血常规检验中应注意的问题

血常规检验已由过去的显微镜下手工计数 ,转变为血液细胞分析仪自动计数 ,极大地提高了工作效率和工作质量 ,也为临床医生提供了更为广泛的参考数据。血液细胞分析仪的种类很多 ,根据其工作原理大致可分为光学型和电学型。目前国内普遍使用的是根据库尔特原理制造的库尔特血液细胞分析仪。库尔特血液细胞分析仪能精确测量悬浮液中颗粒的数量和大小 ,但是在使用过程中应注意如下问题 ,避免影响数据质量。1　加大理论知识学习力度　　有些实验室操作人员对血液细胞分析仪的原理和性能缺乏了解 ,过分依赖仪器 ,只看打印数据 ,对异常结果未做全…     

酶和发酵工程

880989细胞〔专,英〕/Walker,A.G.了UK Patent APPI.GB 2180852.Pub.08.04.87.Appl.GB 8523327,filed 20.09.85〔译自CBA,1987,(6),2469〕 本文介绍一种生化反应器,这种反应器是由容器、支持介质(如聚脂纤维或聚氨基甲酸饱沫)及介质内含有的物理法陷入细胞的颗粒所组成。这种颗粒可能是50一200拜大小的凝胶珠,每个颗粒含有大量陷人介质的细胞,如杂种瘤或植物细胞。(高吉寅)880990可溶性稳定酶〔专,英〕/Modro-v 1 eh,1 .E.…// US Patent US 4652524.Pub.24.03.87.ApPI.US 193116,filed02.10。80〔译自CBA,1987,(6),2470〕 把…     

观察口腔上皮粘膜细胞立体形状的简易方法

口腔上皮粘膜细胞是学生所必须观察的材料。以水为介质制做的临时装片,只能观察到口腔上皮粘膜细胞的平面图形。经大量的实验研究,我配出一种混合介质以代替水制作临时染色装片,即可在一般显微镜下,观察到口腔上皮粘膜细胞的立体形状及其内部结构,这对学生进一步理解细胞的立体形状以及动植物细胞在结构上的不同,是大有帮助的。将方法介绍如下: 取丙三醇(甘油,分析纯)和95%乙醇各一份,预先混合成甘油酒精溶液待用。在室温下,制成蔗糖的饱和水溶液。实验时,取蔗糖饱和水溶液一份(用量和甘油或酒精量相同),加入到预先配好的甘油酒精混合液中,配成1:1:1甘油、酒精、蔗糖饱和液的混合介质(以下简     

扩张莫尼茨绦虫(绦虫纲:圆叶目)的原肾管及原肾管概念的评述

本研究应用透射电子显微镜研究了扩张莫尼茨绦虫原肾管的细胞学特征 ,莫尼茨绦虫原肾管的焰茎球为一个过滤器结构 ,类似于“挡河坝”样构造 ,此构造由端细胞和近管细胞外突形成的肋条 (或称杆 )相互交错排列而成。肋条之间由细胞外物质构成的“膜”结构连接 ,过滤作用通过该“膜”发生。焰细胞与近管细胞交界处有裂缝或孔与细胞外的结缔组织 (实质组织 )相通 ;原肾管的毛细排泄管细胞质索之间没有隔状联结 ;毛细排泄管及排泄管的管腔内有大量珠状微绒毛突起以增加表面积。从扩张莫尼茨绦虫及其它一些无脊椎动物原肾管的研究结果表明 ,原原肾管概念将焰细胞作为封闭的盲端已不再合适 ,需要进行修订 ,建议修订为 :原肾管是一种焰细胞系统 ,通常由焰细胞、管细胞和肾孔细胞组成 ,焰茎球作为过滤装置与周围的结缔组织 (实质组织 )有或没有裂缝 (孔 )相通     

