蚯蚓解剖实验的一点小经验

做解剖蚯蚓实验时,用活蚯蚓经酒精麻醉后解剖,由于其体壁薄而软,易将内脏剪坏,使血液以及肠内容物溢出,固定时又易把体壁扯破,解剖时间较长,效果不理想。用5％福尔马林溶液浸泡后的蚯蚓,由于浸泡时间过长,蚯蚓收缩厉害,体壁变得厚而硬,虽易解剖,但内脏均变白,较难看清血管和心脏。我们通过多次实验总结出,将活蚯蚓放在5％福尔马林溶液     

蚯蚓解剖实验的一点经验

解剖蚯蚓如按常规,用5％福尔马林溶液浸泡后的蚯蚓做解剖实验,因浸泡后蚯蚓收缩,体壁变厚变硬,虽容易解剖但内脏已退色,血管、心脏较难看清。如用活蚯蚓直接麻醉后解剖(10％酒精浸泡5～10min),由于此时蚯蚓体壁薄而软,容易将消化管剪破,使肠内容物溢出,影响观察。我们经多次实践总结,认为将药液直接注入蚯蚓体腔,解剖效果较好。具体方法如下:     

不同蚯蚓采样方法对比研究

蚯蚓种类组成和丰度变化是反映农业管理措施对土壤质量影响的重要指标。为研究利用芥末悬液等方法进行蚯蚓样品采集的有效性和准确性,寻求合理有效的蚯蚓种群特征调查方法,在我国东北玉米连作黑土上分别运用手拣法、福尔马林溶液驱赶法、芥末+水悬液及芥末+乙酸悬液驱赶法,以及驱虫剂与手拣法相结合的方法进行蚯蚓样品采集,将上述7种方法测得的蚯蚓丰度、生物量及年龄组成信息进行了系统分析。结果表明,福尔马林溶液驱赶法不结合手拣法使用时测得的蚯蚓丰度及生物量远远低于其他方法,尤其幼年蚯蚓比例偏低,并不能反映真实的蚯蚓种群特征。使用芥末悬液做驱虫剂有效性明显提高,尤其芥末+乙酸悬液,测得的蚯蚓丰度比手拣法高22.3%。福尔马林溶液结合手拣法后有效性大大提高,测得的蚯蚓丰度和生物量分别是其单独使用时的19.1和9.3倍,但相对其他驱虫剂方法仍高估了成年蚯蚓的比例;芥末+水悬液和芥末+乙酸悬液方法结合手拣法后收集到蚯蚓的数量分别提高了67.8%和89.1%,平均个体重量分别是原来的1.8和1.3倍,说明芥末悬液不会杀死小个体的幼年蚯蚓,但少部分大个体蚯蚓及洞穴不与地表相接的蚯蚓可能并不能被其驱赶至地表,结合手拣法后可以弥补这个缺陷。芥末+乙酸悬液结合手拣法收集到的成年及幼年蚯蚓数量和生物量均显著高于其他方法(P<0.05),既能有效地驱赶小个体和幼年蚯蚓,又可以收集到洞穴不与地表相接的土栖型蚯蚓,因此可以作为真实有效地反映蚯蚓种群特征的采样方法之一。     

茶枯溶液在蚯蚓采样中的应用

蚯蚓是陆地生态系统中重要的大型土壤动物之一,其种类组成、种群大小及群落结构在一定程度上可以反映当地的土壤状况.常用的蚯蚓采样方法如手挖、电击法、福尔马林法、芥末法、异硫氰酸丙烯酯法存在很多差异,各方法都存在一定缺点.本研究应用茶枯溶液进行蚯蚓采样,操作简便易行.试验结果表明,茶枯法在荷木林、马占林、马尾松林的单位面积所驱赶出的蚯蚓个体数依次为62.1、70.3、96.2 number m-2,各林区采样效率依次为80.1%、70.9%、75.8%;3林区平均个体数采样效率为75.3%.除内栖类蚯蚓西土寒宪蚓外,其他蚯蚓种均能完全被驱赶采样;未能采样蚯蚓大部分为西土寒宪蚓幼体;在进入干季11月份采样效率显著降低.     

