蚯蚓中抗肿瘤蛋白组分的提取分离及其抗肿瘤活性

以赤子爱胜蚓为原料 ,通过蛋白质的丙酮沉淀和凝胶过滤 ,分离得到一组抗肿瘤活性蛋白成分 (简称蚯蚓抽提物 ) ;这组成分富含Fe、Zn、Cu以及Se等微量元素 ,蛋白含量为 6 0 4 3± 2 36 %(n =5 ) .体外实验中 ,通过MTT法和SRB法测定了蚯蚓抽提物对多种人癌细胞株 (HCT 116、SY5Y、K5 6 2、MGc80 3和HeLa)以及正常细胞株 (HEK2 93和COS 7)的抑制杀伤率 .结果表明 ,蚯蚓抽提物对癌细胞的杀伤有一定的选择性 ,受试人癌细胞达到 5 0 %生长抑制率所需作用浓度约 6 0～110mg L ;但是 ,10 0℃煮沸 5min后 ,该抑制活性完全消失 .通过纤维蛋白平板法 ,测得蚯蚓抽提物同时具有纤溶酶和纤溶酶原激活酶的活性 .体外测得丝氨酸蛋白酶抑制剂aprotinin和PMSF能显著抑制蚯蚓抽提物的细胞杀伤活性 .体内实验中 ,蚯蚓抽提物能有效延长荷瘤 (S180 )小鼠的生存时间 ,并使其身体机能得到明显改善 .腹膜内注射剂量为 2 8mg kg和 36mg kg时 ,生命延长率分别为135 3%和 12 3 5 % ,和标准药物 (环磷酰胺 )治疗后结果 (76 5 % )相比 ,有显著性差异     

广州哺乳类寄生线虫的研究——Ⅱ.毛陈属(新)(Trichochenia gen.nov.)的三种线虫

毛圆线科的分布甚广,种类众多,其中有很多是寄生於家禽家畜以及工艺兽类的器官和组织内,并且成为许多严重的地方性动物传染病及动物流行病的病原,以致给予畜牧业和兽类养殖业带来了重大的经济损失。毛圆线科的某些种亦为人类的寄生虫。 在我国有关毛圆线虫的研究还不多,国内已发表的有:伍献文与胡祥壁(1935)、陈心陶(1935,1937)、顾瑞严(1939)、伍献文与刘健康(1940,1941)、及洪式闾与李非白(1941,1945)诸人的报告。     

肌醇磷脂激酶(PI4-K)单克隆抗体的制备及其对细胞生长的抑制

制备了抗肌醇磷脂激酶 ( PI4- K)单克隆抗体 ( A6D)并测定了抗原 -抗体反应基本特性及功能 .结果表明 ,单克隆抗体与固相及溶液中肌醇磷脂激酶的亲和常数分别为 7.5× 1 0 6和 6× 1 0 8( mol/L) -1.单抗 1 .9× 1 0 -7mol/L可以抑制从细胞提取液的 PI4- K酶活力 50 % .用 FITC标记单抗在蛋白微球引导下进入细胞内 ,主要富集在细胞质膜区 ,并对 He La细胞和小鼠小脑细胞生长有明显抑制作用 .     

抗腺苷酸激酶单克隆抗体的制备及鉴定

克隆了6株稳定分泌抗腺苷酸激酶(Adenylate kinase,AK)单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并鉴定或测定了其中3株细胞所分泌抗体的亚型和分子量.通过测定抗体和固相及均相抗原的结合能力,发现McAb3D3与固定化及溶液中腺苷酸激酶的亲和常数分别为8.4×10⁸和7.0×10~4(mol·L^-1)^-1,而McAb4D8与固定化及溶液中腺苷酸激酶的亲和常数分别为9.6×10⁸和3.9×10⁶(mol·L.¹)^-1McAb3D3和McAb4D8与不同存在形式抗原之间亲和常数如此大的差别,说明这2个抗体更适合与固定化腺苷酸激酶的结合.由于蛋白质分子常因吸附在酶标板上而发生部分变性,所以用间接ELISA方法筛选出的单克隆抗体McAb3D3和McAb4D8可能是针对部分变性腺苷酸激酶分子的.这2种抗腺苷酸激酶单克隆抗体的制备及鉴定为我们进一步将其用于蛋白质折叠机制的研究奠定了基础.     