海湾扇贝血细胞的表面结构及超微结构

通过光镜、扫描电镜和透射电镜的观察对海湾扇贝血细胞的形态、表面结构及超微结构进行了研究。根据细胞的大小、形态结构可将血细胞分成四种类型:Ⅰ型小透明细胞,大小约(2·38±0·08)μm,约占比例30%-35%;Ⅰ型大透明细胞,大小约(4·41±0·33)μm,约占比例15%-25%;Ⅱ型小颗粒细胞,大小约(4·15±0·26)μm,约占比例20%-25%;Ⅱ型大颗粒细胞,大小约(8·26±0·52)μm,约占比例25%-30%。血细胞在血淋巴中的平均密度为(3·75±0·65)×107cell/ml。其中Ⅰ型透明细胞占55·3%,Ⅱ型颗粒细胞占44·7%。表面结构观察结果显示有5种形态:圆形血细胞,梨形或梭形血细胞,松果形血细胞,阿米巴样细胞,大型细胞,表面结构与功能密切相关。透射电镜观察结果表明血细胞主要归属于两大类型:Ⅰ型透明细胞和Ⅱ型颗粒细胞。超微结构显示颗粒细胞的细胞质颗粒可区分成三种类型:Ⅰ型高电子密度颗粒,Ⅱ型低电子密度颗粒和Ⅲ型中等电子密度颗粒,并推测Ⅰ型高电子密度颗粒是细胞吞噬的异物(微生物等)或细胞内的废物(沉积颗粒,衰老的胞器或碎片);Ⅱ型低电子密度颗粒是溶酶体类的胞内分泌颗粒,来源于高尔基复合体或内质网;Ⅲ型中等电子密度颗粒可能是次级溶酶体,由Ⅰ型颗粒向Ⅱ型颗粒融合并注入裂解酶类而形成[动物学报51(3):486-494,2005]。     

四川短尾唾液腺的组织学观察

利用生物显微技术观察和研究了四川短尾鼩(Anourosorex squamipes)唾液腺的组织结构。结果表明,腮腺属纯浆液腺,有闰管和分泌管,无颗粒曲管;颌下腺属混合腺,以混合性腺泡为主,有少量浆液性腺泡和黏液性腺泡,有闰管、颗粒曲管和分泌管;舌下腺属纯黏液腺,有闰管和分泌管,无颗粒曲管,但在分泌管上存在有颗粒曲管细胞。     

植物细胞吸水力公式的讨论及扩展

一、引言测定细胞或组织吸水力的方法有很多种,通常应用的有下列两类的方法:是把材料放在不同浓度的水溶液中,观察材料的体积变化或溶液的浓度变化。这两者都是依据如果植物细胞或组织与周围环境溶液处于渗透平衡时,吸水力S=O,     

蔗糖酶在尼龙丝上的固定化及酶管性能研究

利用盐酸水解法处理尼龙丝表面,采用戊二醛交联法将蔗糖酶固定在尼龙丝上,制成酶丝,进而制成酶管.该酶管可用于蔗糖的测定,蔗糖通过酶管分解成葡萄糖,再用葡萄糖氧化酶(GOD)电极测糖.酶管的最适 pH 为5—6,最适温度范围:30—40℃.溶液的流速对酶管的转化效率有显著影响.流速为1.3ml/min 时,蔗糖浓度在0—5mmol/L 范围内,酶管的转化效率基本恒定,约为28.5%.用同一浓度的蔗糖溶液重复实验,酶管的重复性很好,CV＜1%。酶管活力至少稳定8d(天)以上.     

利用甲壳素固定大肠杆菌（E.coli）细胞转化苯丙酮酸形成L—苯丙氨酸的研究

利用甲壳素作为固定化介质,能够保留83.3％的游离细胞转氨酶活性,以0.35mol/L苯丙酮酸为前体,于37℃下反应9小时,可产L-苯丙氨酸54.3g/L,其克分子转化率为94％。同时,用25％戊二醛溶液(30μl/g·cell)处理细胞1小时,再用0.3％OP溶液浸泡处理15小时,可以使固定化细胞转化率有较大的提高,Mg~(2+)对转化也有促进作用。     

~(60)Coγ-线对人血淋巴细胞DNA和RNA合成能力的影响

T例人血在体外接受~(60)Coγ-_线照射后进行培养,用~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)和~(14)C-尿嘧啶核苷(~(14)C-UR)作掺入实验,以反映DNA和RNA的合成能力。应用滤膜法收获细胞,液体闪烁计数器测定双标记样品,发现γ-线对DNA和RNA合成的影响有一定规律,即随照射剂量的增加,~3H和~(14)C掺入的放射性呈指数下降。经统计处理分别得到照射剂量和~3H-TdR、~(14)C-UR掺入的放射性计数的对数值两变量间的直线迥归方程。10拉德的照射导致~3H—TdR和~(14)C-UR掺入的放射性计数显著性减少,RNA比DNA合成受抑更明显。     