芸豆凝集素及壬苯醇醚对蚯蚓内外表皮作用的比较

[目的]探究芸豆凝集素(KBL)凝胶剂及常用避孕杀精剂壬苯醇醚(Nonoxynol-9,N-9)对蚯蚓(爱胜蚓属,Eisenia)内外表皮细胞的作用及损伤程度。[方法]分别用自来水将KBL凝胶制剂和N-9稀释为浓度分别为0. 05、0. 1、0. 2、0. 5、1、2 mg/m L的溶液,对照组为自来水。将蚯蚓放入各组溶液中浸泡培养,并用台盼蓝进行活体染色,在不同时间肉眼观察蚯蚓的存活情况,同时取材进行Bouin固定并制作石蜡切片,显微镜下观察不同实验组体表上皮细胞和消化道上皮细胞损伤程度。[结果]相同浓度的N-9与KBL凝胶剂,N-9对上皮细胞的刺激损伤远大于KBL;浓度≤2 mg/m L及以下的KBL凝胶制剂不会对蚯蚓上皮细胞造成损伤,反之N-9溶液在≥0. 5 mg/m L时即可破坏蚯蚓上皮细胞,且N-9浓度越高,对蚯蚓的损伤程度越明显。[结论]浓度≤2 mg/m L及以下的芸豆凝集素凝胶剂不会对内外上皮细胞造成损伤,可以有效用于避孕,其抗病毒作用有助于减少性传播疾病的风险。     

蚯蚓中抗肿瘤蛋白组分的提取分离及其抗肿瘤活性

以赤子爱胜蚓为原料 ,通过蛋白质的丙酮沉淀和凝胶过滤 ,分离得到一组抗肿瘤活性蛋白成分 (简称蚯蚓抽提物 ) ;这组成分富含Fe、Zn、Cu以及Se等微量元素 ,蛋白含量为 6 0 4 3± 2 36 %(n =5 ) .体外实验中 ,通过MTT法和SRB法测定了蚯蚓抽提物对多种人癌细胞株 (HCT 116、SY5Y、K5 6 2、MGc80 3和HeLa)以及正常细胞株 (HEK2 93和COS 7)的抑制杀伤率 .结果表明 ,蚯蚓抽提物对癌细胞的杀伤有一定的选择性 ,受试人癌细胞达到 5 0 %生长抑制率所需作用浓度约 6 0～110mg L ;但是 ,10 0℃煮沸 5min后 ,该抑制活性完全消失 .通过纤维蛋白平板法 ,测得蚯蚓抽提物同时具有纤溶酶和纤溶酶原激活酶的活性 .体外测得丝氨酸蛋白酶抑制剂aprotinin和PMSF能显著抑制蚯蚓抽提物的细胞杀伤活性 .体内实验中 ,蚯蚓抽提物能有效延长荷瘤 (S180 )小鼠的生存时间 ,并使其身体机能得到明显改善 .腹膜内注射剂量为 2 8mg kg和 36mg kg时 ,生命延长率分别为135 3%和 12 3 5 % ,和标准药物 (环磷酰胺 )治疗后结果 (76 5 % )相比 ,有显著性差异     

石油污灌土壤污染物的残留与生态毒理

土壤样品采自沈阳东部石油污水灌渠的上、中、下游。进行了污染物 (Cd、矿物油 )含量分析和生态毒性试验。重金属采用原子吸收分光光度仪测定 ,矿物油采用紫外分光光度计测定。生态毒性试验分别参照国际标准组织 (ISO)和OECD指南 ,进行了植物毒性试验和蚯蚓毒性试验。植物试验以小麦种子发芽根伸长抑制率为试验终点 ,试验周期 5 0h ,蚯蚓毒性试验以蚯蚓死亡率和体重增长抑制率为试验终点 ,试验周期 2 8d。结果表明 ,所有土壤均有矿物油积累 ,含量为 6 6 2 2～ 1391 14mg·kg-1,重金属Cd略高于土壤背景值 ,含量为 0 0 6～ 0 37mg·kg-1。然而 ,土壤对高等植物表现有不同程度的生长刺激效应 ,对蚯蚓有急性致死及慢性亚致死效应。种子发芽根伸长抑制率为 - 2 8 6 1%～ - 5 4 6 5 % ,蚯蚓 2 8d死亡率最大值为 10 %。蚯蚓 14d和 2 8d体重增长抑制率分别为 - 5 13%～ - 2 8 0 5 %和 - 31 78%～ 8 0 8%。研究表明 ,长期石油污水灌溉土壤中矿物油的低积累和较明显的生态毒性。     