一种凋亡相关蚯蚓丝氨酸蛋白酶的纯化、活性鉴定及部分性质研究

通过多级柱层析,从赤子爱胜蚓抽提物（一组抗肿瘤活性蛋白成分）中纯化得到凋亡相关丝氨酸蛋白酶1（apoptosis-related serine protease 1, ARSP1）,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测得其表观分子质量为28 ku.ARSP1非变性PAGE图谱为相连的多条带,质谱图为多头峰,MALDI-TOF-MS测得各主峰相对分子质量为24 645,25 052和25 281,等电聚焦电泳测得等电点pI＜3.8.测得ARSP1 N端25个氨基酸序列为：I(V)IGGT(S)N(D)ASPGEFPWQLSQTRGGSHS,N端序列比较结果显示其与丝氨酸蛋白酶类高度同源.体外实验中,不仅通过凋亡细胞的相差显微观察验证了ARSP1的细胞杀伤活性,而且进一步通过荧光抗体技术对其直接杀伤细胞活性进行了定位研究.Schiff's试剂糖蛋白染色法鉴定ARSP1为糖蛋白（或糖肽）,纤维蛋白平板法测得ARSP1同时具有纤溶酶和纤溶酶原激活酶活性,进一步通过苯甲磺酰氟(PMSF)对其纤溶酶活性的抑制实验,证明属于丝氨酸蛋白酶类.     

广州哺乳类寄生线虫的研究——Ⅰ.寄生在鲮鲤、果子狸和椰子猫的新种线虫

从1955至1957年间作者曾进行了广州市鸟兽市场出售的食用野生哺乳动物体内寄生蠕虫的调查。采得的线虫部分材料已经初步整理,除了文献上已报告过之外,也有不少新的发现。本文系将寄生在鲮鲤,果子狸和椰子猫体内的线虫Chenospirura Kwang-tungensis gen. et Sp. nov.; Chenofilaria filaria gen. et Sp. nov.; ToxocaraParadoxura sp.nov.和Arthrostoma cheni sp.nov.的形态详加描述和比较。     

单克隆抗体——研究蛋白质折叠的新探针

利用竞争ELISA的方法 ,发现溶液状态下全酶SNaseR及其 7个N -末端肽段与McAb2C9之间的结合存在差别 ,其中SNR1 2 1 ,SNR1 0 2 ,SNR79,SNR5 2及全酶SNaseR能够与抗体较好地结合 ,而SNR1 41 ,SNR1 35 ,SNR1 1 0与抗体结合很弱 .由于全酶和SNR5 2均能与McAb2C9紧密结合 ,其抗原决定簇应该包含在 - 6～5 2序列中 .因此 ,不同长度的肽段与抗体结合能力直接与抗原决定簇的可接近程度相关 .比较不同长度的肽段与单抗McAb2C9的结合能力 ,清楚地表明肽链在从N 末端向C -末端延伸的过程中 ,其构象在不断调整直至形成完整的功能蛋白 ,这一结果有力地支持邹氏新生肽链折叠假说 .单克隆抗体作为一种新型探针 ,可为蛋白质折叠机制的研究提供重要的信息 .     

Monoclonal antibody, a novel probe for protein folding

Ｈｙｂｒｉｄｏｍａａｎｔｉｂｏｄｉｅｓａｒｅａｐｏｗｅｒｆｕｌｔｏｏｌｆｏｒｓｔｕｄｙｉｎｇｓｔｒｕｃｔｕｒｅａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆｐｒｏｔｅｉｎｓｏｗｉｎｇｔｏｔｈｅｉｒａｂｉｌｉｔｙｔｏｒｅｃｏｇｎｉｚｅａｎｄｂｉｎｄｔｈｅｉｒｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｎｔｉｇｅｎｓａｔｓｐｅｃｉａｌｒｅｇｉｏｎｓ(ｉ.ｅ.ｅｐｉｔｏｐｅ)ｗｉｔｈｈｉｇｈｅｆｆｉｃａｃｙａｎｄｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ.Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ,ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙｔｈｅｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｄｅｐｅｎｄｅｎ…     

“O_S-732人体成骨肉瘤细胞系”超微结构及细胞化学的研究

本文研究了 Os-732细胞株的超微结构及酶的特性。在 SEM 下细胞形态呈多样性,细胞表面形成树枝状伪足;TEM 下胞质内含丰富的扩张粗面内质网,发达的高尔基复合体及分泌泡;大量碱性磷酸酶作用的沉积物出现于胞膜表面。这些特征均显示它与成骨细胞的相似性。为证明此株细胞是威骨系统的肿瘤提供可靠的依据。结合细胞株的动物接种,染色体和免疫学特性等研究,证明此细胞株是一新的成骨肉瘤细胞株。     

肌醇磷脂激酶(PI4-K)单克隆抗体的制备及其对细胞生长的抑制

制备了抗肌醇磷脂激酶 ( PI4- K)单克隆抗体 ( A6D)并测定了抗原 -抗体反应基本特性及功能 .结果表明 ,单克隆抗体与固相及溶液中肌醇磷脂激酶的亲和常数分别为 7.5× 1 0 6和 6× 1 0 8( mol/L) -1.单抗 1 .9× 1 0 -7mol/L可以抑制从细胞提取液的 PI4- K酶活力 50 % .用 FITC标记单抗在蛋白微球引导下进入细胞内 ,主要富集在细胞质膜区 ,并对 He La细胞和小鼠小脑细胞生长有明显抑制作用 .