶的活性研究。结果表明：草菇不同生长期的菌丝体及子实体中均含有生物碱、有机酸、甾类（或三萜）、糖类、氨基酸（蛋白）等物质。草菇4个生长期的菌丝体醇提物对正常细胞WPMY-1的增殖无抑制作用而对3种肿瘤细胞L1210、SW620、K562全部或部分的增殖有一定的抑制作用。说明这4个生长期的菌丝体醇提物具有抗肿瘤活性。子实体95%醇提物对肿瘤细胞L1210、SW620、K562和正常细胞WPMY-1的增殖均具有抑制作用,说明该部分可能具有细胞毒性。草菇不同生长期的菌丝体和子实体提取物均有一定抑制DPP-IV酶的活性,其中生长2周的菌丝体醇提物对DPP-IV酶的抑制活性较强,IC₅₀值达到0.32mg/mL,该结果说明生长2周的草菇菌丝体具有最佳的抗肿瘤和降血糖潜力。     

超临界CO2萃取洋葱挥发油工艺研究

本实验采用超临界CO2萃取技术从冻干洋葱粉中萃取挥发油。以洋葱挥发油得率为考察指标,经单因素及正交试验,考察了萃取温度、萃取压力、CO2流量、萃取时间4个因素对超临界CO2流体萃取的影响。结果表明萃取压力20 MPa,萃取温度35℃,CO2流量为14 kg/h的条件下萃取2.5 h为最佳工艺,洋葱挥发油得率达0.53%。     

小花假泽兰精油超临界CO_2提取工艺及其成分和抑菌活性研究

采用正交试验法研究超临界CO_2萃取法提取小花假泽兰精油的提取条件,采用GC-MS法分析测定精油的化学成分,并初步测定精油的抑菌效果.结果表明:超临界CO_2萃取小花假泽兰精油的较佳工艺条件为:采用先静态后动态的萃取方式,静态萃取时间20 min,动态萃取条件为萃取温度55℃,萃取压力35 Mpa,CO_2体积为40 mL/g,CO_2 流速为0.5～1.0 mL/min;从超临界CO_2萃取的小花假泽兰精油中鉴定了64种成分,占精油总量的79.80%,主要有萜类、醇类、脂肪酸、酯类、甾体类等;生物测定结果表明,超临界CO_2萃取物对小麦赤霉病菌和小麦纹枯病菌菌丝生长的EC_(50)分别为119.55 mg/L和78.27 mg/L. 果.结果表明:超临界CO_2萃取小花假泽兰精油的较佳工艺条件为:采用先静态后动态的萃取方式,静态萃取时间20 min,动态萃取条件为萃取温度55℃,萃取压力35 MPa,CO_2体积为40 mL/g,CO_2 流速为0.5～1.0 mL/min;从超临界CO2萃取的小花假泽兰精油中鉴定了64种成分,占精油总量的79.80%,主要有萜类、醇类、脂肪酸、酯类、甾体类等;生物测定结果表 ,超临界CO_2萃取物对     

黑木耳中抑制胰脂肪酶活性物质的提取工艺及体外抑制效果

本文以黑木耳醇提物和水提物为研究对象,以对胰脂肪酶活性的抑制率为指标,分别对其提取工艺进行了单因素和正交试验,选取优化后抑制率高的提取物进行抑制类型和3T3-L1前脂肪细胞方面的研究。结果表明醇提物的最佳提取工艺为提取温度70℃、提取时间1h、乙醇浓度90%、料液比1:20,抑制胰脂肪酶的IC₅₀=681.56μg/mL。水提物的最佳提取工艺为提取温度70℃、提取时间2h、料液比1:40,抑制胰脂肪酶的IC₅₀=850.59μg/mL,醇提物的抑制效果优于水提物。醇提物对胰脂肪酶的抑制类型为非竞争性抑制,抑制常数为4.69mg/mL;醇提物浓度低于1mg/mL时,对3T3-L1前脂肪细胞的活性无影响;浓度高于400μg/mL时即可显著抑制前脂肪细胞的分化。     

北虫草体外抗氧化和PC12氧化损伤修复作用的有效部位的筛选

采用系统溶剂法对北虫草子实体进行依次提取,制备得氯仿相、乙酸乙酯相和乙醇相三部位,利用化学发光法和H2O2诱导PC12氧化损伤修复模型,对三部位进行体外抗氧化活性和PC12氧化损伤修复作用测定。结果表明,乙酸乙酯相具有较强的抗氧化活性,是清除H2O2自由基和超氧自由基活性最强的部位,IC50值分别为88.5μg/mL和190μg/mL;乙酸乙酯相对由H2O2诱导的PC12细胞氧化损伤的修复作用较强,且呈现明显的浓度依赖性。无论从抗氧化活性,还是从对H2O2氧化损伤的修复作用,乙酸乙酯相均表现出了较强的作用,乙酸乙酯相是抗氧化活性和保护PC12细胞氧化损伤的主要有效部位。     