关于蚯蚓的实验观察课

这一节课是在初二动物学中,学习了蠕形动物,蚯蚓的外部形态和内部构造两节课后,紧接着进行的。目的在使学生巩固蚯蚓的形态构造的知识,并在这一基础上使学生了解动物体的构造是和它的生活条件统一的,从而体现蠕形动物的构造比腔肠动物既复杂,又高等;并为以后讲节肢动物的进化作好准备。课前准备好活蚯蚓十几条,清水一杯,玻片六张,预先浸在清水内,用酒精或高粱酒慢慢麻醉,全麻醉的蚯蚓6—7条,解剖刀、剪或剃胡刀片,麻醉后用10%蟻醛固定的大蚯蚓标本6个,放大镜6个,分学生为6个组。     

基于因子分析的Cd~(2+)胁迫下赤子爱胜蚓氧化应激响应

蚯蚓受到胁迫时,体内立即产生氧化应激反应,从而使得蚯蚓成为一种灵敏的指示性生物而被广泛应用于各类污染物的监测指示中。由于与蚯蚓氧化应激反应相关的因素众多,找出污染物胁迫过程中重点监测的指标是污染监测警示过程的现实需求。因子分析是在损失较少信息的前提下,将原来多个变量转化为少数的几个综合指标的一种统计方法。本研究运用该方法对重金属胁迫下蚯蚓氧化应激相关指标进行筛选和分析。试验在人工土壤条件下进行,分短期和长期试验2组,前者试验周期10 d,每天取出1条蚯蚓,后者试验周期为30 d,每10天取出1条蚯蚓。每组均设定0、50、100、125、250和500 mg·kg-1的Cd~(2+)浓度梯度溶液,选择蚯蚓环带后部进行体内SOD、POD、GPX、GST、MDA、CAT、VE和ACh E的测定。结果表明:短期试验组蚯蚓受到Cd~(2+)胁迫1~3天时,蚯蚓体内氧化应激的主要指标是CAT,4~5天时是MDA,6~7天时是POD,在第8天时是GST和GPX,在9~10天时是CAT,而在长期试验中,蚯蚓体内氧化应激的主要指标则是GPX。     

观察蚯蚓背血管收缩舒张和心脏跳动的方法

挑选粗大、生活力强的蚯蚓,用自来水冲洗干净,放在培养皿中,倒入少量95%的酒精,立即把盖盖好,用手托起培养皿慢慢摇动3-5分钟,等蚯蚓身体肌肉松弛,失去支撑力、不大活动时,将蚯蚓取出,冲去体表粘液,用常规法     

帽儿山森林生态系统蚯蚓生态分布研究

蚯蚓本研究采用大型土壤动物手拣法和器测法 ,野外调查与室内实验相结合 ,揭示了帽儿山森林生态系统蚯蚓的生态分布规律及其与环境因子的相互关系。水平分布调查表明 ,白桦林的蚯蚓生物量和个体密度远低于其它 3个林型 ;地上垂直分布调查表明 ,蚯蚓生物量与个体密度从山谷到山顶逐渐增多。地下垂直结构调查表明 ,帽儿山地区蚯蚓分布的垂直结构表聚性明显。各种调查均揭示了蚯蚓种群大小随生境条件不同而变化 ,特别是水分条件 ,适合调查地区蚯蚓生存的土壤含水量范围大致为 4 0 %～ 6 5 %。     

水蚯蚓的养殖

水蚯蚓 (L imnodrilus hoffmeisteri)又称丝蚯蚓、红线虫 ,是环节动物中水生寡毛类的总称 ,属淡水底栖生物。具有营养全面、蛋白质含量高达 70 %左右 ,粗蛋白中氨基酸齐全、自然资源丰富等特点。是观赏鱼及水生经济动物鳖、虾、鳗鱼等理想的鲜活饵料 ,尤其适合于水生动物的种苗的生长需要 ,具有广阔的应用前景。目前养殖水蚯蚓已成为我国新兴的一种养殖业。水蚯蚓体细长 ,一般 4～ 5 5 mm,粗 0 .5～ 1.5 mm,呈暗红色 ,终生生活在微水流、多腐烂有机物的水底淤泥中。常将身体前端钻入泥中 ,后端在泥面摆动 ,受惊缩入泥中。喜温 ,最适水温 15…     