自组装IKVAV多肽纳米纤维支架凝胶及其对嗅鞘细胞的作用

旨在观察自组装IKVAV多肽纳米纤维支架凝胶对鼠嗅鞘细胞(OECs)的作用。通过调整IKVAV溶液pH值并加入培养液触发多肽自组装为支架凝胶, 用原子力显微镜检测IKVAV分子可以自组装成编织状纳米纤维(直径为3~5 nm)。采用原代分离培养方法获得OECs单细胞悬液后, 使用差速贴壁法两次纯化OECs且在第12天通过免疫染色计数OECs纯度为85%。将IKVAV多肽纳米纤维支架凝胶与OECs复合培养, 倒置显微镜下观察OECs生长良好, Calcein-AM/PI活、死细胞染色表明活细胞数达95%。CCK-8法间接细胞计数证实IKVAV多肽可促进OECs的黏附, 对OECs增殖没有影响。由此可见IKVAV多肽可以自组装成纳米纤维支架凝胶且对OECs有良好的生物相容性及黏附作用, 可作为神经组织工程支架材料。     

在哺乳动物心肌中可记录出钠-钙交换电流

产电性Na-Ca 交换是心肌细胞膜排Ca~(2 )的重要机制,其交换率为3 Na∶/Ca。日本Kimura 用细胞灌流和全细胞电压钳制术,首次直接记录到外向Na-Ca 交换电流。用宽斜面玻璃管(直径4～5μm,阻抗1～2MΩ)将溶液注入豚鼠心室肌细胞。配制的浸浴液和管溶液可阻断大多数通道电流和产电性Na-K 泵,以减少时间依赖性电流成分,使电流-电压(I-V)近乎为直线关系。实验先用不含Na~ 的胞内溶液和不含游离Ca~(2 )的胞外溶液灌流,再灌流1 mmol/L Ca~(2 ),外向膜电     

植物细胞培养物的生长率测定

为了选择测定生物加工工程所需的植物细胞生长动力学的最佳方法,加利福尼亚大学的D.D.Y.Ruy及其同事比较了测定植物悬浮细胞生长率的几种方法.他们比较了利用细胞鲜重、细胞干重、细胞计数、细胞沉降容积、细胞充填容积、蛋白含量、核酸含量、细胞浓度和导电性,测定西洋梨(Pyrus communis)培养细胞生长率的方法, 上述研究者报道,除核酸测定外,试验的各种方法得到的比生长值相同.但他们认为导电性测定法最佳,原因是:(1)无害、无需取样或湿性化学分析;(2)能进行连续的原位或在线监测;(3)测定所需时间短;(4)经济有效;(5)不受培养中问题如细胞增殖、生长形态学或生长密度的影响.     

BALB/C小鼠某些血液指标的生理数据

我室近年来积累了一批健康BALB/C小鼠外周血液指标和骨髓有核细胞计数资料,今对其中540例较完整的进行整理,并和其他作者的结果进行比较,以供实验中参考。材料和方法本校实验动物所饲养繁殖的健康BALB/C品系小鼠540只,雌雄各半,体重18—25克。自尾静脉采血检查外周血的血小板数、红细胞数、网织红细胞数、白细胞总数和分类,进行红细胞压积、血红蛋白含量测定,计算其血液绝对指数以及骨髓有核细胞计数。用常规方法测定各项指标。血红蛋白的测定用72—Ⅰ型分光光度计;血涂片用瑞氏染色计数200个白细胞;网织红细胞计数用1.5%煌焦油蓝溶液和…     

一种适用于生产转染色体动物的微细胞制备方法

微细胞介导的染色体转移技术(MMCT)是一项将外源染色体转入哺乳动物细胞的技术,具有广阔的应用前景.与体细胞核移植技术结合,MMCT可用于生产具有重要医学药用价值和优良农业生产性状的转染色体动物.制备高质量的微细胞是关系MMCT技术成功的关键步骤之一.通过荧光染色和吉姆萨染色分析,结果表明,A9(neo12)细胞经0.2mg/L秋水仙素酰胺处理48h后,89%的细胞产生微核化,每个细胞平均形成10个微核.微核化的细胞在含有20mg/L细胞松弛B的Percoll密度梯度介质中,经39000g高速离心后,包含微细胞、完整细胞、细胞核和细胞碎片的混合液,依次通过8μm和5μm孔径的滤膜过滤后可获得纯化的微细胞溶液.通过光学显微镜和吉姆萨染色观察,可见微细胞为一群直径约为3～5μm的类细胞核的球形物质.微细胞PCR技术首次用于检测微细胞溶液的质量,检测结果显示,所制备的溶液中均匀分布着带有目的染色体的微细胞,适用于进一步作转染色体动物实验.     