高速逆流色谱法制备灵芝萜烯酮醇

本研究建立一种从灵芝子实体提取物中快速制备灵芝萜烯酮醇的方法。以沪农灵芝1号子实体为原料,经乙醇提取、D101大孔树脂富集后,再经一次正相色谱柱层析,获得富含灵芝萜烯酮醇的流分。采用高速逆流色谱法对该流分进行分离,优化分离条件,获得的最佳条件为：溶剂体系为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水（V/V/V/V,12:24:18:9）,流速2.0mL/min,转速900r/min,上样量500mg,一次上样可得到纯度为90.9%的灵芝萜烯酮醇52.1mg,得率达到10.4%。该方法具有操作简单、污染小、成本低、得率和纯度高的特点,是规模化制备灵芝萜烯酮醇的一种新方法。     

基于UPLC-MS/MS定量检测法优化灵芝三萜热回流提取工艺的研究

基于超高效液相-三重四级杆质谱联用（UPLC-MS/MS）定量检测法优化出一种灵芝三萜热回流提取的工艺。通过本实验建立的灵芝三萜UPLC-MS/MS精确方法检测不同来源的7个栽培品种灵芝子实体中19个三萜化合物的含量,筛选出三萜含量较高的sd-2灵芝子实体作为提取原料,以三萜含量和提取物得率为指标,通过单因素和响应面实验对灵芝三萜的热回流工艺进行优化,获得的最佳条件为：乙醇浓度75%、提取时间2.5h、液料比14:1、提取次数2次。对获得的最佳提取工艺进行中试实验,灵芝子实体乙醇提取物的得率为6.10%,三萜含量为11.8591mg/g。研究结果可为灵芝三萜的工业大规模提取提供理论依据,为灵芝高附加值产品的开发利用提供技术支撑。     

迷宫栓孔菌生物学特性、驯化栽培及抗氧化活性

迷宫栓孔菌在药用上具有降血糖的功效,分布广泛,对采自吉林省白山市露水河镇红松王景区的迷宫栓孔菌Trametes gibbosa进行组织分离,得到菌株ZT-055,对其菌丝体最适培养条件和子实体驯化栽培进行研究,并测定栽培子实体的多糖抗氧化活性。在单因素试验基础上的正交试验结果表明：迷宫栓孔菌最适生长条件是碳源为果糖、氮源为酵母浸粉、温度为30℃、pH值为5.0;栽培试验中,通过17d的发菌,于30d左右开始形成原基,44d原基分化成菇蕾,57d左右形成成熟子实体;采用水提醇沉法提取多糖,苯酚-硫酸法测定多糖含量,结果表明迷宫栓孔菌ZT-055子实体多糖含量约为(80.51±5.1)mg/g,在多糖浓度为1.26mg/mL条件下,羟自由基清除率达到45%,超氧氢离子清除率达到48%,表明该菌具有较高的抗氧化活性。     

桑黄子实体醇提物对SW620结肠癌细胞的抑制作用

为评价桑黄Sanghuangporus sanghuang子实体醇提物对SW620结肠癌细胞的影响,用alamarBlue?法测定细胞增殖率,用流式细胞术碘化丙啶（propidim iodide,PI）染色法和2′,7′-dichlorofluorescin diacetate (H₂DCFDA)染色法分别检测细胞早期凋亡率、细胞周期变化和活性氧（reactive oxygen species,ROS）释放量,结果表明桑黄子实体醇提物在12.5-100μg/mL作用浓度下具有抑制SW620细胞增殖的作用,但对中国仓鼠卵巢（Chinese hamster ovary cell,CHO）细胞和小鼠骨髓巨噬细胞的增殖无显著抑制作用;桑黄子实体醇提物能诱导SW620细胞凋亡,引起细胞周期变化,可降低G0/G1和G2/M期细胞数量,并呈现浓度梯度依赖性,ROS实验结果提示桑黄子实体醇提物的促肿瘤细胞凋亡与ROS释放相关。     