Bt水稻秸秆还田对赤子爱胜蚓生长发育和生殖的影响

Bt蛋白能通过转Bt基因作物的秸秆还田进入土壤,进而可能会对土壤动物如蚯蚓的生长发育和生殖造成影响.为评估Bt水稻对赤子爱胜蚓的影响,本文模拟秸秆还田,在土壤中添加2.5%、5%、7.5%和10% Bt水稻(b2B138)及其同源水稻(安丰A)秸秆,分别在饲养赤子爱胜蚓7、15、30、45、60、75和90 d后观测蚯蚓的存活率、相对生长率和生殖情况,以及秸秆土壤混合物和蚯蚓体内的Cry1Ab蛋白含量.结果表明:较高还田量(7.5%和10%)Bt水稻秸秆处理对赤子爱胜蚓存活率有抑制作用;Bt水稻秸秆还田对赤子爱胜蚓的相对生长率没有不利影响;还田量为5%、7.5%和10%时,Bt水稻秸秆还田能促进蚯蚓的生殖.酶联免疫吸附测定法(ELISA)结果表明: 在Bt水稻土壤混合物中,蚯蚓体内均能检测到Cry1Ab蛋白,且前者随着时间延长而显著减少.因此,还田量为2.5%和5%时,Bt水稻秸秆还田释放的Cry1Ab蛋白对赤子爱胜蚓的生长发育和生殖没有不利影响.     

Bt玉米秸秆杀虫蛋白对赤子爱胜蚓酶活性的影响

Bt玉米分泌的Bt蛋白可通过秸秆还田、根系分泌、花粉飘落等途径进入土壤.本文模拟秸秆还田,在土壤中添加5%或7.5%的Bt玉米及其同源常规玉米秸秆饲养赤子爱胜蚓,分别于7、14d后检测蚯蚓总蛋白含量、乙酰胆碱酯酶(AchE)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性.结果表明:同一玉米品种,同一秸秆添加量处理下,与培养7d相比,培养14d的蚯蚓总蛋白含量下降,AchE、CAT和SOD酶活性提高,GSH-PX酶活性降低.同一培养时间、同一秸秆添加量处理下,与常规相比,Bt玉米培养的蚯蚓SOD活性提高,AchE和GSH-PX活性下降,总蛋白含量和CAT活性无显著变化.表明Bt玉米秸秆处理对蚯蚓总蛋白没有抑制作用,能降低AchE和GSH-PX活性,对CAT没有诱导作用,但在短时间内能诱导蚯蚓SOD酶活性.     

Bt水稻秸秆还田对赤子爱胜蚓生长发育和生殖的影响

Bt蛋白能通过转Bt基因作物的秸秆还田进入土壤,进而可能会对土壤动物如蚯蚓的生长发育和生殖造成影响.为评估Bt水稻对赤子爱胜蚓的影响,本文模拟秸秆还田,在土壤中添加2.5%、5%、7.5%和10% Bt水稻(b2B138)及其同源水稻(安丰A)秸秆,分别在饲养赤子爱胜蚓7、15、30、45、60、75和90 d后观测蚯蚓的存活率、相对生长率和生殖情况,以及秸秆土壤混合物和蚯蚓体内的Cry1Ab蛋白含量.结果表明:较高还田量(7.5%和10%)Bt水稻秸秆处理对赤子爱胜蚓存活率有抑制作用;Bt水稻秸秆还田对赤子爱胜蚓的相对生长率没有不利影响;还田量为5%、7.5%和10%时,Bt水稻秸秆还田能促进蚯蚓的生殖.酶联免疫吸附测定法(ELISA)结果表明: 在Bt水稻土壤混合物中,蚯蚓体内均能检测到Cry1Ab蛋白,且前者随着时间延长而显著减少.因此,还田量为2.5%和5%时,Bt水稻秸秆还田释放的Cry1Ab蛋白对赤子爱胜蚓的生长发育和生殖没有不利影响.     