血管内皮生长因子蛋白在大鼠睾丸和附睾的表达和定位研究

为探讨血管内皮生长因子(VEGF)在雄性生殖系精子发生发育和成熟过程中的调控作用,应用免疫组化、Periodic acid-Schiff(PAS)染色及蛋白质免疫印迹技术,检测VEGF蛋白在成年大鼠睾丸和附睾的表达和定位情况。Western-blots显示,在大鼠睾丸和附睾内均有VEGF蛋白(约45kD)的表达;免疫组化显示,睾丸内VEGF见于圆形和长形精子细胞、Sertoli细胞和Leydig细胞,免疫阳性产物位于细胞质内。精子细胞的VEGF表达伴随精子细胞项体发育的全过程,精子残余体呈强阳性。附睾内VEGF表达于附睾管上皮,且有区域和细胞特异性。附睾起始段的所有上皮主细胞内都有VEGF阳性颗粒;头、体、尾各段的VEGF阳性细胞多数与含PAS阳性颗粒的细胞重合,证明为亮细胞;近端附睾的管腔内可见精子头部呈VEGF阳性染色。睾丸、附睾间质血管内皮为VEGF阴性。上述结果表明,VEGF蛋白可由生殖细胞和附睾管上皮细胞直接产生,它可能以自分泌和／或旁分泌的形式共同作用于睾丸和附睾的生殖细胞和血管内皮,直接或间接影响精子的发生、发育和成熟过程,特别是精子顶体的形成过程,并可能与精子在附睾内的成熟有关。     

血管内皮生长因子蛋白在大鼠睾丸和附睾的表达和定位研究

为探讨血管内皮生长因子(VEGF)在雄性生殖系精子发生发育和成熟过程中的调控作用,应用免疫组化、Periodic acid-Schiff(PAS)染色及蛋白质免疫印迹技术,检测VEGF蛋白在成年大鼠睾丸和附睾的表达和定位情况。Western-blots显示,在大鼠睾丸和附睾内均有VEGF蛋白(约45kD)的表达;免疫组化显示,睾丸内VEGF见于圆形和长形精子细胞、Sertoli细胞和Leydig细胞,免疫阳性产物位于细胞质内。精子细胞的VEGF表达伴随精子细胞顶体发育的全过程,精子残余体呈强阳性。附睾内VEGF表达于附睾管上皮,且有区域和细胞特异性。附睾起始段的所有上皮主细胞内都有VEGF阳性颗粒;头、体、尾各段的VEGF阳性细胞多数与含PAS阳性颗粒的细胞重合,证明为亮细胞;近端附睾的管腔内可见精子头部呈VEGF阳性染色。睾丸、附睾间质血管内皮为VEGF阴性。上述结果表明,VEGF蛋白可由生殖细胞和附睾管上皮细胞直接产生,它可能以自分泌和/或旁分泌的形式共同作用于睾丸和附睾的生殖细胞和血管内皮,直接或间接影响精子的发生、发育和成熟过程,特别是精子顶体的形成过程,并可能与精子在附睾内的成熟有关。     

疫苗

920121微载体ONA盆组细胞用于生产HBsAg仁会,英」/Yuan,2.Y.一/Ann.N.Y.Acad.Sc,一1990,613一555一346〔译自DBA,1992,10 (9),91一04958〕 将一个编码乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原全序列的3.5 kb Hindlll/Pstl片段以及取自肝瘤pLc/PRF/5细胞的侧序列置入牛乳头状瘤病毒载体质粒pBHSne015,形成表达质粒pBHSneos。用pBHSneos质粒转染LTK细胞,得重组细胞系BHSi,能产生HBV表面抗原(HBVsAg),分子量为27000。BHSi或葡糖氧化酶与藻酸钠(Kelc。)混合,并经喷气管嘴喷人1。1%CaCI:溶液中,形成小珠。用0.05%聚一L一赖氨酸溶液处理…     

嗜酸性细胞与嗜酸性细胞趋化因子

嗜酸性细胞是保护性杀伤细胞,主要杀伤多细胞寄生虫,有吞噬抗原一抗体复合物、被抗体覆盖了的细菌和某些病毒的功能,亦有调节变态反应的作用。过去认为嗜酸性细胞能中和炎症介质而起抗炎作用;目前有人提出嗜酸性细胞可能是炎症反应的原发性介质,具有细胞毒性。嗜酸性细胞趋化因子(ECF)的来源是肥大细胞、嗜碱性细胞、补体系统、淋巴细胞、抗原-抗体复合物以及某些癌肿(肺大细胞癌)等。ECF过多或活性过高是诱发嗜酸性细胞增多症的常见原因。     

电泳

在外加电场的作用下,混悬于液体中的荷电颗粒(离子或分子)向一极迁移的现象叫做电泳。由于荷电颗粒的净电荷和大小的不同就以不同的速度向一极迁移,因而可将混合物中性质极为相似的不同颗粒进行有效的分离。此外,电泳法还应用于测定颗粒的迁移速度,从而算出其分子量。因此电泳法是目前普遍使用的生物学实验技术之一。