金针菇CA基因家族分析及其对CO2的响应

金针菇栽培通过提高栽培室CO₂浓度来抑制菌盖生长,提高商品质量。碳酸酐酶能调节CO₂/HCO₃ ^-在细胞内的平衡,它可能是响应CO₂胁迫的关键酶。本研究利用我们已完成的金针菇Flammulina filiformis的基因组测序数据,以双色蜡蘑碳酸酐酶家族基因为参照,通过本地BLAST,得到7个金针菇碳酸酐酶家族的基因,分别命名为CA-1、CA-2、CA-3、CA-4、CA-5、CA-6、CA-7。基因结构、保守结构域和系统进化分析结果均支持这7个序列是碳酸酐酶家族的编码基因。高浓度CO₂胁迫处理金针菇子实体12h,CA-1、CA-2表达量与CO₂浓度正相关,CA-5负相关,CA-3、CA-4和CA-6没有响应,CA-7无明显规律。据此推测,CA-1、CA-2和CA-5可能是金针菇响应CO₂胁迫的关键基因之一,参与调控菌盖生长发育。     

空气CO2增高条件下荔枝叶片光合作用和超氧自由基产率

研究结果表明,生长在77±5PaCO₂分压下30d的荔枝幼树,其光合速率较大气CO₂分压(39.3Pa)下的低23%,光下线粒体呼吸速率和不包含光下呼吸的CO₂补偿点亦略有降低.空气CO₂增高使叶片最大羧化速率(V_cmax)和最大电子传递速率(J_max)降低,表明大气增高CO₂分压下叶片的光系统I(PSI)能量水平较低,叶片超氧自由基产率亦降低39%,叶片感染荔枝霜疫霉病率则从生长在大气CO₂分压下的1.8%增至9.5%.可能较低光合和呼吸代谢诱致较低的超氧自由基产率,而使叶片易受病害侵染.叶片受病害侵染后表现为超氧自由基的激增.在全球大气CO₂分压增高趋势下须加强对荔枝霜疫霉病的控制.     

Supercritical carbon dioxide extraction of astaxanthin from Haematococcus pluvialis with vegetable oils as co-solvent

Soybean oil and olive oil were investigated as continuous co-solvents for supercritical carbon dioxide (SC-CO₂) extraction of astaxanthin from Haematococcus pluvialis. Without co-solvents, only 25.40 ± 0.79% efficiency was achieved with SC-CO₂ extraction at 70 °C and 40 MPa at a continuous flow rate of 3 mL min⁻¹ for 5 h. In the presence of soybean oil or olive oil as a co-solvent, the extraction efficiency was enhanced, with the most appropriate level of soybean oil in the solvent mixture being 10% by volume. At this concentration and the above extraction conditions, the highest extraction efficiency of 36.36 ± 0.79% was obtained for soybean oil, a 30% increase in extraction efficiency compared with SC-CO₂ extraction without soybean oil, whereas the 10% olive oil increased the extraction efficiency further to 51.03 ± 1.08%, which was comparable to that obtained using ethanol as co-solvent.     

蛹虫草MF27高抗氧化活性提取物筛选及保肝作用研究

本研究对一株优质蛹虫草菌株MF27不同提取物进行体外抗氧化活性比较,筛选得到高抗氧化活性提取物,并进一步探究该提取物对CCl₄诱导的小鼠肝损伤的修复作用。以DPPH自由基和羟自由基的清除率为抗氧化评价指标,从菌丝体发酵液、菌丝体水提物/醇提物、以及子实体水提物/醇提物中筛选菌株MF27的高抗氧化活性提取物;以CCl₄致小鼠急性肝损伤为模型,通过检测血清生化指标、肝功指标的变化,来评价该高活性提取物的体内抗氧化保肝效果。体外抗氧化实验结果表明,MF27的不同提取物均具有较好的体外抗氧化活性,但对清除DPPH和OH自由基能力最好的提取物是子实体水提物,其对DPPH自由基的半数有效浓度（EC₅₀）为0.096mg/mL,对羟自由基的半数有效浓度（EC₅₀）为0.196mg/mL,当在1mg/mL 时对DPPH自由基的清除率为94.94%,对羟自由基的清除率为70.17%;体内抗氧化保肝结果显示,给药组（子实体水提物）相比模型组而言,小鼠血清中ALT、AST以及肝脏中MDA水平极显著降低（P<0.01）、SOD水平极显著升高（P<0.01）,表明子实体水提物能有效改善氧化性肝损伤,同时与阳性对照（联苯双酯）对比,给药组在肝脏指数上表现出相当的作用（P>0.05）。本研究表明菌株MF27的最有效抗氧化活性提取物是子实体水提物,它对体内氧化性肝损伤有一定的修复能力,揭示MF27子实体水提物具有成为抗氧化性肝损伤功能产品的潜力。