介绍蚯蚓学习行为的几个实验

常见的粪肥中的爱胜属(Eisenia)或花园里的异唇属(Allolobophora)蚯蚓,都是适用于动物行为实验的蚯蚓种。 1.蚯蚓习惯化行为的实验习惯化是学习的一种简单形式。习惯化形成后,动物对再现的特定刺激的反应逐渐减弱,以至最后完全不起反应。但习惯化和肌肉疲劳或感觉适应不同,尽管肌肉疲劳或感觉适应也能引起反应的降低或完全停止。实验的准备。在两个培养皿中各放入一条蚯蚓,盖上盖,一条作为试验,另一条作为对照观察。将蚯蚓放入培养皿以前,一定要保持其     

蚯蚓野外采样方法评述

蚯蚓作为土壤生态系统的关键组成部分,不但可以改善土壤结构,而且与许多生物化学养分循环直接相关,对土壤质量改善和土壤生产力提高起到至关重要的作用.然而,蚯蚓野外采样方法的系统研究和评估还比较缺乏,在国内尤其少见.本文综述了目前国内外常见蚯蚓野外采样方法的操作过程、优缺点、有效性以及对蚯蚓种群特征研究结果可能产生的影响,认为在允许扰动土壤的区域,利用驱虫剂与手拣法相结合进行蚯蚓采样能够较为准确地反映蚯蚓种群和生物量的真实特征;在不能扰动土壤的区域异硫氰酸烯丙酯(AITC)溶液方法是最佳选择.     

接种蚯蚓对秸秆还田土壤碳、氮动态和作物产量的影响

通过为期 2年的小区 (2 .8m× 1.0m)试验 ,研究了旱作水稻 小麦轮作条件下接种蚯蚓对施用玉米秸秆 (第一季用量 15 0 0g·m-2 ,以后各季为 75 0g·m-2 )农田土壤碳、氮动态和作物产量的影响 .结果表明 ,接种 10条·m-2 或 2 0条·m-2 环毛蚓 (Pheretimasp .)对土壤有机碳和全氮含量无显著影响 ,蚯蚓活动未造成土壤C库的衰减 ,土壤碳、氮基本维持平衡 .接种蚯蚓处理土壤N的矿化作用增强 ,矿质N含量提高 ,NO3 - N含量增加 ,而且稻季比麦季增加更为明显 .接种蚯蚓在稻、麦季均能提高微生物量碳、氮含量 ,蚯蚓具有扩大土壤微生物量N库和促进有机N矿化的双重作用 .这种作用在有效C源供应丰富的作物生长发育旺盛期更为明显 .接种蚯蚓对旱作水稻和小麦有一定的增产作用 ,其中水稻的增产幅度达 9.3% ,小麦为 5 .1% .接种蚯蚓后土壤容重明显降低 ,孔隙度显著增加 .蚯蚓在保持土壤C库平衡的同时 ,对于促进秸秆有机肥N素养分的再循环和作物生产力的提高具有重要的生态学意义 .     

蚯蚓野外采样方法评述

蚯蚓作为土壤生态系统的关键组成部分,不但可以改善土壤结构,而且与许多生物化学养分循环直接相关,对土壤质量改善和土壤生产力提高起到至关重要的作用.然而,蚯蚓野外采样方法的系统研究和评估还比较缺乏,在国内尤其少见.本文综述了目前国内外常见蚯蚓野外采样方法的操作过程、优缺点、有效性以及对蚯蚓种群特征研究结果可能产生的影响,认为在允许扰动土壤的区域,利用驱虫剂与手拣法相结合进行蚯蚓采样能够较为准确地反映蚯蚓种群和生物量的真实特征;在不能扰动土壤的区域异硫氰酸烯丙酯(AITC)溶液方法是最佳选择.     

环毛属蚯蚓一新种及其生殖器官多态记述

1982年4—5月,作者在四川省酉阳县、秀山县等地采集蚯蚓标本,发现环毛属蚯蚓一新种。该种蚯蚓共采得30条,全为成熟个体。仅一条标本保持有完整的雌雄生殖器官,其余29条标本中,有23条蚯蚓的生殖器官有不同程度的发育不全或退化。这种变